醫(yī)學專題—第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗課件

1、醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗第一章 血液學一般(ybn)檢驗第五節(jié) 血栓與止血(zh xu)一般檢驗第一頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗第五節(jié) 血栓與止血(zh xu)一般檢驗內內 容容 概述概述 一、出血時間測定一、出血時間測定 二、凝血酶原時間測定二、凝血酶原時間測定 三、血漿活化部分凝血活酶時間三、血漿活化部分凝血活酶時間 四、血漿凝血酶時間四、血漿凝血酶時間 五、血漿纖維蛋白原測定五、血漿纖維蛋白原測定 六、血漿纖維蛋白（原）降解產物測定六、血漿纖維蛋白（原）降解產物測定 七、血漿七、血漿D-二聚體測定二聚體測定 八、八、出凝血檢查出凝血檢查(jinch)的臨床

2、應用的臨床應用第二頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗概述(i sh)凝血機制凝血機制(jzh)(jzh)第三頁，共四十九頁。4醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗概述(i sh)凝血與纖溶的關系凝血與纖溶的關系(gun x)(gun x)第四頁，共四十九頁。2022-3-8醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗概述(i sh)出凝血障礙出凝血障礙(zhng i)的因素的因素第五頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗定義(dngy) 出血(ch xi)時間（bleeding time，BT）是指在特定條件下，皮膚小血管被刺破后，血液自行流出到自然停止的時間稱為出血時間。一、

3、出血(ch xi)時間測定第六頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（一）（一）TBT法法 1TBT （template bleeding time ） 原理 使用出血時間測定器在受檢者前臂皮膚上造成一個標準切口，記錄血液自行流出到自然(zrn)停止所需要的時間，即為出血時間（BT）。 2主要器材 血壓計、出血時間測定器、秒表。 3簡要操作 加壓 消毒皮膚造成切口計時。一、出血時間(shjin)測定第七頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（二）質量保證（二）質量保證 1減少藥物的影響 檢測前1周內不能服用抗血小板藥物（如阿司匹林等），以免影響結果。 2選擇合適的測定器

4、 不同年齡應該選擇不同類型的出血時間測定器。新生兒型：切口(qi ku)為0.5mm2.5 mm。兒童型：切口為1.0mm3.5 mm。成人型：切口為1.0mm5.0 mm。一、出血時間(shjin)測定第八頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（二）質量保證（二）質量保證 3注意溫度的影響 應在25左右的室內進行，以保證穿刺部位溫度恒定。 4選擇正確穿刺部位 穿刺時應避開淺表靜脈、疤痕、水腫和潰瘍等處皮膚。 5避免接觸和擠壓傷口(shngku) 血液應自行流出，采用濾紙吸去流出的血液時，應避免與傷口接觸，更不能擠壓傷口。一、出血時間(shjin)測定第九頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第

5、五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（三）方法學評價（三）方法學評價(pngji)方法方法評價評價TBT法使用標準的出血時間測定器，能夠使皮膚切口的深度、長度相對恒定，重復性好、靈敏度高，是目前推薦的方法Ivy法傳統(tǒng)方法，雖然在上臂施加了固定的壓力，但因直接使用刺血刀作皮膚切口，切口深度和長度仍未能達到標準化，靈敏度較差，已趨向淘汰Duke法 傳統(tǒng)方法，操作簡單，但穿刺深度、長度難以標準化，靈敏度差，已淘汰一、出血時間(shjin)測定第十頁，共四十九頁。11醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗參考參考(cnko)區(qū)間及臨床意義區(qū)間及臨床意義（四）參考區(qū)間（四）參考區(qū)間TBT：（6.92.1）分鐘。（五）臨

