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文檔簡介
1、第三章 細胞生物學研究方法1.細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察方法:光學顯微鏡技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)、掃描隧道顯微鏡2.細胞組分的分析方法:離心分離技術(shù) 細胞內(nèi)核酸、蛋白質(zhì)、酶、糖與脂類等的顯示方法特異蛋白抗原的定位與定性 細胞內(nèi)特異核酸的定位于定性反射自顯影技術(shù) 定量細胞化學分析技術(shù)第四章 細胞質(zhì)膜(重點:1、3題,2題可不看)1、膜脂有哪幾種基本類型?它們各自的功能?(1)基本類型:甘油磷脂、糖脂、膽固醇(2)功能:甘油磷脂不僅是生物膜的基本成分,其中的某些成分如PI等在細胞信號轉(zhuǎn)導中起重要作用鞘脂:其分子結(jié)構(gòu)與甘油磷脂非常相似,可以與甘油磷脂共同組成生物膜。膽固醇:除了作為生物膜的主要結(jié)構(gòu)成分外,還是很
2、多重要的生物活性分子的前體化合物,它還可以與發(fā)育調(diào)控的重要信號分子Hedgehog共價結(jié)合。3、 細胞表面有哪幾種常見的特化結(jié)構(gòu)?細胞紅細胞膜骨架的基本結(jié)構(gòu)與功能是什么?細胞表面特化結(jié)構(gòu)主要包括:膜骨架、鞭毛、纖毛、變形足和微絨毛,都是細胞膜與膜內(nèi)的細胞骨架纖維形成的復合結(jié)構(gòu),分別于維持細胞的形態(tài)、細胞的運動、細胞與環(huán)境的物質(zhì)交換等功能有關(guān)。第5章 物質(zhì)的跨膜運輸1、 比較載體蛋白與通道蛋白的特點。載體蛋白相當于結(jié)合在細胞質(zhì)膜上的酶,有特異性結(jié)合位點,可同特異性底物結(jié)合,一種特異性載體只轉(zhuǎn)運一種類型的分子或離子;轉(zhuǎn)運過程類似于酶酶與底物作用的飽和動力學特征;既可被底物類似物競爭性地抑制,又可被
3、某種抑制劑非競爭性抑制以及對pH有依賴性等,因此有人將載體蛋白稱為通透酶。與酶不同的是,載體蛋白對轉(zhuǎn)運的溶質(zhì)不進行任何共價修飾。通道蛋白所介導的被動運輸不需與溶質(zhì)分子結(jié)合,允許大小和帶電荷適宜的離子通過。絕大多數(shù)的通道蛋白形成有離子選擇性的、門控的跨膜通道。因為這些通道蛋白幾乎都與離子的轉(zhuǎn)運有關(guān),所以又稱離子通道。與載體蛋白相比,三個顯著特征:具有極高的轉(zhuǎn)運速率,離子通道沒有飽和值,離子通道是門控的。2、 試述胞吞作用的類型和功能。(1) 吞噬作用:是原生生物攝取食物的一種方式,其作用不僅是攝取營養(yǎng)物,主要是清除侵染機體的病原體以及衰老或凋亡的細胞,如人的巨噬細胞每天通過吞噬作用清除10的11
4、次方個衰老的血紅細胞。(2) 胞飲作用:是細胞內(nèi)吞作用從外界獲取物質(zhì)及液體的的一種類型,是細胞外的微粒通過細胞膜的內(nèi)陷包裹形成小囊泡(胞飲囊泡),并最終和溶酶體相結(jié)合并將囊泡內(nèi)部的物質(zhì)水解或者分解的過程。3、 比較胞飲作用和吞噬作用的異同。1) 胞吞泡的大小不同,胞飲泡直徑一般小于150nm,而吞噬泡直徑往往大于250nm。2) 胞飲作用是一個連續(xù)發(fā)生的過程,所有真核細胞都能通過胞飲作用連續(xù)攝入溶質(zhì)和分子;吞噬作用首先需要被吞噬物與細胞表面結(jié)合并激活細胞表面受體,是一個信號觸發(fā)過程。3) 胞飲泡的形成需要網(wǎng)格蛋白、結(jié)合素蛋白和結(jié)合蛋白等的幫助;吞噬泡的形成則需要微絲及其結(jié)合蛋白的幫助,在多細胞
5、動物體內(nèi),只有某些特化細胞具有吞噬功能。第6章 細胞的能量轉(zhuǎn)換線粒體和葉綠體1、 為什么說線粒體和葉綠體是半自主性細胞器?(1) 線粒體和葉綠體都有環(huán)狀的DNA ,都擁有合成蛋白質(zhì)的整套裝置; 2)兩者的DNA都能進行復制,但復制仍受核基因組的控制。mtDNA是由核DNA 編碼、在細胞質(zhì)中合成的。組成葉綠體的各種蛋白質(zhì)成分是由核DNA和葉綠體DNA分別編碼,只有少部分蛋白質(zhì)是由葉綠體DNA編碼的。 3)線粒體、葉綠體的生長和增殖是受核基因組和其本身的基因組兩套遺傳系統(tǒng)的共同控制,因而,它們被稱為是半自主性的細胞器。2、 線粒體DNA有什么特性?線粒體的結(jié)構(gòu)和功能?特性:半自主性、母系遺傳、異質(zhì)
6、性與純質(zhì)性、閾值效應、突變率極高結(jié)構(gòu):雙層膜內(nèi)膜和外膜組成,腔基粒和基質(zhì)外膜:與周圍細胞質(zhì)基質(zhì)分開內(nèi)膜:向內(nèi)折疊形成脊,擴大內(nèi)膜面積,分布與有氧呼吸有關(guān)酶基質(zhì):液態(tài),含有氧呼吸有關(guān)酶,少量DNA功能:線粒體是有氧呼吸的主要場所(1) 分解丙酮酸的細胞器(2) 消耗氧氣的細胞器(3) 生成水、二氧化碳的細胞器(4) 產(chǎn)生大量的ATP的細胞器(5) DNA的次要載體第7章 細胞基質(zhì)與內(nèi)膜系統(tǒng)1、試述內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的主要功能及其質(zhì)量監(jiān)控作用。功能:(1)蛋白質(zhì)的合成(糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的主要功能)(2)脂質(zhì)合成(在光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上)(3)蛋白質(zhì)的修飾與加工(4)新生多肽的折疊與組裝(5)肝細胞的解毒作用,肌質(zhì)網(wǎng)儲存與調(diào)
