選三考前回歸問題導(dǎo)學(xué)及答案

1、【四哥私藏】選修 3 考前回歸問題導(dǎo)學(xué)原創(chuàng)： 秦四哥 高中生物那點(diǎn)事兒 4 天前選修 3現(xiàn)代生物科技專題專題 1 基因工程1基因工程又叫？其原理是什么？用于育種時(shí)有何優(yōu)點(diǎn)？2不同生物的DNA能拼接的原因是什么？轉(zhuǎn)基因能在受體細(xì)胞中表達(dá)是因?yàn)槭裁矗?“分子手術(shù)刀”是指什么？簡(jiǎn)稱？在基因工程中用于？該酶主要從哪獲得？作用部位是哪 里？該酶識(shí)別的序列長(zhǎng)度是多少？切割的結(jié)果是什么？限制酶在選擇的時(shí)候有什么依據(jù)？為 何通常用兩種限制酶同時(shí)切割目的基因和運(yùn)載體？4“分子縫合針”是指什么？作用是什么？可以分為哪兩類？作用部位是哪里？作用有何特點(diǎn)？ DNA聚合酶有何作用？5“分子運(yùn)輸車”是指什么？常用的運(yùn)載體

2、有哪些？什么是質(zhì)粒？質(zhì)粒需具備什么條件才能 充當(dāng)“分子運(yùn)輸車”？天然的質(zhì)粒能直接做運(yùn)載體嗎？6基因工程的基本操作程序主要包括哪四個(gè)步驟？核心步驟是哪一步？ 7什么是目的基因？試舉例。獲得方法有哪 3種？8. 什么是基因文庫？什么是基因組文庫？什么是 cDNA文庫？ cDNA文庫與基因組文庫有什么 區(qū)別？如何從基因文庫中獲取目的基因？（什么是基因庫？）9. PCR勺中文名稱是什么？原理？應(yīng)用的前提？需要的條件有？PCR過程需要解旋酶嗎？模板鏈解旋所需能量是由ATP提供的嗎？ PCR大致過程經(jīng)過哪3步？每一步的溫度要求一樣嗎？擴(kuò) 增的結(jié)果是？ PCF用于提取目的基因時(shí)，循環(huán)幾次能得到等長(zhǎng)的目的基因

3、片段？循環(huán)n次可以得到等長(zhǎng)的目的基因片段多少個(gè)？ PCF在選擇引物時(shí)有什么要求？循環(huán) n次，需要加入某種引 物多少個(gè)？10. 什么樣的目的基因適合用化學(xué)方法合成？11. 一個(gè)完整的基因表達(dá)載體應(yīng)該包括哪些元件？分別有什么作用？畫出示意圖并標(biāo)注。（什 么是起始密碼子？什么是終止密碼子？）12. 什么是轉(zhuǎn)化？轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞常用方法有哪些？分別適用于什么植物？有何優(yōu)缺點(diǎn)？13. 轉(zhuǎn)化動(dòng)物細(xì)胞一般用什么方法？通常選用什么細(xì)胞作為受體細(xì)胞？14. 轉(zhuǎn)化微生物細(xì)胞一般采用什么方法？選擇大腸桿菌作為受體細(xì)胞有何優(yōu)勢(shì)？如何使大腸桿 菌處于感受態(tài)？15. 目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是什么？如何檢測(cè)？以

4、什么作為探針？如何檢 測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA檢測(cè)目的基因是否翻譯成了蛋白質(zhì)用什么方法？16. 除了分子水平的檢測(cè)，有時(shí)還要進(jìn)行什么水平的檢測(cè)？例如？17. 植物基因工程有哪些應(yīng)用？試舉例說明。18. 動(dòng)物基因工程有哪些應(yīng)用？試舉例說明。19. 基因工程獲得的藥物有哪些？試舉例說明。20. 什么是基因治療？要去除或改造缺陷基因嗎？該方法是治療什么疾病最有效的手段？一般 有哪兩種方法？21蛋白質(zhì)工程崛起的緣由是什么？ 22蛋白質(zhì)工程的目標(biāo)是什么？基本途徑是？畫出流程圖。 蛋白質(zhì)工程為何被稱為第二代基因 工程？有何應(yīng)用實(shí)例？專題 2 細(xì)胞工程1什么是細(xì)胞工程？根據(jù)操作對(duì)象不同，可分為哪兩類

