專題10現(xiàn)代生物技術(shù)訓(xùn)練

1、（2012全國(guó)卷新課標(biāo)版）40現(xiàn)代生物科技專題（15分）根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問題：·（）限制性內(nèi)切酶切割分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有 和 。（）質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoR切割后產(chǎn)生的片段如下：為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoR切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是 。（）按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即（）基因工程中除質(zhì)粒外，和也可作為運(yùn)載體。（）若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是 ?！窘馕觥勘绢}著重考查基因工程方面的知識(shí)。限制性核酸內(nèi)切酶可以將DNA分子切成

2、兩種類型的末端，平末端和黏性末端。兩種不同酶切割之后便于相連，所產(chǎn)生的黏性末端必須相同。coliDNA連接酶可以連接黏性末端，DNA連接酶可以連接兩種末端，反轉(zhuǎn)錄是以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄先合成單鏈DNA，再合成雙鏈DNA，利用技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增?；蚬こ讨锌梢赃x用質(zhì)粒，噬菌體、動(dòng)植物病毒做載體。當(dāng)受體細(xì)胞是細(xì)菌時(shí)，為了增大導(dǎo)入的成功率，常用Ca+處理，得到感受態(tài)細(xì)胞，此時(shí)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的通透性增大，容易吸收重組質(zhì)粒。【答案】（）平末端和粘性末端 （）切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoR切割產(chǎn)生的相同 （）coli （）mRNA 單鏈（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)） （）動(dòng)植物病毒噬菌體的衍生物 （）未處理的大腸

3、桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱（2012福建卷）32現(xiàn)代生物科技專題肺細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng)，會(huì)引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let-7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)驗(yàn)表達(dá)，發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖。請(qǐng)回答：（）進(jìn)行過程時(shí)，需用酶切開載體以插入let-7基因。載體應(yīng)用RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動(dòng)let-7基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱為。（）進(jìn)行過程時(shí)，需用酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞，以利于傳代培養(yǎng)。（）研究發(fā)現(xiàn)，let-7基因能影響RAS的表達(dá)，其影響機(jī)理如圖。據(jù)圖分析，可從細(xì)胞提取進(jìn)行分子雜交，以直接檢測(cè)let-7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌

4、細(xì)胞增殖受到抑制，可能是由于細(xì)胞中（RASmRNA/RAS蛋白）含量減少引起的?！敬鸢浮浚?0分）（1）限制性核酸內(nèi)切酶（或限制） 啟動(dòng)子（2）胰蛋白（3）RNA RAS蛋白【解析】（1）過程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，在該過程中需要用限制酶對(duì)載體進(jìn)行切割以便于目的基因的插入（限制性核酸內(nèi)切酶，簡(jiǎn)稱限制酶，寫其他的不得分）；啟動(dòng)子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶結(jié)合和識(shí)別的位點(diǎn)，RNA聚合酶結(jié)合到該位點(diǎn)，可驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程。（2）過程表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制后可以用胰蛋白酶處理，使之分散成單個(gè)的細(xì)胞，之后分裝到其他培養(yǎng)瓶里面進(jìn)行傳代培養(yǎng)。（3）判斷目的基因是否在受體細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄，可

5、用分子雜交技術(shù)來進(jìn)行，從細(xì)胞中提取mRNA和用放射性同位素或者熒光標(biāo)記的目的基因單鏈DNA片段進(jìn)行雜交。根據(jù)題中信息“肺組織細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)就增強(qiáng)，引發(fā)肺癌”導(dǎo)入let7基因后，肺癌細(xì)胞受到抑制，說明RAS基因表達(dá)減弱，導(dǎo)致細(xì)胞中的RAS蛋白質(zhì)含量減少進(jìn)而導(dǎo)致癌細(xì)胞受抑制?！驹囶}點(diǎn)評(píng)】本題主要考查選修3中有關(guān)基因工程和細(xì)胞工程中的知識(shí)，涉及的知識(shí)點(diǎn)主要有表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因的檢測(cè)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等。試題難度不大。（2012山東卷）35（8分）【生物現(xiàn)代生物科技專題】毛角蛋白型中間絲（KIF）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIF基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡(jiǎn)單流

