高效液相色譜法測定葡萄酒中檸檬酸含量

1、2009年第3期9月出版摘要運用磷酸、甲醇溶液作為流動相，采用高效液相色譜法測定了葡萄酒中檸檬酸含量，實驗結果表明，該方法有很好的線性關系，相關系數(shù)為0.9998，最低檢出濃度為0.03mg/L，加標回收率在93.8106.2，相對標準偏差RSD<3%，該方法簡便快捷、準確度高、重現(xiàn)性好。關鍵詞檸檬酸；高效液相色譜；葡萄酒Abstract A reversed-phase high performance liquid chromatographic method was introduced for determining the content of citric acids in

2、wine with phosphate and methanol solution as mobile phase.The result shows that this method takes on good linear relation ，its correlative connection is 0.9998，the lowest detection concentration is 0.03mg/L，the average recoveries ranged from 93.8%to 106.2%with the relative standard deviation is less

3、 than 3%.This method is simpleness, speediness and high veracity and good fidelity. keywordscitric acid ；high performance liquid chro-matography ；wine檸檬酸作為一種食品添加劑廣泛應用于食品加工領域，但其使用范圍是受到嚴格限制的，在葡萄酒標準中有限量要求，即干、半干、半甜葡萄酒中要求檸檬酸含量1.0g/L，甜葡萄酒中要求檸檬酸含量2.0g/L。檸檬酸的測定方法有電位滴定法、離子色譜法、阻抑動力學熒光法和高效毛細管電泳法等。本文采用高效液相色譜反相C

4、 18柱，磷酸二氫鉀溶液作流動相，測定葡萄酒中的檸檬酸，并對測試條件進行了研究，建立了一種簡便、準確的分析方法。1材料與方法流動相的配制體積濃度1%磷酸溶液的配制：準確量取磷酸10mL ，用超純水定容至1000mL 。張素娟*（國家農(nóng)副加工產(chǎn)品及白酒質量監(jiān)督檢驗中心，山西省食品質量監(jiān)督檢驗中心，太原030012）高效液相色譜法測定葡萄酒中檸檬酸含量Determination of citric acids content in wine byhigh performance liquid chromatography*張素娟，女1975年出生，2003年畢業(yè)于吉林大學分析化學專業(yè)，碩士，工程師

5、。收稿日期：2009-07-20ZHANG Su-juan *(NationalFarm Products and Liquor Quality Supervision and Inspection Center, Shanxi Province Foodstuff Quality Supervision andInspection Center ，Taiyuan 030012，China ·食品分析·食品工程FOOD ENGINEERING482009年第3期9月出版樣品本底值g/LRSD 1.000g/L檸檬酸加入量mL 測得值g/L回收率1磷酸甲醇溶液的配制：量取甲醇

6、50mL ，用體積濃度1%磷酸溶液定容至1000mL ，混勻，再經(jīng)0.45m 濾膜過濾、超聲波脫氣后備用。標準溶液的配制色譜分離柱：反相C 18（150mm ×4.6mm i.d ，5m ）；流動相：磷酸甲醇溶液；柱溫：25；流速：1.0mL/min；檢測波長：214nm ；進樣量：10L 。2結果與討論檸檬酸為弱酸，在水系流動相中易解離，需在流動相中加入一些添加劑，以改善其在非極性固定相上的分離選擇性、色譜峰的峰形和色譜峰的重復性。故本實驗選用磷酸甲醇溶液和0.02mol/L的磷酸二氫鉀溶液（pH=2.9）作流動相，測定同一標準溶液和樣品溶液進行比較，兩種流動相具有很好的分離效果，

7、并能避免樣品中的雜質干擾。但0.02mol/L的磷酸二氫鉀溶液（pH=2.9）作為流動相不僅配制時操作繁瑣、pH 稍有變化對數(shù)據(jù)的影響也很大，而且容易滋生細菌，必須每天現(xiàn)用現(xiàn)配，否則造成賭塞色譜柱，縮短柱子的壽命。而磷酸甲醇溶液作為流動相由于有甲醇的存在可抑制細菌的繁殖，能用一定的時間。因此本實驗最終選用磷酸甲醇溶液作為流動相。在最佳色譜條件下，分析檸檬酸標準溶液的保留時間為8.78min 。見圖1。圖1檸檬酸標準色譜圖將5種檸檬酸含量不同的葡萄酒樣品分別取6份平行樣，按所選色譜條件下進行測定，測得5種樣品的相對標準偏差（RSD ）；同時在分析樣品時，5種樣品平行取樣，各取10.0mL 樣品于

8、25mL 容量瓶中，分別加入1.000g/L的標準溶液2.0mL 、10mL ，以超純水定容至刻度。超出線性以外的加標溶液進行適當稀釋，再進行測定。測得5種樣品加標的回收率結果見表1。表1試樣測定的精密度與回收率實驗結果（n 6）選線性范圍中段質量濃度123456789101112t/minA /m A U（下轉第54頁）張素娟，等：高效液相色譜法測定葡萄酒中檸檬酸含量492009年第3期9月出版企業(yè)積極配合中央、地方各級政府及主管部門，切實加強監(jiān)管力度，認真貫徹落實國家新的食品安全法各項條款，建立起統(tǒng)一的、明確的、行之有效的、與國際接軌的安全質量規(guī)則標準體系和產(chǎn)品安全質量預警制度。做到企業(yè)在

9、為客戶和消費農(nóng)用化學品的生產(chǎn)、銷售企業(yè)也應建立健全農(nóng)產(chǎn)品的檔案管理制度，利用現(xiàn)代科學技術力量大力發(fā)展低濃度、低殘留的農(nóng)用化學品，始終保持與國際農(nóng)用化學品接軌。總之，果汁產(chǎn)品的安全，關系到果汁加工企業(yè)的長足發(fā)展，關系到眾多消費者的身體健康。企業(yè)要花大力氣，把好每個質量關，真正從源頭上消除不安全隱患的發(fā)生。要做到這些，要有長遠打算，不能急功近利，務必以一流的管理和技術水準作為實施產(chǎn)品安全質量強有力的后盾。參考文獻1大陶. 有機果汁安全級別最高的飲品J . 食品與健康，2005（2）：16-18.2陳敏. 梨濃縮清汁生產(chǎn)工藝研究J . 食品工程，2008（2）：40-41.（0.40mg/mL）進行

10、干擾實驗，選常見的食品添加劑苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜、雙乙酸鈉、丙酸鈣等物質在10倍濃度范圍內，在確定的色譜條件下進行標樣的測定。試驗結果表明在本實驗條件下不產(chǎn)生干擾（測定值相對偏差小于5%，即認為無干擾）。本方法按儀器的3倍噪聲計算，檸檬酸的最低檢出質量濃度為0.03mg/L。以儀器的10倍噪音計算，檸檬酸的最低定量檢出濃度為0.10mg/L。3結論本文采用高效液相色譜法測定葡萄酒中檸檬酸含量，該方法有很好的線性關系，相關系數(shù)為0.9998，其最低檢出濃度為0.03mg/L，回收率為93.8%106.2，具有簡便靈敏、準確、干擾少等優(yōu)點，可適用于葡萄酒樣品中檸檬酸的檢測分析。參考文獻1陳雪湘. 電位滴定法測定檸檬酸鈉含量J . 浙江化工，2007，9（38）：21-23.2吳玉萍，宋春滿，雷麗萍，等. 梯度淋洗離子色譜法測定煙草中的蘋果酸、檸檬酸和陰