啤酒分析操作步驟及方法

1、啤酒分析操作步驟及方法1水質(zhì)分析:1.1堿度的測(cè)定:1.1.1試劑:1.1.1.1 不含二氧化碳水,用于制備和稀釋溶液。1.1.1.20.1%酚酞指示劑:0.1克酚酞溶于95%乙醇稀釋至100ml。1.1.1.3 0.1%甲基橙指示劑:0.1克甲基橙溶于蒸餾水稀釋至100ml。1.1.1.4 0.1mol/L鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液:吸取1+1鹽酸溶液18ml 或1+1硫酸溶液6ml,用無(wú)二氧化碳水稀釋至1000ml。標(biāo)定方法一;準(zhǔn)確稱(chēng)取基準(zhǔn)試劑硼砂(N a2B4O7.10H2O0.4-0.5克之間,稱(chēng)準(zhǔn)至0.0001g,稱(chēng)量前該試劑不需要干燥。溶于40ml水中,加入2-3滴0.2%甲基紅指示劑(0

2、.2克甲基紅溶于60ml95%乙醇中,溶解后用水稀釋至100ml。用鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液變?yōu)槌壬礊榻K點(diǎn)(大約消耗23ml左右。同時(shí)用40ml水做空白試驗(yàn)。按下式計(jì)算:c=1000m/190.7(V1-V2;式中c鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c(HCI或c(1/2H2SO4,mol/L; m硼砂的質(zhì)量,g;V1滴定所消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V2空白試驗(yàn)所消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;190.7硼砂的摩爾質(zhì)量M(1/2N a2B4O7.10H2O,g/mol。標(biāo)定方法二:稱(chēng)取在140干燥箱干燥至恒重(3小時(shí)的無(wú)水碳酸鈉0.1-0.15克,稱(chēng)準(zhǔn)至0.0001g,溶于無(wú)二氧化碳

3、水的三角瓶中(做三個(gè)平行試驗(yàn),各加入100ml無(wú)二氧化碳水溶解,分別加入2滴甲基橙指示劑,用待標(biāo)定的鹽酸或硫酸溶液滴定至橙紅色為止,記錄用量,按下式計(jì)算:式中C為鹽酸溶液的濃度mol/L;m為無(wú)水碳酸鈉的質(zhì)量g;V為滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸的用量ml;1000為換算成升單位;52.995為無(wú)水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量(1/2Na2CO3g/mol標(biāo)定方法三:準(zhǔn)確稱(chēng)取經(jīng)140干燥至恒重的無(wú)水碳酸鈉0.15-0.2克于三角瓶?jī)?nèi)溶于40ml水,加10滴溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,用配制待標(biāo)定的鹽酸或硫酸溶液滴定至溶液由綠色變?yōu)榘导t色,煮沸2分鐘,冷卻,繼續(xù)滴定至溶液呈暗紅色為終點(diǎn)。同時(shí)用40ml水做空白試驗(yàn)。C

4、=m1000/52.99(V1-V2式中C鹽酸或硫酸溶液的濃度C(HCI或C(1/2HSO,mol/Lm為無(wú)水碳酸鈉的質(zhì)量g。V1滴定所消耗鹽酸或硫酸溶液的體積ml。V2為空白所消耗鹽酸或硫酸的體積ml。52.99為無(wú)水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量(1/2Na2CO3g/mol。1000為換算成升后的單位。1.1.2 操作:1.1.2.1 酚酞堿度的測(cè)定:取50ml或100ml水于250ml三角瓶中,若水樣中有余氯,則加入1滴0.1mol/L硫代硫酸鈉。加2滴酚酞指示劑,如溶液呈紅色,則用0.1mol/L鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至顏色恰好消失。1.1.2.2甲基橙指示劑法總堿度的測(cè)定:在滴定過(guò)酚酞堿度的溶液

5、中(或另取一份水樣,加入2滴甲基橙指示劑,若溶液呈橙黃色,則用0.1mol/L鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液呈淡橙紅色。1.1.3 計(jì)算:C1=1000CV1/V C2=1000CV2/V式中 C1為酚酞堿度mmol/L C2為總堿度mmol/LV1-測(cè)定酚酞堿度所消耗的鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積mlV2-滴定至甲基橙終點(diǎn)的酸的用量(如果總堿度所用式樣為測(cè)定酚酞堿度后的溶液,則酸液用量應(yīng)該包括V1ml。V-為水樣的體積。C-為鹽酸c(HCI或硫酸c(1/2H2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度mol/L。1.2 總硬度的測(cè)定:1.2.1 試劑和溶液:1.2.1.1 PH=10的氨-氯化銨緩沖溶液:溶16.9克氯

6、化銨于143ml 濃氨水中,用水稀釋至250ml搖勻,密封保存可保存一個(gè)月。1.2.1.2鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)至0.0001g,用少許水濕潤(rùn),滴加1+1鹽酸溶液至樣品溶解(必要時(shí)可稍微加熱,轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶,用水稀釋至刻度,搖勻。用基準(zhǔn)氧化鋅配制時(shí)C=M1/81.38。用基準(zhǔn)鋅配制時(shí)C=M2/65.37。式中C鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度mol/L;M1稱(chēng)取基準(zhǔn)氧化鋅的質(zhì)量g;81.38氧化鋅的摩爾質(zhì)量g/mol;M2稱(chēng)取基準(zhǔn)鋅的質(zhì)量g;65.37鋅的摩爾質(zhì)量g/mol配制:稱(chēng)取EDTA二鈉20克溶于適量熱水中,用水稀釋至1000ml,搖勻。標(biāo)定:吸取與所需標(biāo)定的EDTA溶液濃度相當(dāng)?shù)匿\標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.05

7、mol/L25.00ml于三角瓶中,仔細(xì)滴加1+1氨水至開(kāi)始出現(xiàn)白色氫氧化鋅Z N(OH2沉淀,加入10mlPH=10氨-氯化銨緩沖溶液,加50ml水,加3-4滴鉻黑T指示劑或0.2g鉻黑T固體指示劑,用待標(biāo)定的EDTA溶液滴定至溶液由酒紅色變?yōu)榧兯{(lán)色為終點(diǎn)。同時(shí)用75ml水做空白試驗(yàn)。按下式計(jì)算:C=25C0/V1-V2式中CEDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度mol/L;C0-鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度;V1滴定所消耗EDTA溶液的體積ml;V2空白試驗(yàn)消耗的體積ml。1.2.1.40.5%鉻黑T指示劑:稱(chēng)取0.5克鉻黑T溶于10mlPH=10氨-氯化銨緩沖溶液中,用95%乙醇稀釋至1000ml,搖勻。也研細(xì)混勻

