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1、膠體金免疫層析技術(shù)膠體金免疫層析技術(shù)EASYSWEET-培訓(xùn)資料2/36膠體金免疫層析技術(shù)簡(jiǎn)介nColloidal gold (enhanced) immunochromatography assy (GICA)n以免疫學(xué)的高度特異性的抗原抗體反應(yīng)作為反應(yīng)基礎(chǔ)n以膠體金顆粒作為顯示標(biāo)記物n應(yīng)用層析法的反應(yīng)形式,以硝酸纖維素膜作為載體制備EASYSWEET-培訓(xùn)資料3/36膠體金免疫層析法檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn)n操作方便,讀取結(jié)果的時(shí)間短:一般只需要一個(gè)加樣步驟,得到結(jié)果時(shí)間最短的只需要35分鐘,最長(zhǎng)的也不會(huì)超過30分鐘。n靈敏度和特異性好,受外界影響少:高度特異的抗原抗體反應(yīng)保證該檢測(cè)結(jié)果保持很高的

2、特異性和靈敏度。n成本低廉,所需樣本很少:一般只需要不到100l樣本即可得到檢測(cè)結(jié)果。n產(chǎn)品和檢測(cè)結(jié)果均易于保存:固相的產(chǎn)品條件,使得該產(chǎn)品的有效期能夠達(dá)到18月以上,而且只需要保存在室溫條件下。n不依賴于輔助的儀器設(shè)備,而且非專業(yè)人員也可以操作,產(chǎn)品的適用范圍廣,移植能力強(qiáng)。鐵蛋白檢測(cè)試劑盒鐵蛋白檢測(cè)試劑盒鐵蛋白檢測(cè)缺鐵性貧血的預(yù)防性金指標(biāo)EASYSWEET-培訓(xùn)資料4/365北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 什么是缺鐵性貧血n當(dāng)機(jī)體對(duì)鐵的需求與供給失衡,導(dǎo)致體內(nèi)貯存鐵耗盡(ID),繼之紅細(xì)胞內(nèi)鐵缺乏(IDE),最終引起缺鐵性貧血(IDA)。IDA是鐵缺乏癥(包括ID,IDE和IDA)的最終

3、階段,表現(xiàn)為缺鐵引起的小細(xì)胞低色素性貧血及其他異常。nIDA是最常見的貧血。其發(fā)病率在發(fā)展中國家、經(jīng)濟(jì)不發(fā)達(dá)地區(qū)及嬰幼兒、育齡婦女明顯增高。EASYSWEET-培訓(xùn)資料6/36孕婦發(fā)生缺鐵性貧血的后果n增加心輸出量和胎盤血流量,加重心臟負(fù)擔(dān)。n胎兒缺氧,生長(zhǎng)發(fā)育受阻。n影響免疫、消化等多系統(tǒng)的正常功能n多種妊娠并發(fā)癥。n胎兒先天鐵儲(chǔ)存不足,嬰幼兒期易缺鐵。n嚴(yán)重的會(huì)因血紅蛋白攜帶氧氣不足而致胎兒缺氧,引起胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩、早產(chǎn),甚至死胎。北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 7孕婦容易發(fā)生貧血的原因8北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 妊娠婦女對(duì)鐵的需求量明顯增加,胎兒生長(zhǎng)發(fā)育期共需要鐵約350毫克

4、,母體血容量的增加需要鐵約650毫克,考慮妊娠全過程無月經(jīng)來潮的失血,約積存鐵200毫克,故孕期需要鐵800毫克。每天飲食中含鐵1015毫克,其吸收利用率僅為10%,為11.5毫克,而此時(shí)孕婦每天至少需要4毫克鐵。到妊娠后半期,鐵的最大吸收率可達(dá)40%,仍不能滿足要求。 因此,孕期若不補(bǔ)充足夠的鐵,孕婦極易發(fā)生缺鐵性貧血。嬰幼兒發(fā)生缺鐵性貧血的主要臨床表現(xiàn)n皮膚粘膜逐漸蒼白,尤以唇、口腔粘膜及甲床最為明顯。n伴有易疲乏、不愛活動(dòng)、精神不振、對(duì)周圍環(huán)境反應(yīng)差、煩躁不安、注意力不集中、食欲不振、嘔吐、腹瀉等癥狀。n年長(zhǎng)患兒可自述頭昏、眼前發(fā)黑、耳鳴等。部分患兒還可有異食癖(如嗜食泥土、墻皮、煤渣等