5、？ 2什么是脫分化？愈傷組織的細(xì)胞有什么特點(diǎn)？ 3植物組織培養(yǎng)的大致過程是什么？基本原理是什么？ 4什么是全能性？細(xì)胞為何具有全能性？是不是所有細(xì)胞都具有全能性？未離體的組織細(xì)胞 不能表現(xiàn)全能性的原因是什么？ 5“胡蘿卜組織培養(yǎng)”要無菌操作的目的是什么？切取含有形成層部分的原因是什么？ 6植物組織培養(yǎng)的基本條件有哪些？ 7植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基一般含有哪些成分？對(duì)培養(yǎng)條件有何要求？一定要避光培養(yǎng)嗎？植 物組織培養(yǎng)過程中需要換培養(yǎng)基嗎？生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例不同如何影響愈傷組織分化？ 8什么是植物體細(xì)胞雜交？基本原理是什么？屬于哪種變異類型？有何優(yōu)點(diǎn)？實(shí)例？ 9什么是原生質(zhì)體？如何獲得？如何判斷原

6、生質(zhì)體制備是否成功？誘導(dǎo)融合一般采用什么方 法？誘導(dǎo)融合成功的標(biāo)志是？如何判斷雜種細(xì)胞是否再生細(xì)胞壁？（什么是原生質(zhì)層？） 10微型繁殖采用的是什么技術(shù)？有哪些特點(diǎn)？ 11作物脫毒一般選用什么部分的細(xì)胞？原因是什么？（抗毒苗是用什么育種方法獲得的？） 12人工種子的組成是什么？能用原生質(zhì)體或愈傷組織制作人工種子嗎？人工種皮一般含有哪 些成分？人工種子有哪些優(yōu)點(diǎn)？13單倍體育種通常經(jīng)過哪 2 個(gè)關(guān)鍵步驟？其原理是什么？有何優(yōu)點(diǎn)？ 14突變體如何獲得的？如何加以利用？ 15細(xì)胞產(chǎn)物的獲得需要將外植體培養(yǎng)成植株嗎？實(shí)例？ 16什么是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)？基本原理是什么？ 17將成塊動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞的方

7、法是什么？用胃蛋白酶來達(dá)到分散目的嗎？酶解的消 化過程需要控制時(shí)間嗎？分散成單個(gè)細(xì)胞的目的是什么？ 18什么是細(xì)胞貼壁？對(duì)培養(yǎng)器具有何要求？ 19什么是接觸抑制？如何解除？癌細(xì)胞有接觸抑制嗎？為什么？ 20什么是原代培養(yǎng)？什么是傳代培養(yǎng)？細(xì)胞分裂一次就一代嗎？細(xì)胞傳至10-50 代左右時(shí)可能會(huì)發(fā)生什么變化？21動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)如何創(chuàng)設(shè)無菌、 無毒的環(huán)境？對(duì)營養(yǎng)有何特殊要求？對(duì)溫度和 pH 有何要求？ 對(duì)氣體環(huán)境有何要求？22動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有何實(shí)際應(yīng)用？ 23什么是動(dòng)物核移植？有哪兩各類型？哪種更容易？基本原理是什么？克隆動(dòng)物屬于無性還 是有性繁殖？有何優(yōu)點(diǎn)？是對(duì)供體 100%的復(fù)制嗎？ 24動(dòng)物體細(xì)

8、胞核移植的大致過程是怎樣的？供體細(xì)胞一般選用傳代10 代以內(nèi)的原因是什 么？選擇幼齡動(dòng)物的原因是什么？受體細(xì)胞一般選擇什么細(xì)胞？有何優(yōu)點(diǎn)？受體細(xì)胞去核的 目的是什么？25體細(xì)胞核移植技術(shù)有哪些應(yīng)用？試舉例。還存在哪些問題？ 26什么是動(dòng)物細(xì)胞融合？最常用的誘導(dǎo)劑是什么？基本原理是什么？大致過程是怎樣的？融 合的動(dòng)物細(xì)胞能發(fā)育成完整個(gè)體嗎？27單克隆抗體制備過程中小鼠需作何處理？目的是什么？細(xì)胞兩兩融合的結(jié)果有幾種？?jī)纱?篩選的目的分別是什么？獲得抗體的方法有哪兩種？28雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是什么 ?有何應(yīng)用？專題 3 胚胎工程1什么是胚胎工程？包括哪些常用技術(shù)？ 2哺乳動(dòng)物精子

