食品安全檢驗技術(shù)-閩北職業(yè)技術(shù)學(xué)院

1、閩北職業(yè)技術(shù)學(xué)院自編講義食品平安檢驗技術(shù)食品技術(shù)教研室 編寫二 O 一二年二月實訓(xùn)一 食品中水分的測定一、實訓(xùn)目的一了解食品中水分測定的意義二掌握食品中水分的測定方法三掌握食品平安國家標(biāo)準(zhǔn)中水分的測定方法GB 5009.3 2021說明：本文中直接枯燥法適用于在101 C105 C下，不含或含其他揮發(fā)性物質(zhì)甚微的谷物及其制品、水產(chǎn)品、豆制品、乳制品、肉制品及鹵菜制品等食品中水分的測定，不適用于水 分含量小于 0.5 g/100 g 的樣品。減壓枯燥法適用于糖、 味精等易分解的食品中水分的測定， 不適用于添加了其它原料的 糖果，如奶糖、軟糖等試樣測定，同時該法不適用于水分含量小于0.5 g/10

2、0 g 的樣品。蒸餾法適用于含較多揮發(fā)性物質(zhì)的食品如油脂、 香辛料等水分的測定， 不適用于水分含 量小于 1g/100 g 的樣品?？?？費休法適用于食品中水分的測定，卡爾？費休容量法適用于水分含量大于1.0 X 10g/100 g的樣品，卡爾？費休庫倫法適用于水分含量大于1.0 X 10 -5 g/100 g 的樣品。第一法 直接枯燥法二、實訓(xùn)原理利用食品中水分的物理性質(zhì)，在101.3 kPa 個大氣壓，溫度101 C105 C下采用揮發(fā)方法測定樣品中枯燥減失的重量， 包括吸濕水、 局部結(jié)晶水和該條件下能揮發(fā)的物質(zhì)， 再通過枯燥前后的稱量數(shù)值計算出水分的含量。三、試劑和材料 除非另有規(guī)定，本

3、方法中所用試劑均為分析純。一鹽酸：優(yōu)級純。二氫氧化鈉NaOH :優(yōu)級純。三鹽酸溶液6 mol/L :量取50 mL鹽酸，加水稀釋至100 mL。四氫氧化鈉溶液 6mol/L :稱取 24 g 氫氧化鈉，加水溶解并稀釋至 100 mL。五海砂:取用水洗去泥土的海砂或河砂，先用鹽酸2.3 煮沸 0.5 h ，用水洗至中性，再用氫氧化鈉溶液2.4 煮沸0.5 h，用水洗至中性，經(jīng)105 C枯燥備用。四、儀器和設(shè)備扁形鋁制或玻璃制稱量瓶、 電熱恒溫枯燥箱、枯燥器內(nèi)附有效枯燥劑和天平感 量為 0.1 mg。五、分析步驟一固體試樣1、 取潔凈鋁制或玻璃制的扁形稱量瓶，置于101 C105 C枯燥箱中，瓶蓋

4、斜支于瓶邊，加熱1.0 h,取出蓋好，置枯燥器內(nèi)冷卻0.5 h,稱量，并重復(fù)枯燥至前后兩次質(zhì)量差不超過2 mg，即為恒重。2、 將混合均勻的試樣迅速磨細(xì)至顆粒小于2 mm，不易研磨的樣品應(yīng)盡可能切碎，稱取2 g10 g試樣精確至0.0001 g，放入此稱量瓶中，試樣厚度不超過5 mm，如為疏松試樣，厚度不超過10 mm,加蓋。3、 將上述樣品精密稱量后，置101 C105 C枯燥箱中，瓶蓋斜支于瓶邊，枯燥2 h4 h后，蓋好取出，放入枯燥器內(nèi)冷卻0.5 h后稱量。然后再放入101 C105 C枯燥箱中枯燥1 h左右，取出，放入枯燥器內(nèi)冷卻0.5 h后再稱量。并重復(fù)以上操作至前后兩次質(zhì)量差不超過

5、2 mg ,即為恒重。注：兩次恒重值在最后計算中，取最后一次的稱量值。二固體或液體試樣1、 取潔凈的稱量瓶，內(nèi)加10 g海砂及一根小玻棒，置于101 C105 C枯燥箱中，枯燥 1.0 h后取出，放入枯燥器內(nèi)冷卻 0.5 h后稱量，并重復(fù)枯燥至恒重。2、然后稱取5 g10 g試樣精確至0.0001 g，置于蒸發(fā)皿中，用小玻棒攪勻放在沸水浴上蒸干，并隨時攪拌，擦去皿底的水滴，置101 C105 C枯燥箱中枯燥4 h后蓋好取出，放入枯燥器內(nèi)冷卻0.5 h后稱量。3、 然后再放入101 C105 C枯燥箱中枯燥1 h左右，取出，放入枯燥器內(nèi)冷卻0.5 h后再稱量。并重復(fù)以上操作至前后兩次質(zhì)量差不超過

6、2 mg，即為恒重。六、分析結(jié)果的表述試樣中的水分的含量按式1進行計算。m1 - m2 X 二-X100 1m1 - m3式中：X 試樣中水分的含量，單位為克每百克g/100g;m1稱量瓶加海砂、玻棒和試樣的質(zhì)量，單位為克g;m2稱量瓶加海砂、玻棒和試樣枯燥后的質(zhì)量，單位為克 g;m3稱量瓶加海砂、玻棒的質(zhì)量，單位為克g。水分含量 1 g/100時，計算結(jié)果保存三位有效數(shù)字；水分含量v1 g/100 g時，結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。七、精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的5 %。第二法 減壓枯燥法一、原理利用食品中水分的物理性質(zhì)，在到達40 kPa53 kPa壓