5、)。北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 9嬰幼兒發(fā)生缺鐵性貧血的危害 n智商降低,再記憶功能受損:據(jù)聯(lián)合國兒童基金會(huì)的報(bào)道,貧血的兒童其智商較正常兒童平均低 個(gè)點(diǎn);我國的研究報(bào)道,貧血兒童的運(yùn)動(dòng)和智能發(fā)展指數(shù)甚至較正常兒童低得更多。n情商受損:情感淡漠,不開心、緊張、易疲勞;興趣少,不容易逗樂,不合群,注意力難集中。n身體發(fā)育受影響:聽視覺神經(jīng)反應(yīng)遲緩;細(xì)胞、體液免疫功能降低,易感染;延緩運(yùn)動(dòng)神經(jīng)的發(fā)育,運(yùn)動(dòng)功能受損。小兒長(zhǎng)期貧血不僅會(huì)影響生長(zhǎng)發(fā)育,還可誘發(fā)一些感染性疾病。n更重要的一點(diǎn)是:胎兒及嬰幼兒時(shí)期鐵缺乏,甚至無法被日后的補(bǔ)鐵所逆轉(zhuǎn)。北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 10什么是鐵蛋白(F

6、erritin)北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 11 鐵蛋白為機(jī)體內(nèi)一種貯存鐵的可溶組織蛋白,是一種棕色的含鐵蛋白,含鐵量為23,分子量約750kDa,它是一種直徑為1214nm的球形蛋白,主要在肝臟合成。 正常人血清中含有少量鐵蛋白,但不同的檢測(cè)法有不同的正常值。一般正常均值男性約80130ug/L(80-130ng/ml)女性約3555ug/L(35-55ng/ml)。鐵蛋白起什么作用? 鐵蛋白在體內(nèi)作用主要有兩條:一是作為體內(nèi)鐵的儲(chǔ)存庫用于血紅蛋白的合成;二是將鐵保存在中空的球形蛋白內(nèi),防止細(xì)胞內(nèi)游離鐵過多而產(chǎn)生有害作用。北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 12北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有

7、限公司 13 體內(nèi)儲(chǔ)鐵缺乏的診斷指標(biāo)為: 血清鐵蛋白12ng/ml。 血清鐵蛋白含量的多少是判斷體內(nèi)缺鐵還是鐵負(fù)荷過量的指標(biāo)。在臨床上血清鐵蛋白降低見于缺鐵性貧血和體內(nèi)貯存鐵減少導(dǎo)致的繼發(fā)性貧血。北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 14 缺鐵性貧血的癥狀是在一個(gè)較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)逐漸形成的。鐵耗竭期,貯存鐵耗盡,血清鐵蛋白減低,此時(shí)并無貧血,若缺鐵進(jìn)一步加重。貯存鐵耗盡,血清鐵蛋白和血清鐵下降,總鐵結(jié)合力增高,出現(xiàn)缺鐵性貧血。 鐵蛋白缺乏是缺鐵性貧血的初期階段,在這個(gè)階段及時(shí)調(diào)整就能夠避免后期的貧血出現(xiàn)。 即使在貧血發(fā)生以前,鐵缺乏就已經(jīng)對(duì)機(jī)體多項(xiàng)功能造成傷害,有些傷害甚至是不可逆的。鐵蛋白在缺鐵性貧血

8、中的作用檢測(cè)鐵蛋白可以協(xié)助預(yù)防缺鐵性貧血北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 15臨床上將缺鐵性貧血分為以下三個(gè)階段:北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 17鐵缺乏階段鐵缺乏階段血清鐵蛋血清鐵蛋白含量白含量轉(zhuǎn)鐵蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度飽和度紅細(xì)胞游離紅細(xì)胞游離原卟啉(原卟啉(FEPFEP)血紅蛋白血紅蛋白潛在性缺鐵期潛在性缺鐵期12ng/ml缺鐵性紅細(xì)胞生成缺鐵性紅細(xì)胞生成12ng/ml15%4.5g/L4.5g/L缺鐵性貧血缺鐵性貧血12ng/ml15%4.5g/L4.5g/LHb120g/LHb120g/LHb110g/LHb110g/L( (女性女性) )EASYSWEET-培訓(xùn)資料18/36鐵蛋白

