高效液相色譜法測(cè)定葡萄酒中檸檬酸含量

1、2009年第3期9月出版摘要運(yùn)用磷酸、甲醇溶液作為流動(dòng)相，采用高效液相色譜法測(cè)定了葡萄酒中檸檬酸含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法有很好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.9998，最低檢出濃度為0.03mg/L，加標(biāo)回收率在93.8106.2，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD<3%，該方法簡(jiǎn)便快捷、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好。關(guān)鍵詞檸檬酸；高效液相色譜；葡萄酒Abstract A reversed-phase high performance liquid chromatographic method was introduced for determining the content of citric acids in

2、wine with phosphate and methanol solution as mobile phase.The result shows that this method takes on good linear relation ，its correlative connection is 0.9998，the lowest detection concentration is 0.03mg/L，the average recoveries ranged from 93.8%to 106.2%with the relative standard deviation is less

3、 than 3%.This method is simpleness, speediness and high veracity and good fidelity. keywordscitric acid ；high performance liquid chro-matography ；wine檸檬酸作為一種食品添加劑廣泛應(yīng)用于食品加工領(lǐng)域，但其使用范圍是受到嚴(yán)格限制的，在葡萄酒標(biāo)準(zhǔn)中有限量要求，即干、半干、半甜葡萄酒中要求檸檬酸含量1.0g/L，甜葡萄酒中要求檸檬酸含量2.0g/L。檸檬酸的測(cè)定方法有電位滴定法、離子色譜法、阻抑動(dòng)力學(xué)熒光法和高效毛細(xì)管電泳法等。本文采用高效液相色譜反相C

4、 18柱，磷酸二氫鉀溶液作流動(dòng)相，測(cè)定葡萄酒中的檸檬酸，并對(duì)測(cè)試條件進(jìn)行了研究，建立了一種簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的分析方法。1材料與方法流動(dòng)相的配制體積濃度1%磷酸溶液的配制：準(zhǔn)確量取磷酸10mL ，用超純水定容至1000mL 。張素娟*（國(guó)家農(nóng)副加工產(chǎn)品及白酒質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，山西省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，太原030012）高效液相色譜法測(cè)定葡萄酒中檸檬酸含量Determination of citric acids content in wine byhigh performance liquid chromatography*張素娟，女1975年出生，2003年畢業(yè)于吉林大學(xué)分析化學(xué)專(zhuān)業(yè)，碩士，工程師

5、。收稿日期：2009-07-20ZHANG Su-juan *(NationalFarm Products and Liquor Quality Supervision and Inspection Center, Shanxi Province Foodstuff Quality Supervision andInspection Center ，Taiyuan 030012，China ·食品分析·食品工程FOOD ENGINEERING482009年第3期9月出版樣品本底值g/LRSD 1.000g/L檸檬酸加入量mL 測(cè)得值g/L回收率1磷酸甲醇溶液的配制：量取甲醇

6、50mL ，用體積濃度1%磷酸溶液定容至1000mL ，混勻，再經(jīng)0.45m 濾膜過(guò)濾、超聲波脫氣后備用。標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制色譜分離柱：反相C 18（150mm ×4.6mm i.d ，5m ）；流動(dòng)相：磷酸甲醇溶液；柱溫：25；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：214nm ；進(jìn)樣量：10L 。2結(jié)果與討論檸檬酸為弱酸，在水系流動(dòng)相中易解離，需在流動(dòng)相中加入一些添加劑，以改善其在非極性固定相上的分離選擇性、色譜峰的峰形和色譜峰的重復(fù)性。故本實(shí)驗(yàn)選用磷酸甲醇溶液和0.02mol/L的磷酸二氫鉀溶液（pH=2.9）作流動(dòng)相，測(cè)定同一標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液進(jìn)行比較，兩種流動(dòng)相具有很好的分離效果，

7、并能避免樣品中的雜質(zhì)干擾。但0.02mol/L的磷酸二氫鉀溶液（pH=2.9）作為流動(dòng)相不僅配制時(shí)操作繁瑣、pH 稍有變化對(duì)數(shù)據(jù)的影響也很大，而且容易滋生細(xì)菌，必須每天現(xiàn)用現(xiàn)配，否則造成賭塞色譜柱，縮短柱子的壽命。而磷酸甲醇溶液作為流動(dòng)相由于有甲醇的存在可抑制細(xì)菌的繁殖，能用一定的時(shí)間。因此本實(shí)驗(yàn)最終選用磷酸甲醇溶液作為流動(dòng)相。在最佳色譜條件下，分析檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間為8.78min 。見(jiàn)圖1。圖1檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)色譜圖將5種檸檬酸含量不同的葡萄酒樣品分別取6份平行樣，按所選色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得5種樣品的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD ）；同時(shí)在分析樣品時(shí)，5種樣品平行取樣，各取10.0mL 樣品于

