柑桔黃龍病監(jiān)測(cè)方法

1、柑桔黃龍病監(jiān)測(cè)方法 試行 為標(biāo)準(zhǔn)柑桔黃龍病疫情監(jiān)測(cè)工作， 及時(shí)掌握疫情發(fā)生、 開展動(dòng)態(tài)， 特制定本方法。本方法規(guī)定了柑桔黃龍病菌監(jiān)測(cè)區(qū)域、監(jiān)測(cè)布點(diǎn)、監(jiān) 測(cè)時(shí)期、監(jiān)測(cè)方法等要求。本方法適用于我省各地柑桔黃龍病的監(jiān)測(cè)。1 監(jiān)測(cè)準(zhǔn)備 收集當(dāng)?shù)馗探?、金柑屬和枳屬植物等蕓香科植物的種植情況，柑 桔黃龍病菌發(fā)生歷史和現(xiàn)狀等有關(guān)資料； 制定簡(jiǎn)便易行的柑桔黃龍病 菌監(jiān)測(cè)方案。2 監(jiān)測(cè)區(qū)域2.1 未發(fā)生區(qū) 重點(diǎn)監(jiān)測(cè)疫情發(fā)生高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域，如：從疫情發(fā)生區(qū)調(diào)入柑桔屬、 金柑屬和枳屬等蕓香科植物的種苗及產(chǎn)品的地區(qū)， 境外柑桔屬、 金柑 屬和枳屬植物引種種植區(qū)， 柑桔屬、 金柑屬和枳屬等蕓香科植物種苗 繁育基地等高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)

2、域。主要監(jiān)測(cè)是否傳入柑桔黃龍病菌。2.2 發(fā)生區(qū)重點(diǎn)監(jiān)測(cè)發(fā)生疫情的有代表性地塊和發(fā)生邊緣區(qū)。 主要監(jiān)測(cè)多年 種植柑桔屬、 金柑屬和枳屬植物等植物， 并有柑桔黃龍病發(fā)生歷史的 地塊。監(jiān)測(cè)柑桔黃龍病的發(fā)生動(dòng)態(tài)和擴(kuò)散趨勢(shì)。3 監(jiān)測(cè)作物重點(diǎn)監(jiān)測(cè)柑桔屬、金柑屬、枳屬等蕓香科植物。4 監(jiān)測(cè)工具剪刀、取樣袋、手套、鞋套、小鑷子、熒光記錄筆、標(biāo)簽紙、記 錄表、消毒液等。5 監(jiān)測(cè)時(shí)期 在柑桔屬、金柑屬和枳屬類等苗或成年樹春、夏、秋梢轉(zhuǎn)綠后各 調(diào)查 1 次，調(diào)查時(shí)間一般為 5 月上旬至 11 月中下旬，各地可根據(jù)當(dāng) 地的氣候和柑桔屬、金柑屬和枳屬作物的生育期確定具體的調(diào)查時(shí) 間。6 監(jiān)測(cè)方法未發(fā)生區(qū)訪問(wèn)調(diào)查 向柑

3、桔屬、金柑屬和枳屬類的種苗育苗場(chǎng)和采穗圃、經(jīng)銷商、農(nóng) 技人員等相關(guān)人員詢問(wèn)有關(guān)柑桔黃龍病情況， 初步了解疫情可能發(fā)生 地點(diǎn)、時(shí)間、危害情況。對(duì)詢問(wèn)過(guò)程發(fā)現(xiàn)的柑桔黃龍病可疑性地區(qū)， 進(jìn)行深入重點(diǎn)調(diào)查， 訪問(wèn)結(jié)果填寫柑桔黃龍病田間調(diào)查記錄表 附表 1。踏查 在柑桔屬、金柑屬和枳屬果樹苗期和田間生長(zhǎng)期進(jìn)行踏查 2-3 次， 代外表積占種植面積的 50%以上。定點(diǎn)調(diào)查 在訪問(wèn)調(diào)查和踏查根底上，發(fā)現(xiàn)可疑疫情進(jìn)行定點(diǎn)調(diào)查。采用 5 點(diǎn)取樣法，每點(diǎn)隨機(jī)調(diào)查 10 株，統(tǒng)計(jì)發(fā)病株率。6.2 發(fā)生區(qū)發(fā)生區(qū)范圍監(jiān)測(cè)采取訪問(wèn)調(diào)查和踏查方法具體方法見(jiàn)和 ，發(fā)現(xiàn)可疑疫情進(jìn)行 定點(diǎn)調(diào)查，結(jié)果記入附表 1。發(fā)生區(qū)發(fā)生動(dòng)態(tài)監(jiān)

