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1、淺論西青西青果治療感染性創(chuàng)面的有效組分及作用機(jī)制畢業(yè)論文模板    大孔吸附樹(shù)脂對(duì)總鞣質(zhì)的最佳分離純化條件。5.采取柱色譜和半制備色譜等分離策略,以最佳有效組分中分離得到單體化合物,通過(guò)理化和波譜剖析等策略確定了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)。6.首次采取HPLC法,對(duì)最佳有效組分中的沒(méi)食子酸和沒(méi)食子酸乙酯進(jìn)行含量測(cè)定。7首次以抗菌、抗氧化、急毒和推動(dòng)創(chuàng)面愈合4個(gè)方面對(duì)有效組分及沒(méi)食子酸乙酯治摘要:目的本論文選擇藏藥西青果為主要探討對(duì)象,以傳統(tǒng)中醫(yī)藥論述和現(xiàn)代醫(yī)藥論述為基礎(chǔ),采取現(xiàn)代分離淺析技術(shù),利用體外中藥有效組分篩選策略,首次對(duì)西青果有效組分進(jìn)行提取、分離和純化,確

2、定相關(guān)最佳工藝;首次結(jié)合體內(nèi)外藥效學(xué)試驗(yàn),對(duì)篩選出的最佳有效組分進(jìn)行抗菌、抗氧化和急性毒性實(shí)驗(yàn),并首次對(duì)最佳有效組分的作用機(jī)理進(jìn)行深入探討,以而為西青果的開(kāi)發(fā)提供論述和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。探討策略:1.采取現(xiàn)代生藥鑒別技術(shù),對(duì)實(shí)驗(yàn)所用的西青果的原植物形態(tài)、藥材性狀和顯微特點(diǎn)進(jìn)行了探討,以而保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)用藥的準(zhǔn)確和一致性。2.采取平皿挖溝灌藥法,以西青果不同提取組分為探討對(duì)象,選擇金黃色葡萄球菌和肺炎克雷伯桿菌,分別觀察不同組分抑制細(xì)菌生長(zhǎng)情況的影響;根據(jù)血清藥理學(xué)策略檢測(cè)西青果有效組分總鞣質(zhì)含藥血清對(duì)兩種菌的抑制作用。3首次采取改良的干酪素法,考察西青果中主要抗菌有效組分總鞣質(zhì)的含量;通過(guò)單因素考察和L

3、49(3)正交試驗(yàn),對(duì)西青果總鞣質(zhì)的提取工藝進(jìn)行優(yōu)選探討,確定了其最佳提取條件。4.參照中藥新藥指南和藥典規(guī)定,首次采取UV法和HPLC法,分別考察總鞣質(zhì)含量和沒(méi)食子酸含量,通過(guò)靜態(tài)實(shí)驗(yàn)篩選出大孔吸附樹(shù)脂類型,再以動(dòng)態(tài)實(shí)驗(yàn)確定大孔吸附樹(shù)脂對(duì)總鞣質(zhì)的最佳分離純化條件。5.采取柱色譜和半制備色譜等分離策略,以最佳有效組分中分離得到單體化合物,通過(guò)理化和波譜剖析等策略確定了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)。6.首次采取HPLC法,對(duì)最佳有效組分中的沒(méi)食子酸和沒(méi)食子酸乙酯進(jìn)行含量測(cè)定。7首次以抗菌、抗氧化、急毒和推動(dòng)創(chuàng)面愈合4個(gè)方面對(duì)有效組分及沒(méi)食子酸乙酯治療感染性創(chuàng)面及相關(guān)機(jī)制進(jìn)行探討。在抗菌方面,分別考察了有效組分

4、對(duì)兩種菌的MIC、MBC及殺菌曲線,采取掃描和透射電鏡對(duì)不同時(shí)間段對(duì)菌的影響進(jìn)行觀察,以機(jī)制上探討其抑菌作用;在抗氧化方面,采取ABTS法、FRAP法和DPPH法分別考察了有效組分的體外抗氧化作用;在急毒方面,觀察了有效組分對(duì)小鼠的急毒及肝病理切片;在創(chuàng)面愈合實(shí)驗(yàn)中,分別對(duì)有效組分對(duì)大鼠創(chuàng)面的愈合情況,病理切片,VEGF和-FGFmRNA表達(dá)及免疫組化實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了系統(tǒng)的探討。結(jié)果1.通過(guò)對(duì)西青果的原植物形態(tài)、藥材性狀和顯微特點(diǎn)進(jìn)行了探討,確保利用的西青果為使君子科植物訶子Terminapa chebula Retz.的干燥幼果。2.采取平皿挖溝灌藥法和血清藥理學(xué)策略,發(fā)現(xiàn)西青果總鞣質(zhì)提取物及含藥