6、床意義（五）臨床意義1BT延長(ynchng)主要涉及血小板和血管壁的一期止血缺陷。見于：血小板數(shù)量異常，如血小板減少癥、原發(fā)性血小板增多癥。血小板功能缺陷，如血小板無力癥、巨大血小板綜合征。某些凝血因子缺乏，如血管性血友?。╲WD）、低（無）纖維蛋白原血癥和DIC。2BT縮短主要見于某些嚴重的血栓性疾病。一、出血(ch xi)時間測定第十一頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗定義定義(dngy) 凝血酶原時間（prothrombin time， PT）是在體外模擬體內外源性凝血的全部條件，從加入組織因子(ynz)開始到血漿凝固所需要的時間測。 PT是常用的外源性凝血途徑和共同凝

7、血途徑的篩檢指標之一。二、血漿(xujing)凝血酶原時間第十二頁，共四十九頁。2022-3-8醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗PT原理原理(yunl)第十三頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（一）手工（一）手工(shugng)法法 1原理原理 采用Quick一步凝固法。37條件下，在待檢血漿中加入足量的組織凝血活酶（含組織因子、磷脂）和適量的鈣離子(lz)，通過激活因子而啟動外源性凝血途徑，使乏血小板血漿凝固。從加鈣離子到血漿開始凝固所需的時間即為凝血酶原時間。 2簡要操作簡要操作 采血并分離血漿加血漿與凝血活酶試劑（12）混勻并立即計時傾斜試管，觀察結果。二、血漿(xuj

8、ing)凝血酶原時間第十四頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（二）質量保證（二）質量保證1病人準備 停用影響(yngxing)止凝血功能的藥物至少1周。2采血 要求使用真空采血管、硅化玻璃管或塑料管采血，止血帶使用時間不超過1分鐘，采血要順利，加血液至抗凝管后，應立即輕輕地顛倒混勻58次，避免標本溶血和凝固。創(chuàng)傷性或留置導管的血標本、溶血或凝塊形成的標本、輸液時同側采集的標本均不宜做PT等止凝血試驗。3標本運送 及時送檢，因為血液離體后，凝血因子逐漸消耗，隨著標本存放時間延長，消耗加快。4標本離心 按規(guī)定離心力與離心時間要求，及時分離標本，獲得乏血小板血漿。二、血漿(xujin

9、g)凝血酶原時間第十五頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（二）質量保證（二）質量保證5組織凝血活酶（thromboplastin）的質量 必須使用標有國際敏感指數(shù)（international sensitivity index，ISI）的PT試劑。6ISI和國際標準化比值（international normalization ratio，INR） ISI值越接近1.0，表示靈敏度越高。ISI為組織凝血活酶參考品與每批組織凝血活酶PT校正曲線的斜率，即在雙對數(shù)的坐標紙上，縱坐標為用參考品測定的PT對數(shù)值，橫坐標為用待標定的組織凝血活酶測定的相同(xin tn)標本PT對數(shù)值IN

10、R計算公式為：INR（病人PT值/正常人平均PT值）ISIWHO等國際權威機構要求，每次（每批）PT測定的正常對照值，必須用至少來自20名以上男女各半的正常人混合血漿所測定的結果。二、血漿(xujing)凝血酶原時間第十六頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（二）質量保證（二）質量保證 7測定 試劑、標本溫浴時間應控制在310分鐘內，測定溫度應控制在（371），準確判斷血漿凝固終點（纖維蛋白形成）是PT測定結果準確性的關鍵。 8結果審核與復查 結果審核應該結合標本質量和臨床診斷等作出綜合(zngh)判斷，才能發(fā)出正確的檢驗報告。重視異常結果的復查，必要時重新采集標本進行復查，并加

11、強與臨床溝通，及時掌握反饋信息，持續(xù)改進檢驗質量。二、血漿(xujing)凝血酶原時間第十七頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（三）報告（三）報告(bogo)方式方式報告方式報告方式評價評價PT（秒）必須使用的方式，因為試劑不同，其結果差異大，但要同時報告正常對照值INR當口服抗凝劑病人治療監(jiān)測時，必須使用的報告方式PTRPTR被檢血漿PT/正常對照血漿PT，現(xiàn)已少用PTA為被檢血漿相當于正常對照血漿凝固活性的百分率，可用于評估肝受損程度二、血漿(xujing)凝血酶原時間第十八頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（四）方法學評價（四）方法學評價(pngji)方法

