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1、微生物-實(shí)驗(yàn)二-細(xì)菌的生理分布消毒滅菌細(xì)菌的人工培養(yǎng)一、常用培養(yǎng)基的制備原則 1、培養(yǎng)基的制備原則:適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)成分。合適的酸堿度。配制后經(jīng)滅菌后方可使用。2、培養(yǎng)基配制的基本程序按一定配方稱了各種物質(zhì)溶解測(cè)定及調(diào)整PH濾過(guò)分裝滅菌、備用。常用培養(yǎng)基的種類 1按用途可分為 (1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基: (2)營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基: (3)鑒別培養(yǎng)基: (4)選擇培養(yǎng)基: (5)厭氧培養(yǎng)基: 常用培養(yǎng)基的種類 2按物理性狀可分為: 1)液體培養(yǎng)基 2)固體培養(yǎng)基,在液體培養(yǎng)基中加入23%瓊脂,固體培養(yǎng)基傾倒平皿上即成“平板”傾入試管內(nèi)即可制成“斜面培養(yǎng)基3)半固體培養(yǎng)基:當(dāng)液體培養(yǎng)基內(nèi)加入0.20.5%瓊脂時(shí)即成之。
2、二、細(xì)菌人工培養(yǎng)的接種方法: (一)細(xì)菌分離培養(yǎng)接種法平板劃線分離培養(yǎng)法 目的:使混雜在一起的細(xì)菌分散生長(zhǎng)。 平板區(qū)劃線法 培養(yǎng)后菌落的散布情況 一個(gè)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的生長(zhǎng)繁殖之后,所形成的肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán),稱為菌落。 很多菌落連在一起,融成一片,稱為菌苔。 描述菌落:大?。阂灾睆剑╩m)表示之,1mm左右為小菌落,23mm為中等大菌落,3mm以上為大菌落。形成:圓形、卵圓形及不規(guī)則形。邊緣:整齊或不整齊、鋸齒狀、毛發(fā)狀等。表面:光滑、濕潤(rùn)、皺紋、干燥等。隆起度:扁平、凸起、中心凹陷等。透明度:透明、半透明、不透明。顏色:無(wú)色、白色、黃色等。溶血性:在血平板上產(chǎn)生溶血毒素的細(xì)
3、菌,可以使培養(yǎng)基中的紅細(xì)胞破壞溶解,可分為完全溶血、草綠色溶血及不溶血 (二)細(xì)菌純培養(yǎng)接種法 目的:測(cè)試其生物學(xué)性狀、保種等。 方法: 斜面培養(yǎng)基接種 液體培養(yǎng)基接種 穿刺接種法斜面培養(yǎng)基接種法 斜面上生長(zhǎng)狀態(tài)觀察:可見有均勻一致的菌苔,如有不同的菌落出現(xiàn),則表明污染了雜菌。 液體培養(yǎng)基接種法 液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)狀態(tài)觀察:示培養(yǎng)前的液體培養(yǎng)基多為清徹透明的。接種細(xì)菌后,由于細(xì)菌種類不同,可有以下三種生長(zhǎng)形式?;鞚幔阂后w變?yōu)榛鞚?。菌膜:液體澄清,表面有一薄膜。沉淀:管底有沉淀物。 半固體培養(yǎng)基接種方法 半固體中生長(zhǎng)狀態(tài)觀察:無(wú)鞭毛(無(wú)運(yùn)動(dòng))的細(xì)菌,經(jīng)培養(yǎng)后僅沿穿刺線生長(zhǎng),培養(yǎng)基清亮。有運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌
4、,沿穿刺線向外擴(kuò)散,穿刺線摸糊不清,培養(yǎng)基混濁。 空氣中細(xì)菌的檢測(cè)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理二、實(shí)驗(yàn)材料三、實(shí)驗(yàn)方法咽拭培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理二、實(shí)驗(yàn)材料 血平板、棉簽三、實(shí)驗(yàn)方法紫外線的殺菌作用 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理了解紫外線對(duì)不同種細(xì)菌的殺菌作用及紫外線的穿透力。 紫外線的殺菌波長(zhǎng)范圍為240280nm,265266nm的作用最強(qiáng)。其主要是使DNA上相鄰的嘧啶通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合形成二聚體,影響DNA的正常鹼基配對(duì)。 紫外線的穿透力很弱,其殺菌只限于表面的照射。二、實(shí)驗(yàn)材料 1、菌種: 2、培養(yǎng)基:瓊脂平板3 、紙片、鑷子及紫外線燈等三、實(shí)驗(yàn)方法1、涂平板。2、打開皿蓋,蓋紙片。3、紫外線照射30分鐘。4、取掉紙片,蓋好皿蓋,37孵育24小時(shí),觀察生長(zhǎng)情況。 皮膚消毒前后的細(xì)菌學(xué)檢查 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理 觀察消毒劑的消毒效果二、實(shí)驗(yàn)材料1、2%碘酒,75%酒精2、瓊脂平板三、實(shí)驗(yàn)方法細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性測(cè)定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理了解藥物敏感性試驗(yàn)方法及實(shí)踐中的重要意義 二、實(shí)驗(yàn)材料1、菌種:金黃色葡萄球菌68小時(shí)肉湯培養(yǎng)物。2、培
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