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文檔簡介

1、實驗八 細胞培養(yǎng)液滲透壓之測量目的: 滲透壓對細胞的形態(tài)及生理狀況有決定性的影響,本實驗利用Advanced 3D-II凝固點下降法滲透壓計來測量溶液之滲透壓,探討溶液滲透壓對細胞的影響,並在顯微鏡下觀察不同滲透壓之血球形狀。預(yù)報: 使用急速降溫冷凍法測定凝固點溫度。1莫耳粒子可使1升液體之凝固點下降 1.86 ,即定義為1 Osm( 1000 mOsm )步驟: 打開電源開關(guān)(在後面電源座右邊),“ Bath ”紅燈亮“ 8888 ”。 溫機約 6090分鐘,待“ Bath ”紅燈明滅數(shù)分交替表示已達 -7,即可開始使用。 校正:請先用100, 900 mOsm標準查驗3次,將數(shù)值登記於流水

2、記錄簿上(數(shù)值為100 ± 2 , 900 ± 10 即為正常)若三次皆超出100 ± 5,900 ± 30請電請廠商來調(diào),切勿自行謂整。 定量 0.250.3 之 sample ,放入 tube ,按綠色鈕head 會自動降下。3 分鐘內(nèi)讀數(shù)達 3000會有強 buzz 聲,之後約 30秒 head 會自動升起,此時讀數(shù)即為mOsmkg 值。 用畢洗淨 Tip ,置入空 tube 並按下綠色按鈕使 head 降下後再關(guān)閉電源。結(jié)果:本實驗配置0.3、0.9、2.7NaCl用儀器去測量實際滲透壓,並與計算而得的理論滲透壓去做比較,但由於儀器出狀況,無法測

3、得實際滲透壓,故數(shù)值將等下一次實驗測得後再補繳給老師。本次實驗除了測量實際滲透壓外,還觀察了在不同滲透壓下(0.3、0.9、2.7NaCl)紅血球的型態(tài),並將其型態(tài)拍照下來,其照片如下所列。我們可發(fā)現(xiàn)紅血球細胞在0.9NaCl下為正常細胞形態(tài),在2.7NaCl細胞有皺縮情況發(fā)生,而在0.3NaCl下戲胞有漲大的情形,故0.9NaCl較接近紅血球的滲透壓Fig1、置於2.7NaCl的紅血球型態(tài),其細胞膜有皺縮情形Fig2、置於2.7NaCl的紅血球型態(tài),其細胞膜有皺縮情形Fig1、置於2.7NaCl的紅血球型態(tài),其細胞膜有皺縮情形Fig2、置於2.7NaCl的紅血球型態(tài),其細胞膜有皺縮情形Fig3、置於0.9NaCl的紅血球型態(tài),細胞皺縮情形較不顯著,為正常細胞形態(tài)Fig4、置於0.9NaCl的紅血球型態(tài),細胞皺縮情形較不顯著,為正常細胞形態(tài)Fig5、置於0.9NaCl的紅血球型態(tài),細胞皺縮情形較不顯著,為正常細胞形態(tài)Fig6、置於0.3NaCl的紅血球型態(tài),細胞有漲大的情況發(fā)生,未破裂Fig7、置於0.3NaCl的

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