脾神經(jīng)對脾臟免疫功能調(diào)控的研究進(jìn)展

1、脾神經(jīng)對脾臟免疫功能調(diào)控的研究進(jìn)展         關(guān)鍵詞 神經(jīng);脾臟;免疫    脾臟作為全身最大的周圍淋巴器官，其結(jié)構(gòu)和功能復(fù)雜，近年來對脾臟免疫功能的研究愈來愈深入，尤其是神經(jīng)對脾臟免疫的調(diào)控研究取得了較大進(jìn)展，現(xiàn)綜合文獻(xiàn)概述如下。   1 支配脾臟神經(jīng)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)   支配脾臟的神經(jīng)主要是腹腔交感神經(jīng)節(jié)后纖維，富含去甲腎上腺素能傳出神經(jīng)纖維，同時含有膽堿能神經(jīng)纖維，由脾門伴隨脾動脈進(jìn)入脾臟。脾交感神經(jīng)不含傳入神經(jīng)纖維，幾乎是無髓鞘和Schwann細(xì)胞

2、的傳出神經(jīng)束。目前尚未發(fā)現(xiàn)副交感神經(jīng)纖維支配。DeVries等分析牛脾交感神經(jīng)軸膜的分子結(jié)構(gòu)顯示，其軸膜主要有5種分子量居于40130Da的多肽構(gòu)成，脂質(zhì)占干重的59.4%，主要是以膽固醇和神經(jīng)鞘磷脂的形式存在，與周圍神經(jīng)系統(tǒng)軸突起始部的軸膜結(jié)構(gòu)相一致。   Felten等用酪氨酸羥化酶免疫組化染色發(fā)現(xiàn)酪氨酸羥化酶陽性神經(jīng)纖維不僅分布于脾臟被膜和小梁，而且還分布于T細(xì)胞區(qū)和邊緣區(qū)。電鏡發(fā)現(xiàn)部分脾淋巴細(xì)胞與神經(jīng)末梢直接接觸，一個淋巴細(xì)胞可以與多個神經(jīng)末梢接觸，甚至被神經(jīng)末梢包圍，在神經(jīng)末梢與淋巴細(xì)胞接觸部位，二者之間的間隙比突觸間隙還小，且淋巴細(xì)胞膜增厚，似形成特化結(jié)構(gòu)。提示

3、神經(jīng)末梢與淋巴細(xì)胞之間可能進(jìn)行突觸樣化學(xué)傳遞。Schimdtova等在同一組織切片上通過雙重組化染色顯示野雞脾臟中央動脈周圍同時存在還原型輔酶:II-硫辛酰胺脫氫酶（NADPH-diaphorase）和乙酰膽堿脂酶（Acetycholinestease，ACHE）陽性神經(jīng)細(xì)胞，在紅髓和脾包膜僅有ACHE陽性神經(jīng)纖維。楊宏等證實(shí)成年小鼠的脾內(nèi)血管周圍和紅髓、白髓的淋巴細(xì)胞之間廣泛存在生長相關(guān)蛋白（GAP-43）樣免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)纖維，用結(jié)核菌素衍生蛋白誘發(fā)脾臟免疫應(yīng)答反應(yīng)，結(jié)果顯示不僅中央動脈周圍，而且動脈周圍淋巴鞘外層、邊緣區(qū)和紅髓等部位的神經(jīng)纖維較對照組顯著增多，說明脾臟的神經(jīng)纖維處于結(jié)構(gòu)不

4、斷重塑、功能不斷改建之中，這與機(jī)體不斷接受刺激、免疫系統(tǒng)與神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)同時不斷地感受刺激、協(xié)調(diào)功能、作出應(yīng)答和調(diào)節(jié)有關(guān)。有報(bào)道老年大鼠脾臟神經(jīng)纖維的密度下降，預(yù)示脾臟神經(jīng)纖維密度與脾臟免疫功能強(qiáng)弱呈正相關(guān)系，似乎也說明這一點(diǎn)。這些研究結(jié)果較深入地揭示了神經(jīng)系統(tǒng)對脾臟免疫功能調(diào)控的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。    2 神經(jīng)遞質(zhì)的性質(zhì)、存儲與釋放   脾交感神經(jīng)末梢與脾組織的接點(diǎn)屬于化學(xué)性突觸，其內(nèi)存在一類特殊的細(xì)胞器突觸囊泡，根據(jù)其大小和電子密度高低分為大致密顆粒囊泡、小致密顆粒囊泡和亮泡，是儲存神經(jīng)遞質(zhì)的場所。神經(jīng)遞質(zhì)是神經(jīng)系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)的偶聯(lián)劑。現(xiàn)知脾交感