7、力后加熱至60 C犬C,用減壓烘干方法去除試樣中的水分，再通過烘干前后的稱量數(shù)值計算出水分的含量。二、儀器和設(shè)備真空枯燥箱、 扁形鋁制或玻璃制稱量瓶、枯燥器 內(nèi)附有效枯燥劑 、天平感量為 0.1 mg。三、分析步驟一試樣的制備 ：粉末和結(jié)晶試樣直接稱取；較大塊硬糖經(jīng)研缽粉碎，混勻。二測定：取已恒重的稱量瓶稱取約 2 g10 g 精確至0.0001 g試樣，放入真空干 燥箱內(nèi)，將真空枯燥箱連接真空泵， 抽出真空枯燥箱內(nèi)空氣 所需壓力一般為 40 kPa53 kPa， 并同時加熱至所需溫度 60 Ci5 C。關(guān)閉真空泵上的活塞，停止抽氣，使真空枯燥箱內(nèi)保持 一定的溫度和壓力，經(jīng) 4 h后，翻開活塞

8、，使空氣經(jīng)枯燥裝置緩緩?fù)ㄈ胫琳婵湛菰锵鋬?nèi)，待 壓力恢復(fù)正常后再翻開。取出稱量瓶，放入枯燥器中0.5 h后稱量，并重復(fù)以上操作至前后兩 次質(zhì)量差不超過2 mg ,即為恒重。四、分析結(jié)果的表述同第一法。五、精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10 %。第三法蒸餾法、原理利用食品中水分的物理化學(xué)性質(zhì)， 使用水分測定器將食品中的水分與甲苯或二甲苯共同 蒸出，根據(jù)接收的水的體積計算出試樣中水分的含量。本方法適用于含較多其他揮發(fā)性物質(zhì)的食品，如油脂、香辛料等。二、試劑和材料甲苯或二甲苯化學(xué)純：取甲苯或二甲苯，先以水飽和后，分去水層，進行蒸餾，收集餾出液備用。三、儀器和設(shè)

9、備一水分測定器：如圖1所示帶可調(diào)電熱套。水分接收管容量5 mL，最小刻度值0.1 mL， 容量誤差小于0.1 mL。1.250 mL蒸餾瓶；2.水分接收管，有刻度；3.冷凝管。圖1水分測定器二天平：感量為0.1mg。四、分析步驟準(zhǔn)確稱取適量試樣應(yīng)使最終蒸出的水在2 mL5 mL ,但最多取樣量不得超過蒸餾瓶的2/3，放入250 mL錐形瓶中，參加新蒸餾的甲苯 或二甲苯75 mL ,連接冷凝管與水分接 收管，從冷凝管頂端注入甲苯，裝滿水分接收管。加熱慢慢蒸餾，使每秒鐘的餾出液為兩滴，待大局部水分蒸出后，加速蒸餾約每秒鐘4滴，當(dāng)水分全部蒸出后，接收管內(nèi)的水分體積不再增加時，從冷凝管頂端參加甲苯?jīng)_洗

10、。如冷凝管壁附有水滴， 可用附有小橡皮頭的銅絲擦下，再蒸餾片刻至接收管上部及冷凝管壁無水滴附著，接收管水平面保持10min不變?yōu)檎麴s終點，讀取接收管水層的容積。五、分析結(jié)果的表述試樣中水分的含量按式2進行計算。vX =X100 2m式中：X試樣中水分的含量，單位為毫升每百克mL/100 g 或按水在20 C的密度0.998，20 g/mL計算質(zhì)量;V接收管內(nèi)水的體積，單位為毫升mL；m試樣的質(zhì)量，單位為克g 。以重復(fù)性條件下得兩次獨立測定結(jié)果算術(shù)平均值表示，結(jié)果保存三位有效數(shù)字。六、精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10 %。第四法卡爾費休法一、原理根據(jù)碘

11、能與水和二氧化硫發(fā)生化學(xué)反響，在有吡啶和甲醇共存時，1 mol碘只與1 mol水作用，反響式如下：C5H5N 12 + C5H5N SO2 + C5H5N + H 20 + CH2C 5H5N HI + C 5H6NSO4CH3卡爾 費休水分測定法又分為庫侖法和容量法。庫侖法測定的碘是通過化學(xué)反響產(chǎn)生的，只要電解液中存在水，所產(chǎn)生的碘就會和水以1:1的關(guān)系按照化學(xué)反響式進行反響。當(dāng)所有的水都參與了化學(xué)反響，過量的碘就會在電極的陽極區(qū)域形成，反響終止。容量法測定的碘是作為滴定劑參加的，滴定劑中碘的濃度是的，根據(jù)消耗滴定劑的體積，計算消耗碘的量，從而計量出被測物質(zhì)水的含量。二、試劑和材料卡爾費休試

12、劑、無水甲醇CH40 優(yōu)級純。三、儀器和設(shè)備卡爾費休水分測定儀、天平感量為0.1 mg 。四、分析步驟一卡爾 費休試劑的標(biāo)定容量法在反響瓶中加一定體積浸沒鉑電極的甲醇，在攪拌下用卡爾費休試劑滴定至終點。參加10 mg水精確至0.0001 g，滴定至終點并記錄卡爾費休試劑的用量V?？栙M休試劑的滴定度按式3計算：(3)式中：T卡爾費休試劑的滴定度，單位為毫克每毫升 mg/mL ;M水的質(zhì)量，單位為毫克mg;V滴定水消耗的卡爾 費休試劑的用量，單位為毫升 mL 。二試樣前處理可粉碎的固體試樣要盡量粉碎，使之均勻。不易粉碎的試樣可切碎。三試樣中水分的測定于反響瓶中加一定體積的甲醇或卡爾費休測定儀中規(guī)

13、定的溶劑浸沒鉑電極，在攪拌下用卡爾費休試劑滴定至終點。迅速將易溶于上述溶劑的試樣直接參加滴定杯中；對于不易溶解的試樣，應(yīng)采用對滴定杯進行加熱或參加已測定水分的其他溶劑輔助溶解后用卡爾費休試劑滴定至終點。建議采用庫侖法測定試樣中的含水量應(yīng)大于10容量法應(yīng)大于100ug對于某些需要較長時間滴定的試樣，需要扣除其漂移量。四漂移量的測定在滴定杯中參加與測定樣品一致的溶劑，并滴定至終點，放置不少于10 min后再滴定至終點，兩次滴定之間的單位時間內(nèi)的體積變化即為漂移量D。五、分析結(jié)果的表述固體試樣中水分的含量按式4，液體試樣中水分的含量按式 5進行計算。(Vi - D Xt) 乂TMX100(Vi -