9、的發(fā)生場(chǎng)所是哪里？雄性動(dòng)物的生殖細(xì)胞的增殖時(shí)期是什么時(shí)候？精子的發(fā) 生過程大體經(jīng)過哪 3 個(gè)階段？成熟精子的各部分是由什么分化而來？ 3卵子的發(fā)生場(chǎng)所是哪里？卵原細(xì)胞從何即開始增殖 ?減數(shù)第一次分裂在什么時(shí)候完成的 ?減 數(shù)第二次分裂是在什么時(shí)候完成的 ?兩次分裂是連續(xù)的嗎 ?判斷卵子是否受精的標(biāo)志是什么？ 為什么一般只看到兩個(gè)極體？4一個(gè)卵泡中能形成幾個(gè)成熟的卵子 ?排卵是指卵子從卵泡中排出 , 還是指卵泡從卵巢中排出 ? 剛排出的卵是成熟的卵子嗎 ?它在母體的什么部位與精子受精 ?5什么是受精作用 ?包括哪兩個(gè)階段 ?場(chǎng)所是哪里 ?6受精前精子要作何準(zhǔn)備 ?卵子要做何準(zhǔn)備 ?畫出一個(gè)具備受

10、精能力的卵母細(xì)胞示意圖。 7防止多精入卵的兩道屏障分別是什么？受精作用的實(shí)質(zhì)是什么?完成的標(biāo)志是什么 ?8受精卵的分裂方式是什么？什么是卵裂期？其特點(diǎn)是什么？什么是桑椹胚？桑椹胚的細(xì)胞 屬于什么細(xì)胞？胚胎細(xì)胞在什么時(shí)期開始分化？構(gòu)成囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層細(xì)胞分別會(huì)發(fā) 育成什么？什么是孵化？原腸胚已經(jīng)有了什么分化？細(xì)胞分化在什么時(shí)期達(dá)到最大限度？1試管牛是有性生殖還是無性生殖？克隆動(dòng)物呢？2卵母細(xì)胞的采集哪 3 種方法？采集的卵母細(xì)胞能直接與獲能的精子受精嗎？ 3精子的采集方法有哪 3 種？采集的精子需作何處理？有哪兩種方法？分別適用于什么動(dòng) 物？4體外受精需要在什么溶液中進(jìn)行？大致過程是怎樣的

11、？ 5哺乳動(dòng)物胚胎的培養(yǎng)液一般含有什么成分？（六菜一湯）1什么是胚胎移植？可供移植的胚胎有哪些來源？該過程誰是供體？誰是受體？胚胎移植實(shí) 際上是個(gè)什么過程？其實(shí)質(zhì)是什么？胚胎工程的最后一道“工序”是？ 2胚胎移植的優(yōu)勢(shì)是什么？生理學(xué)基礎(chǔ)包括哪 4 個(gè)方面內(nèi)容？3牛胚胎移植過程對(duì)供體和受體分別有何要求？需要對(duì)供體和受體作何處理？該過程用到的 激素是什么？為了獲得更多的早期胚胎還需要對(duì)供體作何處理？用到的激素是什么？什么是沖卵？胚胎的保存需要什么條件？4什么是胚胎分割？胚胎分割技術(shù)屬于無性繁殖還是有性繁殖？什么樣的胚胎適合進(jìn)行胚胎 分割？囊胚階段的胚胎要進(jìn)行分割要特別注意什么？鑒定性別取哪部分的細(xì)

