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文檔簡介
1、精選課件精選課件原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)( (補(bǔ)充內(nèi)容)補(bǔ)充內(nèi)容)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼區(qū)下游 與與RNARNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)聚合酶結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子啟動(dòng)子終止子終止子不編碼蛋白質(zhì)。不編碼蛋白質(zhì)。:編碼蛋白質(zhì):編碼蛋白質(zhì) , ,連續(xù)不間斷連續(xù)不間斷編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)原核原核細(xì)胞細(xì)胞的的 基因基因結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)調(diào)控遺傳信息表達(dá)調(diào)控遺傳信息表達(dá), ,上上 游有啟動(dòng)子,下游有終止子游有啟動(dòng)子,下游有終止子精選課件真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)(補(bǔ)充內(nèi)容)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)(補(bǔ)充內(nèi)容)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與與RNARNA
2、聚合酶聚合酶結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)內(nèi)含子內(nèi)含子 外顯子外顯子 啟動(dòng)子啟動(dòng)子終止子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼區(qū)下游 真核真核細(xì)胞細(xì)胞的的 基因基因結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)外顯子:能編碼蛋白質(zhì)的序列外顯子:能編碼蛋白質(zhì)的序列內(nèi)含子:不能編碼蛋白質(zhì)的序列內(nèi)含子:不能編碼蛋白質(zhì)的序列:有調(diào)控作用有調(diào)控作用, ,上游有啟動(dòng)子,下上游有啟動(dòng)子,下游有終止子游有終止子非編碼序列:非編碼序列: 包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子精選課件原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)比較原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)比較連續(xù)連續(xù)不連續(xù)不連續(xù)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼非編碼精選課件精選課件一、目的基因的獲取一、目
3、的基因的獲取1 1、目的基因主要是指、目的基因主要是指_編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因請舉出三個(gè)以上的例子請舉出三個(gè)以上的例子2 2、獲取目的基因的常用方法、獲取目的基因的常用方法(1 1)從基因文庫中獲取)從基因文庫中獲?。? 2)利用)利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增(3 3)人工合成)人工合成精選課件(1)(1)從基因文庫中獲取目的基因從基因文庫中獲取目的基因什么是基因文庫?基因組文庫?部分什么是基因文庫?基因組文庫?部分基因文庫?基因文庫?如何構(gòu)建基因文庫?如何構(gòu)建基因文庫?怎樣從基因文庫中得到我們所需的目怎樣從基因文庫中得到我們所需的目的基因?的基因?精選課件概念:概念:基
4、因文庫基因文庫 基因組文庫基因組文庫部分基因文庫部分基因文庫(如(如cDNAcDNA文庫)文庫) 將含有某種生物不同基因的許多將含有某種生物不同基因的許多DNADNA片段片段, ,導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存, ,各個(gè)受體各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因菌分別含有這種生物的不同的基因, ,稱為基稱為基因文庫因文庫(gene library)(gene library)精選課件基因組文庫基因組文庫: : 基因文庫中包含了一種生物所有基因文庫中包含了一種生物所有的基因的基因, ,這種基因文庫叫做基因組文這種基因文庫叫做基因組文庫庫. .部分基因文庫部分基因文庫: : 基因文庫
