纈草液的大鼠90天喂養(yǎng)試驗(yàn)

1、纈草液的大鼠90天喂養(yǎng)試驗(yàn)蔣中仁 劉科亮 徐薇 金偉 盧潤(rùn)生 謝惠萍 摘要 目的 評(píng)價(jià)纈草液對(duì)動(dòng)物的亞慢性毒性。方法 采用經(jīng)口灌胃法連續(xù)90天給予SD大鼠后，觀察纈草液對(duì)動(dòng)物血液學(xué)指標(biāo)、血生化指標(biāo)、臟體比、進(jìn)食量及食物利用率和組織病理學(xué)指標(biāo)等的影響。結(jié)果 雄鼠低劑量組第11周進(jìn)食量顯著降低和高劑量組第13周進(jìn)食量顯著增加（P0.05，P0.05）；雌鼠中劑量組第10周進(jìn)食量和高劑量組第11周進(jìn)食量均顯著增加（P0.05、P0.05），雄鼠中劑量組中期血液學(xué)指標(biāo)中的其它細(xì)胞顯著升高（P0.05），雌鼠中劑量組末期白細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低（P0.05）雄鼠低劑量組血糖顯著降低（P0.05），雌鼠低劑量組

2、尿素氮顯著升高（P0.05），其余指標(biāo)未見(jiàn)異常。結(jié)論 在本試驗(yàn)條件下，未觀察到纈草液明顯的毒性反應(yīng)。關(guān)鍵詞 纈草 ；90天喂養(yǎng)；血液學(xué)；血生化 ；進(jìn)食量；食物利用率；臟體比Ninety Days Rat Feeding Study of Valerian liquidJiang Zhongren,Liu keliang,Xu Wei,et al(Si Chuan Center For Disease Control And Prevention,Cheng Du,610041 )Abstract Objective To access subchronic toxicity of Valeri

3、an liquid. Methods Giving the Valerian liquid to rats by gavage,then evaluate hematology indexs,biochemical indexes organ-body ratios,quantity of food-intake, food availability and pathological effects. Results Both eleven-weeks and thirteen-weeks quantity of food-intake of the low-dosage group were

4、 obviousely enhanced in male rats(P0.05，P0.05）, and ten-weeks quantity of food-intake of the middle-dosage group and eleven-weeks quantity of food-intake of the high-dosage group were obviousely enhanced in female rats(P0.05，P0.05). There were significant differences in WBC counts of middle-dosage a

5、nd BUN of low-dosage in female rates(P0.05，P0.05). The mid-term hematology index of middle-dosage was significantly elevated(P<0.05), while blood sugar of low-dosage group were significantly reduced in male rats(P<0.05). Conclusion: No subchronic toxicity could be observed.Keywords: Valerian;

6、Ninety Days Feeding Study;hematology indexs;biochemical indexes; quantity of food-intake;food availability; organ-body ratios. 纈草是一種多年生的耐寒開(kāi)花植物,主要分布在歐洲和亞洲,是近幾年被廣泛開(kāi)發(fā)利用的具有鎮(zhèn)靜改善睡眠作用的藥食兩用植物,目前對(duì)其鎮(zhèn)靜、改善睡眠作用的研究報(bào)道比較多1-2。將纈草直接加工成粉末后的亞慢性毒性資料已見(jiàn)報(bào)道3，而醇和水提取物的亞慢性毒性資料國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)報(bào)道。為此，我們對(duì)纈草的水提物進(jìn)行了大鼠90天喂養(yǎng)試驗(yàn)，所收集的相關(guān)資料為確定人食用的安全劑

7、量提供依據(jù)。1. 材料和方法1.1材料：纈草液由成都某制藥公司生產(chǎn)，成人每日推薦量為10ml/60kg.BW。SD大鼠由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK（川）2004-16.SPF級(jí)，動(dòng)物房使用許可證號(hào)為SCXK（川）2008-043.屏障系統(tǒng),溫度20-25，相對(duì)濕度40-70%。CX4型全自動(dòng)生化分析儀、CA620-Vet型全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、全自動(dòng)脫水機(jī)及組織包埋機(jī)、生化試劑盒、動(dòng)物專用血細(xì)胞稀釋劑和溶血?jiǎng)?.2方法4：采用經(jīng)口灌胃法給予受試物，試驗(yàn)根據(jù)樣品的5倍濃縮液設(shè)3.33ml/.BW、6.67ml/.BW、10.00ml/.BW三個(gè)劑量組（分別相當(dāng)