12、胞？滋養(yǎng)層也需 要均等分割嗎？5胚胎干細(xì)胞的來源有哪些？胚胎干細(xì)胞在形態(tài)和功能上分別有何特性？有何應(yīng)用？ 6一般胚胎發(fā)育到什么程度可供移植？人的胚胎一般在哪個(gè)發(fā)育階段移植？專題 4 生物技術(shù)的安全性和倫理問題1面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利和弊，我們的正確做法是什么？ 2對(duì)待克隆人，我國政府的態(tài)度是什么？什么是設(shè)計(jì)試管嬰兒？ 3我國政府對(duì)待生物武器的態(tài)度是什么？專題 5 生態(tài)工程1生態(tài)工程的目的是什么？生態(tài)工程的優(yōu)點(diǎn)是什么？ 2生態(tài)工程所遵循的基本原理有哪些？試舉例說明。【四哥私藏】選修 3 問題導(dǎo)學(xué)答案版原創(chuàng)： 秦四哥 高中生物那點(diǎn)事兒 今天選修 3現(xiàn)代生物科技專題專題 1 基因工程1.1DNA重組技術(shù)

13、的基本工具1. 基因工程又叫DNA重組技術(shù)，原理是基因重組。優(yōu)點(diǎn)是可以打破物種界限，定向改造生物的 性狀。2. 不同生物的DNA能拼接的原因是DNA都是雙螺旋結(jié)構(gòu)、都由四種脫氧核苷酸組成。轉(zhuǎn)基因能 在受體細(xì)胞中表達(dá)是因?yàn)榈厍蛏系乃猩飵缀豕灿猛惶走z傳密碼子。3. “分子手術(shù)刀”是指限制性核酸內(nèi)切酶， 簡(jiǎn)稱限制酶。 在基因工程中用于切割目的基因和運(yùn) 載體。該酶主要從原核生物中獲得。作用部位是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。該酶識(shí)別的序 列長(zhǎng)度是 4、 5、 6、 8 個(gè)核苷酸，切割的結(jié)果是產(chǎn)生平末端或黏性末端。4. “分子縫合針”是指DNA連接酶，作用是連接雙鏈 DNA片段。可以分為E - co

14、liDNA連接 酶和T4DNA1接酶兩類，前者只能連接黏性末端，后者能連接黏性末端和平末端。作用部位是 磷酸二酯鍵。DNA聚合酶的作用是將脫氧核苷酸聚合成 DNA長(zhǎng)鏈。5. “分子運(yùn)輸車”是指運(yùn)載體，常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、入噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等。質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核 DNA之外的，并具有自我復(fù)制能力的很小的雙 鏈環(huán)狀DNA分子。作為載體的質(zhì)粒應(yīng)該具備的條件：能在受體細(xì)胞中自我復(fù)制，穩(wěn)定保存； 有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)，便于插入目的基因；具有某些標(biāo)記基因，便于篩選；必須是 安全的，不會(huì)對(duì)受體細(xì)胞有害。1.2 基因工程的基本操作程序1. 基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)

15、步驟：獲取目的基因；構(gòu)建表達(dá)載體（核心）； 導(dǎo)入受體細(xì)胞；目的基因檢測(cè)與鑒定。2. 目的基因主要是編碼蛋白質(zhì)的基因， 如，與生物抗逆性相關(guān)的基因、 與優(yōu)良品質(zhì)相關(guān)的基因。 獲得方法有：從基因文庫中獲取目的基因；利用 PCF技術(shù)擴(kuò)增目的基因；用化學(xué)方法直 接人工合成。3. 將含有某種生物不同基因的許多 DNA片段，導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因，稱為基因文庫。若包含了一種生物的所有基因，這種基因文庫叫做基 因組文庫；若只包含了一種生物的一部分基因，這種基因文庫叫做部分基因文庫，如cDNA文庫?？梢愿鶕?jù)目的基因的有關(guān)信息，如基因的核苷酸序列、基因的功能等特性從基因文

16、庫中獲 取目的基因。（基因庫是一個(gè)種群中所有個(gè)體所含有的全部基因）。4. PCM中文名稱是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，原理是 DNA復(fù)制。應(yīng)用的前提是要有一段已知目的基 因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。需要的條件：熱穩(wěn)定 DNA聚合酶（Taq酶）、 模板、4種脫氧核苷酸、2種引物。大致過程經(jīng)過變性復(fù)性延伸 3個(gè)步驟。擴(kuò)增的結(jié)果是 目的基因呈指數(shù)形式擴(kuò)增（約為 2n,其中n為擴(kuò)增循環(huán)次數(shù)）。5. 基因比較小，核苷酸序列已知，可以通過 DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成。6. 一個(gè)完整的基因表達(dá)載體應(yīng)該包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因。啟動(dòng)子是一段有 特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，是RNA聚合酶識(shí)別和