8、,易存放。1.2.2 操作:1.2.2.1 吸取水樣50ml或適當(dāng)體積(以滴定時(shí)消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積大于15ml為宜,注入250ml三角瓶中。1.2.2.2加1-2mlPH=10氨-氯化銨緩沖溶液,加2滴鉻黑T指示劑或約0.2克固體鉻黑T指示劑。1.2.2.3以EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至由酒紅色變?yōu)樗{(lán)色即為終點(diǎn)(在滴入最后幾滴時(shí),兩次之間應(yīng)間隔3-5秒,記錄消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。1.2.3 計(jì)算:P4=P2/10式中C1總硬度c(C a O,mmol/L;P2總硬度(以C a O計(jì),mg/L;P3總硬度(以C a CO3計(jì),mg/L;P4總硬度,德國(guó)度(d;CEDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度mo

9、l/L;V1滴定水樣所消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V2空白試驗(yàn)時(shí)所消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V水樣的體積,ml;56.08氧化鈣的摩爾質(zhì)量g/mol;100.1碳酸鈣的摩爾質(zhì)量g/mol。1.3 永久硬度的測(cè)定:1.3.1試劑;同總硬度。1.3.2操作;取水樣100ml,加入三角瓶中,煮沸5分鐘,冷卻沉淀后,過(guò)濾,用水充分洗滌,濾液用水稀釋至約100ml,按總硬度操作測(cè)定并計(jì)算永久硬度。1.4暫時(shí)硬度:暫時(shí)硬度=總硬度-永久硬度1.5鈣離子的測(cè)定;1.5.1儀器:1.5.1.1酸式滴定管。1.5.1.2250三角瓶。1.5.1.3移液管。1.5.2 試劑;1.5.2.1 0.05

10、mol/L EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液;1.5.2.2 1mol/L氫氧化鈉溶液(不用標(biāo)定;1.5.2.3鈣指示劑(鉻藍(lán)黑R將氯化鈉于105-107干燥箱3-4小時(shí),干燥器中冷卻后稱(chēng)取100g氯化鈉與0.5g鉻藍(lán)黑R研細(xì),混勻,棕色瓶保存。1.5.2.41+1鹽酸溶液;1.5.2.5剛果紅試紙;1.5.3操作:取水樣50ml(鈣含量在5-10mg之間若欲測(cè)樣品是較高堿度的硬水,可加入剛果紅試紙一小塊,用1+1鹽酸溶液中和至試紙變藍(lán)色,然后煮沸一分鐘,冷卻后滴定于250ml三角瓶中,加2ml氫氧化鈉,使PH值達(dá)12-13,加約0.2克指示劑,用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn)。用鈣指示劑時(shí),終點(diǎn)由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)樘焖{(lán)

11、色。1.5.4計(jì)算;C1=1000V1C2/V2式中C1水樣中鈣離子濃度(鈣硬,mmol/L;C2-EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,mmol/L;C3水樣中鈣離子的質(zhì)量濃度,mg/L;V1消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V2水樣的體積,ml;40.08鈣離子的摩爾質(zhì)量,g/mol。1.6 鎂離子的測(cè)定(有兩種方法;1.6.1(第一種方法:鎂離子的硬度(C=總硬度-鈣離子的硬度C單位以mg/L表示之。1.6.2(第二種方法:1.6.2.1 原理用EDTA絡(luò)合滴定法測(cè)定。在用紫脲酸銨做指示劑時(shí),將EDTA絡(luò)合滴定法測(cè)定鈣后的水樣中,加入鹽酸分解紫脲酸銨,再調(diào)節(jié)PH至10,以鉻黑T作指示劑,用EDTA標(biāo)準(zhǔn)

12、溶液滴定水樣中的鎂離子。1.6.1.6.100g無(wú)水乙二醇中,或用200mg紫脲酸銨與100g固體氯化鈉一起研磨至通過(guò)40-50目篩孔。1.6.1.6.用紫脲酸銨作指示劑測(cè)定鈣后,取滴定鈣后的溶液,用1:1鹽酸中和至剛果紅試紙變藍(lán),放置5-10分鐘,待溶液退至無(wú)色(若不褪色,可加熱至40-50C,使之褪色。用氫氧化鈉中和至剛果紅試紙變紅,再加入緩沖溶液1-2ml,鉻黑T指示液1-2滴(或適量的固體粉末指示劑,同測(cè)總硬度一樣用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn)。1.6.C1=1000V1C2/V2式中C1水樣中鎂離子濃度(鎂硬,mmol/L;C2-EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,mmol/L;C3水樣中鎂離子的

13、質(zhì)量濃度,mg/L;V1消耗EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V2水樣的體積,ml;24.31鎂離子的摩爾質(zhì)量,g/mol。1.6.在滴定前把溶液加熱到30-40C可使終點(diǎn)更清楚。其它注意事項(xiàng)同總度硬度測(cè)定的說(shuō)明。1.7 氯化物的測(cè)定;1.7.1試劑;1.7.1.1氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制c(N a CI=0.0141mol/L(以氯離子計(jì),500mg/L;將氯化鈉置于坩堝中,在500600馬弗爐(有些書(shū)上寫(xiě)140干燥兩小時(shí)中灼燒4050分鐘,取出在干燥器中冷卻室溫,稱(chēng)取0.8240g(書(shū)上是寫(xiě)8.2400g溶于蒸餾水,轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻。1.7.1.2 5%g鉻酸鉀指示劑

14、溶5g鉻酸鉀(K2C r O4于少量水中,滴加硝酸銀溶液至有明顯的紅色沉淀生成,放置24小時(shí),過(guò)濾后稀釋至100ml,搖勻。1.7.1.3 0.5%酚酞指示劑稱(chēng)取0.5克酚酞,溶于50ml95%乙醇中加水稀釋至100ml。1.7.1.4 硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液c(A g NO3=0.0141mol/L;配制:準(zhǔn)確稱(chēng)取2.3956g硝酸銀,溶于蒸餾水后轉(zhuǎn)入1000ml 棕色容量瓶,稀釋至刻度搖勻。式中C1硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c(A g NO3,mol/L;C2-氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c(N a CI,mol/L;V1滴定時(shí)消耗硝酸銀溶液的體積,ml;V2空白試驗(yàn)時(shí)消耗硝酸銀溶液的體積,ml。1.7.2操作

15、;1.7.2.1取50ml水樣(若氯離子含量高,可取適量水樣稀釋至50ml置于250ml三角瓶中,另一三角瓶加50ml蒸餾水作為空白。1.7.2.2水樣PH=7-10可直接滴定,超出此范圍時(shí),加入2滴酚酞作指示劑,用0.05mol/L氫氧化鈉溶液或硫酸溶液(1/2H2SO4=0.05mol/L調(diào)至酚酞變色點(diǎn)(PH=8.3。1.7.定至磚紅色剛出現(xiàn)即為終點(diǎn)。記錄消耗硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。同時(shí)做空白滴定。1.7.3計(jì)算: P=35.45(V1-V2C1000/V式中P水樣中氯化物的質(zhì)量濃度(以CI離子計(jì),mg/L;V1滴定水樣時(shí)消耗硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V2做空白試驗(yàn)時(shí)消耗硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體