7、節(jié) 試試高爾基體的結(jié)構(gòu)特征及其生理功能。結(jié)構(gòu)特征:> 順面膜囊/網(wǎng)狀結(jié)構(gòu):中間多孔而連續(xù)的分支網(wǎng)狀 > 高爾基體中間膜囊:由扁平囊和管道組成形成不間隔,功能連續(xù)、完整的體系 > 高爾基體反面膜囊及反面高爾基網(wǎng)絡:蛋白分選的樞紐,蛋白包裝形成網(wǎng)格蛋白/AP包被膜泡,蛋白“晚期”修飾 功能:參與形成溶酶體;參與細胞分泌活動: 調(diào)節(jié)型分泌 組成型分泌 蛋白質(zhì)的糖基化及其修飾:進行膜的轉(zhuǎn)化功能; 將蛋白水解為活性物質(zhì)3、蛋白質(zhì)糖基化的基本類型、 蛋白質(zhì)的糖基化在糖基轉(zhuǎn)移酶(glycosyltransferase)作用下發(fā)生在ER腔面。 1)基本類型: N連接糖基化(Asn);O氧連接
8、糖基化(Ser/Thr)4、溶酶體是怎樣發(fā)生的?它有哪些基本功能?1)初級溶酶體由高爾基體分泌形成,含多種酸性水解酶。 次級溶酶體是正在進行消化作用的溶酶體,分為自噬溶酶體和異噬溶酶體。 殘體又稱后溶酶體,已失去酶活性,僅留未消化的殘渣。 2)基本功能 清除無用的生物大分子、衰老的細胞器及衰老損傷和死亡的細胞,防御功能(病原體感染刺激單核細胞分化成巨噬細胞而吞噬、消化) 作為細胞內(nèi)的消化“器官”為細胞提供營養(yǎng);分泌腺細胞中,溶酶體攝入分泌顆粒參與分泌過程的調(diào)節(jié); 參與清除贅生組織或退行性變化的細胞; 受精過程中的精子的頂體(acrosome)反應。 5、過氧化物酶體與溶酶體有哪些區(qū)別?怎樣理解
9、過氧化物酶體是異質(zhì)性的細胞器。 相同點:由一層單位膜膜包圍;為一類異質(zhì)性細胞器。 不同點: 特 征溶 酶 體微 體(過氧化物酶體)形態(tài)大小直徑0.20.5m, 無酶晶體直徑0.150.25m, 有酶晶體酶的種類酸性水解酶氧化酶類pH 值57需氧與否不需要需要功 能細胞內(nèi)消化主要與糖異生有關(guān)發(fā) 生酶在RER上合成,經(jīng)高爾基復合體出芽形成酶在細胞質(zhì)基質(zhì)中合成,經(jīng)分裂和組裝形成識別的標 志 酶酸性水解酶過氧化氫酶第8章 蛋白質(zhì)分選與膜泡運輸2、已知的膜泡運輸有哪幾種類型?各自主要功能如何? 網(wǎng)格蛋白有被小泡的運輸,負責蛋白質(zhì)從高爾基體TGN向質(zhì)膜、胞內(nèi)體或溶酶體和植物液泡運輸。從TGN區(qū)出芽并由網(wǎng)格
10、蛋白包被形成轉(zhuǎn)運泡。 COP有被小泡的運輸,負責從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基體的物質(zhì)運輸。由5種蛋白亞基組成的蛋白包被COP小泡,具有對轉(zhuǎn)運物質(zhì)的選擇性并使之濃縮。選擇性體現(xiàn)在a. COP小泡能識別并結(jié)合跨膜內(nèi)質(zhì)網(wǎng)胞質(zhì)面一端的信號序列;b. 跨膜內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白的一端作為受體與ER腔的可溶性蛋白結(jié)合。 COP有被小泡的運輸,負責回收、轉(zhuǎn)運內(nèi)質(zhì)網(wǎng)逃逸蛋白返回內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。逃逸的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白的回收是通過回收信號介導的特異性受體完成,這類受體能以COP有被小泡的形式捕獲逃逸分子,并將其回收到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。 第九章 細胞信號轉(zhuǎn)導(重點:3、4題)2、簡要比較G蛋白偶聯(lián)受體介導的信號通路有何異同。(1)激活離子通道的G蛋白偶聯(lián)受體當受
11、體與配體結(jié)合被激活后,通過偶聯(lián)G蛋白的分子開關(guān)做用,調(diào)控跨膜離子通道的開啟與關(guān)閉,進而調(diào)節(jié)靶細胞的活性,如心肌細胞的M乙酰膽堿受體和視桿細胞的光敏感受體,都屬于這類調(diào)節(jié)離子通道的G蛋白偶聯(lián)受體。(P167)(2)激活或抑制腺苷酸環(huán)化酶的G蛋白偶聯(lián)受體在絕大多數(shù)的哺乳動物細胞中,G蛋白偶聯(lián)受體介導的信號通路中,G亞基的首要效應酶是腺苷酸環(huán)化酶,通過腺苷酸環(huán)化酶活性的變化調(diào)節(jié)靶細胞內(nèi)第二信使cAMP的水平,進而影響信號通路的下游事件。(P169) (3)激活磷脂酶C,以IP3和DAG作為雙信使的G蛋白偶聯(lián)受體通過G蛋白偶聯(lián)受體介導的另一條信號通路是磷脂酰肌醇信號通路,其信號轉(zhuǎn)導是通過效應酶磷脂酶C