8、于人體推薦攝入量的100、200、300倍），另設(shè)蒸餾水對(duì)照組。將80只體重62-90g的斷乳SD大鼠隨機(jī)分為四組，每組20只，雌雄各半。每天每只大鼠按10ml/kg.BW定時(shí)經(jīng)口灌胃，連續(xù)給予90天。每只大鼠單籠喂養(yǎng)，讓其自由進(jìn)食飲水。每天觀察動(dòng)物的行為表現(xiàn)、中毒癥狀及死亡情況。每周根據(jù)進(jìn)食量和體重計(jì)算食物利用率。試驗(yàn)中期取尾血測(cè)定血液學(xué)指標(biāo)。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)采血測(cè)定血液學(xué)指標(biāo)和血生化指標(biāo)，解剖動(dòng)物觀察內(nèi)臟改變，計(jì)算肝、腎、脾、睪丸的臟體比，取肝、腎、脾、胃腸、睪丸（卵巢）作組織病理學(xué)檢查。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 11.0 for Windows軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。 作者單位：四川省疾病預(yù)防控制中心毒

9、理所 （ 四川 成都 610041）作者簡(jiǎn)介：蔣中仁（1962-），男，副主任技師，衛(wèi)生毒理學(xué)2.試驗(yàn)結(jié)果：2.1纈草液對(duì)大鼠體重的影響由表1、2可見(jiàn)，雌雄大鼠的初始體重以及每周體重與對(duì)照組相比較，均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。 性別劑量（ml/kg.BW）動(dòng)物數(shù)（只）始重(g)第1周(g)第2周(g)第3周(g)第4周(g)第5周(g)第6周(g)雄010 79.5±9.4123.9±10.8168.9±14.4212.0±20.9247.9±23.1278.1±25.8305.8±27.13.3310 79.7&

10、#177;8.1124.8±10.5162.7±17.1197.6±22.9226.4±31.0253.4±39.0279.1±46.66.6710 79.9±7.3123.1±9.9158.4±12.9191.5±13.7220.5±16.2243.2±19.1269.0±23.210.0010 79.0±8.2127.2±12.3170.8±18.7208.8±23.8248.6±30.1276.9±3

11、1.2306.3±37.4雌010 75.1±5.9115.1±9.2143.3±10.5168.6±12.8187.2±16.3202.1±17.9214.2±21.63.3310 76.1±6.6114.1±9.5144.8±10.4173.2±11.3190.1±9.6201.6±9.1211.8±7.86.6710 76.5±6.7113.4±10.2142.9±9.1166.8±9.8185.7&

12、#177;6.3198.8±7.9214.1±7.310.0010 77.4±5.7114.9±9.8143.8±11.0172.0±12.7194.5±13.7206.7±14.2218.2±14.1表1 纈草液對(duì)大鼠體重的影響 （±S ）表2 纈草液對(duì)大鼠體重的影響 （±S）性別劑量（ml/kg.BW）動(dòng)物數(shù)（只）第7周(g)第8周(g)第9周(g)第10周(g)第11周(g)第12周(g)第13周(g)雄010329.8±27.4347.6±27.8367.4

13、±30.0382.8±30.4396.5±30.3406.1±32.0412.6±32.13.3310302.9±46.6320.6±49.5338.2±52.5353.1±51.9363.4±51.2370.1±51.4376.2±54.66.6710294.2±21.9316.4±23.1337.3±26.2352.9±25.2365.9±26.1377.5±26.3385.2±26.610.00103

14、28.8±38.6343.2±40.1362.0±42.5378.0±44.3391.4±46.3402.7±46.3410.4±47.8雌010223.7±21.0229.9±20.1236.8±20.3242.6±21.1248.5±21.7253.5±22.7257.4±23.73.3310219.5±9.7225.7±10.1232.3±11.3238.0±12.3243.0±13.2247.8&#

15、177;14.9252.1±16.96.6710223.6±9.1228.5±10.4234.6±12.5240.9±14.9245.5±15.7249.1±15.9252.8±15.910.0010229.4±13.7235.9±15.1243.0±15.4249.1±15.1254.6±15.0259.2±14.8263.6±15.62.2 纈草液對(duì)大鼠進(jìn)食量的影響由表3、4可見(jiàn)，雌雄大鼠每周進(jìn)食量與對(duì)照組相比較，雄鼠低劑量組第11周顯著降低