16、積,ml;C硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(A g NO3,mol/L;V水樣的體積,ml;35.45氯離子的摩爾質(zhì)量,g/mol。1.8 電導(dǎo)率的測(cè)定;按電導(dǎo)率儀使用說(shuō)明書(shū)操作。1.9 PH值的測(cè)定;按PH計(jì)使用說(shuō)明書(shū)操作。2 啤酒花理化分析:2.1 崩解時(shí)間:在500ml的燒杯中盛入約200ml自來(lái)水,放在電爐上加熱,在沸騰狀態(tài)下投入2-3粒顆粒酒花,投入時(shí)立即按下秒表計(jì)時(shí),待顆粒啤酒花在沸水中已膨脹并松散狀態(tài)時(shí),停止秒表,記錄時(shí)間(s。2.2 水分的測(cè)定;2.2.1儀器;稱(chēng)量瓶、電熱干燥箱、干燥器。2.2.2操作;準(zhǔn)確稱(chēng)取粉碎酒花5克兩份,稱(chēng)準(zhǔn)至0.0001g,分別置于已烘干至恒重的有蓋稱(chēng)量瓶中,

17、連同蓋一并放入恒溫的103-104的電熱烘箱中烘1小時(shí)。加蓋放入干燥器內(nèi)冷卻至室溫,連蓋稱(chēng)重。前后兩次質(zhì)量差不超過(guò)2mg,即為恒重。2.2.3計(jì)算;X=(M1-M2100/M1-M式中x水分含量%M1烘干前稱(chēng)量皿及樣品質(zhì)量,gM2烘干后稱(chēng)量皿及樣品質(zhì)量,gM稱(chēng)量皿的質(zhì)量,g報(bào)告以平行試驗(yàn)結(jié)果的平均值表示。2.3 a-酸和-酸:2.3.1儀器;紫外分光光度儀、5000轉(zhuǎn)離心機(jī)、感量0.1g的天平、振蕩器。2.3.2試劑;2.3.2.1甲苯(分析純2.3.2.2甲醇(分析純2.3.2.36.0mol/L氫氧化鈉溶液;將氫氧化鈉配制成飽和溶液,注入聚乙烯塑料瓶中,密閉放置至溶液清亮后吸取上清液31.

18、2ml注入100ml不含二氧化碳的水中,搖勻。2.3.2.4堿性甲醇溶液;每100ml甲醇中加入0.2ml6.0mol/L氫氧化鈉溶液,此溶液需當(dāng)天配當(dāng)天用。2.3.3操作;2.3.3.1萃取準(zhǔn)確稱(chēng)取兩份經(jīng)粉碎的酒花式樣 5.000g,分別置于250ml干凈的碘量瓶中,用移液管加入100ml甲苯,加塞稱(chēng)重并記錄。將碘量瓶置于振蕩器上震蕩(或用手搖動(dòng)30分鐘,取下重新稱(chēng)量(若震蕩后失重超過(guò)0.3克應(yīng)重做試驗(yàn)。將碘量瓶?jī)A斜靜置5分鐘備用。2.3.3.2測(cè)定吸光度;a 稀釋A溶液用移液管吸取萃取液5.0ml注入100ml容量瓶用甲醇稀釋至刻度,搖勻。b 稀釋B溶液用移液管吸取A溶液3.0ml注入50

19、ml容量瓶中,用堿性甲醇溶液稀釋至刻度,搖勻。C 參比溶液吸取5.0ml甲苯注入100ml容量瓶中用甲醇稀釋至刻度,搖勻后吸取3.0ml注入50ml容量瓶中,用堿性甲醇溶液稀釋至刻度,搖勻。在波長(zhǎng)275、325、355nm下用10mm石英比色皿分別測(cè)定稀釋B溶液的吸光度,參比溶液作為空白。測(cè)定時(shí)應(yīng)迅速讀數(shù)。2.3.4計(jì)算;W0=W/1-G式中d稀釋指數(shù);500-轉(zhuǎn)換系數(shù);W-a-酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%;W0a-酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(以絕干計(jì),%;G酒花式樣水分含量,%-酸的計(jì)算;W0=W/1-GW-酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%;W0-酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(以絕干計(jì),%;G-酒花水分含量,%。注意:所有有機(jī)試劑均有毒性,操作時(shí)應(yīng)

20、戴口罩。測(cè)定吸光度時(shí),操作應(yīng)迅速,防止有機(jī)溶劑的大量蒸發(fā)。平行試驗(yàn)之差0.2%。3.1水分的測(cè)定;3.1.1儀器;粉碎機(jī)、電熱干燥箱、分析天平、稱(chēng)量瓶、干燥器。3.1.2操作;粉碎前將鐵丁、石粒等堅(jiān)硬雜質(zhì)檢出來(lái)。細(xì)粉碎樣品后,及時(shí)稱(chēng)取3-5克,稱(chēng)準(zhǔn)至0.0002g,置于于烘至質(zhì)量恒定的稱(chēng)量瓶中,此操作應(yīng)迅速進(jìn)行。將稱(chēng)量瓶置于105-107電熱干燥箱內(nèi),取下蓋子,烘3小時(shí)后,蓋上蓋子移入干燥器內(nèi)冷卻,30分鐘后稱(chēng)量。3.1.3 計(jì)算;W=(m1-m2/m1-m100%W麥芽水分的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%;m稱(chēng)量瓶的質(zhì)量,g;m1烘干前稱(chēng)量瓶加樣品的質(zhì)量,g;m2烘干后稱(chēng)量瓶加樣品的質(zhì)量,g;計(jì)算結(jié)果保留三位

21、小數(shù)。3.2協(xié)定法糖化麥汁制備;略。3.3粗細(xì)粉浸出物差的測(cè)定;3.3.1操作;分別測(cè)出協(xié)定法麥汁粗粉和細(xì)分中的浸出物(絕干,%。3.3.2計(jì)算;粗細(xì)粉浸出物差(絕干,%=細(xì)分浸出物(絕干,%-粗粉浸出物(絕干,%。3.4色度的測(cè)定;按EBC色度儀操作測(cè)定。3.5總氮的測(cè)定;3.5.1試劑;3.5.1.1濃硫酸。3.5.1.2 400g/L氫氧化鈉:溶400g氫氧化鈉于不含氨的水中,再稀釋至1L,靜置,使碳酸鈉沉淀,吸取上層澄清溶液儲(chǔ)存于聚乙烯塑料瓶中(或儲(chǔ)存于帶有橡皮塞的瓶?jī)?nèi)。此溶液的相對(duì)密度應(yīng)為1.36以上。3.5.1.3混合催化劑:二氧化鈦:結(jié)晶硫酸銅:硫酸鉀=0.3:0.3: 10。3