4、測(cè)采取定點(diǎn)調(diào)查法具體方法 。每縣選 5 個(gè)調(diào)查點(diǎn)，每 30 天調(diào)查 1次，整個(gè)生育期調(diào)查 3 次，每點(diǎn) 10 畝，10 畝內(nèi)采取五點(diǎn)取樣，每 樣點(diǎn)隨機(jī)調(diào)查 10 株，統(tǒng)計(jì)病株率，填寫柑桔黃龍病田間調(diào)查監(jiān)測(cè)記 錄表附表 27 疫情診斷現(xiàn)場(chǎng)診斷主要檢查新梢葉片，花期和果實(shí)。新梢葉片不能轉(zhuǎn)綠，葉片均勻 黃化，或新梢葉片轉(zhuǎn)綠后， 從主、側(cè)脈附近和葉片基部及邊緣褪綠形 成黃綠相間的斑駁狀黃化，病株開花早而多，落的多，果實(shí)小畸形， 堅(jiān)硬，著色不均勻，近果蒂局部橙紅色，其余局部青綠色，果汁少， 渣多，味酸，成熟期后仍不著色的 “青果，或著色不均勻的 “斑駁果 。 室內(nèi)鑒定經(jīng)現(xiàn)場(chǎng)檢驗(yàn)檢測(cè)， 不能確定為柑桔黃龍

5、病的， 取樣帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn) 行檢測(cè)鑒定。8 監(jiān)測(cè)記錄詳細(xì)記錄、匯總監(jiān)測(cè)區(qū)內(nèi)各調(diào)查點(diǎn)結(jié)果。監(jiān)測(cè)結(jié)果記入附表 2。 并將原始記錄表連同照片、 影像等其它資料妥善保存于縣級(jí)植物檢疫 機(jī)構(gòu)。9 監(jiān)測(cè)報(bào)告 縣級(jí)植物檢疫機(jī)構(gòu)對(duì)監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行整理匯總形成監(jiān)測(cè)報(bào)告， 并按 要求逐級(jí)報(bào)送上級(jí)植物檢疫機(jī)構(gòu)。附錄：柑桔黃龍病病原、病癥及防治措施等1 病原特征病原為 Liberobacter asiaticum,屬原核生物(prokaryote),目前還未能人工培養(yǎng)。菌體多數(shù)呈圓形、橢圓形或線形，少數(shù)呈不規(guī)那么形，大小50600X1701600nm,菌體的外部界限是膜質(zhì)結(jié)構(gòu)，厚約 1733nm,平均25nm,由三層膜 組

6、成，壁膜結(jié)構(gòu)與革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁膜構(gòu)造相似。柑桔黃龍病病原分為 3 個(gè)種，即亞洲種(Liberobacter asiaticum)、非洲種Liberobacter africanum和 美洲種Liberobacter amenicum。亞洲種引起柑桔黃龍病，非洲種引起柑桔青果 病。黃龍病主要發(fā)生在亞洲和非洲的 40多個(gè)國(guó)家，是柑桔上消滅性病害。廣東 省汕頭地區(qū)最早發(fā)生。 在我國(guó)，本病主要在南部和西南部各省柑桔產(chǎn)區(qū)蔓延為害， 摧毀了大量的柑桔園，二十世紀(jì) 30年代以后逐漸嚴(yán)重，在廣東、廣西、福建、 海南、臺(tái)灣的柑桔產(chǎn)區(qū)廣泛蔓延， 80年代以后，隨著柑桔生產(chǎn)的大開展，黃龍 病在老病區(qū)病情加重，