6、程如圖。（）過程中最常用的運(yùn)載工具是_，所需要的酶是限制酶和_。（）在過程中，用_處理將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞。在培養(yǎng)過程中，將成纖維細(xì)胞置于5%CO2的氣體環(huán)境中，CO2的作用是_。（）在過成中，用_處理以獲取更多的卵（母）細(xì)胞。成熟卵（母）細(xì)胞在核移植前需要進(jìn)行_處理。（）從重組細(xì)胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術(shù)是_。在胚胎移植前，通過_技術(shù)可獲得較多胚胎。答案：（1）質(zhì)粒   DNA 連接酶  （2）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶 ）   維持培養(yǎng)基（液）的pH（3）促性腺激素（或促濾泡素，孕馬血清）&#

7、160;     去核  （4）（早期）胚胎培養(yǎng)     胚胎分割解析：本題綜合考查基因工程的基本工具、動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎工程的基礎(chǔ)知識(shí)，考查識(shí)圖、獲取信息與處理信息的能力。基因工程所用的基本工具有限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體，其中，常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒，也可用噬菌體衍生物和動(dòng)植物病毒。在動(dòng)物細(xì)胞工程中，若將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞，常用胰蛋白酶和膠原蛋白酶來處理；若進(jìn)行核移植，需先對(duì)卵母細(xì)胞培養(yǎng)到M中期并做去核處理；動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)需要無菌無毒條件，一定的營(yíng)養(yǎng)條件，血漿血清和O2、CO2氣體條件，其中的

8、氣體CO2主要用于維持培養(yǎng)液的pH。在動(dòng)物胚胎工程中，常用促性腺激素處理雌性個(gè)體而使其超數(shù)排卵；常采用核移植和早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)獲得重組胚胎，并進(jìn)一步培育出克隆動(dòng)物，常采用胚胎分割并移植技術(shù)獲得更多的優(yōu)良個(gè)體。（2012浙江卷）6天然的玫瑰沒有藍(lán)色花，這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因B，而開藍(lán)色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B。現(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰，下列操作正確的是A提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的DNA，再擴(kuò)增基因BB利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫(kù)中獲取基因BC利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞D將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)

9、胞【答案】A【命題透析】通過特定的實(shí)例考查基因工程的相關(guān)概念及操作要領(lǐng)?！舅悸伏c(diǎn)撥】控制藍(lán)色色素合成的基因B即為我們所需要的目的基因，可通過逆轉(zhuǎn)錄法獲得基因B，再進(jìn)行擴(kuò)增以增加其數(shù)量；基因文庫(kù)中保存的是各基因片段，提取時(shí)無須使用限制性核酸內(nèi)切酶；為使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在且能向下一代遺傳，應(yīng)先在體外使用DNA連接酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，然后再導(dǎo)入大腸桿菌。 (2012·天津卷) 7.（13分）生物分子間的特異性結(jié)合的性質(zhì)廣泛用于生命科學(xué)研究。以下實(shí)例為體外處理“蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合體”獲得DNA片段信息的過程圖。據(jù)圖回答：（1）過程酶作用的部位是 鍵，此過程只發(fā)生在非結(jié)合區(qū)DNA，過

10、程酶作用的部位是 鍵。（2）、兩過程利用了酶的 特性。（3）若將得到的DNA片段用于構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要過程的測(cè)序結(jié)果與 酶的識(shí)別序列進(jìn)行對(duì)比，已確定選用何種酶。（4）如果復(fù)合體中的蛋白質(zhì)為RNA酶聚合，則其識(shí)別、結(jié)合DNA序列位基因的 。（5）以下研究利用了生物分子間的特異性結(jié)合的有 （多選）A.分離得到核糖體，用蛋白酶酶解后提rRNA B.用無水乙醇處理菠菜葉片，提取葉綠體基粒膜上的光合色素C通過分子雜交手段，用熒光物質(zhì)標(biāo)記的目的基因進(jìn)行染色體定位D將抑制成熟基因?qū)敕?，其mRNA與催化成熟酶基因的mRNA互補(bǔ)結(jié)合，終止后者翻譯，延遲果實(shí)成熟。【答案】（1）磷酸二酯鍵，肽鍵（2）專一（3）