12、完成的。IP3刺激細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)釋放Ca+進入細胞質(zhì)基質(zhì),使胞內(nèi)Ca+濃度升高;DAG激活蛋白激酶C(PKC),活化的PKC進一步使底物蛋白磷酸化,并可激活Na+/H+交換,引起細胞內(nèi)pH升高。以磷脂酰肌醇代謝為基礎(chǔ)的信號通路的最大特點是胞外信號被膜受體接受后,同時產(chǎn)生兩個胞內(nèi)信使,分別激活兩種不同的信號通路,即IP3-Ca+和DAG-PKC途徑,實現(xiàn)細胞對外界信號的應答,因此把這種信號系統(tǒng)又稱之為“雙信使系統(tǒng)”。4、概述受體酪氨酸激酶介質(zhì)的信號通路的組成、特點及其主要功能。受體酪氨酸激酶(RTK)又稱酪氨酸蛋白激酶受體,是細胞表面一大類重要受體家族,迄今已鑒定有50余種,包括7個亞族。所有RTK
13、的N端位于細胞外,是配體結(jié)合域,C端位于胞內(nèi),具有酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域,并具有自磷酸化位點。它的胞外配體是可溶性或膜結(jié)合的多肽類或蛋白類激素,包括多種生長因子、胰島素和胰島素樣生長因子等。RTK主要功能是控制細胞生長、分化而不是調(diào)控細胞中間代謝。(P176)特點:(1)激活機制為受體之間的二聚體化自磷酸化活化自身(2)沒有特定的二級信使,要求信號有特定的結(jié)構(gòu)域(3)有Ras分子開關(guān)蛋白的參與(4)介導下游MAPK的激活(輔:P171)由RTK介導的信號通路具有廣泛的功能,包括:(1)調(diào)節(jié)細胞的增值和分化(2)促進細胞存活(3)細胞代謝的調(diào)節(jié)與校正作用(P178)第十章 細胞骨架 踏車行為 又稱輪回
14、,是微管組裝后處于動態(tài)平衡的一種現(xiàn)象。思考題:1、除支持作用和運動功能外,細胞骨架還有什么功能?怎樣理解“骨架”的概念?(輔導P198)除支持作用和運動功能外,細胞骨架還具有為物質(zhì)運輸提供軌道、參與肌肉收縮和細胞分化、介導染色體的移動和動物細胞胞質(zhì)分裂、形成細胞的特化結(jié)構(gòu)等功能??偨Y(jié):細胞骨架的成分、類型、功能。細胞骨架 是細胞內(nèi)以蛋白質(zhì)纖維為主要成分的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu),由主要的三類蛋白纖維(filamemt)構(gòu)成,包括微管、肌動蛋白纖維和中間纖維。各種纖絲都是由上千個亞基組裝成不分支的線性結(jié)構(gòu),有時交叉貫穿在整個細胞之中。成分:微絲、微管、中間纖維。微絲確定細胞表面特征、使細胞能夠運動和收縮。微管確
15、定膜性細胞器的位置、幫助染色體分離和作為膜泡運輸?shù)膶к?。中間纖維使細胞具有張力和抗剪切力。類型:細胞骨架是細胞內(nèi)以蛋白質(zhì)纖維為主要成分的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu),由主要的三類蛋白纖絲構(gòu)成:包括微管、微絲(肌動蛋白纖維)和中間纖維。功能:細胞骨架對于維持細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)及內(nèi)部結(jié)構(gòu)的有序性,以及在細胞運動,物質(zhì)運輸,能量轉(zhuǎn)換,信息傳遞和細胞分化等一系列方面起重要作用。第十一章 細胞核與染色體(重點:1、3)1、 概述細胞核的基本結(jié)構(gòu)及其主要功能?1)核被膜(包括核孔復合體):外核膜,附有核糖體顆粒;內(nèi)核膜,有特有的蛋白成份(如核纖層蛋白B受體);核纖層;核周間隙、核孔(nuclear pore)。 其功能為:構(gòu)成核
16、、質(zhì)之間的天然選擇性屏障;避免生命活動的彼此干擾;保護DNA不受細胞骨架運動所產(chǎn)生的機械力的損傷;核質(zhì)之間的物質(zhì)交換與信息交流。 2)染色質(zhì):指間期細胞核內(nèi)由DNA、組蛋白、非組蛋白及少量RNA組成的線性復合結(jié)構(gòu), 是間期細胞遺傳物質(zhì)存在的形式;染色體(chromosome),指細胞在有絲分裂或減數(shù)分裂過程中, 由染色質(zhì)聚縮而成的棒狀結(jié)構(gòu)。 染色質(zhì)與染色體是在細胞周期不同的功能階段可以相互轉(zhuǎn)變的的形態(tài)結(jié)構(gòu) 染色質(zhì)與染色體具有基本相同的化學組成,但包裝程度不同,構(gòu)象不同。3)核仁:纖維中心(fibrillar centers,FC)、致密纖維組分(dense fibrillar componen
17、t,DFC)、顆粒組分(granular component,GC)、核仁相隨染色質(zhì)(nucleolar associated chromatin)、核仁基質(zhì)((nucleolar matrix)。其功能為:核糖體的生物發(fā)生(ribosome biogenesis),包括rRNA的合成、加工和核糖體亞單位的裝配;rRNA基因轉(zhuǎn)錄;rRNA前體的加工。 4)核基質(zhì)或核骨架(nuclear skeleton):包括核基質(zhì)、核纖層(或核纖層-核孔復合體結(jié)構(gòu)體系),以及染色體骨架。; 核骨架是存在于真核細胞核內(nèi)真實的結(jié)構(gòu)體系;核骨架與核纖層、中間纖維相互連接形成貫穿于核與質(zhì)的一個獨立結(jié)構(gòu)系統(tǒng);核骨架的