14、D X ) XTV2PX100(4)(5)式中:X 試樣中水分的含量，單位為克每百克 g /100 g；V1 滴定樣品時卡爾 費休試劑體積的數(shù)值，單位為毫升mL;T 卡爾 費休試劑的滴定度的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為克每毫升 g/ mL ;M 樣品質(zhì)量的數(shù)值，單位為克g;V2 液體樣品體積的數(shù)值，單位為毫升mL;D漂移量，單位為毫升每分鐘mL/min ;t滴定時所消耗的時間，單位為分鐘 min;P 腋體樣品的密度，單位為克每毫升 g/ mL。<1 g/100 g時，計算結(jié)果水分含量> 1 g/100 g寸，計算結(jié)果保存三位有效數(shù)字；水分含量保存兩位有效數(shù)字。六、精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次

15、獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。附實例：面粉中水分的測定一、試劑：面粉二、儀器和設(shè)備 扁形鋁制或玻璃制稱量瓶，電熱恒溫枯燥箱，枯燥器：內(nèi)附有效枯燥劑，天平：感量為0.1 mg三、分析步驟一取潔凈鋁制或玻璃制的扁形稱量瓶，置于101 C105 C枯燥箱中，瓶蓋斜支于瓶邊，加熱1.0 h,取出蓋好，置枯燥器內(nèi)冷卻 0.5 h,稱量，并重復(fù)枯燥至前后兩次質(zhì)量差不 超過2 mg，即為恒重。二稱取2 g10 g面粉試樣精確至0.0001 g，放入此稱量瓶中，試樣厚度不超過5mm，如為疏松試樣，厚度不超過10 mm，加蓋。三將上述樣品精密稱量后，置101 C105 C枯燥箱中，瓶蓋斜支于

16、瓶邊，枯燥2 h4 h后，蓋好取出，放入枯燥器內(nèi)冷卻0.5 h后稱量。然后再放入101 C105 C枯燥箱中枯燥1 h左右，取出，放入枯燥器內(nèi)冷卻0.5 h后再稱量。并重復(fù)以上操作至前后兩次質(zhì)量差不超過2 mg ,即為恒重。注：兩次恒重值在最后計算中,取最后一次的稱量值。四、分析結(jié)果的表述見上文直接枯燥法中式 1。實訓(xùn)二滴定法測定醬油中氨基酸態(tài)氮的含量一、實訓(xùn)目的一學(xué)習(xí)及了解掌握電位滴定法測氨基酸態(tài)氮的根本原理及操作要點。二學(xué)會電位滴定法的根本操作技能。二、實訓(xùn)原理根據(jù)氨基酸的兩性作用， 參加甲醛以固定氨基的堿性， 使羧基顯示出酸性， 將酸度計的 玻璃電極及甘汞電極 或復(fù)合電極插入被測液中構(gòu)成

17、電池， 用堿液滴定，根據(jù)酸度計指示 的pH值判斷和控制滴定終點。三、儀器與試劑一儀器：酸度計，磁力攪拌器，燒杯250mL，微量滴定管。二試劑：pH=6.18標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液；20%中性甲醛溶液；0.05mol/L左右的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶 液。四、實訓(xùn)步驟一樣品處理吸取醬油5.00mL于100mL容量瓶中，加水定容。吸取定容液 20.00mL于250mL燒杯 中，加水60mL，放入磁力轉(zhuǎn)子，開動磁力攪拌器使轉(zhuǎn)速適當(dāng)。用pH6.18的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校正好酸度計，然后將電極清洗干凈，再插入到上述醬油液中，用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至酸度計指示pH8.2,記下消耗的NaOH溶液體積。二氨基酸的滴定在上述滴定至pH8.

18、2的溶液中參加10.00mL的中性甲醛溶液，再用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴 定至pH9.2,記下消耗的NaOH溶液體積。三空白滴定吸取80mL蒸餾水于250mL的燒杯中，用 NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至pH8.2，然后參加 10.00mL中性甲醛溶液，再用 NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至pH9.2,記下參加甲醛后消耗的NaOH溶液體積。五、實驗計算氨基酸態(tài)氮 %V1 -V2C 0014 100 mH20"00式中：Vi醬油稀釋液在參加甲醛后滴定至pH9.2所用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積mL ；V2空白滴定在參加甲醛后滴定至pH9.2所用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積 mL ；C NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 mol/L ；

19、M 吸取的醬油的質(zhì)量 g；0.014氮的毫摩爾質(zhì)量 g/m moL 。實訓(xùn)三 食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定一、實訓(xùn)目的一了解食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽測定的意義二掌握食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽測定方法三掌握食品平安國家標(biāo)準(zhǔn)中亞硝酸鹽與硝酸鹽測定方法GB 5009.33 2021第一法 離子色譜法二、原理試樣經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、 除去脂肪后， 采用相應(yīng)的方法提取和凈化， 以氫氧化鉀溶液為淋洗 液，陰離子交換柱別離，電導(dǎo)檢測器檢測。以保存時間定性，外標(biāo)法定量。三、試劑和材料一超純水：電阻率18.2 M Q ?cm二乙酸 CH 3COOH ：分析純。三氫氧化鉀 KOH ：分析純。四乙酸溶液 3 %：量取乙酸 3.

