雙丹顆粒劑制備工藝的研究

1、雙丹顆粒劑制備工藝的研究    【摘要】  目的研究雙丹顆粒劑制備工藝。方法將處方中丹參、牡丹皮兩味藥進(jìn)行水提，以丹皮酚的得率作為考察指標(biāo)，采用正交實(shí)驗(yàn)，HPLC法測(cè)定丹皮酚含量，對(duì)其得率進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，優(yōu)選出最佳的提取工藝。并建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果水提工藝的最佳條件為:加藥材9倍量的水回流提取3次，1.5 h/次，丹皮酚的提取率最高。高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定丹皮酚的含量，丹皮酚在0.004 40.022 mg/ml的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r = 0. 997 61。論文論文參考網(wǎng)精密性實(shí)驗(yàn)RSD為1.4%，穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)RSD為1.81%，回收

2、率為102.158，RSD1.79%。由此證明用丹皮酚的含量可作為雙丹顆粒劑質(zhì)量部分的控制指標(biāo)。結(jié)論該工藝合理，檢測(cè)方法簡(jiǎn)便可靠，精密度高；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)符合中國(guó)藥典相關(guān)部分的規(guī)定；初步穩(wěn)定性較好。 【關(guān)鍵詞】  丹皮酚；丹參；牡丹皮；雙丹顆粒劑Abstract：ObjectiveTo study the preparation technology of Shuang Dan granules.Methods Danshen Root and Tree peony Bark of were prescription extracted by purified water. With or

3、thogonal design， the extraction rate of paeonol was used as the index. The content of paeonol was determined by HPLC, and  the quality standard was established.Results The best plan of extraction technology by purified water was decocted three times，1.5h each time， with nine times purified wate

4、r added. The extraction rate of paeonol was the highest. The content of paeonol was determined by HPLC. The linear correlation was within the range of 0.004 4 0.022 mg/ml,r=0.997 61.Precision of HPLC was well. RSD of precision test was 1.4%，and sample solution was stable. RSD of stability test was 1

5、.81%. The average recovery was 102.158，RSD1.79% .Therefore， it was proofed that the content of paeonol can regulation indexs of Danshen  Root and Tree peony Bark granule on quality. ConclusionThe technology is reasonable.The method of detection is convenient and reliable. The precision is high.

6、The quality standard is consistent with rule of related part of pharmacopeia.The primary stability is good.Key words： Paeonol；  Danshen Root；  Tree peony Bark；  Granules    雙丹顆粒劑（以下簡(jiǎn)稱雙丹）的主要成分是丹參和牡丹皮。雙丹的主要功效是治療冠心病及心絞痛，目前，以雙丹為主要成分的劑型目前在2005年版中國(guó)藥典上只有液體劑型一種，此種劑型制造技術(shù)復(fù)雜，成本高，價(jià)

7、格昂貴，攜帶不方便。顆粒劑制造工藝簡(jiǎn)單，成本低，價(jià)格便宜，攜帶方便，尤其適合小型藥廠生產(chǎn)。雙丹的主要成分為丹參，別名為血生根、赤參、血參、紅根，其為唇形科植物丹參的根及根莖；雙丹的另一種成分為牡丹皮，別名丹皮、粉丹皮、木芍藥、條丹皮、洛陽(yáng)花，其為毛茛科植物牡丹的干燥根皮13。近幾年來(lái)研究認(rèn)為，牡丹皮中主要有效成分為丹皮酚。大量藥理實(shí)驗(yàn)證明，丹皮酚具有抗炎、降壓以及對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用，牡丹皮水煎劑還具有廣譜抗菌作用。丹皮酚，又稱牡丹酚，芍藥醇，化學(xué)名為2-羥基4-甲氧基苯乙酮，是毛茛科植物牡丹根皮和蘿摩科植物徐長(zhǎng)卿干燥根或全草的主要活性成分，具有鎮(zhèn)靜、催眠、解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗菌等藥理作用?，F(xiàn)代