18、主要成分是由非組蛋白的纖維蛋白構(gòu)成的, 含有多種蛋白成分及少量RNA;核骨架與DNA復制、基因表達及染色體的包裝與構(gòu)建有密切關(guān)系。 2、試述核孔復合體的結(jié)構(gòu)及其功能。結(jié)構(gòu):胞質(zhì)環(huán)(cytoplasmic ring)、外環(huán)、核質(zhì)環(huán)(nuclear ring)、內(nèi)環(huán)、輻(spoke)、柱狀亞單位(column subunit)、腔內(nèi)亞單位(luminal subunit)、環(huán)帶亞單位(annular subunit)、中央栓(central plug)。功能為:核質(zhì)交換的雙向性親水通道;通過核孔復合體的主動運輸;親核蛋白與核定位信號;親核蛋白入核轉(zhuǎn)運;轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA的核輸出。3、 染色質(zhì)按功能分為
19、幾類?它們的特點是什么? 常染色質(zhì)(euchromatin) 1)概念:指間期核內(nèi)染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度低, 處于伸展狀態(tài)(典型包裝率750倍), 用堿性染料染色時著色淺的那些染色質(zhì)。 2)特征:DNA包裝比約為1 0002 000分之一;單一序列 DNA 和中度重復序列DNA(如組蛋白基因和tRNA基因);并非所有基因都具有轉(zhuǎn)錄活性,常染色質(zhì)狀態(tài)只是基因轉(zhuǎn)錄的必要條件而非充分條件 異染色質(zhì)(heterochromatin) 1)概念:堿性染料染色時著色較深的染色質(zhì)組分。 2)類型:結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)(或組成型異染色質(zhì))(constitutive heterochromatin)、兼性異染色質(zhì)(fa
20、cultative heterochromatin) ;結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)或組成型異染色質(zhì),除復制期以外,在整個細胞周期均處于聚縮狀態(tài),形成多個染色中心。 3)結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)特征:在中期染色體上多定位于著絲粒區(qū)、端粒、次縊痕及染色體臂的某些節(jié)段;由相對簡單、高度重復的DNA序列構(gòu)成, 如衛(wèi)星DNA;具有顯著的遺傳惰性, 不轉(zhuǎn)錄也不編碼蛋白質(zhì);在復制行為上與常染色質(zhì)相比表現(xiàn)為晚復制早聚縮;在功能上參與染色質(zhì)高級結(jié)構(gòu)的形成,導致染色質(zhì)區(qū)間性,作為核DNA的轉(zhuǎn)座元件,引起遺傳變異。 4)兼性異染色質(zhì)特征:在某些細胞類型或一定的發(fā)育階段, 原來的常染色質(zhì)聚縮, 并喪失基因轉(zhuǎn)錄活性, 變?yōu)楫惾旧|(zhì),如X染色體隨
21、機失活;異染色質(zhì)化可能是關(guān)閉基因活性的一種途徑。 4、 組蛋白和非組蛋白如何參與表觀遺傳的調(diào)控。 組蛋白修飾主要包括甲基化、乙酰化、磷酸化等。 其參與調(diào)控的方式主要包括:1、改變空間結(jié)構(gòu),因為基因平時是以染色體形式存在的,在轉(zhuǎn)錄時需要通過組蛋白的改變打開,放轉(zhuǎn)錄因子進入;2、作用于特定轉(zhuǎn)錄元件;3、和DNA甲基化進行相互作用,來調(diào)控表達變化。 非組蛋白參與表觀調(diào)控主要就是修飾組蛋白或者甲基。 5、 試述從DNA到染色體的包裝過程。DNA為什么要包裝成染色質(zhì)? 從DNA到染色體經(jīng)過四級包裝過程: 一級結(jié)構(gòu),核小體二級結(jié)構(gòu),螺線管(solenoid)三級結(jié)構(gòu),超螺線管(supersolenoid)
22、四級結(jié)構(gòu),染色單體(chromatid) 即:DNA壓縮7倍核小體壓縮6倍螺線管壓縮40倍超螺線管壓縮5倍染色單體 經(jīng)過四級螺旋包裝形成的染色體結(jié)構(gòu),共壓縮了8400倍。6、 分析中期染色體的三種功能原件及其作用。 1)自主復制DNA序列(autonomously replicating DNA sequence, ARS):具有一段11-14bp的同源性很高的富含AT的共有序列及其上下游各200bp左右的區(qū)域是維持ARS功能所必需的。 2)著絲粒DNA序列(centromere DNA sequence,CEN) :兩個相鄰的核心區(qū),80-90bp的AT區(qū),11bp的保守區(qū)。 3)端粒DNA
23、序列(telomere DNA sequence,TEL) :端粒序列的復制,端粒酶,在生殖細胞和部分干細胞中有端粒酶活性,端粒重復序列的長度與細胞分裂次數(shù)和細胞衰老有關(guān)。7、 概述核仁的結(jié)構(gòu)及功能。 1)結(jié)構(gòu):纖維中心(fibrillar centers,FC),是rRNA基因的儲存位點;致密纖維組分(dense fibrillar component,DFC),轉(zhuǎn)錄主要發(fā)生在FC與 DFC的交界處,并加工初始轉(zhuǎn)錄本;顆粒組分(granular component,GC),負責裝配核糖體亞單位,是核糖體亞單位成熟和儲存的位點;核仁相隨染色質(zhì)(nucleolar associated chro