20、2 3 mL 于100 mL 容量瓶中，以水稀釋至刻度， 混勻。五亞硝酸根離子NO標(biāo)準(zhǔn)溶液100 mg/L,水基體。六硝酸根離子NOJ標(biāo)準(zhǔn)溶液1000 mg/L，水基體。七亞硝酸鹽以 NO2計，下同和硝酸鹽以 NO計，下同混合標(biāo)準(zhǔn)使用液：準(zhǔn)確 移取亞硝酸根離子 NO2-和硝酸根離子NO3-的標(biāo)準(zhǔn)溶液各1.0 mL于100 mL容量瓶中, 用水稀釋至刻度,此溶液每 1 L 含亞硝酸根離子 1.0 mg 和硝酸根離子 10.0 mg。四、儀器和設(shè)備一離子色譜儀：包括電導(dǎo)檢測器，配有抑制器，高容量陰離子交換柱，50卩L定量環(huán)。二食物粉碎機、超聲波清洗器。三天平：感量為 0.1 mg 和1 mg。四離

21、心機：轉(zhuǎn)速 > 10000轉(zhuǎn)/分鐘，配5 mL或10 mL離心管。五0.22卩m水性濾膜針頭濾器。六凈化柱：包括 C18 柱、 Ag 柱和 Na 柱或等效柱。七注射器： 1.0 mL 和2.5 mL。注：所有玻璃器皿使用前均需依次用 2 mol/L氫氧化鉀和水分別浸泡 4 h,然后用水沖洗 3次5次，晾干備用。五、分析步驟一試樣預(yù)處理1、新鮮蔬菜、水果：將試樣用去離子水洗凈，晾干后，取可食部切碎混勻。將切碎的 樣品用四分法取適量，用食物粉碎機制成勻漿備用。如需加水應(yīng)記錄加水量。2、肉類、 蛋、水產(chǎn)及其制品： 用四分法取適量或取全部， 用食物粉碎機制成勻漿備用。3、乳粉、豆奶粉、 嬰兒配方

22、粉等固態(tài)乳制品 不包括干酪 ：將試樣裝入能夠容納 2 倍 試樣體積的帶蓋容器中，通過反復(fù)搖晃和顛倒容器使樣品充分混勻直到使試樣均一化。4、發(fā)酵乳、乳、 煉乳及其他液體乳制品： 通過攪拌或反復(fù)搖晃和顛倒容器使試樣充分 混勻。5、干酪：取適量的樣品研磨成均勻的泥漿狀。為防止水分損失，研磨過程中應(yīng)防止產(chǎn) 生過多的熱量。二提取1、 水果、蔬菜、魚類、肉類、蛋類及其制品等：稱取試樣勻漿5 g 精確至0.01 g,可適當(dāng)調(diào)整試樣的取樣量， 以下相同 ，以 80 mL 水洗入 100 mL 容量瓶中， 超聲提取 30 min， 每隔5 min振搖一次，保持固相完全分散。于75 C水浴中放置5 min，取出放

23、置至室溫，加水稀釋至刻度。溶液經(jīng)濾紙過濾后，取局部溶液于10 000轉(zhuǎn)/分鐘離心15 min，上清液備用。2、 腌魚類、腌肉類及其它腌制品：稱取試樣勻漿 2 g 精確至0.01 g,以80 mL水洗 入100 mL容量瓶中，超聲提取30 min，每5 min振搖一次，保持固相完全分散。于 75 C水 浴中放置5 min，取出放置至室溫，加水稀釋至刻度。溶液經(jīng)濾紙過濾后，取局部溶液于10 000 轉(zhuǎn)/分鐘離心15 min，上清液備用。3、 孚L：稱取試樣10 g 精確至0.01 g,置于100 mL容量瓶中，加水80 mL ,搖勻， 超聲30 min，參加3 %乙酸溶液2 mL ,于4 C放置2

24、0 min，取出放置至室溫，加水稀釋至刻 度。溶液經(jīng)濾紙過濾,取上清液備用。4、 乳粉：稱取試樣2.5 g 精確至0.01 g,置于100 mL容量瓶中，加水80 mL ,搖勻， 超聲30 min，參加3 %乙酸溶液2 mL ,于4 C放置20 min，取出放置至室溫，加水稀釋至刻 度。溶液經(jīng)濾紙過濾,取上清液備用。5、 取上述備用的上清液約15 mL ,通過0.22皿 水性濾膜針頭濾器、C18柱，棄去前面3 mL 如果氯離子大于100 mg/L ,那么需要依次通過針頭濾器、C18柱、Ag柱和Na柱，棄去前面 7 mL ,收集后面洗脫液待測。固相萃取柱使用前需進行活化, 如使用 OnGuard

25、 II RP 柱1.0 mL、 OnGuard II Ag 柱1.0 mL 和 On Guard II Na 柱1.0 mL 1，其活化過程為： On Guard II RP 柱1.0 mL 使用前依次用 10 mL 甲醇、 15 mL 水通過,靜置活化 30 min。 OnGuard II Ag 柱 1.0 mL 和On Guard II Na 柱1.0 mL 用10mL水通過，靜置活化 30 min。三參考色譜條件1、色譜柱： 氫氧化物選擇性, 可兼容梯度洗脫的高容量陰離子交換柱, 如 Dionex IonPacAS11-HC4 mmx 250 mm 帶 IonPac AG11-HC 型保

26、護柱 4 mmX50 mm 1,或性能相當(dāng)?shù)碾x子色譜柱。2、淋洗液1 一般試樣：氫氧化鉀溶液，濃度為6 mmol/L70 mmol/L ;洗脫梯度為6 mmol/L 30 min , 70mmol/L 5 min , 6 mmol/L 5 min ; 流速 1.0 mL/min。2粉狀嬰幼兒配方食品：氫氧化鉀溶液，濃度為 5 mmol/L50 mmol/L ;洗脫梯度為5 mmol/L 33min ,50 mmol/L 5min , 5 mmol/L 5 min ;流速 1.3 mL/min。3、抑制器：連續(xù)自動再生膜陰離子抑制器或等效抑制裝置。4、 檢測器：電導(dǎo)檢測器，檢測池溫度為35 C。

