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文檔簡介

1、內(nèi)容摘要:?電鏡技術(shù)和細胞超微構(gòu)造?這門課程主要講的是電鏡技術(shù),幾種常見的電子顯微鏡及相關(guān)方面的知識了解,并講解了運用電鏡技術(shù),在各種電子顯微鏡下觀察細胞超微構(gòu)造,研究細胞超微構(gòu)造的相關(guān)知識。在課程的學習中,我們也學習到了一些攝影方面的技術(shù)。由于這是一門選修課程,所以我們對此方面的學習沒有專門學習這方面的同學學習的深,我們只是學習了一些根本常識,本文主要講的就是我在這門課程的學習中得到一些知識。關(guān)鍵字:電子顯微鏡、透射電鏡、掃描電鏡、電鏡技術(shù)、細胞超微構(gòu)造正文:電子顯微鏡,簡稱電鏡,是根據(jù)電子光學原理,用電子束和電子透鏡代替光束和光學透鏡,使物質(zhì)的細微構(gòu)造在非常高的放大倍數(shù)下成像的儀器。電子顯

2、微鏡由鏡筒、真空裝置和電源柜三局部組成。鏡筒主要有電子源、電子透鏡、樣品架、熒光屏和探測器等部件,這些部件通常是自上而下地裝配成一個柱體。電子顯微鏡按構(gòu)造和用途可分為透射式電子顯微鏡、掃描式電子顯微鏡、反射式電子顯微鏡和發(fā)射式電子顯微鏡等。透射式電子顯微鏡常用于觀察那些用普通顯微鏡所不能分辨的細微物質(zhì)構(gòu)造;掃描式電子顯微鏡主要用于觀察固體外表的形貌,也能與 X射線衍射儀或電子能譜儀相結(jié)合,構(gòu)成電子微探針,用于物質(zhì)成分分析;發(fā)射式電子顯微鏡用于自發(fā)射電子外表的研究。我們經(jīng)常使用的是透射式電子顯微鏡和掃描式電子顯微鏡。透射電鏡是以電子束透過樣品經(jīng)過聚焦與放大后所產(chǎn)生的物像,投射到熒光屏上或照相底片

3、上進展觀察。透射電鏡是以電子束透過樣品經(jīng)過聚焦與放大后所產(chǎn)生的物像,投射到熒光屏上或照相底片上進展觀察。透射電鏡的分辨率為0.10.2nm,放大倍數(shù)為幾萬幾十萬倍。由於電子易散射或被物體吸收,故穿透力低,必須制備更薄的超薄切片。掃描電鏡是用極細的電子束在樣品外表掃描,將產(chǎn)生的二次電子用特制的探測器收集,形成電信號運送到顯像管,在熒光屏上顯示物體。掃描電鏡是用極細的電子束在樣品外表掃描,將產(chǎn)生的二次電子用特制的探測器收集,形成電信號運送到顯像管,在熒光屏上顯示物體。細胞、組織外表的立體構(gòu)像,可攝制成照片。細胞、組織外表的立體構(gòu)像,可攝制成照片。所以,在選擇使用何種電鏡時要根據(jù)具體情況來決定。在使

4、用電子顯微鏡時,也考驗使用者的拍照技術(shù),同樣一個樣品,拍攝的角度不同、時機不同,拍攝出來的效果是完全不一樣的。這就需要實驗者在拍攝的角度和時機上要有敏感性。用電鏡做實驗,制作細胞超微構(gòu)造不僅僅是為當時的實驗過程,更重要的是要讓別人看到你的成果,根據(jù)你拍出的照片來學習細胞的超微構(gòu)造,對細胞超微構(gòu)造有更多的了解,所以,會做實驗很重要,會對實驗成果進展拍攝也是很重要的。使用電子顯微鏡觀察樣品也是有缺點的。在電子顯微鏡中樣本必須在真空中觀察,因此無法觀察活樣本。在處理樣本時可能會產(chǎn)生樣本本來沒有的構(gòu)造,這加劇了此后分析圖像的難度。由于透射電子顯微鏡只能觀察非常薄的樣本,而有可能物質(zhì)外表的構(gòu)造與物質(zhì)內(nèi)部

5、的構(gòu)造不同。此外電子束可能通過碰撞和加熱破壞樣本。隨著科技的進步,電子顯微鏡也是在不斷開展和進步的,在不斷的研究過程中,科學家們 總是在想方法解決它的缺點,讓它變得更加完美。電子顯微鏡現(xiàn)在的開展特點有:高性能場發(fā)射槍電子顯微鏡日趨普及和應用;努力開展新一代單色器、球差校正器,以進一步提高電子顯微鏡的分辨率; 電子顯微鏡分析工作邁向計算機化和網(wǎng)絡化;電子顯微鏡在納米材料研究中的重要應用;低溫電鏡技術(shù)和三維重構(gòu)技術(shù)是當前生物電子顯微學的研究熱點;高性能CCD相機日漸普及應用于電子顯微鏡中. 由于電鏡及其技術(shù)的開展,也使得電鏡技術(shù)這門學科的開展有了新的特點:電鏡技術(shù)的應用范圍越來越廣,和其他學科的穿