7、新病區(qū)不斷擴(kuò)大，至今在江西、浙江、四川、云南、貴州 和湖南等省的局部產(chǎn)區(qū)均證實(shí)有黃龍病發(fā)生。2 為害病癥柑桔樹各生長(zhǎng)期均感病，46年生開始結(jié)果的樹發(fā)病較多，苗期或十幾年以上的成年樹發(fā)病較少。該病全年均可發(fā)生，以夏梢、秋梢發(fā)病最多，其次是春 梢。春梢發(fā)病時(shí)，當(dāng)年新抽春梢能正常轉(zhuǎn)綠， 5 月份以后局部葉片主脈、側(cè)脈附 近黃化，葉肉逐漸褪綠變黃，形成黃綠相間的駁斑，葉質(zhì)硬化。夏梢或秋梢多在 8月至 10月間發(fā)病。新抽夏梢或秋梢中有一、二個(gè)梢的葉 片尚未完全轉(zhuǎn)綠時(shí)， 那么停止轉(zhuǎn)綠。 葉片在老熟過(guò)程中葉脈變黃， 葉肉由淡黃色均勻黃化，葉質(zhì)變硬。而有的葉片轉(zhuǎn)綠后變黃，出現(xiàn)黃綠相間的斑駁當(dāng)年發(fā)病的黃梢，秋末

8、葉片陸繼脫落。第二年抽出的春梢，葉片明顯變長(zhǎng)、 變小，變硬。葉肉變黃，葉片表現(xiàn)為缺鋅、缺錳的病癥，因此，黃龍病后期葉片 病癥與缺素癥不容易區(qū)別。病樹開花早而多，但花細(xì)小，畸形，所結(jié)果實(shí)小，畸形，著色不均勻，近果 蒂局部橙紅色，其余局部春綠色，稱為 紅鼻果 ，果汁少，渣多，很酸。3 寄主范圍 主要危害蕓香科的柑桔屬、金柑屬和枳屬三個(gè)屬的植物。其中蕉柑、甜橙、 年桔較感病，酸桔、檸檬較耐病，柚子也有黃龍病。用菟絲子能將此病菌傳到長(zhǎng) 春花和夾竹桃植株上，引起典型的黃龍病病癥， 說(shuō)明這兩種植物也是黃龍?jiān)闹鳌? 傳播途徑遠(yuǎn)距離傳播主要通過(guò)帶病的接穗和苗木， 而果園近距離傳病那么是帶菌的柑桔 木虱(Di

9、aphorina citri )。木虱的成蟲和高齡假設(shè)蟲(45齡)都會(huì)傳病，病原體在木 虱成蟲體內(nèi)的循回期長(zhǎng)短不一， 短的為 3 天或少于 3 天，長(zhǎng)的為 2627天。高齡 假設(shè)蟲或成蟲一旦獲得病原體后， 能終生傳病。 此病除由木虱傳播外， 也可通過(guò) 嫁接傳病， 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)， 可通過(guò)菟絲子傳到草本寄主長(zhǎng)春花上， 但是不能由汁液 摩擦和土壤傳病。5 生物學(xué)特性柑桔黃龍病亞洲種，屬于耐熱型，最適宜溫度 2832°C，病癥表現(xiàn)明顯，病 害在高溫地區(qū)流行， 傳播蟲媒為柑桔木虱， 主要分布于亞洲高溫枯燥地區(qū)。 我國(guó) 的柑桔黃龍病屬于亞洲種。 非洲種引起柑桔青果病， 屬于熱敏感型， 最適宜溫度

