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1、腦脊液常規(guī)操作規(guī)程腦脊液常規(guī)腦脊液常規(guī)(chnggu)操作操作規(guī)程規(guī)程河大一附院檢驗(yàn)科河大一附院檢驗(yàn)科第一頁(yè),共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程常規(guī)檢測(cè)(jin c)內(nèi)容n包括:一般性狀的檢查(jinch)、潘迪氏試驗(yàn)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類(lèi)、革蘭氏染色、抗酸染色、墨汁負(fù)染色。第二頁(yè),共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程一般性狀(xngzhung)檢查n主要觀察顏色(無(wú)色、白色(bis)、紅色、黃色、綠色、黑色等),透明度(透明、微渾、渾濁、膿樣等),凝塊(無(wú)、有或薄膜形成、膠凍狀 )。第三頁(yè),共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程n1 1、紅色:、紅色: 如標(biāo)本為均勻紅色血性腦脊液,為區(qū)別蛛網(wǎng)膜下腔出血或穿刺性損傷,應(yīng):
2、 (1)將血性腦脊液試管離心5 min(1500rmin),如上層液體呈淡紅色或黃色,隱血(ynxu)試驗(yàn)陽(yáng)性,多為蛛網(wǎng)膜下腔出血,呈黃色說(shuō)明出血的時(shí)間已超過(guò)4 h。如上層液體澄清無(wú)色,紅細(xì)胞均沉管底,多為穿刺損傷所致的新鮮出血。 (2) 紅細(xì)胞在滲透壓較血漿高的腦脊液中5 min后,即可出現(xiàn)皺縮現(xiàn)象,因此紅細(xì)胞皺縮現(xiàn)象不能用以鑒別陳舊性或新鮮出血。 常見(jiàn)(chn jin)顏色變化及臨床意義 第四頁(yè),共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程n2、黃色:除陳舊性出血外,在腦脊髓腫瘤所致腦脊液滯留時(shí),也可呈黃色。黃疸患者的腦脊液也可呈黃色。但前者呈黃色透明的膠凍狀。n3、膿樣:由于白(膿)細(xì)胞增多,可見(jiàn)于各種
3、化膿性細(xì)菌引起的腦膜炎,應(yīng)立即直接涂片進(jìn)行革蘭染色檢查細(xì)菌。 n4、綠色:可見(jiàn)于綠膿桿菌(l nn n jn)、肺炎鏈球菌、甲型鏈球菌引起的腦膜炎。n5、褐或黑色:見(jiàn)于侵犯腦膜的中樞神經(jīng)系統(tǒng)黑色素肉瘤。第五頁(yè),共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程蛋白定性蛋白定性(dng xng)試驗(yàn)試驗(yàn)(潘迪氏法潘迪氏法)n實(shí)驗(yàn)原理:實(shí)驗(yàn)原理:腦脊液中球蛋白與苯酚結(jié)合,可形成不溶性蛋白鹽而下沉,產(chǎn)生白色渾濁或沉淀。n所需試劑:所需試劑:5%的苯酚溶液(rngy):取純苯酚25 ml,加蒸餾水至500 ml,用力振搖,置37溫箱內(nèi)12天,待完全溶解后,置棕色瓶?jī)?nèi)保存。第六頁(yè),共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程n試驗(yàn)方法試驗(yàn)方
4、法:取潘(迪)氏試劑23ml于小試管內(nèi),用毛細(xì)滴管滴入腦脊液12滴,襯以黑背景,立即觀察(gunch)結(jié)果。n結(jié)果判斷結(jié)果判斷:陰性:清晰透明,不顯霧狀;極弱陽(yáng)性():微呈白霧狀,在黑色背景下才能 看到;弱陽(yáng)性(+):灰白色云霧狀;陽(yáng)性(2+):白色渾濁;強(qiáng)陽(yáng)性(3+):白色濃絮狀沉淀;最強(qiáng)陽(yáng)性(4+):白色凝塊。第七頁(yè),共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程白細(xì)胞總數(shù)(zngsh)n非血性標(biāo)本:于小試管內(nèi)滴入1%冰醋酸1-2滴,轉(zhuǎn)動(dòng)試管,使壁內(nèi)沾有冰醋酸后傾去,滴入標(biāo)本3-4滴,數(shù)分鐘后充入計(jì)數(shù)池計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)10個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。白細(xì)胞數(shù)/L=10個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)106。如白細(xì)胞(xbo)較多,