16、（P0.05），高劑量組第13周顯著增加（P0.05）；雌鼠中劑量組第10周和高劑量組第11周都顯著增加（P0.05、P0.05），其他各劑量組動(dòng)物各周進(jìn)食量均無(wú)顯著性差異（P0.05）。性別劑量（ml/kg.BW）動(dòng)物數(shù)（只）第1周(g)第2周(g)第3周(g)第4周(g)第5周(g)第6周(g)第7周(g)雄01098.3±8.8124.7±11.6130.5±7.0149.1±10.9152.9±10.6154.2±5.8154.8±4.93.331097.9±4.3114.3±10.3129.9&

17、#177;6.1140.1±6.9145.5±7.8146.3±6.5147.5±4.66.6710100.3±5.9113.9±9.4126.9±5.5139.5±7.5143.9±7.7144.9±10.4146.2±9.610.001099.7±8.0124.6±10.9137.0±8.5152.5±11.1155.5±11.3155.8±10.7156.6±10.4雌01095.8±6.4108.6

18、±3.8113.0±4.4116.5±3.8120.6±5.2123.2±4.1122.1±2.63.331089.2±4.6109.0±4.2115.7±2.9119.6±3.4121.0±4.2123.4±2.5120.7±3.26.671092.4±6.1108.2±2.9110.2±2.4112.1±3.9114.5±2.8120.0±2.7121.3±2.810.001094.0

19、7;6.7107.4±6.0113.4±3.9119.4±3.4122.1±2.4123.6±3.7125.5±2.2表3 纈草液對(duì)大鼠進(jìn)食量的影響 （±S ）表4 纈草液對(duì)大鼠進(jìn)食量的影響 （±S ）性別劑量（ml/kg.BW）動(dòng)物數(shù)（只）第8周(g)第9周(g)第10周(g)第11周(g)第12周(g)第13周(g)雄010155.6±3.9156.3±3.6165.4±7.4167.0±7.2167.8±5.7167.1±5.73.3310149.0

20、±5.2149.9±3.9155.4±9.5158.1±6.0*161.9±6.6163.0±5.36.6710148.9±7.1148.4±8.0158.5±9.1161.0±8.8166.5±6.6168.9±3.410.0010152.8±9.5153.6±6.5164.3±5.5168.0±5.8171.8±2.6173.0±3.0*雌010122.9±3.4134.0±3.3133.1&

21、#177;4.4134.2±2.4134.9±1.9137.8±1.93.3310122.1±2.9132.5±3.9136.2±3.9136.5±3.4135.1±3.9139.6±5.56.6710121.2±2.7130.8±4.1138.5±3.3*136.4±2.9133.4±3.1135.4±4.410.0010124.2±2.7134.0±2.1137.2±3.1139.7±3.6*137.4

22、±1.5139.8±1.7注：*表示與對(duì)照相比P0.05。2.3 纈草液對(duì)大鼠食物利用率的影響 結(jié)果見(jiàn)表5、6，雌雄大鼠的每周食物利用率與對(duì)照組比較，各劑量組均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。表5 纈草液對(duì)大鼠每周食物利用率的影響 （±S）性別劑量（ml/kg.BW ）動(dòng)物數(shù)（只）第一周食物利用率(%)第二周食物利用率(%)第三周食物利用率(%)第四周食物利用率(%)第五周食物利用率(%)第六周食物利用率(%)第七周食物利用率(%)01044.86±4.6935.76±4.1532.84±7.9823.93±3.3719

23、.75±2.8117.92±2.4815.39±4.143.331045.98±2.0332.89±7.5327.03±6.5920.29±5.9118.24±6.9217.38±5.6316.12±4.17雄6.671042.90±3.2231.25±7.3226.00±7.9120.54±5.7315.76±4.9217.77±4.5917.29±2.4710.001048.08±3.9834.67±5

24、.9027.65±3.6325.97±5.64 18.12±4.89 18.75±4.75 14.38±3.38 01041.56±3.3725.87±5.8422.33±3.9415.87±3.5712.26±3.08 7.76±2.70 4.97±2.84雌3.331042.42±7.4628.16±6.6324.55±1.9814.09±3.159.49±2.63 6.36±3.09 5.02±2.5