9、與其它實(shí)驗(yàn)指標(biāo)組合對(duì)鐵營(yíng)養(yǎng)狀況的綜合分析判斷鐵蛋白與其它實(shí)驗(yàn)指標(biāo)組合對(duì)鐵營(yíng)養(yǎng)狀況的綜合分析判斷鐵蛋白血紅蛋白元素鐵解 釋正常正常正常正常正常減低正常IDA恢復(fù)期,鐵儲(chǔ)備先行增高,但受紅細(xì)胞生命周期影響,血紅蛋白尚未恢復(fù)正常。 貧血合并感染 其它原因的貧血正常減低減低 IDA恢復(fù)期,鐵儲(chǔ)備先行增高;但受紅細(xì)胞生命周期影響,血紅蛋白尚未恢復(fù)正常;受多因素影響的即時(shí)循環(huán)鐵暫時(shí)減低。貧血合并感染 其它原因的貧血正常正常減低受多因素影響的即時(shí)循環(huán)鐵減低,注意定期觀察鐵蛋白變化減低正常正常體內(nèi)儲(chǔ)備的鐵耗竭,ID期。減低正常減低體內(nèi)儲(chǔ)備的鐵耗竭,受多因素影響的即時(shí)循環(huán)鐵也同時(shí)減低減低減低正常IDA缺鐵性貧血

10、期,但受多因素影響的即時(shí)循環(huán)鐵正常。減低減低減低IDA缺鐵性貧血期。北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 19 只有隨時(shí)關(guān)注血液內(nèi)鐵蛋白的含量,只有隨時(shí)關(guān)注血液內(nèi)鐵蛋白的含量,才能及時(shí)發(fā)現(xiàn)鐵蛋白是否缺乏,避免缺才能及時(shí)發(fā)現(xiàn)鐵蛋白是否缺乏,避免缺鐵性貧血的出現(xiàn)!鐵性貧血的出現(xiàn)!20 由缺鐵性貧血發(fā)生主要人群來看,主要要控制孕婦和嬰幼兒群體。北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 為什么要防治兒童和孕婦的鐵缺乏?北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 21類型類型比率比率人數(shù)(萬)人數(shù)(萬)學(xué)齡前兒童學(xué)齡前兒童20%20%16781678孕婦孕婦28.9%28.9%507.6507.6育齡期婦女育齡期婦女19.9

11、%19.9%69306930 婦女和兒童是鐵缺乏癥的主要受害者,據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)結(jié)果,中國國內(nèi)2002年貧血人數(shù)如下表所示:22 據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)在2008年公布的全球2005年的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù),全球約有16.2億居民呈現(xiàn)貧血癥狀,患病率大概為24.8%。 全球?qū)W齡前兒童的貧血患病率高達(dá)47.4%,總數(shù)約為2.93億; 孕婦群體的患病率為41.8%,人數(shù)高達(dá)5640萬; 全球育齡期婦女貧血率為30.2%,貧血人數(shù)約為4.68億; 而同期的學(xué)齡期兒童和青年貧血率僅為25.4%、成年男性僅為12.7%、老年人為23.9%,均處于較低水平。北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 世界衛(wèi)生組織公布的 全

12、球?qū)W齡前兒童貧血數(shù)據(jù)北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 23世界衛(wèi)生組織公布的全球孕婦貧血數(shù)據(jù)北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 24n我國政府一向重視鐵缺乏癥的防治工作,在中國兒童發(fā)展綱要(20112020年)中,明確要求5歲以下兒童貧血患病率控制在12%以下,中小學(xué)生貧血患病率以2010年為基數(shù)下降1/3。在中國婦女發(fā)展綱要(20112020年)中明確提出降低孕產(chǎn)婦中重度貧血患病率。n在衛(wèi)生部2011年6月23日發(fā)布的孕產(chǎn)期保健工作管理辦法和孕產(chǎn)期保健工作規(guī)范中也明確提出“提倡適量運(yùn)動(dòng),預(yù)防及糾正貧血?!薄斑M(jìn)行保健指導(dǎo),糾正貧血”,同時(shí)孕產(chǎn)婦中重度貧血患病率也作為重點(diǎn)健康指標(biāo)用于核查。n防治兒

13、童營(yíng)養(yǎng)性鐵缺乏癥參照方案中同時(shí)指出:嬰幼兒缺鐵的源頭是孕婦和乳母,防治嬰幼兒缺鐵首先要從源頭人群(孕婦)補(bǔ)鐵開始。要控制兒童鐵缺乏、減少缺鐵的危害,首先要著重防治孕婦的鐵缺乏。 北京易斯威特生物醫(yī)學(xué)科技有限公司 25EASYSWEET-培訓(xùn)資料26/36篩查對(duì)象: 6、12、18、24個(gè)月定期體檢的正常嬰幼兒,早產(chǎn)兒應(yīng)提前至生后4個(gè)月檢測(cè)。 已建冊(cè)體檢的孕婦。管理: 宣教鐵缺乏的危害,指導(dǎo)膳食,給予必要的藥物治療,每月復(fù)查。EASYSWEET-培訓(xùn)資料27/36心肌三項(xiàng)檢測(cè)試劑盒n心肌肌鈣蛋白I(cTnI)檢測(cè)ncTn是存在于心肌內(nèi)的蛋白質(zhì),cTnI對(duì)心肌損傷的特異性極高,僅存在于心肌收縮蛋白