22、.5.1.4 20g/L硼酸。3.5.1.5溴甲酚綠混合指示劑;稱(chēng)取0.1克溴甲酚綠,溶解于100ml95%酒精溶液中。另稱(chēng)取0.1克甲基紅指示劑溶解于100ml95%酒精溶液中。兩份溶液按10:4的比例混合。此指示劑在酸性溶液中呈粉紅色,在堿性溶液中呈藍(lán)色,終點(diǎn)為灰色。3.5.1.6鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液c(HCI或(1/2H2SO4=0.1mol/L;吸取1+1鹽酸溶液18ml或1+1硫酸溶液6ml,用無(wú)二氧化碳水稀釋至1000ml。標(biāo)定方法一;準(zhǔn)確稱(chēng)取基準(zhǔn)試劑硼砂(N a2B4O7.10H2O0.4-0.5克之間,稱(chēng)準(zhǔn)至0.0001g,稱(chēng)量前該試劑不需要干燥。溶于40ml水中,加入2-3滴0

23、.2%甲基紅指示劑(0.2克甲基紅溶于60ml95%乙醇中,溶解后用水稀釋至100ml。用鹽酸或硫酸溶液滴定至溶液變?yōu)槌壬礊榻K點(diǎn)(大約消耗23ml左右。同時(shí)用40ml水做空白試驗(yàn)。按下式計(jì)算:c=1000m/190.7(V1-V2;式中c鹽酸或硫酸準(zhǔn)溶液的濃度c(HCI或c(1/2H2SO4,mol/L; m硼砂的質(zhì)量,g;V1滴定所消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V2空白試驗(yàn)所消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;190.7硼砂的摩爾質(zhì)量M(1/2N a2B4O7.10H2O,g/mol。標(biāo)定方法二:稱(chēng)取在140干燥箱干燥至恒重(3小時(shí)的無(wú)水碳酸鈉0.1-0.15克,稱(chēng)準(zhǔn)至0.0001g

24、,溶于無(wú)二氧化碳水的三角瓶中(做三個(gè)平行試驗(yàn),各加入100ml無(wú)二氧化碳水溶解,分別加入2滴甲基橙指示劑,用待標(biāo)定的鹽酸或硫酸溶液滴定至橙紅色為止,記錄用量,按下式計(jì)算:式中C為鹽酸溶液的濃度mol/L;m為無(wú)水碳酸鈉的質(zhì)量g;V為滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸的用量ml;1000為換算成升單位;52.995為無(wú)水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量(1/2Na2CO3g/mol標(biāo)定方法三:準(zhǔn)確稱(chēng)取經(jīng)140干燥至恒重的無(wú)水碳酸鈉0.15-0.2克于三角瓶?jī)?nèi)溶于40ml水,加10滴溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,用配制待標(biāo)定的鹽酸或硫酸溶液滴定至溶液由綠色變?yōu)榘导t色,煮沸2分鐘,冷卻,繼續(xù)滴定至溶液呈暗紅色為終點(diǎn)。同時(shí)用40ml

25、水做空白試驗(yàn)。C=m1000/52.99(V1-V2式中C鹽酸或硫酸溶液的濃度C(HCI或C(1/2HSO,mol/Lm為無(wú)水碳酸鈉的質(zhì)量g。V1滴定所消耗鹽酸或硫酸溶液的體積ml。V2為空白所消耗鹽酸或硫酸的體積ml。52.99為無(wú)水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量(1/2Na2CO3g/mol。1000為換算成升后的單位。3.5.2操作;3.5.2.1消化;3.5.2.1.1準(zhǔn)確稱(chēng)取兩份1.500g左右混合均勻的粉碎樣品(或經(jīng)測(cè)水分的樣品,小心轉(zhuǎn)移到兩個(gè)完全干燥的凱氏燒瓶中。3.5.2.1.2每克加約10克粉狀混合催化劑與樣品混合后,再加入20ml 濃硫酸,搖勻。瓶中置一玻璃漏斗,然后將燒瓶成45斜置在加

26、熱器上。3.5.2.1.3文火加熱到泡沫停止發(fā)生后強(qiáng)熱使之沸騰,直至溶液轉(zhuǎn)為透明,再繼續(xù)強(qiáng)熱20-30分鐘,最終溶液應(yīng)呈過(guò)量硫酸銅的綠色。3.5.2.2蒸餾;3.5.2.2.1消化液冷卻后,緩緩加入250ml水混勻,再冷卻。3.5.2.2.2連接燒瓶與蒸餾裝置,溜出管的尖端插入一250ml三角瓶中。瓶中盛有約25ml2%硼酸溶液和0.5ml溴甲酚綠混合指示劑。溜出管尖端應(yīng)在液面以下。3.5.2.2.3在燒瓶中加入2克鋅粒,塞緊瓶塞,通過(guò)加液漏斗加入70ml40%氫氧化鈉溶液,輕輕搖動(dòng)燒瓶,使內(nèi)溶物混勻。加熱蒸餾到溜出液體約達(dá)180ml時(shí)停止蒸餾。3.5.2.2.4用鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定蒸餾液

27、到綠色消失轉(zhuǎn)為灰色。3.5.2.2.5同樣操作做一不加樣品的空白測(cè)定。3.5.3計(jì)算;W=0.0140(V2-V1M/W0(1-G.100%式中W無(wú)水麥芽中含氮的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%;V1空白測(cè)定中標(biāo)準(zhǔn)酸的用量,ml;V2樣品測(cè)定中標(biāo)準(zhǔn)酸的用量,ml;M標(biāo)準(zhǔn)酸的摩爾濃度,mol/L;G樣品中水分的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%;0.0140每1mmol氮的克數(shù);6.25麥芽中氮和蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)換系數(shù);W0樣品質(zhì)量,g;W1樣品中含蛋白質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(絕干,%。3.6可溶性氮的測(cè)定:3.6.1儀器、試劑與總氮的測(cè)定。3.6.2操作;3.6.2.1樣品的消化吸取制備好的協(xié)定法麥芽汁25.00ml,小心轉(zhuǎn)移到已干燥的凱氏燒瓶中,加

28、入濃硫酸2-3ml,小心蒸發(fā)至近干。加入混合催化劑約10克,緩緩加入濃硫酸20ml,搖勻。在通風(fēng)廚內(nèi)文火加熱至泡沫停止發(fā)生后,大火加熱使之沸騰,待溶液清亮后,再繼續(xù)加熱20-30分鐘取下。3.6.2.2蒸餾將消化液放置使其自然冷卻后,緩緩加入不含氮的水250ml,搖勻,冷卻。向凱氏燒瓶?jī)?nèi)放入約2克鋅粒或幾塊小瓷片。連接凱氏燒瓶與蒸餾裝置,溜出管的尖端插入盛有25ml2%硼酸溶液和0.5ml溴甲酚綠混合指示劑的錐形瓶中,溜出管的尖端應(yīng)在液面以下。通過(guò)加液漏斗加入70ml10mol/L氫氧化鈉溶液于凱氏燒瓶中,輕輕搖勻,使內(nèi)容物混合均勻,然后加熱蒸餾,待溜出液達(dá)到180ml時(shí)停止蒸餾。3.6.2.