24、matin) 與核仁基質(zhì)((nucleolar matrix)。 2)功能:是核糖體的生物發(fā)生場所,是一個向量過程(vetorical process),即:從核仁纖維組分開始, 再向顆粒組分延續(xù)。這一過程包括rRNA的合成、加工和核糖體亞單位的裝配;rRNA基因轉(zhuǎn)錄的形態(tài)及其組織;rRNA前體的加工;核糖體亞單位的組裝。 第十二章 核糖體(重點:2、3)1、以80S核糖體為例,說明核糖體的結(jié)構(gòu)成分及其功能。 核糖體是一種沒有被膜包裹的顆粒狀結(jié)構(gòu),其主要成分:核糖體表面r蛋白質(zhì)40%,核糖體內(nèi)部rRNA60%。 80S的核糖體普遍存在于真核細胞內(nèi),由60S大亞單位與40S小亞單位組成,60S大
25、亞單位相對分子質(zhì)量為3200×103,40S小亞單位的相對分子質(zhì)量為1600×103。小亞單位中含有18S的rRNA分子,相對分子質(zhì)量為900×103,含有33種r蛋白;大亞單位中含有一個28S的rRNA分子,相對分子質(zhì)量為1600×103,還含有一個5S的rRNA分子和一個5.8S的rRNA分子,含有49種r蛋白。 核糖體大小亞單位常游離于胞質(zhì)中,只有當小亞單位與mRNA結(jié)合后大亞單位才與小亞單位結(jié)合形成完整核糖體。肽鏈合成終止后,大小亞單位解離,重又游離于胞質(zhì)中。核糖體是合成蛋白質(zhì)的細胞器,其唯一的功能是按照mRNA的指令由氨基酸高效且精確地合成多肽
26、鏈。2、已知核糖體上有哪些活性部位?它們在多肽合成中各起什么作用? 活性部位及其作用: 與mRNA的結(jié)合位點; 與新?lián)饺氲陌滨?tRNA的結(jié)合位點氨?;稽c,又稱A位點; 與延伸中的肽酰-tRNA的結(jié)合位點肽?;稽c,又稱P位點; 肽酰轉(zhuǎn)移后與即將釋放的tRNA的結(jié)合位點E位點(exit site); 與肽酰tRNA從A位點轉(zhuǎn)移到P位點有關(guān)的轉(zhuǎn)移酶(即延伸因子EF-G)的結(jié)合位點; 肽酰轉(zhuǎn)移酶的催化位點;與蛋白質(zhì)合成有關(guān)的其它起始因子、延伸因子和終止因子的結(jié)合位點。3、何謂多聚核糖體?以多聚核糖體的形式行使功能的生物學意義是什么? 1)概念:核糖體在細胞內(nèi)并不是單個獨立地執(zhí)行功能,而是由多個甚
27、至幾十個核糖體串連在一條mRNA分子上高效地進行肽鏈的合成,這種具有特殊功能與形態(tài)結(jié)構(gòu)的核糖體與mRNA的聚合體稱為多聚核糖體。 2)多聚核糖體的生物學意義: 細胞內(nèi)各種多肽的合成,不論其分子量的大小或是mRNA的長短如何,單位時間內(nèi)所合成的多肽分子數(shù)目都大體相等。2 以多聚核糖體的形式進行多肽合成,對mRNA的利用及對其濃度的調(diào)控更為經(jīng)濟和有效。 第十三章 細胞周期與細胞分裂1、 什么叫細胞周期?細胞周期各時期的主要變化是什么? 細胞周期是指分裂細胞從一次分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的時期和順序變化; 1) G1期:主要特征是合成一定數(shù)量的RNA和某些專一性的蛋白質(zhì)(觸發(fā)蛋白); 2) S
28、期:DNA復制是S期的主要特征。此外,也合成組蛋白和非組蛋白;3) G2期: 1個細胞核的DNA含量由2C變?yōu)?C;細胞在此期中要合成某些蛋白質(zhì); 4) M期:核分裂和胞質(zhì)分裂。 2、細胞周期同步化的方法有哪些?比較其優(yōu)缺點。 1) 化學同步化 (1) 將培養(yǎng)液中減少某種細胞必需的營養(yǎng)成分,過一段時間后再把該成分加進去, (2) 使用某種化學物質(zhì)將細胞暫時阻滯到有絲分裂的一定時期。消除抑制后,即可發(fā)生高度同步化的細胞分裂。 2) 物理同步化 (1) 溫度 溫度是使細胞同步化的有效手段。分裂前細胞的一些酶對溫度非常敏感,高溫可使分裂停止, 而生物合成繼續(xù)進行,因此有些細胞發(fā)生分裂的時間推遲,其它
29、后進的細胞便趁此趕上來,達到同步化狀態(tài)。 (2) 輻射 輻射也是引起細胞同步分裂的方法之一。分裂前的細胞對射線很敏感,輻射可使細胞在分裂前積累, 隨后去除輻射,細胞便在同一時間開始分裂。 (3) 有絲分裂抖落法 在哺乳動物培養(yǎng)物中還可利用有絲分裂抖落法(mitotic shaking-off) 進行分選。第十四章 細胞增殖調(diào)控與癌細胞1、 細胞周期中有哪些主要檢出點?各起什么作用? 細胞周期檢驗點主要有:R點,G1/S,G2/M,中期/后期,即:G1期中的R點或限制點,S期的DNA損傷檢驗點、DNA復制檢驗點,G2/M檢驗點,M中期至M后期又稱紡錘體組裝檢驗點等。(S期內(nèi)部檢驗點、DNA復制檢
30、驗點)通過細胞周期檢驗點的調(diào)控使細胞周期能正常動轉(zhuǎn),從而保證了遺傳物質(zhì)能精確地均等分配,產(chǎn)生具有正常遺傳性能和生理功能的子代細胞,如果上述檢驗點調(diào)控作用丟失,就會導致基因突變、重排,使細胞遺傳性能紊亂,增殖、分化異常,細胞癌變甚至死亡。2、 舉例說明CDK激酶在細胞周期中如何執(zhí)行調(diào)控功能的。 周期蛋白依賴性激酶(CDK)是與細胞周期進程相對應的一套Ser/Thr激酶系統(tǒng)。各種CDK沿細胞周期時相交替活化,磷酸化相應底物,使細胞周期事件有條不紊地進行下去。CDK1激酶通過使某些蛋白質(zhì)磷酸化,改變其下游的某些蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和啟動其功能,實現(xiàn)其調(diào)控細胞周期的目的。CDK1激酶催化底物磷酸化有一定的位點