8、藥理研究表明，丹皮酚對(duì)心血管系統(tǒng)也有明顯的藥理作用4，5。本實(shí)驗(yàn)研究雙丹的制備工藝。1 材料與儀器    丹皮酚對(duì)照品  （中國(guó)藥品生物制品檢定所）。甲醇（色譜級(jí)）；環(huán)己烷；三氯化鐵；醋酸乙酯；95%乙醇；（試劑級(jí)）糊精；可溶性淀粉；蔗糖等。    高效液相色譜儀（日本島津公司 型號(hào)：CTO?10AS）； ZDHW 型RP?C18 色譜柱(天津市冠東科技有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE?3 000yangrong、SHB?95型循環(huán)水式多用真空泵（河南省予華儀器有限公司）；調(diào)溫電熱套（河北省黃驊市中興儀器有限公司）。2 方法

9、60;2.1 提取每次稱取丹參20 g，牡丹皮10 g置于1 000 ml的圓底燒瓶中，在電熱套上水煮回流、抽濾，然后利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)裝置，濃縮成浸膏。按照正交設(shè)計(jì)表，提取9份。 2.2   高效液相色譜雙丹含量分析所用色譜儀條件：Diamonsil C18 ( 4. 6 mm×150 mm，5 m);流動(dòng)相為甲醇?菜?(7030);檢測(cè)波長(zhǎng)274 nm;柱溫為室溫;流速0.6 ml/min。在此條件下丹皮酚與其它組分均能達(dá)到基本分離。理論板數(shù)以丹皮酚計(jì)算，不得低于3 000。稱取對(duì)照品11.0 mg置10 ml量瓶中，加適量無(wú)水甲醇溶解，回歸方程為以峰面積

10、Y為縱坐標(biāo)，對(duì)照品濃度X(g/ml)為橫坐標(biāo)，Y=471.1+124 886.363 6X，r = 0. 997 61，丹皮酚在0.0040.022 mg/ml的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。3 結(jié)果3.1  利用蒸煮法提取雙丹有效成分  每次稱取丹參20 g，牡丹皮10 g置于1 000 ml的圓底燒瓶中，在電熱套上水煮回流、抽濾，然后利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)裝置，濃縮成浸膏。按照正交設(shè)計(jì)表，提取9份。 選用L9（33）正交表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以丹皮酚得率作為考察指標(biāo)。水提因素水平安排見表1，實(shí)驗(yàn)安排及結(jié)果分析見表2。表1  因素水平（略）表2  正交實(shí)驗(yàn)L9(34)表的實(shí)驗(yàn)安

11、排及結(jié)果（略）由表2的R值結(jié)果可看出，各因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果重要性為BAC，由此可得出，水提的最佳工藝為A2B1C2，即用藥材9倍量的水，回流提取3次，1.5 h/次。第4組樣品得率最高， 其高效液相色譜圖見圖1。 3.2 高效液相色譜驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)3.2.1 線性關(guān)系從對(duì)照品溶液中分別移取0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml溶液置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別得到濃度為0.004 4，0.008 8，0.013 2，0.017 6，0.02 2 mg/ml 5個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，分別用平頭注射器吸取20 l，在上述色譜條件下作HPLC分析。峰面積為Y，對(duì)照品濃度為X

12、(g/ml)，得到回歸方程為Y=471.1+124 886.363 6X，r = 0.997 61，丹皮酚在0.004 40.022 mg/ml的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。論文參考網(wǎng)3.2.2 精密度實(shí)驗(yàn)從配制好的對(duì)照品溶液（濃度為0.22 mg/ml）中，用平頭針連續(xù)抽取5次對(duì)照品溶液，20 l/次，在上述色譜條件下，連續(xù)測(cè)量，得出峰面積，由此可求出RSD1.4%<2%，表明該HPLC色譜儀精密性較高。3.2.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取第1組樣品濃縮后的浸膏，從中抽取1 ml，放入到10 ml容量瓶中，用無(wú)水甲醇定容至刻度線，搖勻，用平頭針分別于0，2，4，6，8 h各抽取1次，在上述色譜條件下

