基因工程第二節(jié)導學案

1、專題 1 基因工程 第二節(jié)基因工程的基本操作程序 設計者： 審核：高二生物備課組 課型：新授課 課時： 2 課時 學習冃標 簡述基因工程原理及基木操作程序。重、難點 學習過程一、目的基因的獲?。?. 冃的基因：符合人們需要的，編碼蛋白質(zhì)的 02. 獲取目的基因的方法(1) 從基因文庫中獲取目的基因 基因文庫：將含冇某種生物不同基因的許多 ，導入受體菌的群體中，各個受體菌分別含有這種生物的不同棊因，稱為基因文庫?；蚪M文庫：含有一種牛物的 基因 種類 f I cD"A 文庫：含有一種牛物的 基因(2) 利用PCR技術擴增忖的基因。 PCR是一項在生物體外特定DNA片段的核酸合成技術。

2、條件：已知目的基因的 序列。 過程：冃的基因 DNA受熱形成,與 結合，然后在 的作用下進行延伸形成 DNAo 方式：指數(shù)擴增二 25 為擴增循環(huán)的次數(shù))( 3) 人工合成法：基因較小，核廿酸序列己知，可以人 T 合成。即時訓練 1利用mRNA反轉(zhuǎn)錄形成從受體細胞小提取利用dnA專錄A. B. 二、基因表達載體的構建1. 表達載體的組成： 目的基因 + 卜?列屬于獲取 H 的基因的方法的是()2. 鞭 動基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生 mRNAo終止了：位于基因的標記基因： 3.4. 從基因組文庫屮提取利用PCF技術人工合成C. D.+標記基因等。啟動子：位于基因的, 它是 和結合的部位， , 終止 受休細胞是

3、否含有目的基因。表達載體的功能：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且 代；同時使冃的基因 和發(fā)揮作用。即時訓練 2 卜列哪項不是基因表達載體的組成部分() A. 啟動子 B. 終止密碼C. 標記基因三、將目的基因?qū)胧荏w細胞5.給下一D. 目的基因基因進人受體細胞內(nèi)，并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和轉(zhuǎn)化：冃的 的過程。(二) 方法1. 將目的基因?qū)胫参锛毎r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 農(nóng)桿菌特點：易感染 植物和裸了植物，對 植物沒冇感染力；Ti質(zhì)粒的 可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上。 轉(zhuǎn)化：目的基因插人 進入農(nóng)桿菌一導入植物細胞一冃的基因整合到植物細胞染色體上一目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。(

4、2) 基因槍法：是單了葉植物中常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法，但是成本較高。(3) 花粉管通道法2將目的基因?qū)雱游锛毎?1) 方法：注射技術。(2) 操作程序：目的基因表達載體 一取卵(受精卵)一顯微注射一注射了目的基因的受精卵移植到一性動物的 內(nèi)發(fā)育一新性狀動物。3. 將F1的基因?qū)宋⑸锛毎?1) 原核生物特點：繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)和對較少等。(2) 大腸桿菌最常用的轉(zhuǎn)化方法是： 處理細胞一 細胞一表達載體與感受態(tài)細胞混合一 細胞吸收DNA分了。即時訓練3下列哪項不是將冃的基因?qū)胫参锛毎姆椒?)A.基因槍法B.顯微注射法C.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.花粉管通道法四、目的基因的檢測與鑒定1.

5、檢測(1) 方法：DNA分了雜交技術、抗原抗體分了雜交方法。(2) 內(nèi)容 檢測轉(zhuǎn)基因牛物染色體的 DNA是否插入o 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄 0 檢測目的基因是否翻譯成 o2. 鑒定：鑒定、抗病鑒定等。當堂檢測1.下圖是利用基因工程技術生產(chǎn)人胰島素的操作過程示意圖，請據(jù)圖作答。D(1) ?過程如果使用人的肝細胞，則不能成功，原因是(2) 過程必需的酶是 酶，過程必需的酶是 酶(3) 在利用AB獲得C的過程中，必須用 切割A和B,使它們產(chǎn)生 , 再加入 ，才可形成 C。(4) 為使過程更易進行，可用 (藥劑)處理Do2、科沖家通過基因工程，培育岀能抗棉鈴蟲的棉花植株抗蟲棉，其過程人致如圖所示J組轉(zhuǎn)化

6、的堀贈AB侵染C C過程的培養(yǎng)基因除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入(4)如果利用DM分子朵交原理對再生植物進行檢測，D過程應該用_4、在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗基因(kan2)常作為標記基因，只有含卡那霉 素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上牛長。下圖為獲得抗蟲棉的技術流程。離體棉花葉片紐織a點為目的基因與 質(zhì)粒A的結合點。工程苗0令成人生長索的RNABt毒蛋白基因*十壤農(nóng)桿菌 呂入培養(yǎng)選心竺空空抗蟲基閃含kan質(zhì)粒構建蘇云金芽 抱桿菌轉(zhuǎn)人(1)細菌的基因Z所以能在棉花細胞內(nèi)表達，產(chǎn)生抗性，其原因是 3.科學家將人的生長素棊因與大腸桿菌的DNA分了進行重組，并成功地在大

7、腸桿菌中得以表達。過程如右圖據(jù)圖回答：(1)人的皋因Z所以能與大腸桿菌的DNA分了進行重 組，原因是,過程表示的是米取方法來獲取冃的基因。T-圖中(3)過程用人工方法，使體外重組的 DNA分子 轉(zhuǎn) 移到受體細胞內(nèi)，主要是借鑒細菌或病毒 細胞的途徑。一般將受體大腸桿菌用 處理使細胞處于能的生理狀態(tài)，這種細胞稱為細胞，再將表達載體溶于緩沖液中與混合，在一定的溫度下完成轉(zhuǎn)化。 如杲把己經(jīng)導入了普通質(zhì)粒 A或重組質(zhì)粒的大腸桿菌，放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培 養(yǎng),發(fā)生的現(xiàn)象是 Ti質(zhì)粒槍測*師選的壞濮銃性穗因込構建基因F“表達載體植株細胞!/ LI K tttAJC 人的 站亠生艮倉就IM1感染抗氛節(jié)育請據(jù)圖回答：(1) A過程需要的酶有(2) B過程及其結果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運載體必須具備的兩個條件是愈傷組織誘導選擇再住柚:株- 分化D轉(zhuǎn)松抗蟲植株沽電纟I質(zhì)粒上述過程中，將目的基因?qū)朊藁毎麅?nèi)使用 的方法是0目的基因能否在棉株體內(nèi)穩(wěn)定維持和表達其遺傳特性的關鍵是H的基因是否插入到受體細胞染色體DNA上,