5、神經(jīng)末梢釋放的遞質(zhì)主要是去甲腎上腺素、腎上腺素、神經(jīng)肽Y等。Lovisetti認(rèn)為與這些遞質(zhì)有關(guān)的蛋白嗜酪顆粒蛋白A，嗜酪顆粒蛋白B和NESP55（一種新的嗜酪顆粒樣蛋白）在脾觸突傳遞過程中逐步降解成為小分子多肽，最后形成遞質(zhì)以出胞機(jī)制釋放。另有作者通過對神經(jīng)分泌型蛋白和膜蛋白在脾交感神經(jīng)亞細(xì)胞器的分布研究后發(fā)現(xiàn)NESP55、血管緊張素和胺載體VMAT2 僅存在于大致密顆粒囊泡，觸突短桿素同時分布于大致密顆粒囊泡和亮泡中，而SNAP-25、構(gòu)造蛋白（syntaxin）和N型、L型Ca2+ 離子通道蛋白存在于一類特殊類型的亮泡中，預(yù)示神經(jīng)末梢釋放的遞質(zhì)是以一種特殊類型的神經(jīng)泡的形式運(yùn)輸?shù)缴窠?jīng)末梢

6、突觸前膨體，在受到刺激后釋放。而胺載體只存在于大致密顆粒囊泡中，提示小致密顆粒囊泡的形成可能需要重新利用大致密顆粒囊泡的膜成分。但也有人認(rèn)為脾神經(jīng)末梢的兩個相互獨(dú)立的分泌通道觸突囊泡和致密顆粒囊泡都是由軸突內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分化形成。至于神經(jīng)末梢膨體釋放的重要遞質(zhì)去甲腎上腺素，Depotter等認(rèn)為是以兩種形式存在于神經(jīng)末梢大致密顆粒囊泡和小致密顆粒囊泡，前者含有與膜相連的多巴胺-羥化酶和可容性多巴胺-羥化酶，后者不含可溶性羥化酶，而神經(jīng)肽只存在于大致密顆粒囊泡中。多巴胺-羥化酶和去甲腎上腺素的釋放在一定范圍內(nèi)隨刺激頻率的增加而增加，而神經(jīng)肽的釋放則相應(yīng)低1020倍。作者進(jìn)一步觀察狗脾交感神經(jīng)發(fā)現(xiàn)，刺激頻

7、率在220Hz之間，釋放的去甲腎上腺素和神經(jīng)肽Y隨刺激強(qiáng)度增加而增多，反復(fù)刺激后，腎上腺素和神經(jīng)肽Y的釋放分別減少12.5%和11%，去甲腎上腺素只能從大致密顆粒囊泡中以出胞方式釋放。由此不難看出神經(jīng)遞質(zhì)在觸突的儲存部位和釋放途徑存在分歧，這可能與實(shí)驗(yàn)動物的種屬和實(shí)驗(yàn)方法有關(guān)。   3 中樞神經(jīng)對脾神經(jīng)電生理的調(diào)控   脾臟的交感神經(jīng)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)之間的重要聯(lián)系途徑，中樞神經(jīng)對脾交感神經(jīng)的作用直接影響脾臟免疫功能的表現(xiàn)。一般認(rèn)為脾交感神經(jīng)電生理活動增強(qiáng)能抑制脾臟免疫功能，反之則增強(qiáng)脾臟免疫功能。舒翠莉等在大白鼠第三腦室注射甲硫-腦啡肽（類阿片物

8、質(zhì)），能顯著增強(qiáng)脾交感神經(jīng)電生理活動;注射IFN-2出現(xiàn)相同效應(yīng)，并可被阿片受體阻斷劑納洛酮所反轉(zhuǎn)。因此，該效應(yīng)可能是通過中樞神經(jīng)系統(tǒng)的阿片受體所介導(dǎo)。這同時也說明IFN-2作為免疫反應(yīng)產(chǎn)物不僅直接參與免疫反應(yīng)，而且通過對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用反饋性調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的產(chǎn)生和強(qiáng)度。在第三腦室注射IL-2則脾交感神經(jīng)的電生理活動受到抑制，這種抑制也能被納洛酮所逆轉(zhuǎn)，上述結(jié)果提示第三腦室附近的阿片受體對脾交感神經(jīng)電生理活動發(fā)揮重要的調(diào)控功能。   此外，靜脈內(nèi)注射細(xì)菌內(nèi)毒素脂多糖也能增強(qiáng)脾交感神經(jīng)電生理活動，縮短其潛伏期。如事先給予前列腺素合成抑制劑消炎痛，該效應(yīng)明顯減弱或消失。在第三腦

