潔凈室(區(qū))沉降菌檢測標準操作規(guī)程

1、名稱：潔凈室（區(qū)）沉降菌測試標準操作規(guī)程共 6 頁編號：SOP-QC-002版本號：00起草:日期：變更原因：審核:日期：批準:日期：執(zhí)行日期：頒發(fā)部門：質(zhì)量保證部分發(fā)部門：質(zhì)量總監(jiān)、質(zhì)量保證部、質(zhì)量控制部目的 制定標準的潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法，指導沉降菌的測試工作。范圍適用于潔凈室（區(qū)）沉降菌的測定和驗證。責任QC微生物室檢驗員負責潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試，QC主管和QA部門負責對測試的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。程序1. 定義 1.1. 菌落：微生物培養(yǎng)后，由一個或幾個微生物繁殖而形成的微生物集落，簡稱CFU。1.2. 沉降菌：通過自然沉降原理收集在空氣中的活微生物粒子，通過專用的培養(yǎng)基，在適

2、宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落數(shù)。1.3. 動態(tài)測試：潔凈室（區(qū)）已處于正常生產(chǎn)狀態(tài)設備在指定的方式下進行，并且有指定的人員按照規(guī)范操作的狀態(tài)。2. 測試方法2.1. 測試過程2.1.1. 設備和培養(yǎng)基：恒溫培養(yǎng)箱、購買預灌裝TSA平皿或者自制TSA平皿。2.2. 測試條件2.2.1. 潔凈室（區(qū)）的溫度和相對濕度應與其生產(chǎn)及工藝要求相適應（無特殊要求時，溫度在1826，相對濕度在45%65%為宜）。2.2.2. 風速、壓差應在合格范圍內(nèi)。2.2.3. 動態(tài)測試。2.3. 測試方法2.3.1. 將準備好的培養(yǎng)皿按采樣點要求放置或放在沉降架上（約1.0m）。將采樣臺面取樣位置或采樣輔助設施表面消

3、毒，打開培養(yǎng)皿，將培養(yǎng)皿蓋置于已消毒位置，將培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)皿蓋上，使培養(yǎng)基表面充分暴露后，將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。2.3.2. 在每一只培養(yǎng)皿上標記好具體的取樣位置及取樣日期，將所有培養(yǎng)皿在QC微生物室進行培養(yǎng)觀察。2.4. 培養(yǎng)觀察計數(shù)2.4.1. 全部采樣結束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在2025培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天，3035培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2天后觀察計數(shù)。2.4.2. 每批培養(yǎng)基應有陰性對照試驗，檢驗培養(yǎng)基本身是否污染?？擅看芜x定2只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。2.5. 計算2.5.1. 平均菌落數(shù)= M11號培養(yǎng)皿菌落數(shù)M22號培養(yǎng)皿菌落數(shù)Mnn號培養(yǎng)皿菌落數(shù)n培養(yǎng)皿總數(shù)2.5.2. 結果判定2.

4、5.2.1. 最終結果采用平均值。但每個碟的菌落數(shù)亦不得多于標準規(guī)定。2.5.2.2. 如有一個碟的菌落數(shù)超過標準規(guī)定，平均卻符合規(guī)定，也以不合格論。2.5.2.3. 靜態(tài)測試時，若某潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)超過評定標準，則必須對此區(qū)域先進行消毒，然后重新采樣兩次，測試結果均須合格。2.6. 注意事項2.6.1. 若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數(shù)。2.6.2. 采取一切措施防止人為因素對樣本的污染。2.6.3. 由于細菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，

5、必要時用顯微鏡鑒別。2.6.4. 采樣前應仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應剔除。2.6.5. 對于沉降菌測試，符合最少采樣點數(shù)時，還必須符合最小培養(yǎng)皿數(shù)。最少采樣點數(shù)與最少培養(yǎng)皿見附表。2.7. 日常監(jiān)控2.7.1. 對于沉降菌的監(jiān)控，宜設定糾偏限和警戒限 ，以保證潔凈室（區(qū)）的微生物濃度受到控制。應定期檢測以檢查微生物負荷以及消毒劑的效力，并做趨勢分析。靜態(tài)動態(tài)監(jiān)控都可以采用此方法。2.7.2. 對于沉降菌的取樣頻次。如果出現(xiàn)下列情況應考慮修改，在評估以下情況后，也應確定其他項目的檢測頻次：2.7.2.1. 連續(xù)超過糾偏限和警戒限2.7.2.2. 停工時間比預計長2.7.

6、2.3. 關鍵區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)污染存在2.7.2.4. 在生產(chǎn)期間，空氣凈化系統(tǒng)進行任何重大的維修2.7.2.5. 日常操作記錄反映出傾向性的數(shù)據(jù)2.7.2.6. 消毒規(guī)程的改變2.7.2.7. 引起生物污染的事故等2.7.2.8. 當生產(chǎn)設備有重大維修或增加設備時2.7.2.9. 當潔凈室（區(qū)）結構或區(qū)域分布有重大變動時2.8. 潔凈車間采樣點分布圖詳見潔凈區(qū)潔凈度監(jiān)控管理規(guī)程。2.9. 微生物實驗室采樣點分布圖詳見微生物實驗室環(huán)境測試規(guī)程。相關文件和記錄序號文件/記錄名稱文件/記錄編號備注1沉降菌測試記錄SOP-QC-002a-002潔凈區(qū)潔凈度監(jiān)控管理規(guī)程SMP-QA-0153微生物實驗室環(huán)境

7、測試規(guī)程SMP-QA-031變更 /修訂記錄：原版本生效日期本次變更/修訂的原因、依據(jù)及詳細變更內(nèi)容附圖： 最少采樣點數(shù)目面 積m2潔 凈 度 級 別A級 C級D級< 10232210< 2042220< 4082240< 1001642100< 20040103200< 40080206400< 100016040131000< 200040010032200080020063注：對于A級的單向流潔凈室（區(qū)），包括A級工作臺，面積指的是送風口的表面積。對于C級以上的非單向流潔凈室（區(qū)），面積指的是指房間面積。沉降菌測試記錄編號：SOP-QC-002a-00 測試人： 測試日期： 測試時間： 測試依據(jù)： 測試級別： 級 生化培養(yǎng)箱型號： 編號：_有效期至：_霉菌培養(yǎng)箱型號：_編號：_有效期至：_培養(yǎng)基批號 ： 來源： 有效