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1、代寫外科論文 不同部位紫玉盤總黃酮的含量測(cè)定 【關(guān)鍵詞】 紫玉盤;,總黃酮;,分光光度法摘要:目的建立紫玉盤總黃酮的含量測(cè)定方法并檢測(cè)其不同部位總黃酮的含量。方法以蘆丁為對(duì)照品,采用分光光度法于500 nm處測(cè)定艾納香中總黃酮的含量。結(jié)果蘆丁在00.076 mg/ml(r=0.999 5)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,平均回收率為99.7%,RSD2.3%(n=5),其葉、枝條、根含總黃酮分別為10.53%,5.60%,3.87%。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、可靠,可作為該藥材中總黃酮含量檢測(cè)的方法。關(guān)鍵詞:紫玉盤; 總黃酮;
2、分光光度法Determination of Total Flavonoids in Different Sections of Uvaria microcarpaHUANG Yonglin,RUAN Jun,WEN Yongxin,XU Qing(Guangxi Institute of Botany, Guangxi Zhuangzu Autonomous Region and the Chinese Academy of Sciences, Guilin 541006, China;Guilin Medical College, Guilin 541004, China)Abstract
3、:ObjectiveTo develop a quantitative method for the determination of total flavonoid in different sections in Uvaria microcarpa.MethodsUsing rutin as a reference substance, the total flavonoids in Uvaria microcarpa was determined by UV absorption at 500 nm. ResultsThe linearity of rutin was obtained
4、within the range of 0 to 0.076 mg/ml(r=0.999 5). The average recovery was 99.7% and RSD was 2.3%. The content of total flavonoid in Uvaria microcarpa from leaf was 10.53%,branch was 5.60%, root was 3.87%(n=5).ConclusionThe method is convenient and reliable. It can be used as a quality control method
5、 to determine total flavonoids of Uvaria microcarpa.Key words:Uvaria microcarpa; Total flavonoid; Determination 紫玉盤Uvaria microcarpa為番荔枝科紫玉盤屬植物,分布于我國(guó)廣西、廣東和臺(tái)灣等省區(qū)。紫玉盤味苦、性甘,微溫,民間用于治療消化不良,腹脹腹瀉,跌打損傷,腰腿疼痛等癥1,是常用的中藥之一。近幾十年來國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)紫玉盤屬植物中黃酮類成分進(jìn)行了大量的研究,發(fā)現(xiàn)了該類化合物具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒、抗腫瘤、抗瘧、抗微生
6、物等活性2,3。由于其具有很好的藥理活性、藥用價(jià)值高,市場(chǎng)開發(fā)前景好,因此對(duì)其黃酮類化合物含量進(jìn)行測(cè)定,掌握其分布基本規(guī)律具有十分重要的意義,目前還未見有該藥材總黃酮含量測(cè)定方法的文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用分光光度法,用蘆丁為對(duì)照品,以亞硝酸鈉硝酸鋁為顯色劑,測(cè)定紫玉盤不同部位中總黃酮的含量,方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、可靠,可作為該藥材中總黃酮的含量檢測(cè)方法,結(jié)果為合理開發(fā)利用紫玉盤植物資源提供基礎(chǔ)資料。1 儀器與材料1.1 材料藥材采自廣西防城,經(jīng)廣西植物研究所分類室劉演副研究員鑒定為番荔枝科紫玉盤屬植物紫玉盤Uvaria microcarpa。1.2 儀器T6新世紀(jì)紫外
7、可見光分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限公司);瑞士Precisa Bailnces Series XS電子天平(Precisa儀器有限公司)。1.3 試劑蘆丁對(duì)照品(購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所)。亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、甲醇等均為分析純。2 方法與結(jié)果2.1 供試液的制備2.1.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取120干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品19 mg置100 ml容量瓶中,加甲醇70 ml,置水浴上微熱使溶解,放冷,加甲醇至刻度,搖勻,即得對(duì)照品溶液(每毫升溶液中含蘆丁0.19 mg),待用。2.1.2