11、限制性DNA內(nèi)切酶 （4）啟動(dòng)子（5）ACD【解析】（1）DNA酶作用的部位是DNA的磷酸二酯鍵，蛋白酶作用的部位是肽鍵。（2）過程利用了各種酶催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)的特性，即專一性。（3）DNA要構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要用限制性DNA內(nèi)切酶切割，再與質(zhì)粒重組。（4）RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合在基因的啟動(dòng)子上，才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。（5）蛋白酶能特異性的酶解蛋白質(zhì)，分子雜交手段也是利用各物質(zhì)分子結(jié)合的特異性，抑制成熟基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA與催化成熟酶基因的mRNA堿基互補(bǔ)結(jié)合，也具有特異性，光和色素易溶于有機(jī)溶劑，與酒精并不是特異性的溶解，所以選ABC。（2012四川卷）2.將大腸桿菌的質(zhì)粒連接上人生長(zhǎng)激素的

12、基因后，重新置入大腸桿菌的細(xì)胞內(nèi)，通過發(fā)酵就能大量生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素。下列敘述正確的是A.發(fā)酵產(chǎn)生的生長(zhǎng)激素屬于大腸桿菌的初級(jí)代謝產(chǎn)物B.大腸桿菌獲得的能產(chǎn)生人生長(zhǎng)激素的變異可以遺傳C.大腸桿菌質(zhì)粒標(biāo)記基因中腺嘌呤與尿嘧啶含量相等D.生長(zhǎng)激素基因在轉(zhuǎn)錄時(shí)需要解旋酶和DNA連接酶【答案】B 【解析】A初級(jí)代謝產(chǎn)物是微生物生長(zhǎng)必需的，而人的生長(zhǎng)激素不是大腸桿菌必需的，幫A錯(cuò)。B可遺傳的變異有基因突變、基因重組和染色體變異，大腸桿菌是原核生物，但其變異來源是基因重組。C基因?yàn)橛羞z傳效應(yīng)的DNA片段，不含有U。D轉(zhuǎn)錄時(shí)不需要形成磷酸二酯鍵，不需要DNA連接酶。 （2012江蘇卷）32圖1表示含有目的基因D

13、的DNA片段長(zhǎng)度（bp即堿基對(duì)）和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有Msp 、BamH 、Mbo 、Sma 4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。請(qǐng)回答下列問題：（1）圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由連接。（2）若用限制酶Sma 完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是末端，其產(chǎn)物長(zhǎng)度為。（3）若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被TA堿基對(duì)替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段，用限制酶Sma 完全切割，產(chǎn)物中共有種不同DNA片段。（4）若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶

14、處理后進(jìn)行，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)檢測(cè)，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達(dá)，其最可能的原因是。答案：（1）脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖（2）平537bp、790bp、661bp（3）4（4）BamH I 抗生素B同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D與質(zhì)粒反向連接解析：（1）DNA單鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間通過“脫氧核糖磷酸脫氧核糖”連接。（2）Sma I識(shí)別的序列為GGGCCC，切割后會(huì)產(chǎn)生平末端；圖1所示的DNA分子中含有兩個(gè)Sma I的識(shí)別位點(diǎn)，第一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)在左端534b

