環(huán)境檢測(cè)試驗(yàn)--農(nóng)藥殘留

1、實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理在一定條件下,有機(jī)磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥對(duì)膽堿脂酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān).正常情況下,酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物(乙酰膽堿)水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng).產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在412nm處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率。通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否含有高劑量有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。抑制率抑制率 有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制酶能力的強(qiáng)弱。實(shí)驗(yàn)儀器 農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀 實(shí)驗(yàn)藥品 緩沖溶液（農(nóng)殘?jiān)噭┮唬?無(wú)水磷酸氫二鉀與磷酸二氫鉀 PH=8的混合溶液 乙酰膽堿酯酶（農(nóng)殘?jiān)噭┒?顯色劑（農(nóng)殘?jiān)噭┤?二硫代二硝基苯甲酸 底物（農(nóng)殘?jiān)噭┧模?

2、硫代乙酰膽堿 操作步驟操作步驟 1 參數(shù)設(shè)置參數(shù)設(shè)置 2 校準(zhǔn)測(cè)量校準(zhǔn)測(cè)量 選擇校準(zhǔn)菜單后，取選擇校準(zhǔn)菜單后，取2.5ml試劑一移入比色瓶后，各試劑一移入比色瓶后，各 取取100ul試劑二和試劑三倒入比色瓶中，蓋緊搖勻試劑二和試劑三倒入比色瓶中，蓋緊搖勻, 放入比色放入比色槽中放置槽中放置10min，按校準(zhǔn)鍵，儀器顯示正在預(yù)熱，儀器發(fā)出，按校準(zhǔn)鍵，儀器顯示正在預(yù)熱，儀器發(fā)出嘀嘀嘀三聲后，表示校準(zhǔn)完畢。嘀嘀嘀三聲后，表示校準(zhǔn)完畢。 3 空白測(cè)量 接上步，按空白測(cè)量鍵，儀器顯示正在預(yù)熱，發(fā)出嘀嘀嘀三聲后，提示加入試劑四，取出比色瓶加入100ul試劑四，蓋好搖勻，放入比色瓶中，按回車?yán)^續(xù)，儀器顯示正

3、在測(cè)量，到計(jì)三分鐘，結(jié)束后同樣發(fā)出嘀嘀嘀三聲。并顯示吸光度值A(chǔ)1，A2 4 樣品測(cè)量 4.1 樣品制備 選取有代表性的果蔬樣品，擦去表面泥土，葉菜用葉菜取樣器取葉片部分，果實(shí)蔬菜可切割。然后切成1cm左右的見(jiàn)方碎片，稱取2.0g樣品。 4.2 樣品中農(nóng)藥的提取樣品中農(nóng)藥的提取 將將6個(gè)樣品提取瓶放在支架上，各放入個(gè)樣品提取瓶放在支架上，各放入2.0g樣品，各加樣品，各加10.ml 試劑一，用攪拌針使樣品全部浸入液體中，放入提取儀中萃取試劑一，用攪拌針使樣品全部浸入液體中，放入提取儀中萃取6分鐘。之后放回支架，取分鐘。之后放回支架，取2.5ml注入比色瓶中注入比色瓶中 4.3 樣品測(cè)量樣品測(cè)量

4、選擇測(cè)量鍵，各加選擇測(cè)量鍵，各加100ul試劑二和試劑三混合搖勻。按確認(rèn)試劑二和試劑三混合搖勻。按確認(rèn)鍵進(jìn)行測(cè)量，預(yù)熱結(jié)束后。儀器顯示正在培養(yǎng)。鍵進(jìn)行測(cè)量，預(yù)熱結(jié)束后。儀器顯示正在培養(yǎng)。10分鐘后結(jié)束，分鐘后結(jié)束，發(fā)出嘀嘀嘀三聲。提示加入試劑四。加入后。按確認(rèn)鍵發(fā)出嘀嘀嘀三聲。提示加入試劑四。加入后。按確認(rèn)鍵三分鐘后，屏幕顯示結(jié)果。三分鐘后，屏幕顯示結(jié)果。 1 抑制率公式 E（%）=(A2-A1)-(A4-A3) /(A2-A1) 100% E :抑制率 A1 空白測(cè)量3分鐘前的吸光度值 A2空白測(cè)量3分鐘后的吸光度值 A3 樣品測(cè)量3分鐘前的吸光度值 A4 樣品測(cè)量3分鐘后的吸光度值 2 結(jié)果判定： 當(dāng)被測(cè)樣品的抑制率在50%以上時(shí)，表示被測(cè)樣品中有高劑量有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，樣品為陽(yáng)性結(jié)果，陽(yáng)性結(jié)果的樣品需要檢測(cè)兩次以上。對(duì)陽(yáng)性結(jié)果的樣品，可用其他方法進(jìn)一步確定農(nóng)藥品種的含量，并報(bào)有關(guān)部門處理。3 試劑二用量 若A2-A1小于0.300，此空白無(wú)效，需要重新檢測(cè)，若多次測(cè)定后，仍小于0.300，則需要增加試劑二的用量，直到大于為止。 4 吸光度確認(rèn) 在樣品測(cè)量結(jié)束后。若A4大于1.80，則此樣品檢測(cè)無(wú)效，需重新檢測(cè)，多次測(cè)量后仍大于1.80，為果蔬色素干擾，需要對(duì)被測(cè)樣品進(jìn)行整株提取，不要剪碎樣品5注意提示加入試劑四時(shí)應(yīng)該在嘀嘀嘀三聲后加入(空白和樣品).且做