27、5、進樣體積：50 uL可根據(jù)試樣中被測離子含量進行調(diào)整。五測定1、標(biāo)準(zhǔn)曲線移取亞硝酸鹽和硝酸鹽混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，加水稀釋，制成系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，含亞硝酸根離子濃度為 0.00 mg/L、0.02 mg/L、0.04 mg/L、0.06 mg/L、0.08 mg/L、0.10 mg/L、0.15 mg/L、 0.20 mg/L ;硝酸根離子濃度為 0.0 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L、1.0 mg/L、 1.5 mg/L、2.0 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，從低到高濃度依次進樣。得到上述各濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖圖1 。以亞硝酸根離子或硝酸根離子的濃度mg

28、/L 為橫坐標(biāo)，以峰高 訓(xùn)或峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或計算線性回歸方程。圖1亞硝酸鹽和硝酸鹽混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖2、樣品測定分別吸取空白和試樣溶液 50 uL在相同工作條件下，依次注入離子色譜儀中，記錄色 譜圖。根據(jù)保存時間定性，分別測量空白和樣品的峰高uS或峰面積。六、分析結(jié)果的表述試樣中亞硝酸鹽以 NO?計或硝酸鹽以NOJ計含量按式1計算：(c-c0) W xf X1000m X1000式中：X 試樣中亞硝酸根離子或硝酸根離子的含量，單位為毫克每千克 mg/kg ； c 測定用試樣溶液中的亞硝酸根離子或硝酸根離子濃度，單位為毫克每升 mg/L ；c0試劑空白液中亞硝酸根離子或硝酸根離子

29、的濃度，單位為毫克每升mg/L ;V試樣溶液體積，單位為毫升mL；f 試樣溶液稀釋倍數(shù)；m試樣取樣量，單位為克g 。說明：試樣中測得的亞硝酸根離子含量乘以換算系數(shù)1.5，即得亞硝酸鹽按亞硝酸鈉計含量；試樣中測得的硝酸根離子含量乘以換算系數(shù)1.37，即得硝酸鹽按硝酸鈉計含量。以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保存兩位有效數(shù)字。七、精密度重復(fù)性條件下獲得兩次獨立測定結(jié)果絕對值差，不得超過算術(shù)平均值的10 %。第二法 分光光度法、原理亞硝酸鹽采用鹽酸萘乙二胺法測定，硝酸鹽采用鎘柱復(fù)原法測定。試樣經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、 除去脂肪后， 在弱酸條件下亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮化后， 再 與

30、鹽酸萘乙二胺偶合形成紫紅色染料， 外標(biāo)法測得亞硝酸鹽含量。 采用鎘柱將硝酸鹽復(fù)原成 亞硝酸鹽，測得亞硝酸鹽總量，由此總量減去亞硝酸鹽含量，即得試樣中硝酸鹽含量。二、試劑和材料一除非另有規(guī)定， 本方法所用試劑均為分析純。 水為 GB/T 6682 規(guī)定的二級水或去離子 水。二亞鐵氰化鉀K4FeCN6 3H2O、乙酸鋅ZnCH3COO 2缶0、冰醋酸CH3C00H 八 硼酸鈉Na2B4O7 10出0、鹽酸p= 1.19 g/mL 、氨水25 % 、對氨基苯磺酸C6H7NO3S、 鹽酸奈乙胺C12H14N2 2HCl 、 亞硝酸鈉NaN02、硝酸鈉NaNO3、鋅皮或鋅棒、 硫酸鎘、三亞鐵氰化鉀溶液1

31、06 g/L:稱取106.0 g亞鐵氰化鉀，用水溶解，并稀釋至1000 mL。四乙酸鋅溶液 220 g/L： 稱取220.0 g 乙酸鋅，先加 30 mL 冰醋酸 9.3溶解，用水 稀釋至 1000 mL。五飽和硼砂溶液 50 g/L: 稱取5.0 g 硼酸鈉，溶于 100 mL 熱水中，冷卻后備用。六氨緩沖溶液pH 9.69.7:量取30 mL鹽酸，加100 mL水，混勻后加65 mL氨水， 再加水稀釋至1000 mL,混勻。調(diào)節(jié)pH至9.69.7。七氨緩沖液的稀釋液:量取 50 mL 氨緩沖溶液，加水稀釋至 500 mL ，混勻。八鹽酸0.1 mol/L : 量取5 mL 鹽酸,用水稀釋至

32、 600 mL。九對氨基苯磺酸溶液4 g/L:稱取0.4 g對氨基苯磺酸，溶于100 mL 20 % V/V 鹽 酸中,置棕色瓶中混勻,避光保存。十鹽酸奈乙二胺溶液2 g/L:稱取0.2 g鹽酸奈乙二胺，溶于100 mL水中，混勻后， 置棕色瓶中,避光保存。一亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液200卩g /mL :準(zhǔn)確稱取0.1000 g于110 C120 C枯燥恒重的亞硝酸鈉,加水溶解移入 500 mL 容量瓶中,加水稀釋至刻度,混勻。十二亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液5.0卩g/mL :臨用前，吸取亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液5.00 mL ,置于200 mL 容量瓶中,加水稀釋至刻度。十三硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液200卩g/mL以亞硝酸鈉

33、計：準(zhǔn)確稱取0.1232 g于110 C120 C 枯燥恒重的硝酸鈉,加水溶解,移于入 500 mL 容量瓶中,稀釋至刻度。十四硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液5卩g/mL :臨用時吸取硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 2.50 mL ,置于100 mL 容量瓶中,加水稀釋至刻度。三、儀器和設(shè)備(一) 天平：感量為 0.1 mg和1 mg。(二) 組織搗碎機、超聲波清洗器、恒溫枯燥箱、分光光度計。(三) 鎘柱1、 海綿狀鎘的制備： 投入足夠的鋅皮或鋅棒于500 mL硫酸鎘溶液(200 g/L)中，經(jīng)過3 h4 h,當(dāng)其中的鎘全部被鋅置換后，用玻璃棒輕輕刮下，取出剩余鋅棒，使鎘沉底，傾去上層清液，以水用傾瀉法屢次洗滌，然后移入組