15、p序列向右三個(gè)堿基對(duì)的位置；第二個(gè)識(shí)別位點(diǎn)在右端658bp序列向左三個(gè)堿基對(duì)的位置，從這兩個(gè)位點(diǎn)切割后產(chǎn)生的DNA片段長(zhǎng)度分別為534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段長(zhǎng)度分別為537bp、790bp和661bp。（3）在雜合子體內(nèi)含有基因D和基因d，基因D的序列中含有兩個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，經(jīng)過SmaI完全切割會(huì)產(chǎn)生537bp、790bp和661bp三種不同長(zhǎng)度的片段，基因d的序列中含有一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，經(jīng)過切割后會(huì)產(chǎn)生1327bp和661bp兩種長(zhǎng)度的片段，綜上，雜合子中分離到該基因的DNA片段經(jīng)過切割后會(huì)產(chǎn)生4種不同長(zhǎng)度的片段。（4）能夠獲取目的基因并切開質(zhì)粒的限制酶有識(shí)別序列為GG

16、ATCC的BamH I和識(shí)別序列為GATC的Mbo I，若使用Mbo I會(huì)同時(shí)破壞質(zhì)粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamH I來切割目的基因和質(zhì)粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于篩選出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌。因?yàn)槟康幕蚝瓦\(yùn)載體是用同種限制酶切割的，目的基因兩端的末端和質(zhì)粒切割后的兩個(gè)末端都能進(jìn)行互補(bǔ)，可能出現(xiàn)目的基因反向連接在運(yùn)載體上的情況，導(dǎo)致基因D不能正確表達(dá)。（2012海南卷）31.【生物選修3：現(xiàn)代生物科技專題】（15分） 。已知甲種農(nóng)作物因受到乙種昆蟲危害而減產(chǎn)，乙種昆蟲食用某種原核生物分泌的丙種蛋白質(zhì)后死亡。因此，可將丙種蛋白質(zhì)基因轉(zhuǎn)入到甲種農(nóng)作物體

17、內(nèi)，使甲種農(nóng)作物獲得抗乙種昆蟲危害的能力?；卮鹣铝袉栴}：（1）為了獲得丙中蛋白質(zhì)的基因，在已知丙種蛋白質(zhì)氨基酸序列的基礎(chǔ)上，推測(cè)出丙中蛋白質(zhì)的 序列，據(jù)此可利用 方法合成目的基因。獲得丙中蛋白質(zhì)的基因還可用 、 方法。（2）在利用上述丙中蛋白質(zhì)基因和質(zhì)粒載體構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程中，常需使用 酶和 。（3）將含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與甲種農(nóng)作物的愈傷組織共培養(yǎng)，篩選出含有丙種蛋白質(zhì)的愈傷組織，由該愈傷組織培養(yǎng)成的再生植株可抵抗 的危害。（4）若用含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌直接感染甲種農(nóng)作物植株葉片傷口，則該植株的種子 （填“含有”或“不含”）丙種蛋白質(zhì)基因?！敬鸢浮?15分)（1）基因化學(xué)基因文庫(kù)PCR（每

18、空2分，共8分，其他合理答案也給分）（2）限制 DNA連接（每空1分，共2分）中.教.網(wǎng)z.z.s.tep（3）乙種昆蟲 （2分）（4）不含（3分）。【解析】（1）在已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列的情況下，可根據(jù)氨基酸和堿基的對(duì)應(yīng)關(guān)系，推出合成該蛋白質(zhì)的基因序列，然后用DNA合成儀通過化學(xué)方法來合成目的基因。此外也可以從基因文庫(kù)中獲取目的基因，也可通過PCR方法獲取目的基因。（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，需要用限制酶將運(yùn)載體切開，并用DNA連接酶將目的基因連接到運(yùn)載體上，從而構(gòu)建基因表達(dá)載體。（3）愈傷組織中含有丙蛋白，說明丙蛋白的基因得到了表達(dá)，在培養(yǎng)成的植株體內(nèi)也含有丙蛋白，乙昆蟲食用丙蛋白后會(huì)死亡，則該

