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血液非蛋白氮的測定血液非蛋白氮的測定內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學生物化學與分子生物學實驗教學中心制作人:王瑞剛實驗原理實驗試劑實驗步驟實驗原理 血液中除蛋白質(zhì)外的含氮物質(zhì)稱為非蛋白氮。主要包括尿素、尿酸、肌酸、肌酐、谷胱甘肽、氨基酸、核苷酸等蛋白質(zhì)和核酸的代謝物及代謝產(chǎn)物。 非蛋白氮物質(zhì)不被蛋白質(zhì)沉淀劑所沉淀。因此,以蛋白沉淀劑去除蛋白質(zhì),制得的無蛋白濾液即含有非蛋白氮物質(zhì)。鎢酸是主要的蛋白質(zhì)沉淀劑。將無蛋白濾液內(nèi)的非蛋白氮物質(zhì),經(jīng)強酸消化后轉(zhuǎn)變?yōu)榱蛩徜@,加入奈氏試劑呈現(xiàn)棕黃色,其含量與經(jīng)同樣加入奈氏試劑之標準銨鹽溶液比色測定之。實驗試劑1消化液2標準硫酸銨3奈氏試劑4 30%雙氧水實驗步驟1以草酸鉀抗凝全血,以鎢酸法制備1:10無蛋白濾液。2取3支硬質(zhì)大試管按表操作 混勻后,在波長420nm處進行比色,以空白管調(diào)零,讀 取各管光密度。3計算測定管光密度 標準管光密度 0.015 100 0.05 = 血液非蛋白氮mg%試管試劑空白管標準管測定管血濾液(ml)標準應(yīng)用液(ml)消化液(ml)0.10.50.10.50.1將測定管加熱消化,待管中充滿白煙,官底液體由黑轉(zhuǎn)為透明為止(可加雙氧水1滴以加速消化) 蒸餾水(ml)奈
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