8、25mL 容量瓶中，分別加入1.000g/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0mL 、10mL ，以超純水定容至刻度。超出線性以外的加標(biāo)溶液進(jìn)行適當(dāng)稀釋?zhuān)龠M(jìn)行測(cè)定。測(cè)得5種樣品加標(biāo)的回收率結(jié)果見(jiàn)表1。表1試樣測(cè)定的精密度與回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（n 6）選線性范圍中段質(zhì)量濃度123456789101112t/minA /m A U（下轉(zhuǎn)第54頁(yè)）張素娟，等：高效液相色譜法測(cè)定葡萄酒中檸檬酸含量492009年第3期9月出版企業(yè)積極配合中央、地方各級(jí)政府及主管部門(mén)，切實(shí)加強(qiáng)監(jiān)管力度，認(rèn)真貫徹落實(shí)國(guó)家新的食品安全法各項(xiàng)條款，建立起統(tǒng)一的、明確的、行之有效的、與國(guó)際接軌的安全質(zhì)量規(guī)則標(biāo)準(zhǔn)體系和產(chǎn)品安全質(zhì)量預(yù)警制度。做到企業(yè)在

9、為客戶(hù)和消費(fèi)農(nóng)用化學(xué)品的生產(chǎn)、銷(xiāo)售企業(yè)也應(yīng)建立健全農(nóng)產(chǎn)品的檔案管理制度，利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)力量大力發(fā)展低濃度、低殘留的農(nóng)用化學(xué)品，始終保持與國(guó)際農(nóng)用化學(xué)品接軌?？傊?，果汁產(chǎn)品的安全，關(guān)系到果汁加工企業(yè)的長(zhǎng)足發(fā)展，關(guān)系到眾多消費(fèi)者的身體健康。企業(yè)要花大力氣，把好每個(gè)質(zhì)量關(guān)，真正從源頭上消除不安全隱患的發(fā)生。要做到這些，要有長(zhǎng)遠(yuǎn)打算，不能急功近利，務(wù)必以一流的管理和技術(shù)水準(zhǔn)作為實(shí)施產(chǎn)品安全質(zhì)量強(qiáng)有力的后盾。參考文獻(xiàn)1大陶. 有機(jī)果汁安全級(jí)別最高的飲品J . 食品與健康，2005（2）：16-18.2陳敏. 梨濃縮清汁生產(chǎn)工藝研究J . 食品工程，2008（2）：40-41.（0.40mg/mL）進(jìn)行

10、干擾實(shí)驗(yàn)，選常見(jiàn)的食品添加劑苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜、雙乙酸鈉、丙酸鈣等物質(zhì)在10倍濃度范圍內(nèi)，在確定的色譜條件下進(jìn)行標(biāo)樣的測(cè)定。試驗(yàn)結(jié)果表明在本實(shí)驗(yàn)條件下不產(chǎn)生干擾（測(cè)定值相對(duì)偏差小于5%，即認(rèn)為無(wú)干擾）。本方法按儀器的3倍噪聲計(jì)算，檸檬酸的最低檢出質(zhì)量濃度為0.03mg/L。以?xún)x器的10倍噪音計(jì)算，檸檬酸的最低定量檢出濃度為0.10mg/L。3結(jié)論本文采用高效液相色譜法測(cè)定葡萄酒中檸檬酸含量，該方法有很好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.9998，其最低檢出濃度為0.03mg/L，回收率為93.8%106.2，具有簡(jiǎn)便靈敏、準(zhǔn)確、干擾少等優(yōu)點(diǎn)，可適用于葡萄酒樣品中檸檬酸的檢測(cè)分析。參考文獻(xiàn)1陳雪湘. 電位滴定法測(cè)定檸檬酸鈉含量J . 浙江化工，2007，9（38）：21-23.2吳玉萍，宋春滿(mǎn)，雷麗萍，等. 梯度淋洗離子色譜法測(cè)定煙草中的蘋(píng)果酸、檸檬酸和陰