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1、腦脊液常規(guī)操作規(guī)程腦脊液常規(guī)腦脊液常規(guī)(chnggu)操作操作規(guī)程規(guī)程河大一附院檢驗科河大一附院檢驗科第一頁,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程常規(guī)檢測(jin c)內容n包括:一般性狀的檢查(jinch)、潘迪氏試驗、白細胞計數(shù)與分類、革蘭氏染色、抗酸染色、墨汁負染色。第二頁,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程一般性狀(xngzhung)檢查n主要觀察顏色(無色、白色(bis)、紅色、黃色、綠色、黑色等),透明度(透明、微渾、渾濁、膿樣等),凝塊(無、有或薄膜形成、膠凍狀 )。第三頁,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程n1 1、紅色:、紅色: 如標本為均勻紅色血性腦脊液,為區(qū)別蛛網(wǎng)膜下腔出血或穿刺性損傷,應:

2、 (1)將血性腦脊液試管離心5 min(1500rmin),如上層液體呈淡紅色或黃色,隱血(ynxu)試驗陽性,多為蛛網(wǎng)膜下腔出血,呈黃色說明出血的時間已超過4 h。如上層液體澄清無色,紅細胞均沉管底,多為穿刺損傷所致的新鮮出血。 (2) 紅細胞在滲透壓較血漿高的腦脊液中5 min后,即可出現(xiàn)皺縮現(xiàn)象,因此紅細胞皺縮現(xiàn)象不能用以鑒別陳舊性或新鮮出血。 常見(chn jin)顏色變化及臨床意義 第四頁,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程n2、黃色:除陳舊性出血外,在腦脊髓腫瘤所致腦脊液滯留時,也可呈黃色。黃疸患者的腦脊液也可呈黃色。但前者呈黃色透明的膠凍狀。n3、膿樣:由于白(膿)細胞增多,可見于各種

3、化膿性細菌引起的腦膜炎,應立即直接涂片進行革蘭染色檢查細菌。 n4、綠色:可見于綠膿桿菌(l nn n jn)、肺炎鏈球菌、甲型鏈球菌引起的腦膜炎。n5、褐或黑色:見于侵犯腦膜的中樞神經系統(tǒng)黑色素肉瘤。第五頁,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程蛋白定性蛋白定性(dng xng)試驗試驗(潘迪氏法潘迪氏法)n實驗原理:實驗原理:腦脊液中球蛋白與苯酚結合,可形成不溶性蛋白鹽而下沉,產生白色渾濁或沉淀。n所需試劑:所需試劑:5%的苯酚溶液(rngy):取純苯酚25 ml,加蒸餾水至500 ml,用力振搖,置37溫箱內12天,待完全溶解后,置棕色瓶內保存。第六頁,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程n試驗方法試驗方

4、法:取潘(迪)氏試劑23ml于小試管內,用毛細滴管滴入腦脊液12滴,襯以黑背景,立即觀察(gunch)結果。n結果判斷結果判斷:陰性:清晰透明,不顯霧狀;極弱陽性():微呈白霧狀,在黑色背景下才能 看到;弱陽性(+):灰白色云霧狀;陽性(2+):白色渾濁;強陽性(3+):白色濃絮狀沉淀;最強陽性(4+):白色凝塊。第七頁,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程白細胞總數(shù)(zngsh)n非血性標本:于小試管內滴入1%冰醋酸1-2滴,轉動試管,使壁內沾有冰醋酸后傾去,滴入標本3-4滴,數(shù)分鐘后充入計數(shù)池計數(shù),計數(shù)10個大方格內的白細胞數(shù)。白細胞數(shù)/L=10個大方格內的白細胞數(shù)106。如白細胞(xbo)較多,

5、可計數(shù)一大格內的細胞(xbo)10 106。n血性標本用1%的冰醋酸稀釋后計數(shù),并用以下公式校正:每升中白細胞數(shù)=每升中白細胞末校正數(shù)-每升中紅細胞數(shù)每升血液中白細胞數(shù)/每升血液中紅細胞數(shù)。(EDTA-K2抗凝?)(上機?)第八頁,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程n成人(chng rn)腦脊液內無紅細胞,白細胞極少,其參考范圍:成人(chng rn):(0-8)106/L ;兒童為(0-15)106/L,新生兒為(0-30)106/L。n如白細胞達(10-50)106/L為輕度增加,(50-100)106/L為中度增加,200106/L以上顯著增加。如超過300106/L時外觀可變?yōu)闇啙帷?第九頁

6、,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程白細胞分類白細胞分類(fn li)n1、直接分類法:白細胞計數(shù)后,將低倍鏡換為高倍鏡,直接在高倍鏡下根據(jù)細胞核的形態(tài)分別計數(shù)單個核細胞(包括淋巴細胞及單核細胞)和多核細胞,應數(shù)100個白細胞,并以百分率表示。若白細胞少于100個,應直接寫出單核、多核細胞的具體數(shù)字。n2、染色(rns)分類法:如直接分類不易區(qū)分細胞時,可將腦脊液離心沉淀,取沉淀物2滴,加正常血清l滴,推片制成均勻薄膜,置室溫或37溫箱內待干,進行瑞氏染色后用油鏡分類。如見有不能分類的細胞,應另行描述報告,如腦膜白血病或腫瘤時。第十頁,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程n正常腦脊液中白細胞(xbo)主要為

7、單個核細胞(xbo),多為淋巴細胞(xbo)及大單核細胞(xbo),兩者之比約為7:3,偶見內皮細胞(xbo):軟腦膜和蛛網(wǎng)膜細胞(xbo)、室管膜細胞(xbo)、脈絡膜細胞(xbo)等。 n 正常腦脊液正常腦脊液 單個核細胞:約單個核細胞:約95%95%, 多型核細胞:約多型核細胞:約5%5%。第十一頁,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程紅細胞總數(shù)紅細胞總數(shù)(zngsh)n1、對澄清的腦脊液可混勻后用滴管直接滴入計數(shù)池,計數(shù)10個大方格內紅細胞數(shù),其總和即為每l的細胞數(shù)。n2、渾濁或帶血的腦脊液可用血紅蛋白吸管吸取(xq)混勻的腦脊液20l,加入含紅細胞稀釋液0.38m1的小試管內,混勻后滴入計數(shù)池內,用低倍鏡計數(shù)4個大方格中的細胞總數(shù),乘以50,即為每l腦脊液的細胞總數(shù)。第十二頁,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程第十三頁,共十四頁。腦脊液常規(guī)操作規(guī)程內容(nirng)總結腦脊液常規(guī)操作規(guī)程(cozuguchng)。如上層液體澄清無色,紅細胞均沉管底,多為穿刺損傷所致的新鮮出血。3、膿樣:由于白(膿)細胞增多,可見于

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