大黃酚對(duì)腦缺血再灌注小鼠探索功能的影響

1、大黃酚對(duì)腦缺血再灌注小鼠探索功能的影響         作者：王樹 張力 張丹參 安芳 薛貴平 【摘要】 目的觀察大黃酚對(duì)腦缺血再灌注小鼠認(rèn)知探索功能的影響。 方法采用暫時(shí)性阻斷兩側(cè)頸總動(dòng)脈的方法制備小鼠腦缺血再灌注損傷的模型，進(jìn)行探索實(shí)驗(yàn)，觀察大黃酚10,1，0.1mg·kg-1 ip對(duì)腦缺血再灌注小鼠認(rèn)知探索功能的改善作用               &

2、#160;                作者：王樹 張力 張丹參 安芳 薛貴平【摘要】  目的觀察大黃酚對(duì)腦缺血再灌注小鼠認(rèn)知探索功能的影響。 方法采用暫時(shí)性阻斷兩側(cè)頸總動(dòng)脈的方法制備小鼠腦缺血再灌注損傷的模型，進(jìn)行探索實(shí)驗(yàn)，觀察大黃酚10,1，0.1mg·kg-1 ip對(duì)腦缺血再灌注小鼠認(rèn)知探索功能的改善作用，并對(duì)各劑量組全血中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力和血漿中超氧化物歧化酶（SOD）活力進(jìn)行測(cè)定。結(jié)

3、果大黃酚可明顯縮短腦缺血再灌注小鼠到達(dá)暗室時(shí)間、到達(dá)高端時(shí)間、到達(dá)明室時(shí)間，增加爬高端的次數(shù)，使小鼠在暗室和在明室滯留時(shí)間相近；并提高全血中GSH-Px活力和血漿中SOD活力。結(jié)論大黃酚對(duì)腦缺血再灌注小鼠所致探索認(rèn)知行為功能障礙有明顯的改善作用，其作用機(jī)制可能是增強(qiáng)抗氧化酶GSH-Px和SOD活力。 【關(guān)鍵詞】  大黃酚 腦缺血再灌注 谷胱甘肽過氧化物酶 超氧化物歧化酶Abstract:ObjectiveTo observe the effects of chrysophanol on cognitive and exploratory functions in mice with

4、cerebral ischemia reperfusion.MethodsCerebral ischemia reperfusion injury  was produced on conscious mice by temporarily obstructing bilateral common carolid arteries. The improvement effects of chrysophanol（10，1，0.1mg·kg-1，ip） on cognitive and exploratory functions in mice with cerebral i

5、schemia reperfusion was observed using exploratory movement test and the glutathione peroxidase(GSH-Px) activities in blood and the superoxide dismutase(SOD) activities in plasma were measured.ResultsChrysophanol could shorten time of entering darkroom, time of climbing height,  time of enterin

6、g brightroom, increase number of climbing height, and showed no differences between staying time at darkroom and brightroom and increase the glutathione peroxidase(GSH-Px) activities in blood and the superoxide dismutase(SOD) activities in plasma. Conclusion Chrysophanol can improve the effects on t

7、he cognitive-behavior impairment in mice with cerebral ischemia reperfusion injury, perhaps the mechanism is involved in enhancing the activities of GSH-Px and SOD.Key words:Chrysophanol;   Cerebral ischemia reperfusion;   GSH-PX;    SOD血管性癡呆(Vascular dementia, VD)

8、是指由各種腦血管疾病引起的以認(rèn)知損害為特征的一種綜合征。VD主要行為表現(xiàn)為高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)的智能障礙,特別是認(rèn)知功能障礙,包括學(xué)習(xí)、記憶、思維等障礙，嚴(yán)重影響中老年人的生活質(zhì)量。中藥大黃作用廣泛，有抗高血壓、抗菌、瀉下、抑制膽堿酯酶、抗衰老作用等許多作用。大黃酚（Chrysophanol , Chry）為大黃的有效成分之一，但藥理作用文獻(xiàn)報(bào)道卻很少，僅限于傳統(tǒng)的抗菌、瀉下、止血等方面。我室前期工作已證實(shí)大黃酚能明顯減少大鼠肝、腦過氧化脂質(zhì)生成1，2。本實(shí)驗(yàn)采用小鼠短暫性腦缺血模型，研究大黃酚對(duì)腦缺血再灌注損傷后小鼠認(rèn)知探索功能的影響，探討其改善認(rèn)知探索功能障礙的機(jī)制，為其應(yīng)用于臨床治療血管性癡呆疾

9、病提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1  器材1.1  藥品和試劑大黃酚（分析純，中國(guó)藥品生物制品檢定所），實(shí)驗(yàn)前用N，N-二甲基甲酰胺溶解，聚山梨酯-80助溶，生理鹽水稀釋至所需濃度，N，N-二甲基甲酰胺：聚山梨酯-80：生理鹽水等于118。谷胱甘肽過氧化物酶活力測(cè)試盒，超氧化物歧化酶測(cè)試盒：南京建成生物工程研究所。實(shí)驗(yàn)用水為三重蒸餾水。1.2 儀器XTY-2探索運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)儀，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所；80-2B離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠； FSH-2內(nèi)切式組織可調(diào)高速勻漿器，江蘇環(huán)保儀器廠；721分光光度計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司；二列六孔電熱恒溫水浴鍋：北京精科華瑞儀器有限公司。1

10、.3 動(dòng)物昆明種小鼠120只，體重 2830g，均為雄性，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京藥物研究所提供。2  方法2.1  分組每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)均取健康小鼠60只，均為雄性，隨機(jī)分為5組：假手術(shù)組（進(jìn)行手術(shù)但不進(jìn)行缺血再灌注）、模型對(duì)照組(缺血再灌注組)、大黃酚高劑量組、中劑量組和低劑量組（高、中、低劑量分別為10，1，0.1 mg·kg-1，ip）。2.2  小鼠腦缺血再灌注模型的制備3.5%水合氯醛（10 ml·kg-1, ip）麻醉小鼠后，仰臥位固定，頸部正中切開皮膚約mm，分離兩側(cè)頸總動(dòng)脈，按Himori法3埋線后縫合切口。術(shù)后48 h將頸下部?jī)啥私z線拉緊,阻斷兩側(cè)頸總動(dòng)脈造成大腦缺血狀態(tài)，5 min后輕拉兩耳后引線，使頸總動(dòng)脈恢復(fù)血液再灌注。2.3  探索運(yùn)動(dòng)探索運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)箱，是檢測(cè)動(dòng)物行為的場(chǎng)所，由一個(gè)暗室和兩個(gè)明室組成，該設(shè)備中裝有傳感系統(tǒng)，可以接受動(dòng)物的活動(dòng)行為信號(hào)并傳送到計(jì)算機(jī)。手術(shù)后48 h將小鼠放入探索運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)儀內(nèi)進(jìn)行預(yù)選，在箱內(nèi)自由活動(dòng)3 min，3 min內(nèi)不進(jìn)入暗室者剔除。將經(jīng)過預(yù)選的小鼠進(jìn)行分組。 除假手術(shù)組外，其余各組使腦立即缺血5 min，然后恢復(fù)血流。其中大黃酚高、中、低劑