桃紅清血膠囊中２３５４′-四羥基二苯乙烯-２-Ｏ-β-Ｄ葡萄糖苷ＨＰＬＣ檢測(cè)方法的建立及評(píng)價(jià)

1、桃紅清血膠囊中，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷檢測(cè)方法的建立及評(píng)價(jià)摘要目的：建立桃紅清血膠囊中，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷含量的測(cè)定方法，為工業(yè)生產(chǎn)的質(zhì)量控制提供依據(jù)。方法：采用高效液相色譜法（）測(cè)定桃紅清血膠囊中，-四羥基二苯乙烯- 葡萄糖苷的含量，具體條件為：-柱（.，），流動(dòng)相為乙腈-水（），檢測(cè)波長(zhǎng)為，柱溫為。結(jié)果：，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷在.范圍內(nèi)有良好線性關(guān)系，回歸方程為 ，.；平均回收率.，（）為. （）；以精密度實(shí)驗(yàn)、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)考察的分別為.、.和.。經(jīng)測(cè)試并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際情況限定桃紅清血膠囊中，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷含量不少于.粒。結(jié)論：檢測(cè)桃紅清血膠囊中，-四

2、羥基二苯乙烯-葡萄糖苷含量的方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單可行，重復(fù)性好，可作為桃紅清血膠囊質(zhì)量控制方法。關(guān)鍵詞桃紅清血膠囊；，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷；色譜法，高效液相中圖分類號(hào).；文獻(xiàn)標(biāo)志碼桃紅清血膠囊是將國(guó)家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編收載的桃紅清血丸- （-）-經(jīng)劑型改革制成的新藥，具有調(diào)和氣血，化瘀消斑之功效；對(duì)氣血不和經(jīng)絡(luò)瘀滯所致的白癜風(fēng)等癥具有良好療效；劑型改革后提高了穩(wěn)定性和生物利用度，彌補(bǔ)了丸劑因加入粘合劑造成在胃腸道中分散慢和吸收差的不足。，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷為本處方制何首烏藥材中的主要有效成分，且與本品的功能主治較吻合-。目前尚未見(jiàn)有關(guān)桃紅清血膠囊含量測(cè)定的研究報(bào)道，本研究首次采用高效液相色

3、譜法（，）對(duì)桃紅清血膠囊中，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷含量-進(jìn)行測(cè)定，以期為工業(yè)生產(chǎn)的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。材料與方法.樣品、試劑及主要儀器桃紅清血膠囊（.粒）自制；，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷對(duì)照品（供含量測(cè)定用，批號(hào)：-，中國(guó)藥品生物制品檢定所提供）；所用試劑乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。島津-高效液相色譜儀；-紫外可見(jiàn)檢測(cè)器；日立-型分光光度計(jì)；十萬(wàn)分之一電子天平。.對(duì)照品溶液的制備精密稱取，-四羥基二苯乙烯- 葡萄糖苷對(duì)照品.，置量瓶中，加甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密吸取對(duì)照品溶液.、.、.、.、. 和. ，分別置量瓶中，加甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，作為系列對(duì)照品溶液。.供

4、試品溶液及陰性對(duì)照溶液的制備取本品粒內(nèi)容物，精密稱定，求得平均粒重。研細(xì)，取約.，精密稱定，置量瓶中，加甲醇溶液，超聲處理 （功率，頻率），放冷，用甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，靜置，濾過(guò)，取續(xù)濾液再經(jīng).微孔濾膜過(guò)濾后，即得。按處方配比與制法，制成不含何首烏藥材的陰性對(duì)照溶液。.測(cè)定方法 - （. .，）色譜柱；乙腈-水（）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為；柱溫。理論板數(shù)按，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷峰計(jì)算，應(yīng)不低于。在此條件下，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷和樣品中的其他物質(zhì)可以得到良好的分離，而陰性液無(wú)干擾。結(jié)果.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別吸取上述份對(duì)照品溶液各，按選定色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以進(jìn)樣量（）為橫坐標(biāo)，峰面積積

5、分值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為，.；，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷在.范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。.精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取同一供試液，在上述同一色譜條件下，連續(xù)進(jìn)樣次，測(cè)定峰面積，. （）。.穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精密吸取對(duì)照品及供試液各，分別于配制后、 及依樣品測(cè)定方法測(cè)定，.（），供試液在內(nèi)穩(wěn)定性好。.重復(fù)性實(shí)驗(yàn)分別稱取本品同一批號(hào)樣品份，按供試品溶液制備方法制備，依法進(jìn)樣測(cè)定，. （）。.回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取已知含量的成品粉末份，定量加入，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷對(duì)照品，依法進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算回收率，平均回收率為.，且.（）。.樣品含量測(cè)定分別稱取不同批號(hào)的樣品批（每批份），制成供試品溶液。另取，-四羥基

6、二苯乙烯-葡萄糖苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每含的溶液，作為對(duì)照品溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算桃紅清血膠囊中，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷含量，依法測(cè)定批樣品，結(jié)果批樣品中，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷含量（）平均值為.粒。見(jiàn)圖。結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際情況，將批樣品中，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷的含量平均值下浮定為本品限度，即本品，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷含量不少于.粒。討論本文作者曾采用甲醇、甲醇及乙醇制備供試品溶液，分別進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果甲醇溶液制備供試液分離效果最好且峰面積積分值最高，故決定采用甲醇制備供試品溶液。參照藥典方法流動(dòng)相的比例進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，樣品中，

7、-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷的峰不能達(dá)到完全基線分離，經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)流動(dòng)相調(diào)整為乙腈-水（），即可排除干擾。據(jù)文獻(xiàn)-報(bào)道，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷色譜峰的光譜吸收曲線在處有最大吸收。本實(shí)驗(yàn)以甲醇溶液為參比，在波長(zhǎng)范圍內(nèi)繪制吸收曲線，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷在處有最大吸收，故確定本品經(jīng)高效液相分離測(cè)定，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷含量的檢測(cè)波長(zhǎng)確定為。測(cè)定的批樣品采用不同產(chǎn)地不同批次的何首烏藥材入藥制備，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷含量為.粒，差異較大，這是由于不同批次藥材含量差異較大導(dǎo)致的（本文作者曾測(cè)定不同批次何首烏藥材含量為.），所以為保證成品的質(zhì)量，控制原料藥材的含量非常重要。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)考察，-四羥基二苯乙烯-葡萄糖苷必須嚴(yán)格避光低溫放置，供試液以甲醇定容后，需在內(nèi)進(jìn)行測(cè)定，否則對(duì)照品及供試液均降解。綜上所述，檢測(cè)桃紅清