29、3滴定用0.1mol/L鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定溜出液,至綠色消失轉(zhuǎn)變?yōu)榛疑珵榻K點(diǎn)。記錄消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。同時(shí)操作1,2,3步驟用25.00ml水代替麥芽汁做一不加樣品的空白試驗(yàn)。記錄消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。W=0.0140(V2-V1Cw1/25d20W2式中W麥芽中可溶性氮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(絕干,%;W1麥芽的浸出物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(絕干,%;V1空白試驗(yàn)滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V2樣品試驗(yàn)滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;c-鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c(HCI或c(1/2H2SO4,mol/L; W2同一樣品麥芽制備的協(xié)定法麥芽汁的浸出物的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%; d20-同一樣品麥

30、芽制備的協(xié)定法麥芽汁在20時(shí)的相對(duì)密度;0.0140氮的摩爾質(zhì)量M,kg/mol。3.7庫(kù)爾巴哈值的計(jì)算;W=(W1/W2.100%式中W麥芽的庫(kù)爾巴哈值;W1麥芽的可溶性氮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(絕干,%;W2麥芽的總氮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(絕干,%。3.8浸出物的測(cè)定;3.8.1儀器;附溫比重瓶、分析天平,高精度恒溫水浴。3.8.2操作;略。3.8.3計(jì)算;麥芽汁比重(d20=m2-m/m1-m式中m比重瓶質(zhì)量,g;m1比重瓶和水的質(zhì)量,g;m2比重瓶和樣品的質(zhì)量,g;查比重與浸出物含量對(duì)照表得相應(yīng)的麥汁的浸出物含量(G。 E1(%=(800+MG/100-GE2(%=100E1/100-M式中E1風(fēng)干麥芽的浸

31、出物,%; M麥芽水分,%;E2無(wú)水麥芽的浸出物,%; G查表得出的浸出物。3.9煮沸色度的測(cè)定;3.9.1主要儀器; 500ml燒瓶、球形回流冷凝管、可調(diào)電爐、110甘油浴或其它的油浴。3.9.2操作;麥芽汁煮沸回流:移取制備好的協(xié)定法麥芽汁200ml于500ml平底或圓底燒瓶中,將燒瓶放甘油浴中,置于可調(diào)電爐上,連接球形回流冷凝管,開(kāi)啟電爐和冷卻水,加熱沸騰(麥芽汁沸騰,調(diào)節(jié)電爐,保持油浴溫度在(1082,回流兩小時(shí),取下燒瓶,用自來(lái)水快速冷卻至室溫后,再用中速濾紙過(guò)濾。色度的測(cè)定:按EBC色度儀操作方法測(cè)定色度。結(jié)果保留一位小數(shù)。3.10 a-氨基氮的測(cè)定;3.10.1儀器;高精度恒溫水

32、浴、可見(jiàn)分光光度計(jì)、沸騰水浴。3.10.2試劑;10g N a2HPO4.12H2O;6g KH2PO4;0.500g水合茚三酮;0.300g果糖。稱(chēng)取以上試劑混勻,用水溶解并稀釋至100ml,搖勻(此溶液在冰箱內(nèi)可保存二周,PH應(yīng)為6.6-6.8。稱(chēng)取KIO32g溶于600ml水中,加入96%乙醇400ml,冰箱內(nèi)5保存。稱(chēng)取甘氨酸0.1072g用水溶解并定容至100ml,搖勻,于冰箱內(nèi)儲(chǔ)存。此溶液a-氨基氮的含量為200mg/L.3.10.2.4甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)使用液(使用時(shí)現(xiàn)配吸取甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.00ml,用水稀釋至100ml。此標(biāo)準(zhǔn)溶液的a-氨基氮含量為2mg/L。3.10.3.1樣液的

33、制備取協(xié)定法麥芽汁1.00ml用水稀釋至100ml搖勻。3.10.3.2取7支試管并編號(hào),于1、2、3管中分別加入上述稀釋過(guò)的樣液2.0ml,4號(hào)管中加入水2.0ml,5、6號(hào)管中分別加入甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)使用液2.0ml。各加入顯色劑1.00ml,搖勻,并分別放一顆玻璃球于試管口上,以避免蒸發(fā)損失,將試管放入水浴中準(zhǔn)確加熱16分鐘。3.10.3.3后在20水浴中冷卻20分鐘。各加入碘酸鉀稀釋溶液5.00ml,混勻,并在30分鐘內(nèi),在570nm波長(zhǎng)下,用1cm比色皿以4號(hào)管為空白,分別測(cè)其吸光度。C=2nA1/A2式中c麥芽汁中a-氨基氮的質(zhì)量濃度,mg/L;A1樣品溶液的平均吸光度;A2甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶

34、液的平均吸光度;2甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液中a-氨基氮的含量,mg/L;n樣品溶液的稀釋倍數(shù)(若按操作將1ml樣品稀釋至100ml,n 為100。麥芽中a-氨基氮的含量按下式計(jì)算;W=(800+W0C/1000d20(100-G(100-W0式中W麥芽中a-氨基氮的含量,mg/100g無(wú)水麥芽;c麥芽汁中a-氨基氮的含量,mg/L;W0麥芽水分的百分含量,%;d20麥芽汁在20時(shí)的相對(duì)密度;G麥芽汁浸出物質(zhì)量百分?jǐn)?shù)。計(jì)算結(jié)果保留兩位小數(shù)。注意事項(xiàng);必須嚴(yán)防任何外界痕量氨基酸的引入,為此有關(guān)玻璃器皿都必須仔細(xì)洗滌,洗凈后只能接觸其外部表面。移液管必須用吸球吸,不能用嘴吸,以免唾液引入氨基酸,拿玻璃球最好用

35、鑷子。測(cè)定中加入果糖作為還原性發(fā)色劑。碘酸鉀在稀溶液中使茚三酮保持氧化態(tài),以阻止進(jìn)一步發(fā)生不希望的生色反應(yīng)。3.11麥芽蛋白質(zhì)區(qū)分的測(cè)定(隆丁區(qū)分法;3.11.1儀器;蛋白質(zhì)測(cè)定儀、蛋白質(zhì)消化爐、高精度恒溫水浴鍋。3.11.2試劑;3.11.2.1濃硫酸。3.11.2.2 400g/L氫氧化鈉:溶400g氫氧化鈉于不含氨的水中,再稀釋至1L,靜置,使碳酸鈉沉淀,吸取上層澄清溶液儲(chǔ)存于聚乙烯塑料瓶中(或儲(chǔ)存于帶有橡皮塞的瓶?jī)?nèi)。此溶液的相對(duì)密度應(yīng)為1.36以上。3.11.2.3 混合催化劑:二氧化鈦:結(jié)晶硫酸銅:硫酸鉀=0.3:0.3: 10。3.11.2.4 20g/L硼酸。3.11.2.5溴甲