10、2024C，病癥表現(xiàn)明顯，病害在冷涼地區(qū)流行，傳病蟲媒為非洲木虱，主要分 布于非洲適溫高濕地區(qū)；毛里球斯島上，既有亞洲種，也有非洲種存在。6 防控措施1嚴(yán)格實(shí)行檢疫保護(hù)無(wú)病區(qū)和新區(qū)， 嚴(yán)格執(zhí)行植物檢疫制度， 禁止病區(qū)的接穗和苗木進(jìn)入新 區(qū)和無(wú)病區(qū)。疫區(qū)采取封鎖措施，盡快予以撲滅。2建立無(wú)病苗圃，培育無(wú)病苗木 無(wú)病苗圃應(yīng)選擇在無(wú)柑桔木虱發(fā)生的無(wú)病區(qū)， 并盡可能遠(yuǎn)離病柑桔園， 至少相距5公里以上，具有良好的隔離條件，最好有高山大海等自然屏障。 砧木種子用5052C熱水預(yù)浸5分鐘，再用5556C溫湯處理50分鐘，然 后播種育苗。 無(wú)病接穗的采集及處理從優(yōu)良品種的健康老樹上采種，經(jīng) 5556C熱水處理

11、后隔離種植，培育無(wú)病 的實(shí)生樹采穗。在非病區(qū)或病區(qū)中隔離的無(wú)病老果園中， 嚴(yán)格選擇無(wú)病樹作母樹采穗，接穗 用1000單位鹽酸土霉素或四環(huán)素浸泡 2小時(shí)；接穗也可用濕熱空氣 4749C處 理50分鐘。莖尖嫁接脫除病原是獲得無(wú)病接穗和培育無(wú)病苗木的好方法，比前述方法更為優(yōu)越。因?yàn)榍罢咧荒苊摮S龍病病原體，而莖尖嫁接既能脫除黃龍病病原體， 又能脫除衰退病病毒和裂皮病類病毒。3挖除病株及防治媒介昆蟲在病區(qū)及時(shí)控除病樹，集中燒毀，以消除傳染源，并適時(shí)噴藥防治傳病的柑 桔木虱。鏟除果園附近木虱的寄主和越冬場(chǎng)所，主要是果園附近的蕓香科植物， 消滅傳染中心和蟲媒是防治黃龍病發(fā)生流行的關(guān)鍵措施之一，因此，疫區(qū)要

12、抓好兩個(gè)時(shí)期：一是每年春芽萌動(dòng)前，可結(jié)合冬季清園，加噴殺蟲劑防除；二是每次 新梢抽發(fā)期，視蟲口密度情況，連噴12次殺蟲劑防治。10%吡蟲啉可濕性粉劑、 20%撲虱靈可濕性粉劑、40%氧化樂(lè)果等對(duì)柑桔木虱的成蟲、假設(shè)蟲都有很好的 防治效果。對(duì)于初發(fā)病和發(fā)病較輕的柑桔園內(nèi)病株，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)應(yīng)立即整株挖除； 發(fā)病較重的柑桔園，重病樹應(yīng)全面鏟除，同時(shí)要噴灑殺蟲劑，防治傳病蟲煤。4加強(qiáng)栽培管理通過(guò)柑桔園內(nèi)管理，如水肥管理，合理施 N、P、K，增強(qiáng)樹勢(shì)，以提高抗病 力，并創(chuàng)造園中小氣候，不利于柑桔木虱的發(fā)生、繁殖和傳播，而有利于柑桔樹 的健壯生長(zhǎng)，可以減輕黃龍病的發(fā)生和危害。有條件的果園，四周可以栽植防護(hù) 林，以減少日照和保持果園有較高的濕度，這對(duì)媒介昆蟲的遷飛有阻礙作用。柑桔黃龍病病癥附表1:柑桔黃龍病田間調(diào)查記錄表調(diào)查地點(diǎn)：調(diào)