31、特異性。它一般選擇底物中某個特定序列中的某個絲氨酸或蘇氨酸殘基。CDK1激酶可以使許多蛋白質(zhì)磷酸化,其中包括組蛋白H1,核纖層蛋白A、B、C,核仁蛋白等;組蛋白H1磷酸化,促進染色體凝集;核纖層蛋白磷酸化,促使核纖層解聚;核仁蛋白磷酸化,促使核仁解體等。3、 為什么說腫瘤的發(fā)生是基因突變逐漸積累的結(jié)果? 根據(jù)大量的病例分析,癌癥的發(fā)生一般并不是單一基因的突變,而至少在一個細胞中發(fā)生了5-6個基因突變,才能賦予癌細胞所有的特征,因此細胞基因組中產(chǎn)生與腫瘤發(fā)生相關(guān)的某一原癌基因的突變,并非馬上形成癌,而是繼續(xù)生長直至細胞群體中新的偶發(fā)突變的產(chǎn)生。某些在自然選擇中具有競爭優(yōu)勢的細胞,再經(jīng)過類似的過程
32、,逐漸形成具有癌細胞一切特征的惡性腫瘤。癌癥是一種典型的老年性疾病,它涉及一系列的原癌基因與腫瘤抑制基因的致癌突變積累。第十五章 細胞分化與胚胎發(fā)育1、 何為細胞分化?為什么說細胞分化是基因選擇性表達的結(jié)果?(重點)細胞分化:在個體發(fā)育中,為執(zhí)行特定的生理功能,由一種相同的細胞類型經(jīng)細胞分裂后逐漸在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上形成穩(wěn)定性差異,產(chǎn)生各不相同的細胞類群的過程。其本質(zhì)是基因選擇性表達的結(jié)果,即基因表達調(diào)控的結(jié)果。細胞分化是結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生差異的過程,而結(jié)構(gòu)和功能是由蛋白質(zhì)所體現(xiàn)出來的,所以細胞分化的實質(zhì)是細胞發(fā)育過程中特異蛋白質(zhì)的合成,分化的過程就是產(chǎn)生新的專一的結(jié)構(gòu)蛋白和功能蛋白的過程,如肌細
33、胞和紅細胞同是來自中胚層,后來它們在結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生分工,紅細胞合成血紅蛋白,而肌細胞合成肌動蛋白和肌球蛋白;蛋白質(zhì)又是通過承繼DNA遺傳信息的mRNA翻譯而來,所以細胞分化的實質(zhì)在于基因選擇性的表達。2、 組織特異性基因的表達是如何調(diào)控的。如果每種類型的細胞分化都需要一種基因表達調(diào)控蛋白,那么至少需要200種以上的調(diào)控蛋白,然而實際上是有限的少量調(diào)控蛋白啟動為數(shù)眾多的特異細胞類型的分化,其機制就是組合調(diào)控的方式,即每種類型的細胞分化是由多種調(diào)控蛋白共同調(diào)控完成的。這樣如果調(diào)控蛋白的數(shù)目是n,則其調(diào)控的組合在理論上就可以啟動分化的細胞類型為2n。然而在啟動細胞分化的各類調(diào)控蛋白組合中,其中往往
34、是只有一兩種調(diào)控蛋白是起決定性的因子。這樣單一調(diào)控蛋白就有可能啟動整個細胞分化過程。3、 影響細胞分化的因素有哪些?請予以說明。調(diào)控蛋白的組合是影響細胞分化的直接因素:1) 胞外信號分子對細胞分化的影響 2)細胞記憶與決定3) 受精卵細胞質(zhì)的不均一性對細胞分化的影響4) 細胞間的相互作用與位置效應,細胞間的相互作用對細胞分化器官構(gòu)建有影響,這種作用為胚胎誘導,胚胎誘導作用不斷強化可分化成不同層次;細胞所處的位置不同對細胞分化的命運有影響,改變細胞所處的位置可導致分化方向的改變。5) 環(huán)境對性別決定的影響環(huán)境因素對細胞分化可產(chǎn)生影響,特別是對性別決定的影響,并進而影響到生物的個體發(fā)育。6) 染色
35、質(zhì)變化與基因重排對細胞分化的影響。4、 什么是干細胞?它分為哪幾種類型,各類型的特征是什么?什么是腫瘤干細胞? 干細胞是指分化程度相對較低、具有不斷增殖和分化能力的細胞。 干細胞的分類:分全能、多能和單能。 全能干細胞:可以分化成人體所具有的全部細胞。 多能干細胞:已經(jīng)是發(fā)育晚期了,這種干細胞具有分化出多種細胞,組織的潛能,但卻失去了發(fā)育成完整個體的能力,發(fā)育潛能受到一定的限制。單能(專能)干細胞:只能分化成一種細胞,或者是分化成關(guān)系比較密切的兩種細胞,這叫單能干細胞。腫瘤干細胞:是指癌組織中為數(shù)不多的具有自我更新能力、分化潛能的細胞。第十六章 細胞死亡與細胞衰老1、 試述細胞凋亡的概念與形態(tài)
36、特征,并指出其與壞死的區(qū)別是什么?2、 動物細胞凋亡的基本途徑有哪些?請舉例說明。動物細胞凋亡的途徑主要分為Caspase依賴性和不依賴于Caspase的細胞凋亡。(1)Caspase依賴性細胞凋亡途徑 a. 死亡受體起始的外源途徑 b. 線粒體起始的內(nèi)源途徑 (2)Caspase非依賴性的細胞凋亡 除了Cyt C,線粒體能夠向細胞質(zhì)內(nèi)釋放多個凋亡相關(guān)因子,誘發(fā)Caspase非依賴性的細胞凋亡。例如:AIF位于線粒體外膜,被釋放至細胞質(zhì)基質(zhì)后,進而進入細胞核,引起核內(nèi)DNA凝集并斷裂形成5*104大小的片段。3、 細胞凋亡受到哪些因素的控制?細胞凋亡相關(guān)因素:細胞凋亡是一個非常復雜的過程,受到
