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1、五日生化需氧量的測定五日生化需氧量的測定稀釋接種法稀釋接種法1.方法原理:方法原理: 生化需氧量是指在規(guī)定條件下,微生生化需氧量是指在規(guī)定條件下,微生物分解存在水中的某些可氧化物質,特別是有物分解存在水中的某些可氧化物質,特別是有機物所進行的生物化學過程中消耗溶解氧的量。機物所進行的生物化學過程中消耗溶解氧的量。 對某些地表水及大多數工業(yè)廢水,因對某些地表水及大多數工業(yè)廢水,因含較多的有機物,需要稀釋后再培養(yǎng)測定,含較多的有機物,需要稀釋后再培養(yǎng)測定,以降低其濃度和保證有充足的溶解氧。為了以降低其濃度和保證有充足的溶解氧。為了保證水樣稀釋后有足夠的溶解氧,稀釋水通保證水樣稀釋后有足夠的溶解氧,

2、稀釋水通常要通入空氣或氧氣進行曝氣,使稀釋水中常要通入空氣或氧氣進行曝氣,使稀釋水中溶解氧接近飽和。稀釋水中還應加入一定量溶解氧接近飽和。稀釋水中還應加入一定量的無機營養(yǎng)鹽和緩沖物質的無機營養(yǎng)鹽和緩沖物質,以保證微生物生以保證微生物生長的需要。長的需要。2. 稀釋接種法測定稀釋接種法測定BOD5時需注意的問題時需注意的問題2.1 樣品的采集及保存樣品的采集及保存 采集樣品時應充滿并密封于瓶中,在采集樣品時應充滿并密封于瓶中,在0-4條件下進行保存,一般應在條件下進行保存,一般應在6h內進行分析。內進行分析。若需要遠距離轉運,在任何情況下,貯存時若需要遠距離轉運,在任何情況下,貯存時間不應超過間

3、不應超過24h。 2.2 時間的影響時間的影響 樣品中的樣品中的BOD5濃度易隨時間的變化而變化,濃度易隨時間的變化而變化,樣品儲存時間、測定過程時間和培養(yǎng)時間均樣品儲存時間、測定過程時間和培養(yǎng)時間均會對測定結果產生影響。這就要求我們在進會對測定結果產生影響。這就要求我們在進行行BOD5的測定時需要嚴格控制培養(yǎng)時間和的測定時需要嚴格控制培養(yǎng)時間和樣品儲存時間。樣品儲存時間。 2.3. 溫度的影響溫度的影響 溫度與微生物的增長速率相關,直接影響溫度與微生物的增長速率相關,直接影響 微生物的生長繁殖,進而影響微生物的生長繁殖,進而影響B(tài)OD5的測定的測定結果。另外,溫度的變化還會引起溶解氧的結果。

4、另外,溫度的變化還會引起溶解氧的變化。因此,應嚴格控制采樣溫度、樣品儲變化。因此,應嚴格控制采樣溫度、樣品儲存溫度、實驗室溫度及培養(yǎng)箱溫度。存溫度、實驗室溫度及培養(yǎng)箱溫度。2.4 pH值的影響值的影響 水樣的水樣的pH若超出若超出6.5-7.5范圍時,應加酸或范圍時,應加酸或堿調節(jié)至此范圍;稀釋水和接種稀釋水的堿調節(jié)至此范圍;稀釋水和接種稀釋水的pH值應為值應為7.2。2.5. 生物因素的影響生物因素的影響2.5.1 接種液的質量接種液的質量 對于一般的地表水、生活污水或者不含對于一般的地表水、生活污水或者不含或少含微生物的工業(yè)廢水的測定,在測定時或少含微生物的工業(yè)廢水的測定,在測定時應進行接