34、織搗碎機中，加500 mL水，搗碎約2 s,用水將金屬細(xì)粒洗至標(biāo)準(zhǔn)篩上，取 20目40目之間的局部。2、鎘柱的裝填：如圖2。1-mm,外柚 3? EiTM3迸K韋期胃"內(nèi)隹0,4桓£ IOIBF3< <1柱玻瞎由輕ws lNT玻碑Ift*£I0出it毛闌皆.內(nèi)輕2 be外裡£ mna*用水裝滿鎘柱玻璃管，并裝入2 cm高的玻璃棉做墊，將玻璃棉壓向柱底時，應(yīng)將其中所包含的空氣全部排出，在輕輕敲擊下參加海綿狀鎘至8 cm10 cm高，上面用1 cm高的玻璃棉覆蓋，上置一貯液漏斗，末端要穿過橡皮塞與鎘柱玻璃管緊密連接。如無上述鎘柱玻璃管時，可以25

35、 mL酸式滴定管代用，但過柱時要注意始終保持液面在鎘層之上。當(dāng)鎘柱填裝好后，先用 25 mL鹽酸(0.1 mol/L)洗滌，再以水洗兩次，每次25 mL ,鎘柱不用時用水封蓋，隨時都要保持水平面在鎘層之上，不得使鎘層夾有氣泡。3、 鎘柱每次使用完畢后，應(yīng)先以25 mL鹽酸(0.1 mol/L )洗滌，再以水洗兩次，每次25 mL ,最后用水覆蓋鎘柱。4、 鎘柱復(fù)原效率的測定：吸取20 mL硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液，參加 5 mL氨緩沖液的稀釋液，混勻后注入貯液漏斗，使流經(jīng)鎘柱復(fù)原，以原燒杯收集流出液，當(dāng)貯液漏斗中的樣液流 完后，再加5 mL水置換柱內(nèi)留存的樣液。取 10.0 mL復(fù)原后的溶液相當(dāng)10卩

36、g亞硝酸鈉于50 mL 比色管中，以下按 11.4自 吸取 0.00 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80mL、I.OOmL起依法操作，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算測得結(jié)果，與參加量一致，復(fù)原效率應(yīng)大于98%為符合要求。5、復(fù)原效率計算復(fù)原效率按式2進行計算。AX = 一 X100% 210式中：X復(fù)原效率，%；A測得亞硝酸鈉的含量，單位為微克卩0 ;10測定用溶液相當(dāng)亞硝酸鈉的含量，單位為微克 yg。四、分析步驟一試樣的預(yù)處理同“第一法 離子色譜法。二提取稱取5 g 精確至0.01 g 制成勻漿的試樣如制備過程中加水，應(yīng)按加水量折算，置于50 mL燒杯中，加12.5 mL飽和硼

37、砂溶液，攪拌均勻，以 70 C左右的水約300 mL將試樣 洗入500 mL容量瓶中，于沸水浴中加熱15 min，取出置冷水浴中冷卻，并放置至室溫。三提取液凈化在振蕩上述提取液時參加 5 mL亞鐵氰化鉀溶液，搖勻，再參加5 mL乙酸鋅溶液9.14,以沉淀蛋白質(zhì)。加水至刻度，搖勻，放置30 min,除去上層脂肪，上清液用濾紙過濾， 棄去初濾液30 mL，濾液備用。四亞硝酸鹽的測定吸取40.0 mL上述濾液于50 mL帶塞比色管中，另吸取 0.00 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80mL、1.00 mL、1.50 mL、2.00 mL、2.50 mL 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液

38、相當(dāng)于0.0憾、1.0級、2.0倉、3.0倉、4.0倉、5.0倉、7.5倉、10.0丑、12.5級亞硝酸鈉， 分別置于50 mL帶塞比色管中。于標(biāo)準(zhǔn)管與試樣管中分別參加2 mL對氨基苯磺酸溶液， 混勻，靜置3 min5 min后各參加1 mL鹽酸萘乙二胺溶液9.20，加水至刻度，混勻，靜置 15 min，用2 cm比色杯，以零管調(diào)節(jié)零點，于波長 538 nm處測吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線比擬。 同時做試劑空白。五硝酸鹽的測定1、鎘柱復(fù)原1先以25 mL稀氨緩沖液9.17沖洗鎘柱，流速控制在 3 mL/min5 mL/min 以 滴定管代替的可控制在 2 mL/min3 mL/min 。2吸取20 m

39、L濾液于50 mL燒杯中，加5 mL氨緩沖溶液9.16，混合后注入貯液漏斗，使流經(jīng)鎘柱復(fù)原，以原燒杯收集流出液， 當(dāng)貯液漏斗中的樣液流盡后，再加5 mL水置換柱內(nèi)留存的樣液。3將全部收集液如前再經(jīng)鎘柱復(fù)原一次，第二次流出液收集于 100 mL容量瓶中，繼以水流經(jīng)鎘柱洗滌三次，每次20 mL,洗液一并收集于同一容量瓶中，加水至刻度，混勻。2、亞硝酸鈉總量的測定吸取10 mL20 mL復(fù)原后的樣液于50 mL比色管中。以下按11.4自 吸取0.00 mL、 0.20 mL、0.40mL、0.60 mL、0.80 mL、1.00 mL 起依法操作。五、分析結(jié)果的表述一亞硝酸鹽含量計算亞硝酸鹽以亞硝酸

40、鈉計的含量按式3進行計算。A1 X1000X1 = p 3m X 1 X1000V0式中：X1試樣中亞硝酸鈉的含量，單位為毫克每千克 mg/kg;A1測定用樣液中亞硝酸鈉的質(zhì)量，單位為微克yg ;m 試樣質(zhì)量，單位為克g;V1測定用樣液體積，單位為毫升 mL ;V0試樣處理液總體積，單位為毫升 mL 。以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保存兩位有效數(shù)字。二硝酸鹽含量的計算硝酸鹽以硝酸鈉計的含量按式4進行計算。A X1000X2 = V V-X1 X1.232 4m Xv2 Xv4 X1000V0 V3式中：X2試樣中硝酸鈉的含量，單位為毫克每千克 mg/kg;A2經(jīng)鎘粉