17、結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA終止子也 是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停下來。標(biāo)記基因的作用是便于重組載 體的鑒定和選擇。（起始密碼子是指 mRN上的3個(gè)堿基，作為翻譯的起點(diǎn)；終止密碼子是翻 譯的終點(diǎn)）7. 目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過客中，稱為轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化植 物細(xì)胞常用的方法：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：適用于雙子葉植物、裸子植物和少數(shù)單子葉植物，比較 經(jīng)濟(jì)有效。 基因槍法： 適用于單子葉植物， 但成本較高。 花粉管通道法： 適用于被子植物， 比較簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)。8. 轉(zhuǎn)化動(dòng)物細(xì)胞一般用顯微注射法，常用受精卵作為受體細(xì)胞。9. 轉(zhuǎn)化微生物細(xì)胞一般受用感受態(tài)

18、法：用 Ca2+（般用CaCl2溶液）處理微生物，使細(xì)胞處 于一種能吸收周圍環(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài)。選用大腸桿菌作為受體是因?yàn)槠浞敝晨臁?單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少。10. 目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因。檢測(cè)方法是DNA分子雜交，通常選用單鏈的 DNA乍為探針。檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 mRNA勺 方法是DNA-RN分子雜交。檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)的方法是抗原 -抗體雜交。11. 除了分子水平的檢測(cè)，有時(shí)還要進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè)，例如，轉(zhuǎn)基因抗蟲棉還需要做抗蟲 實(shí)驗(yàn)。1.3 基因工程的應(yīng)用1. 植物基因工程的應(yīng)用實(shí)例有：抗蟲；抗病；抗逆

19、；改良品質(zhì)。2. 動(dòng)物基因工程的應(yīng)用實(shí)例有：提高生長(zhǎng)速度；改良品質(zhì)；生產(chǎn)藥物；作器官供體。3. 基因工程獲得的藥物有：胰島素、白細(xì)胞介素、干擾素、乙肝疫苗等。（干擾素是白細(xì)胞產(chǎn)生的一種糖蛋白）。4. 基因治療是把正常人的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)， 使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能， 從而達(dá)到治療疾病的目的，這是治療遺傳病的最有效的手段。分為兩類：體外基因治療：在體外完成轉(zhuǎn)基因 再輸入患者體內(nèi)；體內(nèi)基因治療：直接向人體組織細(xì)胞中轉(zhuǎn)移基因。1.4 蛋白質(zhì)工程的崛起1. 蛋白質(zhì)工程崛起的緣由是： 基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)， 這些天然蛋 白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能符合特定物種生存的需要，卻不一定完全符合人

20、類生產(chǎn)和生活的需要。2. 蛋白質(zhì)工程的目標(biāo)是根據(jù)人們對(duì)蛋白質(zhì)功能的特定需求，對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)。 它的基因途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)一設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)一推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列T 找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）。蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物 功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋 白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代 基因工程。應(yīng)用實(shí)例：速效型胰島素、蛋白質(zhì)電子原件等。專題 2 細(xì)胞工程2.1 植物細(xì)胞工程1. 細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法， 通過細(xì)

21、胞水平或細(xì)胞器水平上的 操作，按照人的意愿改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合科學(xué)技術(shù)。 根據(jù)操作對(duì) 象不同，可以分為植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程。2. 脫分化是已經(jīng)分化的細(xì)胞失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過程。 愈傷組織細(xì) 胞特點(diǎn)：細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。3. 植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工 配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。 大致過程：外植體經(jīng)脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體或叢芽，再經(jīng)生長(zhǎng)成為 完整植株?；驹硎侵参锛?xì)胞的全能