5、中包含了一種生物的一基因文庫中包含了一種生物的一部分基因部分基因, ,這種基因文庫叫做部分基這種基因文庫叫做部分基因文庫因文庫. .精選課件提取某種生物的全部提取某種生物的全部DNADNA用適當(dāng)?shù)南拗泼盖杏眠m當(dāng)?shù)南拗泼盖幸欢ù笮〉囊欢ù笮〉腄NADNA片段片段將將DNADNA片段與載體連接片段與載體連接導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存基因組文庫基因組文庫基因文庫的構(gòu)建方法之基因文庫的構(gòu)建方法之(1 1)直接分離法)直接分離法精選課件某種生物的單鏈某種生物的單鏈mRNAmRNA單鏈互補(bǔ)單鏈互補(bǔ)DNADNA雙鏈雙鏈cDNAcDNA片段片段導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存與載體連接與載體連接cDNA
6、cDNA文庫文庫反(逆)轉(zhuǎn)錄酶反(逆)轉(zhuǎn)錄酶DNADNA聚合酶聚合酶反轉(zhuǎn)錄法:反轉(zhuǎn)錄法:cDNAcDNA的合成流程圖解的合成流程圖解基因文庫的構(gòu)建方法之基因文庫的構(gòu)建方法之精選課件(3 3)如何從基因文庫中得到所需要的基因?)如何從基因文庫中得到所需要的基因?依據(jù):目的基因的有關(guān)信息。依據(jù):目的基因的有關(guān)信息。如:如:基因的核苷酸序列基因的核苷酸序列 基因在染色體上的位置基因在染色體上的位置 基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNAmRNA 基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)精選課件(2 2)利用)利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 是一項(xiàng)生物是一
7、項(xiàng)生物體外復(fù)制體外復(fù)制特定特定DNADNA片段片段的核酸合成的核酸合成技術(shù)技術(shù)。通過此技術(shù),可獲。通過此技術(shù),可獲取大量的目的基因。取大量的目的基因。精選課件四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸(dNTP)(dNTP) 一對引物:一對引物:熱穩(wěn)定熱穩(wěn)定DNADNA聚合酶聚合酶(Taq(Taq酶)酶)模板模板DNA( DNA( 需含有目的基因需含有目的基因 ) ) 兩段寡核苷酸序列:與目的基因兩段寡核苷酸序列:與目的基因的起始段互補(bǔ)的起始段互補(bǔ)一段已知目的基因的核苷酸序列,以便一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物根據(jù)這一序列合成引物精選課件過程:過程:高溫變性(高溫變性(解旋為單鏈解旋
8、為單鏈)低溫退火(低溫退火(引物與單鏈互補(bǔ)結(jié)合引物與單鏈互補(bǔ)結(jié)合)適溫延伸(適溫延伸(在在TaqTaq酶的作用下合成酶的作用下合成 與模板互補(bǔ)的與模板互補(bǔ)的DNADNA雙鏈雙鏈)重復(fù)循環(huán)重復(fù)循環(huán)精選課件2 2、具體過程、具體過程精選課件精選課件PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增與技術(shù)擴(kuò)增與DNADNA復(fù)制的比較復(fù)制的比較堿基互補(bǔ)配對堿基互補(bǔ)配對四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸模板、能量、酶模板、能量、酶DNADNA在高溫下變性解旋在高溫下變性解旋解旋酶催化解旋酶催化體外復(fù)制體外復(fù)制細(xì)胞核內(nèi)細(xì)胞核內(nèi)熱穩(wěn)定的熱穩(wěn)定的DNADNA聚合酶聚合酶細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞內(nèi)的DNADNA聚合酶聚合酶大量的大量的DNADNA片段片段形成
9、整個(gè)形成整個(gè)DNADNA分子分子精選課件v(3) 人工合成人工合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA DNA 蛋白質(zhì)的氨基酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNAmRNA的核苷酸序列的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測推測推測推測目的基因目的基因化學(xué)合成化學(xué)合成精選課件1 1、在已知序列信息的情況下,獲取目的基因的最、在已知序列信息的情況下,獲取目的基因的最方便方法是方便方法是A A、化學(xué)合成法、化學(xué)合成法 B B、基因組文庫法、基因組文庫法C C、cDNAcDNA文庫法文庫法 D D、聚合酶鏈反應(yīng)、聚合酶鏈反應(yīng)2 2、下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是、下