37、機體內(nèi)、外多種因素的影響,其具體的分子機制尚不完全清楚。細胞凋亡相關(guān)因素分誘導性因素和抑制性因素兩大類。 (一)誘導性因素 (1) .激素和生長因子失衡 (2) 理化因素 射線、高溫、強酸、強堿、乙醇、抗癌藥物等,均可導致細胞凋亡。(3) 免疫性因素 在生長、分化及執(zhí)行防御、自穩(wěn)、監(jiān)視功能中,免疫細胞可釋放某些分子導致免疫細胞本身或靶細胞的凋亡。 (4)微生物學因素 (5)其他 如缺血與缺氧,神經(jīng)遞質(zhì)(如谷氨酸、多巴胺),失去基質(zhì)附著等因素 (二)抑制性因素 (1) 細胞因子 IL2、神經(jīng)生長因子等具有抑制凋亡的作用(2)某些激素 ACTH、睪丸酮、雌激素等(3)其他 某些2價金屬陽離子如Zn
38、2+第十七章 細胞社會的聯(lián)系1、 細胞通過哪些方式產(chǎn)生社會聯(lián)系? 細胞識別、細胞黏著、細胞連接、細胞通訊 2、 細胞連接有哪幾種類型?各有什么功能?分為緊密連接、錨定連接、通訊連接。緊密連接:在細胞質(zhì)上,緊密連接蛋白形成分支的鏈索條,與相鄰的細胞質(zhì)膜上的鏈索條對應結(jié)合,將細胞間隙封閉;功能:形成滲漏屏障,起重要的封閉作用;隔離作用,使游離端與基底面質(zhì)膜上的膜蛋白行使各自不同的膜功能;支持功能。錨定連接:通過中間纖維(橋粒、半橋粒)或微絲(粘著帶和粘著斑)將相鄰細胞或細胞與基質(zhì)連接在一起,以形成堅挺有序的細胞群體、組織與器官;通訊連接:包括間隙連接與化學突觸,是通過在細胞之間的代謝偶聯(lián)、信號傳導
39、等過程中起重要作用的連接方式;3、 胞外基質(zhì)的組成及生物學功能有哪些?組成:膠原、彈性蛋白、糖胺聚糖和蛋白聚糖和纖連蛋白和層粘連蛋白。膠原:a、構(gòu)成細胞外基質(zhì)的骨架結(jié)構(gòu),細胞外基質(zhì)中的其它組分通過與膠原結(jié)合形成結(jié)構(gòu)與功能的復合體;b、在不同組織中,膠原組裝成不同的纖維形式,以適應特定功能的需要;c、膠原可被膠原酶特異降解,而參入胞外基質(zhì)信號傳遞的調(diào)控網(wǎng)絡中。彈性蛋白:彈性蛋白是彈性纖維的主要成分;主要存在于脈管壁及肺。彈性纖維與膠原纖維共同存在,分別賦予組織以彈性及抗張性。糖胺聚糖和蛋白聚糖:軟骨中的蛋白聚糖是最大巨分子之一, 賦予軟骨以凝膠樣特性和抗變形能力;蛋白聚糖可視為細胞外的激素富集與
40、儲存庫,可與多種生長因子(如成纖維細胞生長因子FGF、轉(zhuǎn)化生長因子TGF等)結(jié)合,有利于激素分子進一步與細胞表面受體結(jié)合,有效完成信號的傳導。纖連蛋白和層粘連蛋白:介導細胞粘著,通過細胞信號轉(zhuǎn)導途徑調(diào)節(jié)細胞的形狀和細胞骨架的組織;促進細胞鋪展;在胚胎發(fā)生過程中,纖粘連蛋白對于許多類型細胞的遷移和分化是必須的;在創(chuàng)傷修復中,纖粘連蛋白促進巨噬細胞和其它免疫細胞遷移到受損部位;在血凝塊形成中,纖粘連蛋白促進血小板附著于血管受損部位。名詞解釋1、脂筏模型lipid rafts model:該模型認為在甘油磷脂維生物膜的主體上,膽固醇、鞘磷脂等富集區(qū)域形成相對有序的脂相,如同漂浮在脂雙層上的“脂 筏”
41、一樣載著某些特定生物學功能的各種膜蛋白。P55 在生物膜上膽固醇富集而形成有序脂相,如同脂筏一樣載著各種蛋白.脂 筏是質(zhì)膜上富含膽固醇和鞘磷脂的微結(jié)構(gòu)域。大小約70nm左右,是一種動態(tài)結(jié)構(gòu),位于質(zhì)膜的外小頁。 2、蛋白protein,:蛋白能調(diào)節(jié)細胞周期和避免細胞癌變發(fā)生。p53 3、界限Hayflick limitation Hayflick:細胞停止分裂是由細胞自身因素決定的,與環(huán)境條件無關(guān),正常細胞具有有限分裂次數(shù),而癌細胞能夠在體外無限增殖。 P356細胞,至少是培養(yǎng)的二倍體細胞,不是不死的,而是有一定的壽命;它們的增殖能力不是無 限的,而是有一定的界限,這就是 Hayflick 界線
42、。4、細胞系cell line:原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右就不易傳下去,細胞生長出現(xiàn)停滯, 大部分細胞衰老死亡,但有極少數(shù)細胞可能渡過 “危機” 而傳下去。 這些存活的細胞一般又可順利地傳 40-50 代次, 并且仍保持原來染色體的二倍數(shù) 量及接觸抑制的行為。P43 5、核定位信號Nuclear localization signal (NLS):親核蛋白一般都含有特殊的氨 基酸序列, 這些內(nèi)含的特殊短肽保證了整個蛋白質(zhì)能夠通過核孔復合體被轉(zhuǎn)運到 細胞核內(nèi),這段具有“定向” “定位”作用的序列被命名為核定位信號。P232 6、細胞程序性死亡programmed cell death (P
43、CD):無論是單細胞生物還是多細胞 生物,細胞死亡往往受細胞內(nèi)由遺傳機制決定的“死亡程序”控制,要求特定基 因表達,是“主動”而非“被動”的過程。P341 7、生物膜biomembrane:真核生物內(nèi)部存在由膜圍繞構(gòu)建的各種細胞器。細胞 內(nèi)的膜系統(tǒng)和細胞質(zhì)膜統(tǒng)稱為生物膜。P54 8、第二信使Second messenger;:是指在胞內(nèi)產(chǎn)生的非蛋白類小分子,通過其濃 度變化(增加或減少)應答胞外信號與細胞表面受體的結(jié)合,調(diào)節(jié)細胞內(nèi)酶和非 酶蛋白的活性,從而在細胞信號轉(zhuǎn)到途徑中行使攜帶和放大信號的功能。P160 9、蛋白Ras protein Ras:在許多真核細胞中,Ras 蛋白在 RTK 介