12、方法評價評價手工測定法重復性差，耗時；但操作簡單，不需特殊儀器，準確性好，為儀器校準的參考方法儀器法操作簡便、快速，結果重復性好；目前常采用光學法和磁珠法。磁珠法的檢測結果不受黃疸、乳糜、溶血標本的干擾，但反應杯中需要加入磁珠，成本高二、血漿(xujing)凝血酶原時間第十九頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗參考參考(cnko)區(qū)間及臨床意義區(qū)間及臨床意義（五）參考區(qū)間（五）參考區(qū)間每個實驗室必須建立相應的參考區(qū)間。PT：成人1113秒，超過正常對照值3秒為異常(ychng)。INR：依ISI不同而異。PTR：成人0.851.15。PTA：70130。（六）臨床意義（六）臨床意

13、義1PT延長 先天性凝血因子、缺乏癥和低（無）纖維蛋白原血癥。獲得性凝血因子缺乏，如嚴重肝病、維生素K缺乏癥（影響凝血因子、合成）、原發(fā)纖溶亢進癥、DIC等。血循環(huán)中存在抗凝物質，如口服抗凝劑等。2PT縮短 先天性凝血因子增多癥。高凝狀態(tài)和血栓性疾病。藥物，如長期服用避孕藥等。二、血漿(xujing)凝血酶原時間第二十頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗定義定義(dngy) 活化部分凝血活酶時間（activated partial thromboplastin time，APTT）是在體外模擬體內內源性凝血的全部(qunb)條件，測定血漿凝固所需的時間。 APTT反映內源性凝血因

14、子是否異常和血液中是否存在抗凝血物質，是常用而且比較靈敏的內源性凝血系統(tǒng)的篩檢指標之一。三、血漿活化(huhu)部分凝血活酶時間第二十一頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗APTT原理原理(yunl)第二十二頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（一）手工（一）手工(shugng)法法 1原理原理 在37條件下，于待檢血漿中加入足量的接觸因子激活劑（如白陶土）和部分凝血活酶（代替血小板磷脂），在Ca2+參與下，通過激活因子而啟動內源性凝血途徑，觀察血漿凝固所需的時間。 2簡要操作簡要操作(cozu) 采血并分離血漿加血漿與APTT試劑（11）溫育活化3分鐘加氯化鈣混勻

15、并立即計時傾斜試管觀察結果。三、血漿活化部分(b fen)凝血活酶時間第二十三頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（二）質量保證（二）質量保證 1標本 采血后應盡快測定。 2APTT試劑 是激活劑和部分凝血活酶的混合物。 3激活時間 血漿加入APTT試劑后被激活的時間要保證為3分鐘。時間過短，APTT延長。 4其它 與PT試驗相同，如采血順利、抗凝劑的種類(zhngli)及比例等。三、血漿(xujing)活化部分凝血活酶時間第二十四頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗 （三）方法學評價（三）方法學評價 與PT試驗相同。 （四）參考區(qū)間（四）參考區(qū)間 2535秒，超過

16、正常對照值10秒為異常。 （五）臨床意義（五）臨床意義1APTT延長 因子、水平降低的血友病甲、乙，因子缺乏癥，部分血管性血友病。嚴重(ynzhng)的因子、缺乏，如嚴重肝臟疾病、維生素K缺乏癥等。原發(fā)性或繼發(fā)性纖溶亢進?？诜鼓齽酶嗡氐?。血液循環(huán)中存在病理性抗凝物質，如抗因子或抗體、狼瘡樣抗凝物等。2APTT縮短 高凝狀態(tài)和血栓性疾病，如DIC高凝期、心肌梗死、深靜脈血栓形成等。三、血漿(xujing)活化部分凝血活酶時間第二十五頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗概述概述(i sh) 凝血酶時間（thrombin time，TT）是從加入凝凝血酶血酶開始至血漿中纖維蛋白