13、，每一時(shí)間段測(cè)一次，可求出RSD1.812，說(shuō)明丹皮酚在8 h內(nèi)穩(wěn)定，不易降解。3.2.4  重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取第5組樣品制成的浸膏，從中抽取1 ml，放入到10 ml容量瓶中，用無(wú)水甲醇定容至刻度線，搖勻，用平頭針抽取20 l，在上述色譜條件下，連續(xù)用HPLC測(cè)定5次， RSD1.82，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好。 3.2.5 加樣回收率實(shí)驗(yàn)從1號(hào)，3號(hào)，5號(hào)，7號(hào)，9號(hào)樣品提取液濃縮后的浸膏中，各移取1 ml，根據(jù)上述測(cè)得的含量，計(jì)算出這5組浸膏中丹皮酚的量，將其分別放入到5個(gè)10 ml容量瓶中，再分別加入等量對(duì)照品，用無(wú)水甲醇稀釋至刻度，在上述色譜條件下，求回收率，RSD值。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

14、見表3。表3  丹皮酚加樣回收實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（略）3.3  顆粒劑的處方設(shè)計(jì)及制備稱取第4組浸膏10 g， 按稠膏淀粉糊精糖粉=1212的比例，向浸膏中加入淀粉，糊精，糖粉制成軟材。并加入適量95%乙醇，揉捏成團(tuán)，將軟材過(guò)16目篩，制成顆粒，將顆粒置于恒溫干燥箱中于60干燥，待顆粒干后稱其重量為30 g，再用16目篩進(jìn)行整粒，稱重量為19 g。3.4  顆粒劑的質(zhì)量檢測(cè)3.4.1  樣品的含量測(cè)定稱取干燥后的顆粒1份（約含丹皮酚0.134 mg），用研缽將其研成粉末，放入到10 ml容量瓶中，加適量甲醇使其溶解，再用甲醇定容至刻度線，搖勻，用平頭針吸取20 l

15、，注入到高效液相色譜儀中，在上述色譜條件下，用HPLC檢測(cè)峰面積，再用回歸方程Y=471.1+124 886.363 6X計(jì)算丹皮酚的量，最后求出顆粒劑含量3.2% 。3.4.2  性狀評(píng)價(jià) 本品為淡黃色至黃色顆粒，無(wú)吸濕、軟化、結(jié)塊、潮解現(xiàn)象。3.4.3 鑒別（參照中國(guó)藥典2005版）取顆粒劑溶液20 ml，用乙醚提取3次，10 ml/次，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)颖? ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹皮酚對(duì)照品，加丙酮制成每毫升含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。吸取上述兩種溶液各10 l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷?泊姿嵋陰?31）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以鹽酸

16、酸性三氯化鐵乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。見圖2。3.4.4  粒度（參照中國(guó)藥典2005版）除另有規(guī)定外，取供試品10 g，稱定重量，置規(guī)定的藥篩中，保持水平狀態(tài)過(guò)篩，左右往返，邊篩動(dòng)邊輕叩3 min。取不能通過(guò)1號(hào)篩和能通過(guò)5號(hào)篩的顆粒及粉末，稱定重量，計(jì)算所占百分比?？偤筒坏眠^(guò)15%。3.4.5  溶化性（參照中國(guó)藥典2005版）取供試顆粒5 g，加熱水100 ml，攪拌5 min，可溶性顆粒應(yīng)全部溶化或可允許有輕微渾濁，但不得有焦屑等異物?；鞈倚皖w粒劑應(yīng)能混懸均勻，泡騰性顆粒劑遇水時(shí)應(yīng)立即產(chǎn)生二氧化碳?xì)怏w，并呈泡騰狀。4 討論    本文主要研究雙丹的劑制備工藝。水提工藝的最佳條件為:加藥材9倍量的水回流提取3次，1.5 h/次，丹皮酚的提取率最高。HPLC法測(cè)定丹皮酚的含量，丹皮酚在0.004 40.02 2 mg/ml的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r = 0. 997 61。精密性實(shí)驗(yàn)RSD為1.4%，穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)RSD為1.81%，由此證明用丹皮酚的含量可作為雙丹質(zhì)量部分的控制指標(biāo)。工藝合理，檢測(cè)方法簡(jiǎn)便可靠，精密度高；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)符合中國(guó)藥典相關(guān)部分的規(guī)定；初步穩(wěn)定性較好?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1李以菊，孫澤玲.丹參