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1、影響尿生成的因素適用對象 藥學(xué)(醫(yī)藥營銷)、音樂學(xué)專業(yè) 實驗學(xué)時 2學(xué)時一、實驗?zāi)康挠^察某些因素對尿生成的影響,進一步認(rèn)識和理解尿液生成的調(diào)節(jié)。學(xué)習(xí)觀察尿生成的動物實驗方法。二、實驗原理尿的生成過程包括腎小球濾過、腎小管和集合管重吸收及分泌、排泄過程。腎小球濾過作用受濾過膜通透性、腎小球有效濾過壓和腎小球血漿流量等因素的影響。腎小管和集合管重吸收受小管液的溶質(zhì)濃度和血液中血管升壓素及腎素血管緊張素醛固酮系統(tǒng)等因素的影響。凡能影響上述各種因素者,均可影響尿的生成。三、儀器設(shè)備兔手術(shù)臺、常用手術(shù)器械、插管等。四、相關(guān)知識點1、影響尿生成的多個因素及其與血壓影響的綜合效應(yīng),進一步理解機體的整體功能調(diào)
2、節(jié)的方式。2、生物信息學(xué)在生理學(xué)的具體運用。3、臨床利尿、保水和升壓等藥物運用的機理。五、實驗步驟連接儀器裝置,調(diào)節(jié)參數(shù)將壓力換能器固定在鐵支架上,換能器的位置大致與心臟在同一水平。將動脈導(dǎo)管經(jīng)三通開關(guān)與壓力換能器正中的一個輸入接口相接,壓力換能器側(cè)管上的輸入接口與另一三通開關(guān)連接。壓力換能器的輸入信號插頭與生物信號采集處理系統(tǒng)的信號放大器輸入盒的某通道相連。用注射器通過三通開關(guān)向壓力換能器及動脈導(dǎo)管內(nèi)注滿肝素生理鹽水,排盡氣泡,然后關(guān)閉三通開關(guān)備用。將刺激電極輸入端與生物信號采集處理系統(tǒng)的刺激輸出口相連,將刺激電極輸出端與保護電極相連。(二)手術(shù)1、麻醉動物固定用20%氨基甲酸乙酯按1g/k
3、g體重的劑量耳緣靜脈緩慢注入,待動物麻醉后,取仰臥位將兔固定于兔手術(shù)臺上。2、分離頸部的神經(jīng)和血管、插頸總動脈插管,行膀胱插管術(shù)用粗剪刀剪去頸部的毛,沿正中線切開頸部皮膚,在氣管旁分離右側(cè)頸總動脈,按常規(guī)插管,并以止血鉗分離出兩側(cè)迷走神經(jīng),在其下方穿線備用。在下腹部正中線作長約4cm的切口,下端達(dá)恥骨聯(lián)合。沿腹白線切開腹壁,將膀胱移至腹外。辯認(rèn)清楚輸尿管進入膀胱背側(cè)的部位后,細(xì)心地分離出兩側(cè)輸尿管,先在靠近膀胱處穿線結(jié)扎,再在離此結(jié)扎2cm處的輸尿管近腎段下方穿過一根線。用眼科剪在管壁上剪一斜口,插入充滿生理鹽水的細(xì)塑料管,用留置的線結(jié)扎固定。再以同樣方法插好另一側(cè)輸尿管。兩側(cè)的細(xì)塑料插管可用
4、Y形管連起來。此時,可看到尿液從細(xì)塑料管中慢慢逐滴流出。本實驗亦可改為從膀胱插管導(dǎo)尿。同述輸尿管插管法,切開腹壁將膀胱移至腹壁上。先辨認(rèn)清楚膀胱和輸尿管的解剖部位,在兩側(cè)輸尿管下穿線,將膀胱翻向頭側(cè)。用絲線結(jié)扎膀胱頸部,以阻斷它與尿道的通路,然后在膀胱頂部選擇血管較少處剪一縱行小切口,插入膀胱插管,插管不要緊貼膀胱后壁而堵塞輸尿管。將切口邊緣用絲線固定在插管壁上。此時,可看到尿液從插管中緩慢逐滴流出。(三)觀察項目1、記錄尿量、血壓的正常數(shù)據(jù)2、靜脈注射生理鹽水:從耳緣靜脈迅速注入37生理鹽水20ml,記錄尿量、動脈血壓曲線的變化。靜脈注射去甲腎上腺素:從耳緣靜脈注射1:10000去甲腎上腺素
5、溶液0.5ml,記錄尿量、動脈血壓曲線的變化。靜脈注射葡萄糖與尿糖定性實驗:用尿糖試紙接取1滴尿液進行尿糖測定,然后從耳緣靜脈注射20%葡萄糖溶液5ml,記錄尿量、動脈血壓曲線的變化。在尿量明顯增多時,再用尿糖試紙接取1滴尿液進行尿糖測定。電刺激迷走神經(jīng)外周端:剪斷右側(cè)頸迷走神經(jīng),以中等強度的電壓刺激迷走神經(jīng)的外周端,使動脈血壓下降并維持在5.33-6.67kPa (40-50mmHg)水平30-60s,記錄尿量、動脈血壓曲線的變化。靜脈注射速尿:從耳緣靜脈注射速尿(5mg/kg體重),記錄尿量、動脈血壓曲線的變化。靜脈注射垂體后葉素:從耳緣靜脈注射垂體后葉素2-5U,記錄尿量、動脈血壓曲線的變化。右側(cè)頸總動脈放血:打開右側(cè)頸總動脈插管的夾子放血,使動脈血壓迅速下降至10.7kPa(80mmHg)以下,記錄尿量、動脈血壓曲線的變化。六、實驗報告要求1、正文部分按實驗報告記錄本要求書寫。2、將每個觀察項目實驗結(jié)果記錄下來。3、重點論述實驗結(jié)果的機理及實驗失敗的原因。七、思考題1、本實驗中哪些因素是通過影響腎小球濾過作用而影響尿量的?哪些因素是通過影響腎小管和集合管的重吸收作用而影響尿量的?2、注射20%葡萄糖前后為什么要做尿糖定性試驗?尿糖和尿量之間有何關(guān)系?3、動脈插管放血后與放血前比
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