22、性。4. 細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。 理論上具有某種生物全 部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞都具有全能性。 未離體的組織細(xì)胞不能表現(xiàn)全能性的原因是基因進(jìn) 行了選擇性表達(dá)。5. “胡蘿卜組織培養(yǎng)”要無菌操作的目的是防止雜菌與培養(yǎng)物爭(zhēng)奪營養(yǎng)， 雜菌產(chǎn)生的有害物 質(zhì)會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)物死亡。 切取胡蘿卜塊時(shí)強(qiáng)調(diào)要切取含有形成層部分， 原因是這部分容易誘導(dǎo)形 成愈傷組織。6. 植物組織培養(yǎng)的基本條件有離體、無菌、一定的營養(yǎng)、溫度、pH光照等。7. 植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基一般含有無機(jī)營養(yǎng)成分、 有機(jī)營養(yǎng)成分、激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素） 、 瓊脂四部分。還要注意控制好溫度、pH、光照（誘導(dǎo)

23、愈傷組織一般要避光）等。8. 植物體細(xì)胞雜交就是將不同種的植物體細(xì)胞， 在一定條件下融合成雜種細(xì)胞， 并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)?；驹硎羌?xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。屬于染色體（數(shù) 目）變異。優(yōu)點(diǎn)是可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。實(shí)例有白菜-甘藍(lán)、胡蘿卜 -羊角芹等。9. 原生質(zhì)體是指去掉細(xì)胞壁的植物細(xì)胞。 獲得方法是用纖維素酶和果膠酶處理。 去壁時(shí)應(yīng)該在 等滲或高滲溶液中進(jìn)行，防止原生質(zhì)體吸水漲破。誘導(dǎo)融合的方法一般有兩類：物理方法： 離心、振動(dòng)、電擊等；化學(xué)方法：用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑。誘導(dǎo)成功的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生 細(xì)胞壁（可通過觀察雜種細(xì)胞是否會(huì)吸水漲破來判斷成功與否）。10

24、. 微型繁殖采用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，優(yōu)點(diǎn)有高效性、可以保持親本的優(yōu)良特性。11. 作物脫毒一般選用植物的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，原因是該部分可能不帶病毒。（抗毒苗是通 過基因工程獲得的）。12. 人工種子是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄膜 包裝得到的種子。人工種皮一般含有適量養(yǎng)分、無機(jī)鹽、有機(jī)碳源、農(nóng)藥、抗生素、有益菌、 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等。人工種子的優(yōu)點(diǎn)有可以完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性；不受季節(jié)、氣 候和地域限制；可以方便地貯藏和運(yùn)輸。13. 單倍體育種的2個(gè)關(guān)鍵步驟：花藥離體培養(yǎng)（獲得單倍體）：人工誘導(dǎo)染色體加倍（使 單倍體可育）。其原理是染色體（數(shù)目）變異。

25、優(yōu)點(diǎn)是可以明顯縮短育種年限（一般得到是純 合體）。14. 在作物育種中，可以對(duì)植物的愈傷組織進(jìn)行化學(xué)或物理的誘變處理，促使其發(fā)生突變，再 通過分化形成植物，從這些植物中篩選出高抗、高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的突變體，就可以培育成新品種。15. 細(xì)胞產(chǎn)物的獲得一般需要將外植體培養(yǎng)到愈傷組織階段即可，不需要培養(yǎng)成植株。實(shí)例有 人參皂甙、紫草素等。2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程1. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是從動(dòng)物機(jī)體取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng) 基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖?；驹硎羌?xì)胞增殖。2. 將成塊動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞的方法是用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。 目的是解除細(xì)胞間 的接觸抑制，還有利于細(xì)胞從

26、培養(yǎng)液中獲得營養(yǎng)物質(zhì)。3. 懸液中分散的細(xì)胞很快會(huì)貼附在瓶壁上， 稱為細(xì)胞貼壁。 這要求培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光 滑、無毒，易于貼附。4. 當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)， 細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖， 這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸 抑制。解除方法是用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。癌細(xì)胞沒有接觸抑制，是由癌細(xì)胞表面糖蛋 白減少所致。5. 人們通常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)， 分瓶繼續(xù)培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。 一般來說，細(xì)胞在傳到 1050代左右時(shí)，增殖會(huì)逐漸緩慢，以至于完全停止，部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可 能會(huì)發(fā)生變化。目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10 代以內(nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。6. 動(dòng)