14、的細(xì)肌絲上,所以迄今為止cTnI仍是心肌損傷的最特異的標(biāo)志物,不會(huì)因骨骼肌或其他組織的損害而出現(xiàn)假陽性 。n血清中cTnI在AMI發(fā)病后36 h增高,1214 h達(dá)高峰,血中升高持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),可達(dá)610d,故對(duì)胸痛幾天后人院的病人,ctnI具有相當(dāng)長(zhǎng)的窗口期,能鑒別CK-MB所不能診斷出的心肌損傷。ctnI的診斷特異性優(yōu)于Mb,可用于評(píng)價(jià)不穩(wěn)定性心絞痛,一旦檢測(cè)到cTnI,即表明病人已出現(xiàn)不可逆的心肌損害,cTnI濃度與AMI的面積大小以及預(yù)后呈正相關(guān)。EASYSWEET-培訓(xùn)資料28/36n肌紅蛋白(MYO)檢測(cè)nMyo是一種存在于心肌和骨骼肌的低分子量氧結(jié)合蛋白,在心肌細(xì)胞中含量豐富,心肌

15、受損后,小分子量的Mb迅速釋放入血,12h后血清濃度即可升高,并可在69h達(dá)到高峰比CK-MB的釋放早36h。n由于Myo在肌肉細(xì)胞質(zhì)含量很高,而分子體積較小,分子量相對(duì)較低,所以在出現(xiàn)細(xì)胞損傷后,能夠更加迅速的釋放到血液循環(huán)中。在AMI發(fā)作后l2 h,患者血清中Myo的濃度即迅速增加,在6-9 h后達(dá)到峰值,比CK-MB的釋放早25 h,在1d內(nèi)即返回到正常,是AMI診斷的早期最靈敏的指標(biāo) 。因?yàn)樘禺愋圆?,Myo陽性不能確診AMI,但Myo陰性特別有助于排除AMI的診斷,在有急性癥狀的患者中,4 h內(nèi)Myo水平不升高,則基本排除AMI。由于Mb的血中半衰期短,所以又有助于觀察AMI病程中有無

16、梗死再發(fā)生以及梗死有無擴(kuò)展。EASYSWEET-培訓(xùn)資料29/36n肌酸激酶(CK-MB)檢測(cè)n血清中CK-MB升高是公認(rèn)的診斷急性心肌梗死和確定有無心肌壞死的重要指標(biāo),在傳統(tǒng)酶學(xué)中曾作為診斷AMI的金標(biāo)準(zhǔn),對(duì)判定梗死發(fā)生的時(shí)間、面積、部位、梗死的擴(kuò)展及有無心肌灌注均具有一定的價(jià)值 。正常人血清中CK-MB含量極少(低于總活性5),當(dāng)心肌受損時(shí)釋放入血。AMI發(fā)病后38 h,CK-MB即開始升高,CK-MB達(dá)峰值時(shí)問較CK短(1224 h),如無并發(fā)癥3 d后恢復(fù)至正常。在AMI病程中,若有并發(fā)癥,如梗死延展,則CK-MB不下降;若新的梗死再次出現(xiàn),已趨下降的CK-MB會(huì)再次升高。EASYSW

17、EET-培訓(xùn)資料30/36三項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)對(duì)比降鈣素原檢測(cè)試劑盒n降鈣素原(procalcitonin, PCT) 是無激素活性的降鈣素( calcitonin, CT) 的前體, 由116個(gè)氨基酸組成、分子質(zhì)量為13 000的糖蛋白。PCT的半衰期為2530 h,在體內(nèi)外穩(wěn)定性很好。血漿中的PCT非常穩(wěn)定, 收集標(biāo)本24 h后PCT濃度在室溫下約下降12%, 4時(shí)下降6% 。PCT被特異性的蛋白酶降解, 其在循環(huán)中的半衰期是2530 h。腎功能異?;颊咧蠵CT 的清除半衰期無顯著延長(zhǎng);n新近發(fā)現(xiàn)血清PCT的升高與細(xì)菌感染密切相關(guān),在全身系統(tǒng)性嚴(yán)重感染中PCT早期即可升高,經(jīng)抗生素治療使感染控制后血中PCT會(huì)下降,在病毒感染及局部

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