17、原（纖維蛋白原（Fg）轉變?yōu)槔w維纖維蛋白（蛋白（Fb）所需的時間。 TT延長主要(zhyo)反映Fg濃度減少或功能異常以及血液中存在相關的抗凝物質（肝素、類肝素等）。四、血漿(xujing)凝血酶時間第二十六頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗TT原理原理(yunl)第二十七頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（一）手工（一）手工(shugng)法法 1原理 37條件下，在待檢血漿中加入“標準化”凝血酶后，直接將血漿纖維蛋白原轉變?yōu)槔w維蛋白，使乏血小板血漿凝固，其凝固時間即為TT。 2簡要操作 采血并分離血漿加血漿與凝血酶試劑（11）混勻并立即計時傾斜試管(shgu

18、n)觀察結果。四、血漿(xujing)凝血酶時間第二十八頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗 （二）質量保證（二）質量保證 與PT試驗相同。 （三）方法學評價（三）方法學評價 與PT試驗相同。 （四）參考區(qū)間（四）參考區(qū)間 1618秒，超過正常對照值3秒為異常。由于試劑中凝血酶濃度不同，其檢測(jin c)結果存在差異。因此，每個實驗室必須建立相應的參考區(qū)間。四、血漿(xujing)凝血酶時間第二十九頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗 1TT延長低（無）纖維蛋白原血癥和異常纖維蛋白原血癥，其中(qzhng)更多見于獲得性低纖維蛋白原血癥。肝素或類肝素抗凝物質，如肝

19、素治療、腫瘤和SLE等。原發(fā)性或繼發(fā)性纖溶亢進時（如DIC），由于FDP增多對凝血酶有抑制作用，可導致TT延長。 2TT縮短 一般無臨床意義。四、血漿(xujing)凝血酶時間（五）臨床意義（五）臨床意義第三十頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗概述概述(i sh) 纖維蛋白原（fibrinogen，F(xiàn)g）是由肝臟合成，是血漿濃度最高的凝血因子。Fg濃度或功能異常(ychng)均可導致凝血障礙。 Fg是出血性疾病與血栓性疾病診治中常用的篩檢指標之一。 常用的方法有Clauss法、PT衍生法等。五、血漿(xujing)纖維蛋白原測定第三十一頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血

20、一般檢驗Fg原理原理(yunl)第三十二頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（一）（一）Clauss法法 1原理 在待檢稀釋的血漿中加入(jir)足量的凝血酶，使血漿中的Fg轉變成纖維蛋白，血漿凝固，其血漿凝固時間與Fg含量呈負相關；以Fg含量一定的國際標準品為參比血漿，測定其對應的凝固時間，制作標準曲線；通過標準曲線，可以得到待檢血漿中Fg含量。 2簡要操作 采血并分離血漿溶解Fg試劑及參比血漿制備標準曲線檢測待檢血漿報告結果。五、血漿(xujing)纖維蛋白原測定第三十三頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（二）質量保證（二）質量保證 1保證結果的可靠性和準確性

21、 Fg參比血漿必須與待檢血漿平行測定，以保證測定結果的可靠性。當Clauss法測定結果超出其檢測線性時，必須改變稀釋度，并重新測定，才能(cinng)保證其結果的準確性。如Fg5.00g/L時，可將原來設定的稀釋度1 10改變?yōu)? 20的稀釋血漿進行檢測，結果乘以2。五、血漿(xujing)纖維蛋白原測定第三十四頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（二）質量保證（二）質量保證 2注意異常結果的復查 當標本中存在異常纖維蛋白原、纖維蛋白（原）降解產物（FDP）、肝素和類肝素抗凝物質時，Clauss法測定的Fg濃度可假性減低(jind)或測不出，此時，需用其他方法（如PT衍生法）復查