27、物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理、培養(yǎng)液中添 加一定量的抗生素、定期更換培養(yǎng)液。營養(yǎng)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，特別要加入血清、血漿等一些天然成分。溫度和pH:哺乳動(dòng)物多以36.5 ± 0.5 C為宜，pH為7.27.4。氣體環(huán)境：95濟(jì)氣+5%CO2CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的 pH。7. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用實(shí)例：獲得生物制品：如病毒疫苗、干擾素等；檢測(cè)有毒物質(zhì)； 用于生理、病理、藥理研究。8. 動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核， 移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中， 使其重 組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎， 這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)

28、物個(gè)體。 分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞 核移植兩種類型。由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程序低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易?；驹硎莿?dòng)物細(xì)胞 核的全能性?？寺?dòng)物屬于無性繁殖，優(yōu)點(diǎn)是可以保持供體親本的優(yōu)良特性?？寺?dòng)物并不是 對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物100%勺復(fù)制，因?yàn)楹送膺€有少量DNA另外，后代個(gè)體的表現(xiàn)還受環(huán)境影響。9. 動(dòng)物體細(xì)胞核移植： 供體細(xì)胞一般選用傳代 1 0代以內(nèi)的， 是因?yàn)?1 0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保 持正常的二倍體核型。一般選擇幼齡動(dòng)物的、分化程度低的組織細(xì)胞作為供體更易于培養(yǎng)。受體細(xì)胞一般選擇Mil期的卵母細(xì)胞（因?yàn)镸il期卵母細(xì)胞核的位置靠近第一極體， 用微型吸管 可一并吸出細(xì)胞核與第一極體；卵母

29、細(xì)胞中含有核全能性表達(dá)所需的營養(yǎng)物質(zhì)）。10. 體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用實(shí)例：加速家畜遺傳改良進(jìn)程、保護(hù)瀕危物種、作為生物反應(yīng)器、 作為器官移植供體等。存在的問題有：成功率仍然比較低，克隆動(dòng)物還存在健康問題。11. 動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程?；驹?理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性。優(yōu)點(diǎn)是突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。誘導(dǎo)融合常 用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇（PEG、滅活的病毒、電激等。12. 單克隆抗體制備過程中小鼠需作免疫處理，目的是讓其體內(nèi)形成相應(yīng)的效應(yīng)B細(xì)胞。細(xì)胞兩兩融合的結(jié)果有3種：B-B、瘤-瘤、雜交瘤。需要兩次篩選：第一次篩選是為了獲得雜交

30、瘤 細(xì)胞，第二次篩選是為了獲得能產(chǎn)生單一性抗體的雜交瘤細(xì)胞。13. 雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度 高、并可能大量制備。具體應(yīng)用有：作為診斷試劑：如“早早孕診斷試劑盒”，具有準(zhǔn)確、 高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。用于治療疾病和運(yùn)載藥物：如“生物導(dǎo)彈”，借助單克隆抗體的 導(dǎo)向作用。專題 3胚胎工程3.1 體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育1. 胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)，如體外受精、 胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。2. 哺乳動(dòng)物精子的發(fā)生場(chǎng)所是睪丸， 雄性動(dòng)物生殖細(xì)胞的增殖時(shí)期是從初情期 （相當(dāng)于人的青 春期）開始直到

31、生殖機(jī)能衰退。精子的發(fā)生過程大體經(jīng)過 3個(gè)階段：第一階段：精原細(xì)胞經(jīng) 過數(shù)次有絲分裂，產(chǎn)生大量的精原細(xì)胞，部分形成初級(jí)精母細(xì)胞；第二階段：初級(jí)精母細(xì)胞連續(xù)進(jìn)行兩次細(xì)胞分裂形成精細(xì)胞；第三階段：精細(xì)胞變形成為精子。細(xì)胞核變?yōu)榫宇^的 主要部分，高爾基體發(fā)育為頭部的頂體，中心體演變?yōu)榫拥奈?，線粒體聚集在尾的基部形成 線粒體鞘，細(xì)胞內(nèi)的其他物質(zhì)濃縮為球狀叫做原生質(zhì)滴。3. 卵子的發(fā)生是在雌性動(dòng)物的卵巢內(nèi)完成的。 卵原細(xì)胞從動(dòng)物的胚胎性別分化以后 （胎兒期）， 即開始通過有絲分裂增殖。 減數(shù)第一次分裂是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的， 減數(shù)第二次分裂是 在精子和卵子結(jié)合的過程中完成的。兩次分裂是不連續(xù)的。

