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1、雙糖殘基在肺癌組織學(xué)的檢測(cè) 關(guān)鍵詞:雙糖殘基肺癌組織學(xué)檢測(cè)一、材料和方法 1.材料選自我院近年來(lái)手術(shù)切除的肺大體標(biāo)本182 份,其中肺惡性腫瘤95例(腺癌 36例、鱗癌 40例、小細(xì)胞癌 14例、類癌 4例、惡性纖維 組織細(xì)胞瘤 1例) ;其他非肺惡性腫瘤 87 例,包括肺結(jié)核 41 例,支氣 管擴(kuò)張 12 例,肺膿腫 12 例,肺曲菌球感染 7 例,肺囊腫 7 例,肺其 他良性疾病8例。肺癌組年齡3074歲,平均51.8歲,男女性別比3 : 1; 非肺癌組年齡766歲,平均35.8歲,男女性別比1.5: 1。2.標(biāo)本常規(guī)甲醛固定石蠟包埋制片(厚 5 am),半乳糖氧化酶試劑購(gòu)自Sigma化學(xué)
2、公司(G-740010000units, Lot85H6847)。染色參照 Abulkalam 等1及Xu等2半乳糖化酶-Schiff試劑方法加以改良:(1)石蠟 切片脫蠟,置蒸溜水浸洗10min; (2) 0.1mol/L、pH7.0的磷酸鉀緩沖 液浸洗 10min; (3)用上述緩沖液配制的半乳糖氧化酶液( 100u/ml) 37C孵育45h; (4)蒸餾水洗10min (其中換2次水);(5)與Schiff 試劑反響2030min, (6)自來(lái)水沖洗10min; (7) Harris蘇木素染色 12min; (8) 1%鹽酸酒精分化數(shù)秒,然后自來(lái)水沖洗,常規(guī)脫水透明 中性樹(shù)膠封片。 鏡下
3、觀察:于胞質(zhì)、腺腔內(nèi)出現(xiàn)紅色產(chǎn)物者定為陽(yáng)性。 二、結(jié)果 195例瘤組織檢測(cè)為陽(yáng)性僅見(jiàn)于腺癌, 其陽(yáng)性率為 36.11%(13/36), 鱗癌、小細(xì)胞癌等均陰性,陽(yáng)性產(chǎn)物位于腺癌胞質(zhì)、腺腔緣及腺腔的 粘液中。2肺癌支氣管斷端檢測(cè)有意義者粘膜組織結(jié)構(gòu)完整者 85 例,陽(yáng)性 率 71.76%61/85 ,陽(yáng)性產(chǎn)物位于粘膜下腺體的胞質(zhì)及腺腔粘液中, 由數(shù)個(gè)細(xì)胞到數(shù)個(gè)腺體不等,粘膜上 皮細(xì)胞陰性。盡管鱗癌、小細(xì)胞癌等瘤組織陰性。但其支氣管斷端粘 膜下腺體為陽(yáng)性。3非肺癌病例 87 例,檢測(cè)病變肺支氣管斷端及病灶陽(yáng)性率 71.26% 62/87。陽(yáng)性產(chǎn)物位于病灶中殘存的腺體及支氣管粘膜下腺體,也 由數(shù)個(gè)細(xì)
4、胞到數(shù)個(gè)腺體不等,而粘膜上皮陰性。4.肺癌和非肺癌病變肺支氣管粘膜下腺體的陽(yáng)性率經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果X 2=0.005, P>0.9,差異無(wú)顯著性。三、討論 雙糖殘基位于末端連接唾液酸的糖鏈上,當(dāng)細(xì)胞膜上糖基轉(zhuǎn)移酶異常 或缺如時(shí)暴露, 可被半乳糖氧化酶氧化, 而與 Schiff 試劑反響生成紅色 產(chǎn)物而得以顯示。 Abulkalam 等1和 Xu 等 2等證明其表達(dá)于結(jié) 直腸癌及癌前病變的粘液中。近年李昕等 3在肺癌患者的痰液中也 檢測(cè)到雙糖殘基的表達(dá),建議為人群肺癌普查方法。我們用此方法對(duì) 肺癌組織進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)它表達(dá)于肺癌的腺癌組織陽(yáng)性率36.11%和不同組織類型的肺癌支氣管斷端的粘膜下
5、腺體 陽(yáng)性率 71.76%,而 非腺癌的瘤組織和粘膜上皮未見(jiàn)表達(dá)。但我們?cè)诜欠伟┑牟∽兎沃?管斷端及病灶中同樣發(fā)現(xiàn)有表達(dá) 陽(yáng)性率 71.26%,因而我們認(rèn)為雙糖 殘基作為肺癌的鑒定指標(biāo)應(yīng)持謹(jǐn)慎態(tài)度。參考文獻(xiàn):1 Abulkalamm,ShamsuddinMD,AlaaeldeenM,etal.ATestforDetectionofcolore ctalcancer.HumPathol,1989,19:7-10. 2 XuH,SakamotoK,ShamsuddinAM , etal.DetectionofthetumormarkerD-galactose- 3-(1 3)N-Acetyl-D-galactos amineincoloniccancerandprecancer.ArchpatholLabMed,1992,11
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