5、種,以引入能分解廢水中有機物的應進行接種,以引入能分解廢水中有機物的微生物。接種液一般采用城市污水或表層土微生物。接種液一般采用城市污水或表層土壤浸出液。壤浸出液。 城市污水,一般采用生活污水,在室溫城市污水,一般采用生活污水,在室溫下放置一晝夜,取上清液供用。下放置一晝夜,取上清液供用。 表層土壤浸出液,取表層土壤浸出液,取100g花園土壤,加花園土壤,加入入1L水,混合并靜置水,混合并靜置10min,取上清液供用。,取上清液供用。 上清液的接種量,按水樣的性質確定。上清液的接種量,按水樣的性質確定。 啤酒廠:啤酒廠: 接種量一般以接種量一般以7-8ml/L水為宜。水為宜。 印染廢水:上清液

6、印染廢水:上清液2ml/L,再加入再加入7ml/L馴化接種液。馴化接種液。 葡萄糖谷氨酸標準溶液:接種量一般以葡萄糖谷氨酸標準溶液:接種量一般以2-3ml/L水水 為宜。為宜。 當廢水中存在著難于被一般生活污水中當廢水中存在著難于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有機物或含有劇的微生物以正常速度降解的有機物或含有劇毒物質時,在其排污口的下游毒物質時,在其排污口的下游3-8km處取水處取水樣做為廢水的馴化接種液,同時加入適量表樣做為廢水的馴化接種液,同時加入適量表層土壤或生活污水,使能適應該種廢水的微層土壤或生活污水,使能適應該種廢水的微生物大量繁殖。生物大量繁殖。 當水樣中含有銅、鉛、鋅

7、、鎘、鉻、砷、當水樣中含有銅、鉛、鋅、鎘、鉻、砷、氰等有毒物質時,可使用經馴化的微生物接氰等有毒物質時,可使用經馴化的微生物接種液的稀釋水進行稀釋,或提高稀釋倍數以種液的稀釋水進行稀釋,或提高稀釋倍數以減少毒物的濃度。減少毒物的濃度。 2.5.2 抑制硝化作用抑制硝化作用 水中有機物的生物氧化過程可分為兩水中有機物的生物氧化過程可分為兩個階段,第一階段主要是碳氫化合物被氧化,個階段,第一階段主要是碳氫化合物被氧化,稱為碳化階段,在稱為碳化階段,在20下約需下約需20d才能完成,才能完成,BOD測定的一般是該階段的耗氧量。第二測定的一般是該階段的耗氧量。第二階段是含氮化合物及部分氨氧化為亞硝酸鹽

8、階段是含氮化合物及部分氨氧化為亞硝酸鹽及硝酸鹽,稱為硝化階段,在及硝酸鹽,稱為硝化階段,在20約需約需100d 。對一般水樣,測定。對一般水樣,測定BOD5時的硝化作時的硝化作用并不顯著。但對于生化處理的出水,因其用并不顯著。但對于生化處理的出水,因其含有大量的硝化細菌,在測定含有大量的硝化細菌,在測定BOD5時也包時也包括了部分含氮化合物的需氧量,因此需要加括了部分含氮化合物的需氧量,因此需要加入硝化抑制劑,抑制硝化作用對入硝化抑制劑,抑制硝化作用對BOD5測定測定的影響??稍诿可♂屗畼又屑尤氲挠绊???稍诿可♂屗畼又屑尤?ml濃度濃度為為500mg /L的丙烯基硫脲。的丙烯基硫脲。 2.

9、6 稀釋倍數的確定稀釋倍數的確定 確定合理的稀釋倍數是成功測定確定合理的稀釋倍數是成功測定BOD5的關鍵之一,稀釋的倍數一般以五日培養(yǎng)后的關鍵之一,稀釋的倍數一般以五日培養(yǎng)后消耗的溶解氧占原有溶解氧的消耗的溶解氧占原有溶解氧的40%-70%為為宜,也就是恰當的稀釋比應使培養(yǎng)后的剩余宜,也就是恰當的稀釋比應使培養(yǎng)后的剩余溶解氧溶解氧1mg/L,消耗的溶解氧大于,消耗的溶解氧大于2mg/L。先測定水樣的先測定水樣的CODcr值,然后根據水樣的值,然后根據水樣的CODcr濃度選用合適的稀釋倍數,一般一個濃度選用合適的稀釋倍數,一般一個樣品應做樣品應做3-4個不同的稀釋比,如果經個不同的稀釋比,如果經