41、復(fù)原后測得總亞硝酸鈉的質(zhì)量，單位為微克yg ；m試樣的質(zhì)量，單位為克g;1.232亞硝酸鈉換算成硝酸鈉的系數(shù)；V2測總亞硝酸鈉的測定用樣液體積，單位為毫升mL;V0試樣處理液總體積，單位為毫升 mL;V3經(jīng)鎘柱復(fù)原后樣液總體積，單位為毫升 mL;V4 經(jīng)鎘柱復(fù)原后樣液的測定用體積，單位為毫升mL；X1 由式 3計算出的試樣中亞硝酸鈉的含量，單位為毫克每千克mg/kg 。以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保存兩位有效數(shù)字。六、精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值，不得超過算術(shù)平均值的10 %。第三法 乳及乳制品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定、原理試樣經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)

42、、除去脂肪后，用鍍銅鎘粒使局部濾液中的硝酸鹽復(fù)原為亞硝酸鹽。在濾液和已復(fù)原的濾液中，參加磺胺和N-1-萘基-乙二胺二鹽酸鹽，使其顯粉紅色，然后用分光光度計在 538 nm 波長下測其吸光度。將測得的吸光度與亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的吸光度進行比擬，就可計算出樣品中的亞硝酸鹽含量和硝酸鹽復(fù)原后的亞硝酸總量；從兩者之間的差值可以計算出硝酸鹽的含量。二、試劑和材料一測定用水應(yīng)是不含硝酸鹽和亞硝酸鹽的蒸餾水或去離子水。注：為防止鍍銅鎘柱中混入小氣泡， 柱制備、 柱復(fù)原能力的檢查和柱再生時所用的蒸餾 水或去離子水最好是剛沸過并冷卻至室溫的。二亞硝酸鈉NaNO2、硝酸鉀KNO3。三鍍銅鎘柱鎘粒直徑0.3 mm

43、0.8 mm。也可按下述方法制備。將適量的鋅棒放入燒杯中，用40g/L的硫酸鎘CdSO4 8H2O溶液浸沒鋅棒。在24 h之內(nèi)，不斷將鋅棒上的海綿狀鎘刮下來。取出鋅棒， 潷出燒杯中多余的溶液， 剩下的溶液能浸 沒鎘即可。用蒸餾水沖洗海綿狀鎘 2 次 3 次，然后把鎘移入小型攪拌器中，同時參加 400 mL 0.1 mol/L 的鹽酸。攪拌幾秒鐘，以得到所需粒度的顆粒。將攪拌器中的鎘粒連同溶液 一起倒回?zé)校?靜置幾小時， 這期間要攪拌幾次以除掉氣泡。 傾出大局部溶液， 立即按 17.1.1 至17.1.8 中表達的方法鍍銅。四硫酸銅溶液：溶解 20 g硫酸銅CUSO4 5H2O于水中，稀釋至

44、1000 mL。五鹽酸 -氨水緩沖溶液： pH 9.609.70。用600 mL 水稀釋75 mL 濃鹽酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為36 % 38 % ?；靹蚝?，再參加 135 mL 濃氨水質(zhì)量分?jǐn)?shù)等于 25 %的新鮮氨水。用水稀 釋至1000 mL,混勻。用精密pH計調(diào)pH值為9.609.70。六鹽酸 2 mol/L： 160 mL 的濃鹽酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 36 %38 %用水稀釋至 1000 mL。七鹽酸 0.1 mol/L ： 50 mL 2 mol/L 的鹽酸用水稀釋至 1000 mL。八沉淀蛋白和脂肪的溶液：1、 硫酸鋅溶液：將53.5 g的硫酸鋅ZnSO4 7H2O溶于水中，并稀釋至 100 mL。2

45、、 亞鐵氰化鉀溶液：將17.2 g的三水亞鐵氰化鉀K4FeCN6 3H2O溶于水中，稀釋至100 mL 。九EDTA 溶液：用水將33.5 g的乙二胺四乙酸二鈉Na2C1°H14N2O3 2H2O溶解，稀 釋至 1000 mL。十顯色液顯色液1:體積比為450: 550的鹽酸。將450 mL濃鹽酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 36 %38 %加 入到 550mL 水中，冷卻后裝入試劑瓶中。顯色液 2: 5 g/L 的磺胺溶液。在 75 mL 水中參加 5 mL 濃鹽酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 36 % 38 % ，然后在水浴上加熱，用其溶解 0.5 g 磺胺 NH2C6H4SO2NH 2 。冷卻至室溫后用水 稀釋至

46、100 mL。必要時進行過濾。顯色液3: 1 g/L的萘胺鹽酸鹽溶液。將 0.1 g的N-1-萘基-乙二胺二鹽酸鹽C10H7NHCH 2CH2NH2 2HCI 溶于水，稀釋至 100 mL。必要時過濾。注：此溶液應(yīng)少量配制，裝于密封的棕色瓶中，冰箱中2 C5 C保存。十一 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液:相當(dāng)于亞硝酸根的濃度為 0.001 g/L。將亞硝酸鈉在110 C120 C的范圍內(nèi)枯燥至恒重。冷卻后稱取0.150 g,溶于1000 mL容量瓶中，用水定容。在使用的當(dāng)天配制該溶液。取10 mL 上述溶液和 20 mL 緩沖溶液于 1000 mL 容量瓶中,用水定容。每1 mL該標(biāo)準(zhǔn)溶液中含1.00g勺N

47、O2。十二硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液,相當(dāng)于硝酸根的濃度為 0.0045 g/L。將硝酸鉀在110 C120 C的溫度范圍內(nèi)枯燥至恒重，冷卻后稱取1.4580 g，溶于1000mL 容量瓶中,用水定容。在使用當(dāng)天,于 1000 mL 的容量瓶中,取 5 mL 上述溶液和 20 mL 緩沖溶液 15.5, 用水定容。每1 mL的該標(biāo)準(zhǔn)溶液含有4.50 i g勺NO。三、儀器和設(shè)備所有玻璃儀器都要用蒸餾水沖洗,以保證不帶有硝酸鹽和亞硝酸鹽。一天平:感量為 0.1 mg 和1 mg。二燒杯: 100 mL 。三錐形瓶: 250 mL , 500 mL 。四容量瓶:100 mL、500 mL 和1000 mL。五