19、植株可抵抗乙昆蟲的危害。（4）直接用含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌直接感染甲種農(nóng)作物植株葉片傷口，僅僅在該葉片內(nèi)部分細(xì)胞中能合成丙蛋白，該植株的種子和其他的營(yíng)養(yǎng)器官均不含有重組質(zhì)粒，也就不含有丙中蛋白質(zhì)的基因?！驹囶}點(diǎn)評(píng)】本題以農(nóng)作物蟲害防治為背景考查基因工程的操作流程、基因工程所用的工具、獲取目的基因的方法、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因的篩選等內(nèi)容，難度不大。（2012上海卷）(六)回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞和表達(dá)的問題。(10分)55如圖18所示，若用兩種識(shí)別切割序列完全不同的限制酶E和F從基因組DNA上切下目的基因，并將之取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000對(duì)堿基)上相應(yīng)的EF區(qū)域 (0

20、.2kb)，那么所形成的重組質(zhì)粒pZHZ2_。A既能被E也能被F切開 B能被E但不能被F切開C既不能被E也不能被F切開 D能被F但不能被E切開56已知在質(zhì)粒pZHZl中，限制酶G切割位點(diǎn)距限制酶E切割位點(diǎn)08kb，限制酶H切割位點(diǎn)距限制酶F切割位點(diǎn)O5kb。若分別用限制酶G和H酶切兩份重組質(zhì)粒pZHZ2樣 品，據(jù)表4所列酶切結(jié)果判斷目的基因的大小為 kb；并將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點(diǎn)標(biāo)注在圖19中。 57若想在山羊的乳汁中收獲上述目的基因的表達(dá)產(chǎn)物，則需將重組質(zhì)粒pZHZ2導(dǎo)入至山羊的_細(xì)胞中。若pZHZ2進(jìn)入細(xì)胞后插入在一條染色體DNA上，那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子山羊的方式是_。58上

21、述目的基因模板鏈中的。TGA序列對(duì)應(yīng)一個(gè)密碼子，翻譯時(shí)識(shí)別該密碼子的tRNA上相應(yīng)的堿基序列是_。一般而言，一個(gè)核糖體可同時(shí)容納_分子的tRNA。59下列四幅圖中能正確反映目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物內(nèi)部結(jié)構(gòu)的是_。TSS：轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)，TTS：轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)，STC：起始密碼子，SPC：終止密碼子【答案】55.A56.1.2 見右圖57.受精卵 轉(zhuǎn)基因山羊間相互交配58.UGA 2（或3）59.B【解析】55.用限制酶從基因組DNA上切下目的基因，并取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000對(duì)堿基)上相應(yīng)的EF區(qū)域 (0.2kb)，用DNA連接酶連接后形成重組質(zhì)粒，則在重組質(zhì)粒中仍然含有限制酶E和限

22、制酶F的切割位點(diǎn)，形成的重組質(zhì)粒pZHZ2既能被E也能被F切開，故本題選A。56. 根據(jù)題中信息，原來質(zhì)粒長(zhǎng)度為3.7kb切去EF之間的還有3.5kb，插入目的基因后構(gòu)成重組質(zhì)粒，重組質(zhì)粒長(zhǎng)度為1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，可推導(dǎo)出目的基因長(zhǎng)度為1.2kb。重組質(zhì)粒中G的切割位點(diǎn)距E的切割位點(diǎn)0.8kb，單獨(dú)用限制酶G切割后產(chǎn)生1.6kb和3.1kb的兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中除了圖中標(biāo)示出來的G酶識(shí)別位點(diǎn)外，還有一個(gè)G酶識(shí)別位點(diǎn)；H的酶切位點(diǎn)距F0.5kb，用H單獨(dú)酶切產(chǎn)生1.2kb和3.5kb兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中含有另外一個(gè)H的酶切位點(diǎn)，根據(jù)題中信息提示“將目的基因內(nèi)部