36、酚綠混合指示劑;稱(chēng)取0.1克溴甲酚綠,溶解于100ml95%酒精溶液中。另稱(chēng)取0.1克甲基紅指示劑溶解于100ml95%酒精溶液中。兩份溶液按10:4的比例混合。此指示劑在酸性溶液中呈粉紅色,在堿性溶液中呈藍(lán)色,終點(diǎn)為灰色。3.11.2.6 鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液c(HCI或(1/2H2SO4=0.1mol/L;吸取1+1鹽酸溶液18ml或1+1硫酸溶液6ml,用無(wú)二氧化碳水稀釋至1000ml。3.11.2.7不含氨的水取強(qiáng)堿性及強(qiáng)酸性陰離子交換樹(shù)脂(用量2:1,依次填充于直徑3cm長(zhǎng)50cm的交換柱中,將水以每分鐘3-5ml的流速通過(guò)交換柱。標(biāo)定方法一;準(zhǔn)確稱(chēng)取基準(zhǔn)試劑硼砂(N a2B4O7.1

37、0H2O0.4-0.5克之間,稱(chēng)準(zhǔn)至0.0001g,稱(chēng)量前該試劑不需要干燥。溶于40ml水中,加入2-3滴0.2%甲基紅指示劑(0.2克甲基紅溶于60ml95%乙醇中,溶解后用水稀釋至100ml。用鹽酸或硫酸溶液滴定至溶液變?yōu)槌壬礊榻K點(diǎn)(大約消耗23ml左右。同時(shí)用40ml水做空白試驗(yàn)。按下式計(jì)算:c=1000m/190.7(V1-V2;式中c鹽酸或硫酸準(zhǔn)溶液的濃度c(HCI或c(1/2H2SO4,mol/L; m硼砂的質(zhì)量,g;V1滴定所消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V2空白試驗(yàn)所消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;190.7硼砂的摩爾質(zhì)量M(1/2N a2B4O7.10H2O,g/

38、mol。標(biāo)定方法二:稱(chēng)取在140干燥箱干燥至恒重(3小時(shí)的無(wú)水碳酸鈉0.1-0.15克,稱(chēng)準(zhǔn)至0.0001g,溶于無(wú)二氧化碳水的三角瓶中(做三個(gè)平行試驗(yàn),各加入100ml無(wú)二氧化碳水溶解,分別加入2滴甲基橙指示劑,用待標(biāo)定的鹽酸或硫酸溶液滴定至橙紅色為止,記錄用量,按下式計(jì)算:式中C為鹽酸溶液的濃度mol/L;m為無(wú)水碳酸鈉的質(zhì)量g;V為滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸的用量ml;1000為換算成升單位;52.995為無(wú)水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量(1/2Na2CO3g/mol標(biāo)定方法三:準(zhǔn)確稱(chēng)取經(jīng)140干燥至恒重的無(wú)水碳酸鈉0.15-0.2克于三角瓶?jī)?nèi)溶于40ml水,加10滴溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,用配制待標(biāo)

39、定的鹽酸或硫酸溶液滴定至溶液由綠色變?yōu)榘导t色,煮沸2分鐘,冷卻,繼續(xù)滴定至溶液呈暗紅色為終點(diǎn)。同時(shí)用40ml水做空白試驗(yàn)。C=m1000/52.99(V1-V2式中C鹽酸或硫酸溶液的濃度C(HCI或C(1/2HSO,mol/Lm為無(wú)水碳酸鈉的質(zhì)量g。V1滴定所消耗鹽酸或硫酸溶液的體積ml。V2為空白所消耗鹽酸或硫酸的體積ml。52.99為無(wú)水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量(1/2Na2CO3g/mol。1000為換算成升后的單位。3.11.2.7 16%單寧稱(chēng)取16g單寧溶于水并定容至100ml。4.3ml濃硫酸。3.11.2.9 50%鉬酸鈉 50g鉬酸鈉溶于水并定容至100ml。3.11.3 協(xié)定法麥汁

40、總氮(總可溶性氮的測(cè)定;3.11.3.1 樣品的消化吸取制備好的協(xié)定法麥芽汁10.00ml,小心轉(zhuǎn)移到已干燥的凱氏燒瓶中,加入濃硫酸2ml左右,小心蒸發(fā)至近干。加入混合催化劑約10克,緩緩加入濃硫酸20ml,搖勻。在通風(fēng)廚內(nèi)文火加熱至泡沫停止發(fā)生后,大火加熱使之沸騰,待溶液清亮后,再繼續(xù)加熱20-30分鐘取下。3.11.3.2蒸餾將消化液放置使其自然冷卻后,緩緩加入不含氮的水250ml,搖勻,冷卻。向凱氏燒瓶?jī)?nèi)放入約2克鋅粒或幾塊小瓷片。連接凱氏燒瓶與蒸餾裝置,溜出管的尖端插入盛有25ml2%硼酸溶液和0.5ml溴甲酚綠混合指示劑的500ml錐形瓶中,溜出管的尖端應(yīng)在液面以下。通過(guò)加液漏斗加入

41、70ml10mol/L氫氧化鈉溶液于凱氏燒瓶中,輕輕搖勻,使內(nèi)容物混合均勻,然后加熱蒸餾,待溜出液達(dá)到180ml時(shí)停止蒸餾。3.11.3.3滴定用0.1mol/L鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定溜出液,至綠色消失轉(zhuǎn)變?yōu)榛疑珵榻K點(diǎn)。記錄消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。同時(shí)操作1,2,3步驟用25.00ml水代替麥芽汁做一不加樣品的空白試驗(yàn)。記錄消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。3.11.3.4 計(jì)算協(xié)定法麥汁總氮(總可溶性氮的計(jì)算式中W100ml協(xié)定法麥汁中總氮的毫克數(shù)(mg/100ml;V1空白試驗(yàn)滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V2樣品試驗(yàn)滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;c-鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c(

42、HCI或c (1/2H2SO4,mol/L;14氮的摩爾質(zhì)量M,g/mol。3.11.4 用單寧沉淀后,濾液中氮的測(cè)定:取100ml麥芽汁于200ml容量瓶中,加水至180-185ml,加4ml 相對(duì)密度為1.4的硫酸,混勻。置20水浴中保溫15-20分鐘。3.11.5 用磷鉬酸沉淀后,濾液中氮的測(cè)定:取100ml麥芽汁于200ml 容量瓶中,加75ml水及10ml鉬酸鈉溶液搖勻,置20水浴中保溫15-20分鐘,加10ml相對(duì)密度為1.4的硫酸,加水至刻度搖勻。立即用折疊紙過(guò)濾,重復(fù)過(guò)濾至澄三個(gè)區(qū)分中氮含量(mg/100ml分別為A、B、CA=(W-W1.200/50.1000/ A區(qū)分=A/