10、列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是從基因文庫中獲取目的基因從基因文庫中獲取目的基因 利用利用PCRPCR技技術(shù)擴(kuò)增目的基因術(shù)擴(kuò)增目的基因 反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法 通過通過DNADNA合成儀合成儀利用化學(xué)方法人工合成利用化學(xué)方法人工合成A A B B C C D DA AD D精選課件二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心核心(1 1)用一定的)用一定的_切切割質(zhì)粒,使其出現(xiàn)一個(gè)切口,割質(zhì)粒,使其出現(xiàn)一個(gè)切口,露出露出_。(2 2)用)用_切斷目切斷目 的基因,使其產(chǎn)生的基因,使其產(chǎn)生_ _ _。(3 3)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的_處,再加入適量處,再
11、加入適量_,形成了一個(gè)重組,形成了一個(gè)重組 DNADNA分子(重組質(zhì)粒)分子(重組質(zhì)粒)限制酶限制酶黏性末端黏性末端同一種限制酶同一種限制酶的黏性末端的黏性末端切口切口DNADNA連接酶連接酶相同相同1.1.過程過程: :精選課件質(zhì)粒質(zhì)粒目的基因目的基因限制酶處理限制酶處理一個(gè)切口一個(gè)切口兩個(gè)黏性末端兩個(gè)黏性末端兩個(gè)切口兩個(gè)切口獲得目的基因獲得目的基因DNADNA連接酶連接酶表表達(dá)達(dá)載載體體同種同種1.1.過程過程: :精選課件2、基因表達(dá)載體的作用、基因表達(dá)載體的作用a、使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代、使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代b、同時(shí)使目的基因能表達(dá)和發(fā)揮作用、
12、同時(shí)使目的基因能表達(dá)和發(fā)揮作用思考:思考:作為基因工程表達(dá)載體,只需含有目的基因就可作為基因工程表達(dá)載體,只需含有目的基因就可以完成任務(wù)嗎?為什么?以完成任務(wù)嗎?為什么?精選課件不可以。因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到表達(dá)并發(fā)揮作用,不可以。因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到表達(dá)并發(fā)揮作用,還需要有其他控制元件,如啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。還需要有其他控制元件,如啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。必須構(gòu)建上述元件的主要理由是:必須構(gòu)建上述元件的主要理由是:(1) 生物之間進(jìn)行基因交流,只有使用生物之間進(jìn)行基因交流,只有使用受體生物自身基因受體生物自身基因的啟動(dòng)子才能比較有利于基因的表達(dá);的啟動(dòng)子才能比較有利
13、于基因的表達(dá);(2) 通過通過cDNA文庫獲得的目的基因沒有啟動(dòng)子,只將編碼文庫獲得的目的基因沒有啟動(dòng)子,只將編碼序列導(dǎo)入受體生物中無法轉(zhuǎn)錄;序列導(dǎo)入受體生物中無法轉(zhuǎn)錄;(3) 目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記;目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記;(4) 為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平,往往還要增加一些其為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平,往往還要增加一些其他調(diào)控元件,如增強(qiáng)子等;他調(diào)控元件,如增強(qiáng)子等;(5) 有時(shí)需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么有時(shí)需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么部位,往往要加上可以標(biāo)識存在部位的基因(或做成目的基部位,往往要加上可以標(biāo)識存在部位的基因