22、。PT衍生法檢測結果可疑時（如結果過高或過低），則采用Clauss法復查。五、血漿纖維蛋白(xin wi dn bi)原測定第三十五頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（三）方法學評價（三）方法學評價(pngji)五、血漿(xujing)纖維蛋白原測定第三十六頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗（四）參考區(qū)間（四）參考區(qū)間(q jin)成人：2.004.00g/L；新生兒：1.253.00g/L。（五）臨床意義（五）臨床意義1Fg增高 Fg是一種急性時相反應蛋白，其增高往往是機體一種非特異性反應。感染：毒血癥、肺炎、亞急性細菌性心內膜炎等。無菌性炎癥：腎病綜合征、風

23、濕熱、風濕性關節(jié)炎等。血栓前狀態(tài)與血栓性疾病：糖尿病、急性心肌梗死等。惡性腫瘤。外傷、燒傷、外科手術后、放射治療后。其他：妊娠晚期、妊娠高血壓綜合征等。2Fg減低 原發(fā)性纖維蛋白原減少或結構異常：低或無纖維蛋白原血癥、異常纖維蛋白原血癥。繼發(fā)性纖維蛋白原減少：DIC晚期、纖溶亢進、重癥肝炎和肝硬化等。五、血漿纖維蛋白(xin wi dn bi)原測定第三十七頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗 纖維蛋白原、可溶性纖維蛋白、纖維蛋白多聚體、交聯(lián)纖維蛋白均可被纖溶酶降解，生成纖維蛋白（原）降解產物(chnw)（FDP）。 血液中FDP增高是體內纖溶亢進的標志，但不能鑒別原發(fā)性纖溶亢進

24、與繼發(fā)性纖溶亢進。 FDP中X、Y、D和E等片段具有纖維蛋白原的抗原決定簇，用其免疫動物可獲得抗FDP抗體。因此，通過免疫學方法可檢測血漿FDP濃度。六、血漿纖維蛋白(xin wi dn bi)（原）降解產物測定概述概述(i sh)第三十八頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗 FDP測定方法有膠乳凝集試驗、酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法與免疫比濁法。膠乳凝集試驗是定性試驗，免疫比濁法使用(shyng)血凝儀進行定量測定。由于各廠家選用的抗FDP抗體可能存在質量的不同，導致其定量測定結果存在差異，因此，每個實驗室必須建立相應的參考區(qū)間。六、血漿纖維蛋白（原）降解(jin ji)產物測

25、定（一）測定方法（一）測定方法第三十九頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗六、血漿纖維蛋白(xin wi dn bi)（原）降解產物測定（二）方法學評價（二）方法學評價(pngji)第四十頁，共四十九頁。2022-3-8醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗 （三）參考區(qū)間（三）參考區(qū)間 陰性（5mg/L）。 （四）臨床意義（四）臨床意義 FDP陽性或增高見于(jiny)原發(fā)性纖溶亢進或繼發(fā)性纖溶亢進，如DIC、肺栓塞、深靜脈血栓形成、惡性腫瘤、肝臟疾病、器官移植排斥反應和溶栓治療等。六、血漿(xujing)纖維蛋白（原）降解產物測定第四十一頁，共四十九頁。醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗概述概述(i sh) D-二聚體（D-dimer，D-D）是交聯(lián)纖維蛋白的降解產物之一。 因為繼發(fā)性纖溶中纖溶酶的主要作用(zuyng)底物是纖維蛋白，生成特異性FDP即為D-D，所以D-D是繼發(fā)性纖溶特有代謝產物。 現(xiàn)多用D-D抗體應用免疫學方法檢測血漿D-D濃度。七、血漿(xujing)D-二聚體測定第四十二頁，共四十九頁。2022-3-8醫(yī)學專題第五節(jié)-血栓與止血一般檢驗 （二）方法學評價（二）方法學評價 與FDP測定相同。 （三）參考（三）參考(cnko)區(qū)間區(qū)間 陰性（250g/L）。七、血漿(xujing)D-二聚體測定第四十三頁，共四十九頁。2022-3-8醫(yī)學專題第