43、W.100%B=(W1-W2.200/50.100/ B區(qū)分=B/W.100%C=W2.200/50.100/ C區(qū)分=C/W. 100%V為取樣量(測(cè)總氮時(shí)的取樣量,ml。3.11.6 說(shuō)明:用單寧沉淀后高分子氮對(duì)溫度的變化非常敏感,最好實(shí)驗(yàn)室溫度能保持近似20.若用單寧沉淀后不能立即過(guò)濾,則在繼續(xù)操作前,應(yīng)在20放置15分鐘。在低于20時(shí),濾液能重新混濁,甚至可以形成沉淀,這沉淀不能用過(guò)濾法除去。在測(cè)定濾液的含氮量前應(yīng)充分搖勻。因此用單寧沉淀后應(yīng)立即過(guò)濾。4 麥汁的理化分析;4.1 麥汁PH值的測(cè)定4.1.1儀器 PH計(jì)4.1.2試劑 PH=4.008和PH=6.86(均為25緩沖溶液。4

44、.1.3 操作按PH計(jì)使用說(shuō)明書(shū)操作。4.2 總酸的測(cè)定4.2.1 儀器一般玻璃儀器4.2.2 試劑 1 %酚酞指示劑及0.1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液。4.2.3 操作吸取麥汁10ml于250ml三角瓶中,加90ml水,加2-3滴1%酚酞指示劑,用0.1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色。另取100ml水加2-3滴1%酚酞指示劑做空白試驗(yàn)。4.2.4 計(jì)算V=10c(V2-V1式中V100ml麥汁中消耗1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)的毫升數(shù)。c氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度,mol/L。V20.1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的消耗量,ml。V1空白試驗(yàn)消耗0.1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml

45、。10取樣量換算成100ml麥汁的系數(shù)。4.3 色度的測(cè)定按EBC比色計(jì)測(cè)定。4.4 總還原糖的測(cè)定4.4.1 儀器 50ml滴定管、250ml三角瓶、可調(diào)電爐。4.4.2.11%次甲基藍(lán)指示劑稱(chēng)取1g次甲基藍(lán)用水稀釋至100ml。4.4.2.2 30%醋酸溶液量取28.5ml冰醋酸用水稀釋至100ml。4.4.2.3 0.5%淀粉溶液稱(chēng)取0.5g于105烘2小時(shí)的可溶性淀粉,用少量水調(diào)成糊狀,再用煮沸的水稀釋至100ml。A配制稱(chēng)取硫代硫酸鈉26g或無(wú)水硫代硫酸鈉16g及0.2g無(wú)水碳酸鈉溶于1000ml水中,緩緩煮沸10分鐘,冷卻。將溶液保存于棕色具塞瓶中,放置1-2周后過(guò)濾備用。使用前進(jìn)

46、行標(biāo)定。B標(biāo)定稱(chēng)取于120烘干至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀0.15-0.2g,稱(chēng)準(zhǔn)至0.0001g。置于500ml具塞錐形瓶(或碘量瓶中,溶于25ml煮沸后冷卻的水中加2g碘化鉀及20ml4mol/L硫酸。搖勻。待碘化鉀溶解后于暗處放置10分鐘,加150ml水,用配制好待標(biāo)定的硫代硫酸鈉溶液滴定。近終點(diǎn)時(shí)加入3ml0.5%淀粉指示劑,繼續(xù)滴定至溶液由藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)榱辆G色(亮藍(lán)綠色為終點(diǎn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。按下式計(jì)算: C=m/0.04903(V2-V1式中C硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c(N a2S2O3,mol/L;m重鉻酸鉀的質(zhì)量,g;V2滴定時(shí)消耗硫代硫酸鈉溶液的體積,ml;V1空白試驗(yàn)消耗硫代硫酸鈉溶液

47、的體積,ml;0.04903重鉻酸鉀的摩爾質(zhì)量,kg/mol。A溶液稱(chēng)取34.639g結(jié)晶硫酸銅用水溶解后稀釋至500.0ml。B溶液稱(chēng)取173g酒石酸鉀鈉(N a KC4H4O6.4H2O和50g氫氧化鈉,混合后溶于水中,稀釋至500.0ml。斐林溶液的標(biāo)定:式中f斐林溶液的校正系數(shù);c-硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c(N a2S2O3,mol/L。V滴定時(shí)消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml。0.06355銅的摩爾質(zhì)量,kg/mol;0.01763斐林溶液的A溶液中銅的質(zhì)量濃度,g/ml。4.4.3 操作:4.4.3.1 吸取麥汁5.0ml用水稀釋至200ml。4.4.3.2 分別吸取斐林溶液A

48、和B溶液各5.0ml注入250三角瓶中,加10ml水稀釋,加熱使其在5分鐘內(nèi)沸騰,在沸騰狀態(tài)下,用滴定管滴入稀釋麥汁至藍(lán)色即將消失時(shí),加1-2滴次甲基藍(lán)指示劑,繼續(xù)滴定至溶液由藍(lán)色變?yōu)榧t色。5.0ml注入250ml三角瓶中,加少于預(yù)備試驗(yàn)所消耗的稀釋麥汁約1ml,加熱至沸后,加1-2滴次甲基藍(lán)指示劑,用稀釋麥汁滴定至溶液由藍(lán)色變?yōu)榧t色即為終點(diǎn)。記錄消耗稀釋麥汁的總量。4.4.4.1根據(jù)稀釋麥汁在正式測(cè)定中的用量,從附錄表查得相應(yīng)的麥芽糖量C14.4.4.2計(jì)算100ml麥汁樣品中還原糖的含量 C1=fnC0/10004.4.4.3計(jì)算每100g麥汁浸出物中還原糖的含量 C=fc0n/1000W

49、D式中C1麥汁總還原糖(以麥芽糖計(jì),g/100ml麥汁;C2麥汁總還原糖(以麥芽糖計(jì),g/100g麥汁浸出物;f斐林溶液的校正系數(shù);C0從附錄表查得麥芽糖量,mg/100ml麥汁;n麥汁的稀釋倍數(shù);W麥汁中浸出物的含量;D麥汁在20時(shí)的相對(duì)密度。操作時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制加熱時(shí)間。由沸騰至滴定完應(yīng)在3分鐘內(nèi)結(jié)束。4.5.1儀器 35ml派來(lái)克斯硬質(zhì)玻璃血清管,帶有螺紋頸口、塑料蓋、回轉(zhuǎn)震蕩器,振幅2-3cm、離心機(jī)(轉(zhuǎn)速3000、紫外分光光度計(jì)。4.5.2.16mol/L鹽酸 250ml濃鹽酸加250ml重蒸餾水;4.5.2.2異辛烷;4.5.2.3重蒸餾水。4.5.3.1取20的麥汁5ml于35ml離

