鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、邈殲由，奈七，學(xué)分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)題目：鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵學(xué)院：專業(yè)：食品科學(xué)與工程班級(jí)：姓名：學(xué)號(hào)：同組者姓名：一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 了解分光光度法測(cè)定物質(zhì)含量的一般條件及其選定方法2. 掌握鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵的方法3. 了解722型分光光度計(jì)的構(gòu)造和使用方法二.實(shí)驗(yàn)原理1 .光度法測(cè)定的條件：分光光度法測(cè)定物質(zhì)含量時(shí)應(yīng)注意的條件主要是顯色反應(yīng)的條件和測(cè)量吸光度的條件。顯色反應(yīng)的條件有顯色劑用量、介質(zhì)的酸度、顯色時(shí)溶液溫度、顯色時(shí)間及干擾物質(zhì)的消除方法等；測(cè)量吸光度的條件包3+ F/括應(yīng)選擇的入射光波長(zhǎng)，吸光度范圍和參比溶液等。2 .在PH=2-9勺條件下，F(xiàn)e”與鄰二氮雜菲(

2、o-ph)生成極穩(wěn)定的橘紅色配合物，反應(yīng)式如下：此配合物的IgK槍二摩爾吸收系數(shù)&510=x10在顯色前，首先用鹽酸羥胺把Fe?+還原成Fe3+.其反應(yīng)式如下：2Fe3+2NH2OH-HC1=2Fe>+N2T+2耳0+4H+2C測(cè)定時(shí)，控制溶液酸度在PH=£右較為適宜。酸度過高時(shí)，反應(yīng)進(jìn)行較慢；酸度太低，則Fe"水解，影響顯色。三、實(shí)驗(yàn)儀器分光光度計(jì)、容量瓶、移液管、洗瓶四、實(shí)驗(yàn)步驟1 .條件實(shí)驗(yàn)(1)吸收曲線的測(cè)繪準(zhǔn)確吸取20Pg-血:鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL于50mL容量瓶中，加入5%鹽酸羥胺溶液1mL,搖勻，加入1mol-I?NaOAC溶液5mL和鄰二氮雜菲溶液

3、3mLo以水稀釋至刻度，搖勻。放置10min,在722型分光光度計(jì)上，用1cm比色皿，以水為參比溶液，波長(zhǎng)從570nm到430nm為止，每隔10nm測(cè)定一次吸光度。如圖1所示，其最大吸收波長(zhǎng)為510nm,故該實(shí)驗(yàn)選擇測(cè)定波長(zhǎng)為510nm.（2）鄰二氮雜菲-亞鐵配合物的穩(wěn)定性用上面溶液繼續(xù)進(jìn)行測(cè)定，其方法是在最大吸收波長(zhǎng)510nm處，每隔一定時(shí)間測(cè)定其吸光度，及再加入顯色劑后立即測(cè)定一次吸光度，經(jīng)10、20、30、120min后，再各測(cè)一次吸光度。（3）顯色劑濃度實(shí)驗(yàn)取50mL容量瓶7只，編號(hào)。每只容量瓶中準(zhǔn)確加入20ug血？鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL以及l(fā)mL5鹽酸羥胺溶液，經(jīng)2min后。再加入5mLl

4、mol-L-1NaOA（溶液,然后分別加入鄰二氮雜菲溶液、mL、mL、mL、mL和mL,用水稀釋至刻度，搖勻，在分光光度計(jì)上，用最大吸收波長(zhǎng)510nm、1cm比色皿，以水為參比，測(cè)定上述溶液的吸光度。2 .鐵含量的測(cè)定（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取50mL容量瓶6只，編號(hào)。分別吸取20PgmL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液、mL、mL、mL和mL于5只容量瓶中，另一只容量瓶中不加標(biāo)準(zhǔn)溶液（配制空白溶液，作參比）。然后各加5冊(cè)酸羥胺溶液，搖勻，經(jīng)2min后，再各加5mLlmol-I?NaAc溶液及3mLlgL鄰二氮雜菲溶液，以水稀釋至刻度線，搖勻。放置10min,在分光光度計(jì)上，用1cm比色皿，在510nm處，測(cè)定各溶液的

5、吸光度。以鐵含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。（2）未知液中鐵含量的測(cè)定吸取5nli未知液代替標(biāo)準(zhǔn)溶液，其他步驟均同上測(cè)定吸光度。由未知液的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出5nli未知液中的鐵含量，然后以每亳升未知液中含鐵多少微克表示結(jié)果。五、記錄與計(jì)算（1）吸收曲線的測(cè)繪波長(zhǎng)nm吸光度A570550530520510500490470450430討論：從曲線可以看出，在一定范圍內(nèi)，當(dāng)波長(zhǎng)較小時(shí)，隨波長(zhǎng)增加吸光度增加測(cè)定的適宜波長(zhǎng)是510nm(2)鄰二氮雜菲亞鐵配合物的穩(wěn)定性討論：從曲線可以看出，配合物穩(wěn)定性較好。(3)顯色劑用量的測(cè)定容量瓶號(hào)顯色劑量/mL12345吸光度A顯色劑龜/nL討論：當(dāng)顯色劑較小時(shí)，隨顯色劑含量增加吸光度增加，當(dāng)加入顯色劑為吸光度最大。所以顯色劑的適宜加入的量為(4)標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)繪與鐵含量的測(cè)定試液編