8、0; 供試品溶液的制備精密稱取紫玉盤藥材粉末(40目)1 g,至燒瓶中,加甲醇100 ml,冷浸30 min后,在水浴上加熱回流60 min,分取濾液,藥渣加甲醇100 ml,繼續(xù)水浴加熱回流30 min,濾過,濾渣用30 ml甲醇洗滌,合并濾液,濾液置250 ml量瓶中,放冷,加甲醇至刻度,搖勻,作供試品溶液,待用。2.2 含量測(cè)定2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密量取對(duì)照品溶液0.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0,10.0 ml分別置于25 ml量瓶中,各加水至10 ml,加5%亞硝酸鈉溶液1 ml,使混勻,放
9、置6 min,加10%硝酸鋁溶液1 ml,搖勻,放置6 min,加4%氫氧化鈉溶液10 ml,再加水至刻度,搖勻,放置15 min,以相應(yīng)的試劑溶液為空白,在500 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。以吸收度 A為縱坐標(biāo),以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)(mg/ml),求得回歸方程:A=11.079C+0.008 4 (r=0.999 5) ,線性范圍 00.076 mg/ml。2.2.2 樣品的測(cè)定分別精密吸取上述供試品溶液2 ml于25 ml量瓶中,按標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制項(xiàng)下操作,分別加入5%亞硝酸鈉溶液,10%硝酸鋁溶液,4%氫氧化鈉溶液10 ml及水,經(jīng)放置顯色后,于500 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸
10、收度,代入回歸方程,計(jì)算總黃酮的含量。結(jié)果見表1。表1 不同部位紫玉盤中總黃酮的含量(略)2.2.3 精密度實(shí)驗(yàn) 取某一濃度對(duì)照品溶液2 ml,按標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制項(xiàng)下操作,依法顯色后測(cè)定吸收度,連續(xù)6次,RSD值為1.70%,表明儀器精密度較好。結(jié)果見表2。2.2.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取某一供試品溶液2 ml,按標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制項(xiàng)下操作,依法顯色后每隔5 min測(cè)定其吸收度,共計(jì)30 min,其測(cè)得值基本保持不變,RSD值為1.49%,表明供試品溶液在顯色后30 min內(nèi)基本穩(wěn)定。2.2.5 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一
11、批藥材樣品按供試品溶液的制備項(xiàng)下方法平行制備供試品溶液5份,分別取供試品溶液2 ml,按標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制項(xiàng)下操作,依法顯色后測(cè)定吸收度,計(jì)算總黃酮平均含量為3.91%,RSD為1.13%,表明實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)性良好。結(jié)果見表3。表2 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)表3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)2.2.6 回收率測(cè)定 精密稱取已知總黃酮含量的藥材樣品5份,分別加入一定量蘆丁對(duì)照品,按供試品溶液的制備項(xiàng)下方法制備供試品溶液,按樣品的測(cè)定項(xiàng)下方法依法顯色后測(cè)定吸收度,計(jì)算平均回收率為99.7%,RSD為2.3%。3 討論3.1 采用紫外分光
12、光度法建立測(cè)定紫玉盤藥材中總黃酮含量的方法,該方法快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、可靠,為今后紫玉盤中總黃酮含量的檢測(cè)提供了便捷方法,同時(shí)為深入開發(fā)利用紫玉盤中黃酮類成分的研究奠定了基礎(chǔ)。經(jīng)檢測(cè)的紫玉盤中,葉與枝中的總黃酮含量分別高達(dá)10.53%和5.60%,因此,藥材紫玉盤中黃酮類化合物具有非常重要的開發(fā)利用價(jià)值。3.2 本實(shí)驗(yàn)僅考察了不同部位對(duì)紫玉盤中總黃酮含量的影響,產(chǎn)地、采收期等因素對(duì)紫玉盤中總黃酮及其它活性物質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化影響還有待進(jìn)一步研究 。參考文獻(xiàn):1 江蘇新醫(yī)學(xué)院, 中藥大辭典M.上海: 上海人民出版社, 1997: 3955.2 Li Huuang, Maonroe, E. Wall, Mansukh C.Wai. et al. New Compounds with DNA StrandScission Activity from the Combined leaf and Stem of Uvaria hamiltoniiJ.J Nat Prod. 1998,61(4):446.3 Nkunya M
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