23、的限制酶G和H的識(shí)別位點(diǎn)標(biāo)注在圖19中”，可確定在EF之間分別含有G和H的一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)?？蓴喽℅的識(shí)別位點(diǎn)，在舉例E點(diǎn)右側(cè)0.8kb處，H的識(shí)別位點(diǎn)在距F左側(cè)0.7kb處。57.將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞中，通常以受精卵作為受體細(xì)胞，當(dāng)受精卵發(fā)育成山羊后，在雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。重組質(zhì)粒插入在一條染色體DNA上，可通過雌雄轉(zhuǎn)基因山羊雜交的方法來獲取轉(zhuǎn)基因純合子山羊。58.目的基因的模板連中堿基為TGA，則mRNA中對(duì)應(yīng)的密碼子為ACU，tRNA中的反密碼子為UGA，在翻譯的過程中，一個(gè)核糖體一般可以容納兩個(gè)tRNA攜帶氨基酸進(jìn)入核糖體與mRNA進(jìn)行互補(bǔ)配對(duì)，使得兩個(gè)氨基酸之

24、間脫水縮合形成肽鍵，最多不會(huì)超過3個(gè)。59.基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為mRNA，作為基因開始轉(zhuǎn)錄形成的在mRNA上的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)和終止位點(diǎn)應(yīng)在mRNA兩端；作為起始密碼子應(yīng)在轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)之后，終止密碼子應(yīng)在轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)之前，這樣才能保證翻譯的正常開始和終止?！驹囶}點(diǎn)評(píng)】本題綜合考查基因工程的相關(guān)內(nèi)容，涉及到基因工程常用工具酶的切割位點(diǎn)的確定、根據(jù)限制酶切割結(jié)果推斷目的基因的長(zhǎng)度、基因工程中常用的受體細(xì)胞、密碼子反密碼子的推導(dǎo)、起始密碼子和終止密碼子及轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)和終止位點(diǎn)的位置等問題，綜合性強(qiáng)，有一定難度。（但是本題有一個(gè)值得商榷探討的地方，59題中轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)和轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)是位于DNA上的特殊序列，而題

25、目中是指mRNA。明顯有問題。（2012廣東卷）2.培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是A.組織培養(yǎng) B.細(xì)胞雜交 C.顯微注射 D.核移植【答案】 【解析】草莓植株分生區(qū)的細(xì)胞含病毒的量比較少，可以利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)出脫毒幼苗。（2012浙江卷）31（12分）請(qǐng)根據(jù)以下提供的實(shí)驗(yàn)材料，完善生物制劑W對(duì)動(dòng)物不同細(xì)胞的分裂具有促進(jìn)作用的實(shí)驗(yàn)思路，并預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)材料：培養(yǎng)液、正常體細(xì)胞、癌細(xì)胞、W、胰蛋白酶。（要求與說明：答題時(shí)不考慮加入W后的體積變化等誤差。提供的細(xì)胞均具有分裂能力，只進(jìn)行原代培養(yǎng)且培養(yǎng)條件適宜）（1）實(shí)驗(yàn)思路： 取培養(yǎng)瓶若干個(gè)，分組如下：。每組設(shè)置若干個(gè)重復(fù)樣品。 各組

26、樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時(shí)間后，各取其中的幾個(gè)樣品，加入，搖勻，在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板分別計(jì)數(shù)并記錄細(xì)胞數(shù)。 重復(fù)若干次。 。（2）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（用坐標(biāo)系和細(xì)胞數(shù)變化曲線示意圖表示）：【答案】（1）A組：培養(yǎng)液中加入體細(xì)胞。B組：培養(yǎng)液中加入體細(xì)胞，加入W。C組：培養(yǎng)液中加入癌細(xì)胞。D組：培養(yǎng)液中加入癌細(xì)胞，加入W。胰蛋白酶統(tǒng)計(jì)并分析所得數(shù)據(jù)。（2）【命題透析】本題以實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的形式，綜合考查了必修和選修的相關(guān)內(nèi)容。【思路點(diǎn)撥】（1）本實(shí)驗(yàn)的目的是：完善生物制劑W對(duì)動(dòng)物不同細(xì)胞的分裂具有促進(jìn)作用的實(shí)驗(yàn)思路，有兩個(gè)自變量：是否加入生物制劑W、動(dòng)物細(xì)胞的種類。（2）設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)遵循單一變量及對(duì)照實(shí)