10、5d培培養(yǎng) 后 , 測 其 溶 解 氧 時 , 當 向 水 樣 中 加養(yǎng) 后 , 測 其 溶 解 氧 時 , 當 向 水 樣 中 加1mlMnSO4及及2ml堿性碘化鉀溶液后,瓶內堿性碘化鉀溶液后,瓶內出現(xiàn)白色絮狀沉淀,說明此培養(yǎng)液剩余溶解出現(xiàn)白色絮狀沉淀,說明此培養(yǎng)液剩余溶解氧為零,應加大稀釋比。氧為零,應加大稀釋比。 溶解氧消耗量小于溶解氧消耗量小于2mg/L,有兩種可能,有兩種可能,一是稀釋倍數過大;另一種可能是微生物菌一是稀釋倍數過大;另一種可能是微生物菌種不適應,活性差,或含毒物質濃度過大。種不適應,活性差,或含毒物質濃度過大。 對工業(yè)廢水稀釋倍數的確定,書上列出對工業(yè)廢水稀釋倍數的

11、確定,書上列出了三個系數:了三個系數:0.075,0.15,0.225。根據本。根據本站以往的經驗,在選擇系數的時候,可以在站以往的經驗,在選擇系數的時候,可以在0.075-0.15之間,之間,0.15-0.225之間多選擇幾之間多選擇幾個系數。比如某水樣個系數。比如某水樣CODcr濃度為濃度為100mg/L,我們可以選擇系數為我們可以選擇系數為0.11,0.13,0.14,0.15。 由高錳酸鹽指數與一定的系數的乘積由高錳酸鹽指數與一定的系數的乘積 求得的稀釋倍數求得的稀釋倍數 對地表水稀釋倍數的確定,也同樣如此。比如,對地表水稀釋倍數的確定,也同樣如此。比如,高錳酸鹽指數的濃度為高錳酸鹽指

12、數的濃度為5-10mg/L之間時,我們可之間時,我們可以在系數以在系數0.2-0.3之間,再增加之間,再增加0.22,0.25,0.28等等幾個系數。幾個系數。 高錳酸鹽指數(高錳酸鹽指數(mg/L) 系數系數高錳酸鹽指數(高錳酸鹽指數(mg/L) 系數系數5 -5-10 0.2 0.310-20 0.4、0.620 0.5、0.7、1.03 樣品分析過程中應注意的細節(jié):樣品分析過程中應注意的細節(jié):3.1 固定溶解氧的時候,應將吸管插入溶解氧瓶的固定溶解氧的時候,應將吸管插入溶解氧瓶的液面下。液面下。3.2 加入硫酸后混合搖勻,一定要確保沉淀物全部加入硫酸后混合搖勻,一定要確保沉淀物全部溶解。

13、溶解。3.3 在稀釋水樣時,用虹吸法沿筒壁先引入部分稀在稀釋水樣時,用虹吸法沿筒壁先引入部分稀釋水(或接種稀釋水)于釋水(或接種稀釋水)于1000ml量筒中,加入需量筒中,加入需要量的均勻水樣,再加入稀釋水(或接種稀釋水)要量的均勻水樣,再加入稀釋水(或接種稀釋水)至定量至定量,用帶膠板的玻棒小心上下混勻,混勻時勿用帶膠板的玻棒小心上下混勻,混勻時勿使攪拌棒的膠板露出水面,防止產生氣泡。使攪拌棒的膠板露出水面,防止產生氣泡。 4. 驗證試驗驗證試驗 為了檢查接種稀釋水,接種水和分析人為了檢查接種稀釋水,接種水和分析人員的技術,需進行驗證試驗。將每升含葡萄員的技術,需進行驗證試驗。將每升含葡萄糖和谷氨酸各糖和谷氨酸各150mg的標準溶液以的標準溶液以1:50稀稀釋比稀釋后(用接種稀釋水),與水樣同步釋比稀釋后(用接種稀釋水),與水樣同步測定測定BOD5,測得值應在,測得值應在

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