14、(或做成目的基因與標(biāo)識基因的融合基因),如綠色熒光蛋白基因等。因與標(biāo)識基因的融合基因),如綠色熒光蛋白基因等。精選課件3.3.基因表達(dá)載體的組成:基因表達(dá)載體的組成:它們有什么作用?它們有什么作用?a、目的基因、目的基因b、啟動(dòng)子、啟動(dòng)子c、終止子、終止子d、標(biāo)記基因、標(biāo)記基因位于基因的首端位于基因的首端,是是mRNA結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)位于基因的末端位于基因的末端,終終止轉(zhuǎn)錄止轉(zhuǎn)錄檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞精選課件1、(多選)一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建應(yīng)包括、(多選)一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建應(yīng)包括A目的基因目的基因B啟動(dòng)子啟動(dòng)子C終止子終止子D標(biāo)記基因標(biāo)記基因ABCD2、
15、下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正確的是、下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正確的是A啟動(dòng)子是與啟動(dòng)子是與RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,是起聚合酶識別和結(jié)合的部位,是起始密碼始密碼B啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的DNA短片段,對短片段,對mRNA的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用C標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否有目的基因標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否有目的基因從而便于篩選從而便于篩選D基因表達(dá)載體的構(gòu)建視受體細(xì)胞及導(dǎo)入方式不同基因表達(dá)載體的構(gòu)建視受體細(xì)胞及導(dǎo)入方式不同而有所差別而有所差別A3、目前轉(zhuǎn)基因工程可以、目前轉(zhuǎn)基因工程可以A. 打破地理隔離但不能突破生殖隔離打破地理隔
16、離但不能突破生殖隔離B. 打破生殖隔離但不能突破地理隔離打破生殖隔離但不能突破地理隔離C.完全突破地理隔離和生殖隔離完全突破地理隔離和生殖隔離D.部分突破地理隔離和生殖隔離部分突破地理隔離和生殖隔離C精選課件三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞精選課件1、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞(1)農(nóng)桿菌)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化法特點(diǎn)特點(diǎn):能感染能感染雙子葉植物雙子葉植物和和祼子植物祼子植物,對對單子葉植物無感染能力單子葉植物無感染能力Ti質(zhì)粒質(zhì)粒的的TDNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到其染色體上胞并整合到其染色體上轉(zhuǎn)化過程轉(zhuǎn)化過程:Ti質(zhì)粒質(zhì)粒目的基因目的基因構(gòu)建構(gòu)
17、建表表達(dá)達(dá)載載體體導(dǎo)入導(dǎo)入植植物物細(xì)細(xì)胞胞插入插入植物細(xì)胞植物細(xì)胞染色染色DNA表達(dá)表達(dá)新新性性狀狀轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)入農(nóng)農(nóng)桿桿菌菌精選課件(2)基因槍法)基因槍法 基因槍法又稱微彈轟擊法,是利用壓縮氣體產(chǎn)生的動(dòng)力,基因槍法又稱微彈轟擊法,是利用壓縮氣體產(chǎn)生的動(dòng)力,將包裹在金屬顆粒表面的表達(dá)載體將包裹在金屬顆粒表面的表達(dá)載體DNA打入受體細(xì)胞中,使目打入受體細(xì)胞中,使目的基因與其整合并表達(dá)的方法。的基因與其整合并表達(dá)的方法。精選課件(3)花粉通道法)花粉通道法 植物花粉在柱頭上萌發(fā)后,花粉管要穿過花柱直通胚囊。植物花粉在柱頭上萌發(fā)后,花粉管要穿過花柱直通胚囊?;ǚ酃芡ǖ婪ň褪窃谥参锸芊酆?,花粉形成的花粉管
18、還未愈合花粉管通道法就是在植物受粉后,花粉形成的花粉管還未愈合前,剪去柱頭,然后,滴加前,剪去柱頭,然后,滴加DNA(含目的基因),使目的基(含目的基因),使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞。因借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞。精選課件2、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞方法方法:顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)操作程序操作程序:提純含目的基提純含目的基因表達(dá)載體因表達(dá)載體取受精卵取受精卵顯微注射顯微注射移植到子宮移植到子宮受精卵發(fā)育受精卵發(fā)育新性狀動(dòng)物新性狀動(dòng)物精選課件3、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常用法常用法:Ca2+處理處理常用菌常用菌:大腸桿菌:大腸桿菌微生物作受