27、驗(yàn)原則，進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)可減少誤差并使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為準(zhǔn)確可靠，故分組時(shí)應(yīng)分4組分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。（3）胰蛋白酶用來分解組織細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，使組織細(xì)胞相互分散開來，有利于細(xì)胞的分裂。（4）繪制曲線時(shí)，應(yīng)注意橫縱坐標(biāo)及各組合的最終高度。（2012江蘇卷）22下列事實(shí)能體現(xiàn)細(xì)胞全能性的是A棉花根尖細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)形成幼苗B單細(xì)胞的DNA在體外大量擴(kuò)增C動(dòng)物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體D小鼠體細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)培育成小鼠答案： AD解析：證明細(xì)胞全能性的實(shí)例必須滿足的三個(gè)條件：起點(diǎn)：高度分化的細(xì)胞；終點(diǎn)：形成完整的個(gè)體；外部條件：離體、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等。B為分子克隆，C為細(xì)胞克隆。（2012江蘇卷）31（1）2,4D常用于秈稻愈傷組織

28、的誘導(dǎo)， 對(duì)形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進(jìn)愈傷組織再分化，在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需（填“升高”、“保持”或“降低”）2,4D的濃度。（2）當(dāng)秈稻愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加，以促進(jìn)幼苗形成。（3）研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是（填下列序號(hào)）。綠色芽點(diǎn)細(xì)胞排列松散剛?cè)诤系亩i稻和稗草雜交細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離胚狀體細(xì)胞中有葉綠體分化的愈傷組織的各細(xì)胞的形態(tài)大小一致（4）經(jīng)組織培養(yǎng)篩選獲得的秈稻葉綠素突變體，其葉綠素a與葉綠素b的比值顯著大于對(duì)照，葉綠素總量不變。某同學(xué)用（填序號(hào)：綠色紅色藍(lán)紫色黃色）光照射突變體和對(duì)照葉片，檢測(cè)到

29、兩者光合放氧差異不大。若取等量色素提取液進(jìn)行層析，會(huì)發(fā)現(xiàn)突變體第條色素帶（自上而下）窄于對(duì)照組。（5）胚乳（3n）由一個(gè)精子與兩個(gè)極核受精發(fā)育而成。若用秈稻種子的胚乳誘導(dǎo)愈傷組織，培育三倍體，需適時(shí)晚年除胚，以免胚的存在影響愈傷組織細(xì)胞的，還可避免再生苗中混有。答案：31（1）降低（2）適量的生長(zhǎng)素（3）（4）4（5）增殖與分化二倍體幼苗解析：2，4-D常用于植物愈傷組織的誘導(dǎo)和生長(zhǎng)，但它趨向于抑制植物形態(tài)的發(fā)生，當(dāng)愈傷組織再分化形成新的植株個(gè)體時(shí)，要減小2，4-D抑制植物形太發(fā)生的作用。所以在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需降低2，4-D的濃度。根據(jù)題意，此時(shí)已經(jīng)出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但不能繼續(xù)出芽。由于生長(zhǎng)素有促進(jìn)再分化過程中芽的生長(zhǎng)，所以在培養(yǎng)基中添加適量的生長(zhǎng)素，以促進(jìn)幼苗形成。綠色芽點(diǎn)細(xì)胞為分生區(qū)細(xì)胞，排列緊密；剛?cè)诤系碾s種細(xì)胞沒有細(xì)胞壁，不可能發(fā)生質(zhì)壁分離；愈傷組織細(xì)胞排列疏松無規(guī)則；再分化產(chǎn)生胚狀體，需要光照刺激，會(huì)促進(jìn)葉綠體的形成，可在光學(xué)顯微鏡下觀察到葉綠體。色素具有不同的吸收光譜，葉綠素a、b主要吸收的是紅光和藍(lán)紫光。而對(duì)綠光和黃光吸收很少。在本題