32、4. 一個(gè)卵泡中能形成一個(gè)成熟的卵子。 排卵是指卵子從卵泡中排出。 剛排出的卵不是成熟的卵 子，它在母體的輸卵管內(nèi)與精子受精。5. 受精是精子與卵子結(jié)合形成合子 （即受精卵）的過程，它包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段。 自然條件下，受精是在雌性輸卵管內(nèi)完成的。6. 受精前精子要獲能，卵子要達(dá)到減數(shù)第二次分裂的中期。7. 防止多精入卵的兩道屏障：透明帶反應(yīng)：在精子觸及卵黃膜的瞬間，會(huì)產(chǎn)生阻止后來的精 子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)； 卵細(xì)胞膜反應(yīng)： 精子入卵后，卵細(xì)胞膜會(huì)立即發(fā)生一種生理反應(yīng)， 拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)。 受精作用的實(shí)質(zhì)是精子的核與卵細(xì)胞的核相融合的過程。 完成的標(biāo) 志是在卵黃膜和透明帶的間

33、隙可以觀察到兩個(gè)極體（第一極體一般不再繼續(xù)分裂）。8. 受精卵的分裂方式是有絲分裂。 胚胎發(fā)育的早期有一段時(shí)間是在透明帶內(nèi)進(jìn)行的， 稱為卵裂 期。其特點(diǎn)是：細(xì)胞分裂方式為有絲分裂，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，但胚胎的總體積并不增加， 或略有縮小。當(dāng)胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到 32 個(gè)左右時(shí)，形似桑椹，叫做桑椹胚，這一階段前的每一 個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細(xì)胞。胚胎細(xì)胞在囊胚期開始出現(xiàn)分化。構(gòu)成 囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織， 滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤。 囊胚進(jìn)一步 擴(kuò)大，會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎從其中伸展出來，這一過程叫做孵化。原腸胚已經(jīng)有了胚層 的分化，此時(shí)期細(xì)胞分化達(dá)到最大

34、限度。3.2 體外受精和早期胚胎培養(yǎng)1. 試管牛是有性生殖，克隆動(dòng)物屬于無性繁殖。2. 卵母細(xì)胞采集的3種方法：從輸卵管中沖取卵子；從屠宰母畜的卵巢中采集；直接從 活體動(dòng)物卵巢中吸取。只有從輸卵管中采集的卵母細(xì)胞能直接與獲能的精子受精。3. 精子采集的3種方法：假陰道法；手握法；電刺激法。采集的精子需進(jìn)行獲能處理， 兩種方法：培養(yǎng)法：對(duì)于嚙齒動(dòng)物、家兔和豬等，用人工配制的獲能液中；化學(xué)誘導(dǎo)法： 對(duì)于牛、羊等，用一定濃度的肝素或鈣離子載體 A23187溶液中。4. 體外受精需要在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿伞?. 哺乳動(dòng)物胚胎的培養(yǎng)液一般含有無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等 （六菜一湯）。不同動(dòng)物胚胎移植的時(shí)間不同：人的體外受精胚胎可在 816個(gè)細(xì)胞階段移植， 牛、羊一般要培養(yǎng)到桑椹胚階段或囊胚階段才進(jìn)行移植， 小鼠和家兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可在更早的階 段移植。3.3 胚胎工程的應(yīng)用及前景1. 胚胎移植是指將雌性動(dòng)物體內(nèi)的早期胚胎， 或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎， 移植 到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。提供胚胎的 個(gè)體稱為供體（包括提供卵細(xì)胞的雌性個(gè)體和提供精子的雄性個(gè)體） ，接受胚胎的個(gè)體叫受體。 胚胎移植實(shí)際上是生產(chǎn)胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的過程。 胚胎移植是胚胎工 程其