50、心管內(nèi),并加入0.5ml6mol/L 鹽酸和20ml異辛烷。4.5.3.2再加入3個(gè)玻璃球,擰上帶有聚丙烯塞的蓋,并用回轉(zhuǎn)振蕩器(130轉(zhuǎn)/分鐘在20下震蕩15分鐘。4.5.3.3 以每分3000轉(zhuǎn)離心3分鐘。4.5.3.4 取離心后上層清液置于1cm石英比色皿中,在波長(zhǎng)275nm處,以5ml重蒸水代替麥汁用同樣方法作為空白,測(cè)其吸光度。(書(shū)上是直接用異辛烷做為空白,測(cè)其吸光度。4.5.4計(jì)算 C=50A275式中C麥汁樣品中苦味質(zhì)含量,BU;A275波長(zhǎng)275nm處的吸光度。4.6.1儀器及試劑:與測(cè)總氮相同。4.6.2樣品的消化吸取過(guò)濾后的麥芽汁10.00ml,小心轉(zhuǎn)移到已干燥的凱氏燒瓶中

51、,加入濃硫酸2-3ml,小心蒸發(fā)至近干。加入混合催化劑約10克,緩緩加入濃硫酸20ml,搖勻。在通風(fēng)廚內(nèi)文火加熱至泡沫停止發(fā)生后,大火加熱使之沸騰,待溶液清亮后,再繼續(xù)加熱20-30分鐘取下。4.6.3蒸餾將消化液放置使其自然冷卻后,緩緩加入不含氮的水250ml,搖勻,冷卻。向凱氏燒瓶?jī)?nèi)放入約2克鋅粒或幾塊小瓷片。連接凱氏燒瓶與蒸餾裝置,溜出管的尖端插入盛有25ml2%硼酸溶液和0.5ml溴甲酚綠混合指示劑的錐形瓶中,溜出管的尖端應(yīng)在液面以下。通過(guò)加液漏斗加入70ml10mol/L(40%氫氧化鈉溶液于凱氏燒瓶中,輕輕搖勻,使內(nèi)容物混合均勻,然后加熱蒸餾,待溜出液達(dá)到180ml時(shí)停止蒸餾。4.

52、6.4滴定用0.1mol/L鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定溜出液,至綠色消失轉(zhuǎn)變?yōu)榛疑珵榻K點(diǎn)。記錄消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。同時(shí)操作1,2,3步驟用10.00ml水代替麥汁做一不加樣品的空白試驗(yàn)。記錄消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。W=10(V2-V1C14式中W麥汁總可溶性氮(N,mg/100ml麥汁;V1空白試驗(yàn)滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;V2樣品試驗(yàn)滴定時(shí)消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;c-鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c(HCI或c(1/2H2SO4,mol/L; 14氮的摩爾質(zhì)量M,g/mol;10換算成100ml的稀釋倍數(shù)。4.7.1.1食鹽水浴 40g食鹽加100ml自來(lái)水。4.7.1.2

53、回流冷凝管。4.7.1.3總氮測(cè)定所用儀器。4.7.3.1取麥汁20ml置于500ml凱氏燒瓶,接上回流冷凝管,將燒瓶浸入食鹽水浴中直至瓶頸,加熱煮沸5h。4.7.3.2過(guò)濾,用熱水洗滌沉淀數(shù)次,每次20ml。4.7.3.3將附有沉淀的濾紙放回原燒瓶,按總氮測(cè)定中操作測(cè)定沉淀中凝結(jié)性氮的含量。4.7.3.4用 20ml蒸餾水代替樣品同樣操作對(duì)濾紙做一相應(yīng)的空白測(cè)定。4.7.4 計(jì)算可凝固性氮W(N,mg/100ml麥汁=5(V2C14-V1C14式中V2C14為毫克凝固性氮;mg/20ml;V1C14濾紙的毫克氮,mg/20ml;V2樣品測(cè)定中中和氨的標(biāo)準(zhǔn)酸液用量,ml;C-為標(biāo)準(zhǔn)酸液的摩爾濃

54、度,mol/L;V1空白測(cè)定中標(biāo)準(zhǔn)酸液的用量,ml;5為取樣量換算成100ml的系數(shù);14為氮的摩爾質(zhì)量,g/mol。用下式換算為麥汁濃度12%時(shí)凝固性氮的含量:N=12W/P式中W實(shí)際式樣凝固性氮含量,mg/100ml;P麥汁濃度,%。用比重瓶稱(chēng)其麥汁的比重按下式計(jì)算D=m2-m/m1-m式中m2密度瓶加麥汁的質(zhì)量;m密度瓶的質(zhì)量;m1密度瓶加水的質(zhì)量;D麥汁的相對(duì)密度。查比重與浸出物對(duì)照表得麥汁濃度。4.9.1儀器;高精度恒溫水浴、可見(jiàn)分光光度計(jì)、沸騰水浴。4.9.2試劑;4.9.2.1.1 10gN a2HPO4.12H2O;4.9.2.1.2 6gKH2PO4;4.9.2.1.3 0.

55、500g水合茚三酮;4.9.2.1.4 0.300g果糖。稱(chēng)取以上試劑混勻,用水溶解并稀釋至100ml,搖勻(此溶液用棕色瓶裝在冰箱內(nèi)可保存二周,PH應(yīng)為 6.6-6.8。稱(chēng)取KIO3(碘酸鉀2g溶于600ml水中,加入96%乙醇400ml,冰箱內(nèi)5保存。稱(chēng)取甘氨酸0.1072g用水溶解并定容至100.0ml,搖勻,于冰箱內(nèi)儲(chǔ)存。此溶液a-氨基氮的含量為200mg/L.4.9.2.4甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)使用液(使用時(shí)現(xiàn)配吸取甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.00ml,用水稀釋至100ml。此標(biāo)準(zhǔn)溶液的a-氨基氮含量為2mg/L。4.9.3.1樣液的制備取麥汁1.00ml用水稀釋至100ml搖勻。4.9.3.2取7支試管并編號(hào),于1、2、3管中分別加入上述稀釋過(guò)的樣液2.0ml,4號(hào)管中加入水2.0ml,5、6號(hào)管中分別加入甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)使用液2.0ml。各加入顯色劑1.00ml,搖勻,并分別放一顆玻璃球于試管口上,以避免蒸發(fā)損失,將試管放入恒溫沸水浴中準(zhǔn)確加熱16分鐘。4.9.3.3立即在20水浴