5、可計(jì)數(shù)一大格內(nèi)的細(xì)胞(xbo)10 106。n血性標(biāo)本用1%的冰醋酸稀釋后計(jì)數(shù),并用以下公式校正:每升中白細(xì)胞數(shù)=每升中白細(xì)胞末校正數(shù)-每升中紅細(xì)胞數(shù)每升血液中白細(xì)胞數(shù)/每升血液中紅細(xì)胞數(shù)。(EDTA-K2抗凝?)(上機(jī)?)第八頁(yè),共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程n成人(chng rn)腦脊液內(nèi)無(wú)紅細(xì)胞,白細(xì)胞極少,其參考范圍:成人(chng rn):(0-8)106/L ;兒童為(0-15)106/L,新生兒為(0-30)106/L。n如白細(xì)胞達(dá)(10-50)106/L為輕度增加,(50-100)106/L為中度增加,200106/L以上顯著增加。如超過(guò)300106/L時(shí)外觀可變?yōu)闇啙帷?第九頁(yè)
6、,共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程白細(xì)胞分類(lèi)白細(xì)胞分類(lèi)(fn li)n1、直接分類(lèi)法:白細(xì)胞計(jì)數(shù)后,將低倍鏡換為高倍鏡,直接在高倍鏡下根據(jù)細(xì)胞核的形態(tài)分別計(jì)數(shù)單個(gè)核細(xì)胞(包括淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞)和多核細(xì)胞,應(yīng)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞,并以百分率表示。若白細(xì)胞少于100個(gè),應(yīng)直接寫(xiě)出單核、多核細(xì)胞的具體數(shù)字。n2、染色(rns)分類(lèi)法:如直接分類(lèi)不易區(qū)分細(xì)胞時(shí),可將腦脊液離心沉淀,取沉淀物2滴,加正常血清l滴,推片制成均勻薄膜,置室溫或37溫箱內(nèi)待干,進(jìn)行瑞氏染色后用油鏡分類(lèi)。如見(jiàn)有不能分類(lèi)的細(xì)胞,應(yīng)另行描述報(bào)告,如腦膜白血病或腫瘤時(shí)。第十頁(yè),共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程n正常腦脊液中白細(xì)胞(xbo)主要為
7、單個(gè)核細(xì)胞(xbo),多為淋巴細(xì)胞(xbo)及大單核細(xì)胞(xbo),兩者之比約為7:3,偶見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞(xbo):軟腦膜和蛛網(wǎng)膜細(xì)胞(xbo)、室管膜細(xì)胞(xbo)、脈絡(luò)膜細(xì)胞(xbo)等。 n 正常腦脊液正常腦脊液 單個(gè)核細(xì)胞:約單個(gè)核細(xì)胞:約95%95%, 多型核細(xì)胞:約多型核細(xì)胞:約5%5%。第十一頁(yè),共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程紅細(xì)胞總數(shù)紅細(xì)胞總數(shù)(zngsh)n1、對(duì)澄清的腦脊液可混勻后用滴管直接滴入計(jì)數(shù)池,計(jì)數(shù)10個(gè)大方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù),其總和即為每l的細(xì)胞數(shù)。n2、渾濁或帶血的腦脊液可用血紅蛋白吸管吸取(xq)混勻的腦脊液20l,加入含紅細(xì)胞稀釋液0.38m1的小試管內(nèi),混勻后滴入計(jì)數(shù)池內(nèi),用低倍鏡計(jì)數(shù)4個(gè)大方格中的細(xì)胞總數(shù),乘以50,即為每l腦脊液的細(xì)胞總數(shù)。第十二頁(yè),共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程第十三頁(yè),共十四頁(yè)。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程內(nèi)容(nirng)總結(jié)腦脊液常規(guī)操作規(guī)程(cozuguchng)。如上層液體澄清無(wú)色,紅細(xì)胞均沉管底,多為穿刺損傷所致的新鮮出血。3、膿樣:由于白(膿)細(xì)胞增多,可見(jiàn)于
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