生物：2.1《微生物的實驗室培養(yǎng)》課件1(新人教版選修1)

1、選修1 專題二課題課題1 微生物的實驗室培養(yǎng)微生物的實驗室培養(yǎng)課題課題1 微生物的實驗室培養(yǎng)微生物的實驗室培養(yǎng)微生物的實驗室微生物的實驗室培養(yǎng)條件：培養(yǎng)條件：（1）合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件）合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件（2）確保其他微生物無法混入）確保其他微生物無法混入一一. 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 1. 概念：概念： 按照微生物對按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。2. 種類：種類：（按物理形態(tài)分）（按物理形態(tài)分）液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基應(yīng)用微生物分離、鑒定、計數(shù)和應(yīng)用微生物分離、鑒定、計數(shù)和菌

2、種保存等方面菌種保存等方面 按照培養(yǎng)基用途分按照培養(yǎng)基用途分 選擇性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基按照培養(yǎng)基的成分來分按照培養(yǎng)基的成分來分 合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基3. 成分：成分：思考：思考：各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都包括哪些成分？各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都包括哪些成分？水、無機鹽、碳源、氮源、（生長因子）水、無機鹽、碳源、氮源、（生長因子）+滿足微生物對滿足微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)、氧氣的要求、特殊營養(yǎng)物質(zhì)、氧氣的要求C二二. 無菌技術(shù)無菌技術(shù)思考：思考：1. 什么是無菌技術(shù)？包括哪些方面？什么是無菌技術(shù)？包括哪些方

3、面？2. 無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？（微生物污染外，還有什么目的？（P15旁欄思考）旁欄思考）3. 消毒和滅菌有何不同？消毒和滅菌有何不同？4. 常用的消毒和滅菌方法有哪些？常用的消毒和滅菌方法有哪些？無菌技術(shù)：無菌技術(shù)：泛指培養(yǎng)微生物操作中，所有泛指培養(yǎng)微生物操作中，所有防防 止雜菌污染止雜菌污染的方法。的方法。無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。C3. 常用的常用的消毒消毒方法：方法：煮沸消毒法，巴氏消毒法，紫外線或化學(xué)藥劑消毒法煮沸消毒法，巴氏消毒法

4、，紫外線或化學(xué)藥劑消毒法常用的常用的滅菌滅菌方法：方法：灼燒滅菌灼燒滅菌干熱滅菌干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌 ：100kPa 121 15-30min判斷下列各項是否需要消毒或滅菌。如需要，選擇合適方法。判斷下列各項是否需要消毒或滅菌。如需要，選擇合適方法。（1）豆?jié){）豆?jié){ （2）游泳池）游泳池 （3）超凈工作臺超凈工作臺 （4）玻棒、試管、吸管、錐形瓶）玻棒、試管、吸管、錐形瓶 （5）培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)皿）培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)皿 （6）無菌水）無菌水 （7）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（8）接種環(huán)、接種針接種環(huán)、接種針（9）實驗操作者的雙手）實驗操作者的雙手牛奶牛奶 接種室、接種箱

5、或超凈工作臺接種室、接種箱或超凈工作臺 接種工具，接種環(huán)、接種針或其他金屬用具接種工具，接種環(huán)、接種針或其他金屬用具 玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿） 三三. 實驗操作實驗操作-大腸桿菌的純化培養(yǎng)大腸桿菌的純化培養(yǎng)（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 計算稱量溶化滅菌計算稱量溶化滅菌倒平板倒平板（二）純化大腸桿菌（二）純化大腸桿菌 最常用的接種方法有：最常用的接種方法有： 平板劃線法平板劃線法和和稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法（冷卻至（冷卻至50）涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操

6、作要求，想結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第一想，第2 2步應(yīng)如何進行無菌操作？步應(yīng)如何進行無菌操作？ 應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌無菌”。例如，。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。等。倒平板倒平板討論討論1，2討論討論3，41.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50 左右時，才能左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過

7、火焰？為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？提示：可以用提示：可以用手觸手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手剛剛不燙手時，就可以進行時，就可以進行倒平板了。倒平板了。通過灼燒滅菌，通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？微生物嗎？為什么？ 平板冷凝后，皿蓋上

8、會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，表面的濕度也比較高， 將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。 不要不要空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生平板劃線法平板劃線法討討論論2，31.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然

9、需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？環(huán)嗎？為什么？操作的第一步灼燒接種環(huán)：操作的第一步灼燒接種環(huán)： 每次劃線前灼燒接種環(huán)：每次劃線前灼燒接種環(huán)：劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)：劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)： 避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物； 殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。及時殺

10、死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？3.在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？次劃線的末端開始劃線？以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。劃線后，線條劃線后，線條末端末端細菌的數(shù)目比細菌的數(shù)目比線條起始處線條起始處要要少少， 每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增

11、加而逐步減少，最終能得到由目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落單個細菌繁殖而來的菌落接種環(huán)接種環(huán)接種針接種針涂布器涂布器 1 1、臨時保藏法：、臨時保藏法： 對象：對象： 溫度：溫度： 缺點：缺點： 2 2、甘油管藏法：、甘油管藏法： 對象：對象： 溫度：溫度： 結(jié)果分析與評價結(jié)果分析與評價 課題延伸課題延伸（P20）頻繁使用的菌種頻繁使用的菌種 44（冰箱）（冰箱） 容易被污染或容易被污染或產(chǎn)生變異產(chǎn)生變異 長期保存的菌種長期保存的菌種 -20-20（冷凍箱）（冷凍箱） 選擇培養(yǎng)基不加氮源的無氮培養(yǎng)基不加氮源的無氮培養(yǎng)基: : 分離固氮菌分離固氮菌不加含碳有機物的無碳培養(yǎng)基不加含碳有機物的無碳培養(yǎng)基: : 分離自養(yǎng)型