5、血清對(duì)兩種菌均有顯著的抑制作用,同時(shí)確定總鞣質(zhì)為其有效組分。3未提取純化的西青果中主要抗菌有效組分總鞣質(zhì)的含量?jī)H為9.57%左右;對(duì)西青果總鞣質(zhì)的提取工藝進(jìn)行優(yōu)選探討,其鞣質(zhì)含量達(dá)到30%左右,并確定了其最佳提取條件為:15倍量水溶劑,浸泡20min,提取3次,每次1h。4. UV法中對(duì)總鞣質(zhì)的最佳分離純化條件確定為:選用AB-8樹(shù)脂,樹(shù)脂柱徑高比為1:1.5,洗脫劑為50%乙醇,洗脫速度為1ml/min為最佳洗脫條件;HPLC法中,最佳分離純化條件確定為:洗脫劑為50%乙醇,選用HPD-400樹(shù)脂,上樣體積為40mL。5.以最佳提取純化工藝制備的有效組分中分離得到13個(gè)化合物,鑒定了11個(gè)化

6、合物,其中9個(gè)酚酸類及衍生物,1個(gè)三萜類化合物。并確定了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu),其中訶子次酸三正丁酯為一個(gè)未見(jiàn)報(bào)道的新化合物,其它均為西青果中首次分離得到。6.利用HPLC法測(cè)定最佳有效組分中的沒(méi)食子酸和沒(méi)食子酸乙酯含量分別為0.2%和0.392%。7以抗菌、抗氧化、急毒和推動(dòng)創(chuàng)面愈合4個(gè)方面對(duì)有效組分治療感染性創(chuàng)面及相關(guān)機(jī)制進(jìn)行探討。發(fā)現(xiàn)有效組分及沒(méi)食子酸乙酯對(duì)兩種菌具有顯著的抑制作用,而且抗氧化作用顯著,并且體內(nèi)急毒實(shí)驗(yàn)證明其毒性小,安全性高;對(duì)感染性創(chuàng)面作用及相關(guān)機(jī)制探討中發(fā)現(xiàn)有效組分具有顯著的推動(dòng)創(chuàng)面愈合作用。結(jié)論1西青果有效組分總鞣質(zhì)的最佳提取純化工藝穩(wěn)定、可行,適合進(jìn)一步的中試及放大實(shí)驗(yàn)。

7、2首次對(duì)有效組分中的化學(xué)成分進(jìn)行分離和結(jié)構(gòu)鑒定,并對(duì)單一活性成分進(jìn)行含量測(cè)定,為該藥的開(kāi)發(fā)提供相關(guān)的物質(zhì)基礎(chǔ)3體內(nèi)外藥效實(shí)驗(yàn)證明西青果有效組分具有顯著的抗菌、抗氧化和推動(dòng)創(chuàng)面愈合作用,并且毒性小,安全性高的特點(diǎn)。4首次利用電鏡技術(shù)對(duì)其對(duì)抗菌機(jī)制進(jìn)行探討,并通過(guò)免疫組化等生物技術(shù)策略對(duì)西青果有效組分推動(dòng)創(chuàng)面愈合的作用機(jī)制進(jìn)行深入探討。    關(guān)鍵詞:西青果論文 有效組分論文 抗氧化論文 抗菌論文 創(chuàng)面愈合論文         中文摘要4-6Abstract6-9中英文對(duì)照9-1

8、1目錄11-13引言13-14第一章 西青果的文獻(xiàn)探討綜述14-25第一節(jié) 西青果的本草考證14-15第二節(jié) 西青果及訶子化學(xué)和藥理探討進(jìn)。    展15-251 化學(xué)成分15-222 藥理作用22-243 其他作用24-25第二章 西青果抗菌有效組分的活性篩選及分離純化探討25-81第一節(jié) 西青果的性狀和顯微鑒別25-321 西青果的性狀鑒別25-262 西青果組織顯微鑒別26-293 西青果粉末顯微鑒別29-314 討論31-32第二節(jié) 不同組分及含藥血清抑菌篩選探討32-361 不同組分對(duì)金葡萄球菌和肺炎克雷伯菌初篩探討32-332 含藥血清對(duì)金葡

9、萄球菌和肺炎克雷伯菌的抑制作用33-353 討論35-36第三節(jié) 抗菌有效組分的提取純化工藝探討36-631 紫外檢測(cè)策略測(cè)定西青果中總鞣質(zhì)的含量36-412 西青果中有效組分總鞣質(zhì)的提取工藝探討41-443 西青果中有效組分總鞣質(zhì)的純化工藝探討44-494 西青果有效組分總鞣質(zhì)中沒(méi)食子酸純化工藝探討49-63第四節(jié) 西青果抗菌有效組分中活性成分的分離和結(jié)構(gòu)剖析63-761 實(shí)驗(yàn)儀器與材料632 有效組分中活性成分的提取與分離63-673 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定67-76第五節(jié) 抗菌有效組分中沒(méi)食子酸和沒(méi)食子酸乙酯的含量測(cè)定76-811 實(shí)驗(yàn)儀器及材料762 實(shí)驗(yàn)策略76-803 討論80-81第三章 西青果抗菌有效組分對(duì)感染性創(chuàng)面的愈合作用探討81-118第一節(jié) 有效組分抗菌作用探討81-941 有效組分對(duì)肺炎克雷伯菌的抗菌作用81-892 有效組分對(duì)金葡萄球菌的抗菌作用89-94第二節(jié) 有效組分抗氧化作用探討94-1001 實(shí)驗(yàn)儀器及材料942 實(shí)驗(yàn)策略94-953 實(shí)驗(yàn)結(jié)果95-994 討論99-100第三節(jié) 有效組分的急性毒性實(shí)

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