25、06.671039.79±2.5927.20±2.6221.66±3.4516.80±6.0111.41±2.69 7.81±2.62 3.99±2.5610.001039.65±3.8426.76±5.3024.79±2.6118.85±4.769.97±3.28 8.89±3.09 5.24±2.05表6 纈草液對(duì)大鼠每周食物利用率的影響 （±S）性別劑量（ml/kg. BW）動(dòng)物數(shù)（只）第八周食物利用率(%)第九周食物利用率(%)第十周食物

26、利用率(%)第十一周食物利用率(%)第十二周食物利用率(%)第十三周食物利用率(%)01011.43±3.6612.62±4.179.36±3.318.19±2.355.72±2.033.87±2.013.331011.83±4.2111.70±2.799.52±2.676.56±1.844.14±1.903.74±2.74雄6.671014.97±3.9414.05±3.369.94±3.348.13±2.477.04±4.

27、034.58±2.0110.00109.48±4.3812.22±3.339.72±2.897.98±1.79 6.59±1.85 4.46±2.17 010 4.97±2.84 5.14±1.74 4.36±1.38 4.39±1.16 3.69±1.67 2.81±1.62雌3.3310 5.03±2.50 4.97±1.80 4.17±1.37 3.64±1.30 3.55±1.71 3.05±2.2

28、16.6710 4.00±2.56 4.67±2.49 4.52±2.39 3.37±1.55 2.70±0.82 2.73±1.3410.0010 5.24±2.05 5.30±1.19 4.45±2.29 3.92±1.92 3.33±1.61 3.13±1.622.4、纈草液對(duì)大鼠總食物利用率的影響結(jié)果見(jiàn)表7，雌雄大鼠的總食物利用率與對(duì)照組比較，均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。表7 纈草液對(duì)大鼠總食物利用率的影響（±S）性別劑量（ml/kg. BW）動(dòng)物

29、數(shù)（只）總增重(g)總進(jìn)食量(g)總食物利用率(%)010333.10±32.251944.20±49.5417.12±1.433.3310296.50±53.831857.80±51.2915.91±2.43雄6.6710305.30±29.701866.80±69.4216.34±1.3010.0010331.40±48.561965.20±89.8916.84±2.10010182.30±26.381596.70±26.6211.40±1.

30、53雌3.3310176.00±13.751600.60±22.1210.99±0.826.6710176.30±20.681574.40±18.2011.19±1.2910.0010186.20±15.321617.70±12.9311.51±0.912.5、血液學(xué)檢查結(jié)果由表8、9可見(jiàn)，雌雄大鼠的血液學(xué)檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照組比較，雄鼠中劑量組中期血液學(xué)指標(biāo)中的其它細(xì)胞顯著升高（P0.05），雌鼠中劑量組末期白細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低（P0.05），其他各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)顯著性差異（P>0.05）。所測(cè)值在本室歷史正常

31、值范圍內(nèi)。表8 纈草液對(duì)大鼠中期血液學(xué)指標(biāo)的影響 （±S）性別劑量（ml/kg.BW ）動(dòng)物數(shù)（只）血紅蛋白（g/L）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（×1012/L）白細(xì)胞計(jì)數(shù)（×109/L）中性（%）淋巴（%）其它（%）010135.90±6.746.83±0.6110.87±4.4320.83±5.8774.61±6.344.56±0.52雄3.3310138.60±9.356.86±0.3912.84±4.8924.77±5.7770.17±6.655.06±

32、0.996.6710134.80±5.147.04±0.3812.52±5.6523.98±5.4170.62±6.195.40±0.84*10.0010140.60±8.877.16±0.629.95±5.3517.91±3.2577.99±3.764.10±0.53010128.00±4.226.79±0.43 9.24±2.9617.32±3.2578.29±3.854.39±0.61雌3.3310135.30

33、±7.047.03±0.599.59±3.2321.66±6.1273.39±7.024.95±0.916.6710136.40±10.527.19±0.5411.62±5.2724.31±8.2470.64±8.915.05±0.7510.0010134.50±9.326.70±0.5210.16±4.3022.96±7.6172.21±8.564.83±0.99注：*表示與對(duì)照相比P0.05。表9 纈草液對(duì)大鼠末

34、期血液學(xué)指標(biāo)的影響 （±S）性別劑量（ml/kg.BW ）動(dòng)物數(shù)（只）血紅蛋白（g/L）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（×1012/L）白細(xì)胞計(jì)數(shù)（×109/L）中性（%）淋巴（%）其它（%）010151.20±17.357.34±0.629.39±2.2924.74±4.4071.82±4.733.44±0.58雄3.3310152.50±12.867.63±0.6310.13±2.7026.63±7.9269.99±8.473.38±0.646.6710159.