44、導的信號通路 中也是一種關(guān)鍵組分。Ras 蛋白是 ras 基因表達產(chǎn)物,是由190個氨基酸殘基組 成的小的單體 GTP 結(jié)合蛋白,具有 GTPase 活性,分布于質(zhì)膜胞質(zhì)一側(cè),結(jié)合 GTP 時為活性態(tài),而結(jié)合 GDP 時為失活狀態(tài),是 GTPase 的開關(guān)蛋白。P177 10、氧化磷酸化oxidative phosphorylation:在活細胞中伴隨著呼吸鏈的氧化過程 所發(fā)生的能量轉(zhuǎn)換和ATP的形成。P90 11、內(nèi)膜系統(tǒng)endomembrane system:是指在結(jié)構(gòu)、功能乃至發(fā)生上相互關(guān)聯(lián)、 由單層膜包被的細胞器或細胞結(jié)構(gòu)。主要包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、胞內(nèi)體和分泌泡等。P112
45、12、Na+-K+泵K+, Na+-ATPase: 位于動物細胞的質(zhì)膜上,由 2 個 和 2 個 亞 基組成四聚體, 亞基是糖基化的多肽,并不直接參與離子跨膜轉(zhuǎn)運,但幫助 在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)新合成的 亞基進行折疊。P74 13、端粒學說telomere theory:由Olovnikov提出,認為細胞在每次分裂過程中都會由于DNA聚合酶功能障礙而不能完全復制它們的染色體,因此最后復制DNA序列可能會丟失,最終造成細胞衰老死亡。14、蛋白質(zhì)分選Protein Sorting:真核細胞中除線粒體和植物細胞葉綠體中能合 成少量蛋白質(zhì)外,絕大數(shù)蛋白質(zhì)都是核基因編碼,或在游離核糖體上合成,或在 粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜集合核
46、糖體上合成。然而,蛋白質(zhì)發(fā)揮機構(gòu)或功能作用的部位幾乎 遍布細胞的各種區(qū)間或組分。 因此必然存在不同的機制以確保蛋白質(zhì)的分選,轉(zhuǎn) 運至細胞的特定部位, 也只有蛋白質(zhì)各就各位并組裝成結(jié)構(gòu)與功能的復合體,才 能參與實現(xiàn)細胞的各種活動。P138 15、黏著斑focal adhesion:是細胞與胞外基質(zhì)之間的連接方式,參與的細胞骨架 組分是微絲, 跨膜黏附性蛋白質(zhì)是整聯(lián)蛋白質(zhì), 胞外基質(zhì)主要是膠原和纖連蛋白, 胞內(nèi)錨定蛋白有 蛋白、 - 肌動蛋白、細絲蛋白和紐蛋白等。P363 16、干細胞Stem cells:是機體中能進行自我更新(產(chǎn)生與自身相同的子代細胞)和多分化潛能(分化成不同細胞類型)并具有形
47、成克隆能力的一類細胞。P322 17、微管組織中心Microtubule organizing centers (MTOC):微管的體外組裝可以 分為成核和延伸兩個階段。在活細胞內(nèi),能夠起始微管的成核作用,并使之延伸 的細胞結(jié)構(gòu)稱為微管組織中心。P209 18、端粒Telomere;:是染色體兩個端部特化結(jié)構(gòu)。端粒通常由富含鳥嘌呤核苷酸 (G) 的短的串聯(lián)重復序列 DNA 組成 (TEL DNA) 伸展到染色體的 3 端。 P254. 19、原癌基因Proto-Oncogenes:是在正常細胞基因組中對細胞生命活動起主要 調(diào)控基因作用的基因, 這些基因一旦發(fā)生突變或被異常激活,可使細胞發(fā)生惡性
48、 轉(zhuǎn)化。P312 20、整聯(lián)蛋白integrin:普遍存在于脊椎動物細胞表面,屬于異親型結(jié)合、Ca+ 或 Mg+依賴性的細胞黏著性分子,主要介導細胞與胞外基質(zhì)的黏著。P371 21、細胞外基質(zhì)Extracellular matrix:多細胞生物的組成除了細胞之外,還包括 由細胞分泌的蛋白質(zhì)和多糖所構(gòu)成的細胞外基質(zhì), 細胞外基質(zhì)在結(jié)締組織中含量 最為豐富, 主要由成纖維細胞所分泌形成的復雜的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu),占據(jù)結(jié)締組織的大 部分外空間。P372 22、G 蛋白偶聯(lián)受體G protein-coupled receptor;:是細胞表面受體中最大家族,普 遍存在于各類真核細胞表面, 根據(jù)其偶聯(lián)效應蛋白的不同, 介導不同的信號通路。 P159 23、泛素化途徑ubiquitination pathway:在真核細胞的細胞質(zhì)機制中,有一種識別 并降解錯誤折疊或不穩(wěn)定蛋白質(zhì)的機制, 即泛素化和蛋白酶體所介導的蛋白質(zhì)降 解途徑。P115 24、管家基因Hous
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