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1、種子活力加速老化試驗(yàn)測(cè)定一、測(cè)定原理加速老化試驗(yàn)(簡(jiǎn)稱 AA 測(cè)定)是根據(jù)高溫(4045)和高濕(l00相對(duì)濕度)能導(dǎo)致種子快速劣變這一原理進(jìn)行測(cè)定。高活力種子能忍受逆境條件處理,劣變較慢;而低活力種子劣變較快,長(zhǎng)成較多的不正常幼苗或者完全死亡。二、適用范圍國(guó)際種子檢驗(yàn)規(guī)程所規(guī)范的AA測(cè)定適用于大豆種子;ISAT手冊(cè)指出該法也適用于其他許多種,詳見表中所列的種。表 不同作物種子加速老化試驗(yàn)的溫度和時(shí)間作 物內(nèi) 箱外 箱老化后種子水分/%種子重量/g數(shù)目箱老化溫度/老化時(shí)間/h大豆42141722730苜蓿3.5141724044菜豆(干)42141722730(法國(guó))50245482630(菜
2、園)30241723132油菜1141723944玉米(大田)40245722629(甜)24141723135萵苣0.5141723841洋蔥1141724045紅花屬2141724045三葉草1141723944葦狀羊茅1141724753番茄1141724446小麥20141722830黑麥草1141483638綠豆40145962732高草0.2143724050三、儀器和藥品(1)種子老化箱 種子老化箱由種子老化外箱和種子老化內(nèi)箱組成。老化外箱(圖6-3-1)推薦應(yīng)用水套培養(yǎng)箱,保持恒溫(41土0.3)。如果沒(méi)有水套培養(yǎng)箱,其他有加水的加熱培養(yǎng)箱也可。老化內(nèi)
3、箱(圖6-3-2)是帶蓋的塑料盒(大小為11.0cm11.0cm3.5cm),內(nèi)有一個(gè)網(wǎng)架盤(10.0cml0.0cm0.3cm,網(wǎng)孔為14mm18mm)。老化內(nèi)箱可以購(gòu)買,也可以自制,使用時(shí)老化內(nèi)箱的蓋不應(yīng)密封。(2)天平 感量為0.001g。(3)去離子水或蒸餾水。(4)帶刻度的容量杯 刻度從0至100mL,從標(biāo)準(zhǔn)的容量器或有50mL刻度的容器準(zhǔn)確量取40mL水。(4)鋁盒 供種子水分測(cè)定(5)發(fā)芽試驗(yàn)設(shè)備四、測(cè)定程序(1)預(yù)備試驗(yàn)檢查老化外箱:老化外箱的溫度必須經(jīng)過(guò)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量器或類似的溫度計(jì)的檢定。檢查溫度:收集按規(guī)定的程序或系統(tǒng)進(jìn)行操作的老化外箱的溫度和其均勻度的記錄數(shù)據(jù)。記錄顯示能
4、達(dá)到規(guī)定溫度的情況下才能進(jìn)行老化測(cè)定。如大豆種子,所有水平應(yīng)達(dá)到410.3下才能進(jìn)行老化測(cè)定。保證老化內(nèi)箱的清潔度:為了防止菌類污染,使用過(guò)的老化內(nèi)箱、蓋和網(wǎng)架需經(jīng)過(guò)熱消毒或用15次氯酸鈉溶液洗凈并烘干,才可進(jìn)行老化測(cè)定。 (2)測(cè)定每一種子批的程序 檢查種子水分:如果不知道測(cè)定種子批的水分,應(yīng)采用烘箱法測(cè)定種子批的水分。對(duì)于水分低于10 % 或高于14的種子批,應(yīng)在老化測(cè)定前將其水分調(diào)節(jié)至 10%14。準(zhǔn)備老化內(nèi)箱:把 40mL 去離子水或蒸餾水放入老化內(nèi)箱,然后插入網(wǎng)架,確信水不滲到網(wǎng)架和種子上。如果在處理時(shí)種子滲到水,用另一準(zhǔn)備好的試樣種子替代。從凈種子中稱取 42 g(至少含有200粒
5、種子)種子,稱重后放在網(wǎng)架上,攤成一層。老化的種子最好不要經(jīng)過(guò)處理,然而,該作物種子是以殺菌劑處理銷售的,可以使用處理種子。每次外箱用于老化測(cè)定應(yīng)包括一個(gè)對(duì)照樣品。保證每一內(nèi)箱有蓋(不要封口)。注意蓋不應(yīng)密封。注:設(shè)置對(duì)照樣品的目的是為活力測(cè)定結(jié)果提供一致性的內(nèi)在質(zhì)量控制。對(duì)照樣品的結(jié)果差異反映了試驗(yàn)條件(如溫度、種子水分或其他因素)的微小變異,而會(huì)導(dǎo)致明顯影響結(jié)果的可靠性。使用老化外箱:內(nèi)箱排放在架上,同時(shí)放入外箱內(nèi)。為了使溫度均勻一致,外箱內(nèi)的兩個(gè)內(nèi)箱之間間隔大約為 2.5cm。記錄內(nèi)箱放入外箱的時(shí)間,準(zhǔn)確監(jiān)控老化外箱的溫度在規(guī)定的的范圍和時(shí)間內(nèi),如大豆種子在( 410.3) 溫度保持72
6、h 。注意:在老化規(guī)定期間,不能打開外箱的門,如果門己經(jīng)打開,應(yīng)從箱中取出種子重新進(jìn)行測(cè)定。發(fā)芽試驗(yàn):經(jīng) 72h老化時(shí)間后,從外箱中取出內(nèi)箱,記錄這時(shí)的時(shí)間。取出一小時(shí)內(nèi)用50 粒四個(gè)重復(fù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽試驗(yàn)。在同一天內(nèi)如果有許多種子批進(jìn)行老化試驗(yàn),樣品應(yīng)進(jìn)行分類,在兩個(gè)老化外箱的試驗(yàn)應(yīng)間隔 l h,以便有足夠的時(shí)間在老化后進(jìn)行置床發(fā)芽。檢查老化后對(duì)照樣品的水分:在老化結(jié)束時(shí)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽前,從內(nèi)箱中取出對(duì)照樣品的一個(gè)小樣品( 1020 粒),立即稱重,用烘箱法測(cè)定種子水分(以鮮重為基礎(chǔ))。記錄對(duì)照樣品種子水分,如果種子水分低于或高于規(guī)定的值(大豆種子老化后的水分應(yīng)在 27 %30 % ) ,則試驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,應(yīng)重作試驗(yàn)。結(jié)果計(jì)算與表示:用50粒四次重復(fù)的平均結(jié)果表示人工老化發(fā)芽結(jié)果,以百分率表示。結(jié)果說(shuō)明解釋 :老化測(cè)定并不提供一個(gè)絕對(duì)的活力范圍,只是通過(guò)一段時(shí)間的高溫高濕逆境后進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)的結(jié)果。該結(jié)果與老化前同一
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