35、40±8.757.97±0.517.86±2.5925.80±3.8670.75±4.233.45±0.4810.0010143.50±21.396.76±0.958.04±2.8320.50±3.2876.60±3.682.90±0.46010144.70±10.417.53±0.489.59±2.4427.44±4.0668.53±4.844.03±1.46雌3.3310144.80±6.397.34&

36、#177;0.545.55±1.60*26.79±4.4469.03±5.064.18±1.356.6710142.90±7.877.18±0.456.68±2.5127.11±6.4269.19±7.403.70±1.2510.0010136.60±13.226.87±0.6410.32±3.8622.45±6.7174.28±7.003.27±0.89注：*表示與對(duì)照相比P0.05。2.6、末期生化檢驗(yàn)結(jié)果：由表10、11可見(jiàn)，雌雄

37、大鼠生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照組相比，雄鼠低劑量組血糖顯著降低（P0.05），雌鼠低劑量組尿素氮顯著升高（P0.05），其余各項(xiàng)生化檢測(cè)項(xiàng)目無(wú)顯著性差異（P>0.05）。所測(cè)值仍在本室正常值范圍內(nèi)。表10 纈草液對(duì)大鼠末期生化檢驗(yàn)結(jié)果（±S）性別劑量(ml/kg.BW)動(dòng)物數(shù)（只）谷丙轉(zhuǎn)氨酶（U/L）谷草轉(zhuǎn)氨酶（U/L）尿素氮（mmol/L）肌酐（mol/L）血糖（mmol/L）雄03.336.6710.001010101040.20±8.2437.70±6.0440.40±7.1142.50±10.86128.20±37.5713

38、8.60±28.17127.80±23.44120.30±23.537.76±1.328.05±0.988.12±1.619.11±1.5856.40±5.2757.04±5.5457.74±4.2460.46±4.976.32±0.315.83±0.47*6.02±0.376.31±0.36雌03.336.6710.001010101029.20±4.6931.00±4.4227.90±5.4334.10±

39、;5.36121.90±28.56109.40±15.78117.70±19.24144.40±18.348.13±0.809.38±1.28*8.30±0.799.13±1.4057.77±3.5958.84±4.4457.67±4.3358.37±7.916.41±0.256.49±0.356.21±0.396.24±0.48 注：*表示與對(duì)照相比P0.05。表11 纈草液對(duì)大鼠末期生化檢驗(yàn)結(jié)果（±S）性別劑量(ml/kg

40、.BW)動(dòng)物數(shù)（只）總蛋白（g/L）白蛋白（g/L）總膽固醇（mmol/L）甘油三酯（mmol/L）雄03.336.6710.001010101068.49±3.1968.15±2.1569.74±1.8869.35±3.1126.58±2.0226.42±2.0127.86±1.0226.99±2.231.12±0.081.09±0.161.10±0.111.02±0.160.87±0.190.85±0.110.89±0.130.94±

41、;0.27雌03.336.6710.001010101074.71±3.3475.05±3.7877.51±3.0376.06±2.0131.68±1.7932.20±2.3233.16±1.6631.63±1.821.33±0.171.55±0.301.38±0.101.28±0.281.00±0.210.96±0.280.94±0.240.96±0.322.7、纈草液對(duì)大鼠臟體比的影響結(jié)果見(jiàn)表12，三個(gè)劑量組雌雄大鼠的肝體比、脾體比

42、、腎體比以及雄鼠的睪丸體比值與對(duì)照組相比較，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。 表12 纈草液對(duì)大鼠臟體比的影響 （±S）性別劑量（ml/kg .BW）動(dòng)物數(shù)（只）肝臟濕重(g)肝體比(%)脾臟濕重(g)脾體比(%)腎臟濕重(g)腎體比(%)睪丸濕重(g)睪體比(%)01010.52±1.11 2.55±0.140.89±0.120.22±0.042.59±0.240.63±0.043.29±0.360.79±0.07雄3.33109.69±1.422.58±0.240.83±0.210.22±0.032.39±0