19、體細(xì)胞原因:微生物作受體細(xì)胞原因:繁殖快繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對少、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對少過程:過程:Ca2+處理處理大腸桿菌大腸桿菌感受態(tài)感受態(tài)細(xì)胞細(xì)胞表達(dá)載體表達(dá)載體與感受態(tài)與感受態(tài)細(xì)胞混合細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)感受態(tài)細(xì)胞吸收胞吸收DNA精選課件1、基因工程中科學(xué)家常用細(xì)菌、酵母菌等微生物作、基因工程中科學(xué)家常用細(xì)菌、酵母菌等微生物作為受體細(xì)胞,原因是為受體細(xì)胞,原因是A結(jié)構(gòu)簡單、操作方便結(jié)構(gòu)簡單、操作方便B繁殖速度快繁殖速度快C遺傳物質(zhì)含量少、簡單遺傳物質(zhì)含量少、簡單D性狀穩(wěn)定、變異少性狀穩(wěn)定、變異少2、基因工程常用的受體細(xì)胞有、基因工程常用的受體細(xì)胞有大腸桿菌大腸桿菌枯草桿菌枯草
20、桿菌支原體支原體動(dòng)植物細(xì)胞動(dòng)植物細(xì)胞ABCDBD3、基因工程是在、基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的,在分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的,在基因操作的基本步驟中,不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對的步驟是基因操作的基本步驟中,不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對的步驟是A.人工合成基因人工合成基因 B.目的基因與運(yùn)載體結(jié)合目的基因與運(yùn)載體結(jié)合C.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 D.目的基因的檢測和表達(dá)目的基因的檢測和表達(dá)C精選課件4.采用基因工程的方法培育抗蟲棉,下列導(dǎo)入目的基因采用基因工程的方法培育抗蟲棉,下列導(dǎo)入目的基因的做法正確的是的做法正確的是將毒素蛋白質(zhì)注射到棉受精卵中將毒素蛋白質(zhì)注射到棉受精卵中將編碼
21、毒素蛋白將編碼毒素蛋白的的DNA序列注射到棉受精卵中序列注射到棉受精卵中將編碼毒素蛋白的將編碼毒素蛋白的DNA序列與細(xì)菌質(zhì)粒重組,注射到棉的子房并進(jìn)入受精序列與細(xì)菌質(zhì)粒重組,注射到棉的子房并進(jìn)入受精卵中卵中將編碼毒素蛋白的將編碼毒素蛋白的DNA序列與質(zhì)粒重組,導(dǎo)入序列與質(zhì)粒重組,導(dǎo)入細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞,再進(jìn)行組織培養(yǎng)細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞,再進(jìn)行組織培養(yǎng)ABCDC5.下列屬于基因工程中導(dǎo)入目的基因方法的是下列屬于基因工程中導(dǎo)入目的基因方法的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法基因槍法花粉管道法花粉管道法顯微注顯微注射法射法胚胎移植胚胎移植DNA分子雜交法分子雜交法ABCDC精選課件( (四四) )目
22、的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定檢測檢測導(dǎo)入檢測:目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞導(dǎo)入檢測:目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞方法方法 DNADNA分子雜交分子雜交表達(dá)檢測表達(dá)檢測轉(zhuǎn)錄檢測轉(zhuǎn)錄檢測分子雜交分子雜交翻譯檢測翻譯檢測抗原抗體抗原抗體雜交雜交分分子子檢檢測測法法鑒定鑒定抗蟲鑒定抗蟲鑒定抗病鑒定抗病鑒定活性鑒定等活性鑒定等個(gè)體水平的鑒定個(gè)體水平的鑒定精選課件知識延伸知識延伸DNADNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù) 該方法是根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則,把互補(bǔ)的雙鏈該方法是根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則,把互補(bǔ)的雙鏈DNA解開,把單股的解開,把單股的DNA小片段用同位素、熒光分子或小片段用同位素、熒光分子或化學(xué)發(fā)光催化劑