9、室內(nèi)直接注射前列腺素2，同樣能迅速增強(qiáng)脾交感神經(jīng)的電生理活動，表明脂多糖是通過中樞前列腺素的合成這一中間環(huán)節(jié)使脾交感神經(jīng)電生理活動增強(qiáng)，說明第三腦室周圍結(jié)構(gòu)受前列腺素刺激對脾交感神經(jīng)生理電活動的影響。這部分解釋了細(xì)菌所致炎癥反應(yīng)與免疫應(yīng)答的消長關(guān)系。   靜脈輸注精氨酸和賴氨酸能抑制脾交感神經(jīng)傳出沖動，Niijima等推測是肝門部化學(xué)感受器感受刺激后通過肝迷走神經(jīng)將信號傳人下丘腦，再由下丘腦發(fā)出指令抑制脾交感神經(jīng)電生理活動，從而提高脾臟免疫力。這可能是氨基酸增強(qiáng)機(jī)體免疫力的重要神經(jīng)調(diào)控機(jī)制之一。因此，中樞神經(jīng)對脾交感神經(jīng)電生理活動的調(diào)控部位主要是在第三腦室周圍和下丘腦。&#

10、160;  4 脾神經(jīng)對脾臟免疫功能的調(diào)控   許多實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)脾交感神經(jīng)對脾臟免疫功能的影響主要表現(xiàn)為兩方面:調(diào)節(jié)脾臟血液灌流量和脾免疫細(xì)胞功能。Roagusch等的研究結(jié)果顯示，低劑量脂多糖能刺激機(jī)體產(chǎn)生內(nèi)源性IL-1作用于脾交感神經(jīng)節(jié)后水平，抑制脾交感神經(jīng)興奮所致的收縮，從而增加脾臟血流量，提高脾臟免疫功能。該作者直接靜脈給予亞劑量（不引起發(fā)熱的劑量）的IL-1，同樣能顯著增加脾臟血流量，而骨骼肌血流量無改變。去除脾交感神經(jīng)以后，該效應(yīng)完全消失。此結(jié)果較好地支持了脾血液灌流量增加是脾神經(jīng)受抑制，血管緊張度降低所致的觀點(diǎn)。MacNeil也記錄到脾交感神經(jīng)電生理

11、活動與內(nèi)毒素呈劑量依賴關(guān)系，內(nèi)毒素劑量越大，脾交感神經(jīng)電生理活動強(qiáng)度越高，潛伏期越短，脾臟血液灌流量越低，腎交感神經(jīng)對此反應(yīng)較弱，說明脾交感神經(jīng)對內(nèi)毒素更敏感，能快速調(diào)節(jié)脾臟血流量，使之表現(xiàn)出相應(yīng)的免疫反應(yīng)。   Besedovsky切除脾交感神經(jīng)后向腹腔內(nèi)注射綿羊紅細(xì)胞致敏，觀察脾內(nèi)抗體形成細(xì)胞數(shù)較對照組明顯增加，用特異性更高的6-羥多巴作化學(xué)性交感神經(jīng)切除后，再用綿羊紅細(xì)胞致敏得到同樣的結(jié)果。Wiliams等給新生小鼠腹腔注射6-羥多巴胺后，再向腹腔注射綿羊紅細(xì)胞，也發(fā)現(xiàn)脾內(nèi)抗體形成細(xì)胞增加，認(rèn)為這可能是交感神經(jīng)切除后c-GMP增高，影響Ts細(xì)胞分化或抑制其活性，也可能

12、是增強(qiáng)了TH 細(xì)胞活性。   Okada等切除大鼠雙側(cè)頸交感神經(jīng)后4周，脾臟NK細(xì) 胞活性顯著降低，如去除脾交感神經(jīng)支配后再切除頸交感神經(jīng)，則脾臟NK細(xì)胞活性沒有明顯改變，說明脾交感神經(jīng)能抑制NK細(xì)胞活性。然而，Jonsdottri對長期體質(zhì)鍛煉的老鼠去除脾神經(jīng)支配，發(fā)現(xiàn)脾臟NK細(xì)胞活性沒有影響。因此，脾交感神經(jīng)對脾臟免疫細(xì)胞活性的調(diào)節(jié)及其機(jī)制尚需進(jìn)一步深入細(xì)致的研究。             參考文獻(xiàn)   1DeVries GH，Campbell B，S

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