6、插和結(jié)合越來越多,在學習電鏡技術(shù)時也需要掌握更多方面的技能.因此此學科的學習會更加的需要綜合性的技能,在學習時也要更加的用心,以便真正的做到學好這門學科,能在學習后學以致用。在介紹了電鏡技術(shù)后,我們將了解細胞超微構(gòu)造這也是我們要學習和運用電鏡技術(shù)的主要原因之一。要想在做實驗做樣品時能夠更準確,更能反映出樣品的本來面目,從而更好的研究樣品,對細胞的超微構(gòu)造進展分析,那么首先要做的就是對細胞的構(gòu)造有很深的認識,對細胞各個局部很了解。通過近代對細胞及其病變的超微構(gòu)造以及構(gòu)造與功能相結(jié)合的研究,已經(jīng)獲得了新的更廣更深的根底,擴大和加深了對疾病的理解. 細胞是一個由細胞膜封閉的根本生命單元,內(nèi)含一系列明

7、確無誤的互相分隔的反響腔室,這就是以細胞膜為界限的各種細胞器,是細胞代謝和細胞活力的形態(tài)支柱. 細胞內(nèi)的這種嚴格分隔保證各種細胞器分別進展著無數(shù)的生化反響,行使各自的獨特功能,維持細胞和機體的生命活動.細胞器的改變是各種病變的根本組成局部.細胞構(gòu)造包括細胞核、細胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、高爾基體、溶酶體、過氧體、細胞骨架、基漿及其內(nèi)含物等。在 對細胞超微構(gòu)造的學習中,我們最常用的就是電子顯微鏡,通過觀察在電子顯微鏡下的細胞超微構(gòu)造樣品,并根據(jù)不同的外界影響對細胞超微構(gòu)造的改變,讓我們對細胞超微構(gòu)造更加深刻的認識和了解,能更好的為人們效勞,為醫(yī)學等方面帶來了巨大的奉獻。?電鏡技術(shù)與細胞超微構(gòu)造?這門

8、課程主要講的就是這兩門學科的完美結(jié)合,是在二者的結(jié)合下完成我們需要研究的任務。透射電鏡樣品的制備過程與石蠟切片相似,但要求極嚴格。要在機體死亡后的數(shù)分鐘釣取材,組織塊要小(1立方毫米以內(nèi),常用戊二醛和餓酸進展雙重固定樹脂包埋,用特制的超薄切片機切成超薄切片,再經(jīng)醋酸鈾和檸檬酸鉛等進展電子染色。電子束投射到樣品時,可隨組織構(gòu)成成分的密度不同而發(fā)生相應的電子發(fā)射,如電子束投射到質(zhì)量大的構(gòu)造時,電子被散射的多,因此投射到熒光屏上的電子少而呈暗像,電子照片上那么呈黑色,稱電子密度高反之,那么稱為電子密度低。而掃描電鏡樣品用戊二醛和餓酸等固定,經(jīng)脫水和臨界點枯燥后,再於樣品外表噴鍍薄層金膜,以增加二波電

9、子數(shù)。掃描電鏡樣品用戊二醛和餓酸等固定,經(jīng)脫水和臨界點枯燥后,再于樣品外表噴鍍薄 電子顯微鏡下的纖維層金膜,以增加二波電子數(shù)。掃描電鏡能觀察較大的組織外表構(gòu)造,由於它的景深長,1mm左右的凹凸不平面能清所成像,故放樣品圖像富有立體感。在使用透視電子顯微鏡觀察生物樣品前樣品必須被預先處理。隨不同研究要求的需要科學家使用不同的處理方法。固定:為了盡量保存樣本的原樣使用戊二醛來硬化樣本和使用鋨酸來染色脂肪。冷固定:將樣本放在液態(tài)的乙烷中速凍,這樣水不會結(jié)晶,而形成非晶體的冰 電子顯微鏡下的病毒。這樣保存的樣品損壞比擬小,但圖像的比照度非常低。 脫干:使用乙醇和丙酮來取代水。 墊入:樣本被墊入后可以分

10、割。 分割:將樣本使用金剛石刃切成薄片。 染色:重的原子如鉛或鈾比輕的原子散射電子的能力高,因此可被用來提高比照度。 使用透視電子顯微鏡觀察金屬前樣本要被切成非常薄的薄片約0.1毫米,然后使用電解擦亮繼續(xù)使得金屬變薄,最后在樣本中心往往形成一個洞,電子可以在這個洞附近穿過那里非常薄的金屬。無法使用電解擦亮的金屬或不導電或?qū)щ娦阅懿缓玫奈镔|(zhì)如硅等一般首先被用機械方式磨薄后使用離子打擊的方法繼續(xù)加工。為防止不導電的樣品在掃描電子顯微鏡中積累靜電它們的外表必須覆蓋一層導電層。在對這門學科的學習過程中,我們更加了解了細胞的內(nèi)部構(gòu)造和電子顯微鏡技術(shù)的一般應用,同時我們知道了很多日常生活中遇到的現(xiàn)象的科學原理和解釋,讓我們對更多現(xiàn)象有了更深刻的認識,這對我們今后的生活有很大的幫助。除此之外,我們還學習了攝影中需要注意的問題,這不僅是學習電鏡的需要,更是我們在日常生活中的需要。通過學習這門課程,我不僅增長了在電鏡技術(shù)和細胞超微構(gòu)造這種專業(yè)方面的知識,擴大了我的知識面,我還學習了一門技術(shù),即攝影技術(shù)。我想在今后的生活和工作當中,這將給我?guī)砀嗟臋C遇和優(yōu)勢,提高了我自身的價值。參考文獻:內(nèi)容總結(jié)1內(nèi)容摘要:?電鏡技術(shù)和細胞超微構(gòu)造?

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