23、等進(jìn)行標(biāo)記,之后同被檢測的化學(xué)發(fā)光催化劑等進(jìn)行標(biāo)記,之后同被檢測的DNA中的中的同源互補(bǔ)序列雜交,從而檢出所要查明的同源互補(bǔ)序列雜交,從而檢出所要查明的DNA或基因?;蚧?。精選課件精選課件1、用、用-珠蛋白的珠蛋白的DNA探針可以檢測出的遺傳病是探針可以檢測出的遺傳病是 A鐮刀狀細(xì)胞貧血癥鐮刀狀細(xì)胞貧血癥B白血病白血病C壞血病壞血病D苯丙酮尿癥苯丙酮尿癥A2、應(yīng)用基因工程技術(shù)診斷疾病的過程中必須使用基、應(yīng)用基因工程技術(shù)診斷疾病的過程中必須使用基因探針才能達(dá)到檢測疾病的目的。這里的基因探針是因探針才能達(dá)到檢測疾病的目的。這里的基因探針是 A用于檢測疾病的醫(yī)療器械用于檢測疾病的醫(yī)療器械B用放射性
24、同位素或熒光分子等標(biāo)記的用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的DNA分子分子C合成合成-珠蛋白的珠蛋白的DNAD合成苯丙羥化酶的合成苯丙羥化酶的DNA片段片段B精選課件思考與探究:思考與探究:2.根據(jù)農(nóng)桿菌可將目的基因?qū)腚p子葉植物的機(jī)理根據(jù)農(nóng)桿菌可將目的基因?qū)腚p子葉植物的機(jī)理,你能分你能分析出不能導(dǎo)入單子葉植物的原因嗎析出不能導(dǎo)入單子葉植物的原因嗎?若將一個(gè)抗病基因?qū)魧⒁粋€(gè)抗病基因?qū)胄←溨腥胄←溨?理論上講你應(yīng)該怎樣做理論上講你應(yīng)該怎樣做?要選擇合適的農(nóng)桿菌菌株,因?yàn)椴皇撬械霓r(nóng)桿菌菌株都要選擇合適的農(nóng)桿菌菌株,因?yàn)椴皇撬械霓r(nóng)桿菌菌株都可以侵染單子葉植物;可以侵染單子葉植物;要加趨化和誘導(dǎo)
25、的物質(zhì),一般為乙要加趨化和誘導(dǎo)的物質(zhì),一般為乙酰丁香酮等,目的是使農(nóng)桿菌向植物組織的受傷部位靠攏酰丁香酮等,目的是使農(nóng)桿菌向植物組織的受傷部位靠攏(趨化性)和激活農(nóng)桿菌的(趨化性)和激活農(nóng)桿菌的Vir區(qū)(誘導(dǎo))的基因,使區(qū)(誘導(dǎo))的基因,使T-DNA轉(zhuǎn)移并插入到染色體轉(zhuǎn)移并插入到染色體DNA上。上。3.3.利用大腸桿菌可以生產(chǎn)出人的胰島素,聯(lián)系前面有關(guān)細(xì)胞器功利用大腸桿菌可以生產(chǎn)出人的胰島素,聯(lián)系前面有關(guān)細(xì)胞器功能的知識,結(jié)合基因工程操作程序的基本思路,思考一下,若要能的知識,結(jié)合基因工程操作程序的基本思路,思考一下,若要生產(chǎn)人的糖蛋白,可以用大腸桿菌嗎?生產(chǎn)人的糖蛋白,可以用大腸桿菌嗎?有些
26、蛋白質(zhì)肽鏈上有共價(jià)結(jié)合的糖鏈,這些糖鏈?zhǔn)窃趦?nèi)質(zhì)網(wǎng)有些蛋白質(zhì)肽鏈上有共價(jià)結(jié)合的糖鏈,這些糖鏈?zhǔn)窃趦?nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體上加工完成的,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體存在和高爾基復(fù)合體上加工完成的,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體存在于真核細(xì)胞中,大腸桿菌不存在這兩種細(xì)胞器,因此,在大于真核細(xì)胞中,大腸桿菌不存在這兩種細(xì)胞器,因此,在大腸桿菌中生產(chǎn)這種糖蛋白是不可能的。腸桿菌中生產(chǎn)這種糖蛋白是不可能的。精選課件4.-4.-珠蛋白是動(dòng)物血紅蛋白的重要組成成分。當(dāng)它的成分異珠蛋白是動(dòng)物血紅蛋白的重要組成成分。當(dāng)它的成分異常時(shí),動(dòng)物有可能患某種疾病,如鐮刀形細(xì)胞貧血癥。假如常時(shí),動(dòng)物有可能患某種疾病,如鐮刀形細(xì)胞貧血癥。假如讓你用基因工程的方法,使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠的讓你用基因工程的方法,使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠的-珠蛋白,珠蛋白,想一想,應(yīng)如何進(jìn)行設(shè)計(jì)?想一想,應(yīng)如何進(jìn)行設(shè)計(jì)?(1 1)從小鼠中克隆出)從小鼠中克隆出-珠蛋白基因的編碼序列(珠蛋白基因的編碼序列
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