48、移液管: 2 mL、5 mL、10 mL 和20 mL。六吸量管: 2 mL、5 mL、10 mL 和25 mL。七量筒:根據(jù)需要選取。八玻璃漏斗:直徑約 9 cm ,短頸。九定性濾紙:直徑約 18 cm。 十復(fù)原反響柱:簡稱鎘柱,如圖 3 所示。L旦圖3硝酸鹽復(fù)原裝置十一分光光度計：測定波長538 nm,使用1 cm2 cm光程的比色皿。十二pH計：精度為±0.01，使用前用pH 7和pH 9的標(biāo)準(zhǔn)溶液進行校正。四、分析步驟一制備鍍銅鎘柱1、置鎘粒15.3于錐形瓶16.3中所用鎘粒的量以到達要求的鎘柱高度為準(zhǔn)。2、 加足量的鹽酸15.6以浸沒鎘粒，搖晃幾分鐘。3、潷出溶液，在錐形燒

49、瓶中用水反復(fù)沖洗，直到把氯化物全部沖洗掉。4、 在鎘粒上鍍銅。向鎘粒中參加硫酸銅溶液15.4每克鎘粒約需2.5 mL ，振蕩1 min。5、潷出液體，立即用水沖洗鍍銅鎘粒，注意鎘粒要始終用水浸沒。當(dāng)沖洗水中不再有 銅沉淀時即可停止沖洗。6、 在用于盛裝鍍銅鎘粒的玻璃柱的底部裝上幾厘米高的玻璃纖維見圖3。在玻璃柱 中灌入水，排凈氣泡。7、將鍍銅鎘粒盡快地裝入玻璃柱，使其暴露于空氣的時間盡量短。鍍銅鎘粒的高度應(yīng)在15 cm20 cm的范圍內(nèi)。注1:防止在顆粒之間遺留空氣。注2：注意不能讓液面低于鍍銅鎘粒的頂部。8、新制備柱的處理。將由 750 mL水、225 mL硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液15.14、20 m

50、L緩 沖溶液15.5和20 mLEDTA 溶液15.9組成的混合液以不大于 6 mL/min的流量通過剛 裝好鎘粒的玻璃柱，接著用 50 mL水以同樣流速沖洗該柱。二檢查柱的復(fù)原能力每天至少要進行兩次，一般在開始時和一系列測定之后。1、用移液管將 20 mL的硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液15.14移入復(fù)原柱頂部的貯液杯中，再立 即向該貯液杯中添加5 mL緩沖溶液15.5。用一個100 mL的容量瓶收集洗提液。洗提液 的流量不應(yīng)超過 6 mL/min 。2、在貯液杯將要排空時，用約15 mL 水沖洗杯壁。沖洗水流盡后，再用 15 mL 水重復(fù)沖洗。當(dāng)?shù)诙螞_洗水也流盡后，將貯液杯灌滿水，并使其以最大流量流過柱

51、子。3、當(dāng)容量瓶中的洗提液接近100 mL 時，從柱子下取出容量瓶，用水定容至刻度，混合均勻。4、移取 10 mL 洗提液于 100 mL 容量瓶中， 加水至60 mL 左右。然后按17.8.2 和17.8.4 操作。5、根據(jù)測得的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線 上可查得稀釋洗提液 中的亞硝 酸鹽含量卩g/mL。據(jù)此可計算出以百分率表示的柱復(fù)原能力NO-的含量為0.067卩g/mL時復(fù)原能力為 100 %。如果復(fù)原能力小于 95 %，柱子就需要再生。三柱子再生柱子使用后，或鎘柱的復(fù)原能力低于95%時，按如下步驟進行再生。1、在 100 mL 水中參加約 5 mLEDTA 溶液15.9和2 mL 鹽酸15.

52、7，以10 mL/min 左右的速度過柱。2、 當(dāng)貯液杯中混合液排空后，按順序用25 mL 水、25 mL 鹽酸 15.7和25 mL 水 沖洗柱子。3、 檢查鎘柱的復(fù)原能力，如低于95%，要重復(fù)再生。四樣品的稱取和溶解1、 液體乳樣品：量取 90 mL樣品于500 mL錐形瓶中，用22 mL 50 C55 C的水分 數(shù)次沖洗樣品量筒，沖洗液傾入錐形瓶中，混勻。2、乳粉樣品：在100 mL燒杯中稱取10 g樣品，準(zhǔn)確至0.001 g。用112 mL 50 C55 C 的水將樣品洗入 500 mL 錐形瓶中，混勻。3、 乳清粉及以乳清粉為原料生產(chǎn)的粉狀嬰幼兒配方食品樣品：在100 mL 燒杯中稱

53、取10 g樣品，準(zhǔn)確至0.001 g。用112 mL 50 C55 C的水將樣品洗入500 mL錐形瓶中，混勻。 用鋁箔紙蓋好錐形瓶口，將溶好的樣品在沸水中煮15 min，然后冷卻至約50 C。五脂肪和蛋白的去除1、按順序參加 24 mL 硫酸鋅溶液、 24 mL 亞鐵氰化鉀溶液和 40 mL 緩沖溶液參加時 要邊加邊搖，每加完一種溶液都要充分搖勻。2、靜置15 min1 h。然后用濾紙過濾，濾液用 250 mL錐形瓶收集。六硝酸鹽復(fù)原為亞硝酸鹽1、移取 20 mL 濾液于 100 mL 小燒杯中，參加 5 mL 緩沖溶液，搖勻，倒入鎘柱頂部 的貯液杯中，以小于 6 mL/min 的流速過柱。洗提液過柱后的液體接入 100 mL 容量瓶 中。2、當(dāng)貯液杯快要排空時，用 15 mL 水沖洗小燒杯，再倒入貯