第9章環(huán)境衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)(共30頁)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上第九章 環(huán)境衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)第一節(jié) 化妝品微生物檢驗(yàn)化妝品是指以涂擦、噴灑或者其他類似的方法，散布于人體表面任何部位（皮膚、毛發(fā)、支架、口唇等），以達(dá)到清潔、消除不良?xì)馕?、護(hù)膚、美容和修飾目的的日用化學(xué)工業(yè)產(chǎn)品。在正常以及合理的、可預(yù)見的使用條件下，化妝品不得對(duì)人體健康產(chǎn)生危害?；瘖y品的微生物學(xué)質(zhì)量應(yīng)符合下列規(guī)定：眼部化妝品及口唇等黏膜用化妝品以及嬰兒和兒童用化妝品菌落總數(shù)不得>500CFU/mL或500CFU/g。其他化妝品菌落總數(shù)不得>1000CFU/mL或1000CFU/g。每克或每毫升產(chǎn)品中不得檢出糞大腸菌群、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌。化妝品中霉

2、菌和酵母菌總數(shù)不得>100CFU/mL或100CFU/g?；瘖y品的直接接觸容器材料必須無毒，不得含有或釋放可能對(duì)使用者造成危害的有毒物質(zhì)。一、樣品的采集及注意事項(xiàng)1、所采集的樣品，應(yīng)具有代表性，一般視每批化妝品數(shù)量大小，隨機(jī)抽取相應(yīng)數(shù)量的包裝單位。檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別從兩個(gè)包裝單位以上的樣品中共取10g或10mL。包裝量<20g的樣品，采集量可以適當(dāng)增加，其總量應(yīng)>16g。2、供檢驗(yàn)樣品，應(yīng)嚴(yán)格保持原有的包裝狀態(tài)。進(jìn)口產(chǎn)品應(yīng)為市售包裝。容器不應(yīng)有破裂，在檢驗(yàn)前不得打開，防止樣品被污染。3、接到樣品后，應(yīng)立即等級(jí)，編寫檢驗(yàn)序號(hào)，并按檢驗(yàn)要求盡快檢驗(yàn)。如不能及時(shí)檢驗(yàn)，樣品應(yīng)放在室溫音量

3、干燥處，不要冷藏或冷凍。4、若只有一個(gè)樣品而同時(shí)需做多種分析，如細(xì)菌、毒理、化學(xué)等，應(yīng)先做微生物檢驗(yàn)，再將剩余樣品做其他分析。5、在檢驗(yàn)過程中，從打開包裝到全部檢驗(yàn)操作結(jié)束，均需防止微生物的在污染和擴(kuò)散，所用采樣用具、器皿及材料均應(yīng)事先滅菌，全部操作應(yīng)先在無菌室內(nèi)進(jìn)行，或在相應(yīng)條件下，按無菌操作規(guī)定進(jìn)行。6、若檢出糞大腸菌群或其他致病菌，自報(bào)告發(fā)出之日起該菌種及備檢樣品應(yīng)保存一個(gè)月。二、供檢樣品的制備（一）液體樣品1、水溶性的液體樣品可量取10mL加到90mL滅菌生理鹽水中，如樣品少于10mL，仍按10倍稀釋法進(jìn)行。如為5mL則加到45mL滅菌生理鹽水中，混勻后，制成1:10檢液。2、油性液體

4、樣品取樣品10mL，先加到5mL滅菌液狀石蠟混勻，再加10mL滅菌的吐溫80，在4044水浴中振蕩混合10分鐘，加入滅菌生理鹽水75mL（在4044水浴中預(yù)溫），在4044水浴中乳化，制成1:10的懸液。（二）膏、霜、乳劑半固體狀樣品1、親水性樣品稱取10g，加到裝有玻璃珠及90mL滅菌生理鹽水的三角瓶中，充分振蕩混勻，靜置15分鐘。用其上清液作為1:10檢液。2、疏水性樣品稱取10g，放到滅菌的研缽中，加10mL滅菌液狀石蠟，研磨成黏稠狀，再加入10mL滅菌吐溫80，研磨待溶解后，加70mL滅菌生理鹽水，在4044水浴中充分混合，制成1:10檢液。 （三）固體樣品稱取10g，加到90mL滅菌

5、生理鹽水中，充分振蕩混勻，使其分散混懸，靜置后，取上清液作為1:10檢液。如有均質(zhì)器，上述水溶性膏、霜、粉劑等，可稱10g樣品加入90mL滅菌生理鹽水，均質(zhì)12分鐘；疏水性膏、霜及眉筆、唇膏等，稱10g樣品，加10mL滅菌液狀石蠟，10mL滅菌吐溫80,70mL滅菌生理鹽水均質(zhì)35分鐘。三、化妝品微生物指標(biāo)檢驗(yàn)方法（一）菌落總數(shù)菌落總數(shù)（aerobic bacterial count）是指化妝品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后（如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間、pH、需氧性質(zhì)等），1g（1mL）檢樣中所含菌落的總數(shù)。所得結(jié)果只包含一群本方法規(guī)定的條件下生長(zhǎng)的嗜中溫的需氧性菌落總數(shù)。測(cè)定菌落總數(shù)

6、便于判明樣品杯細(xì)菌污染的程度，是對(duì)樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)總評(píng)價(jià)的綜合依據(jù)。1、檢驗(yàn)步驟 （1）用滅菌吸管吸取1：10稀釋的檢液2mL，分別注入到兩個(gè)滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL。另取1mL注入到9mL滅菌生理鹽水試管中（注意勿使吸管接觸液面），更換一支吸管，并充分混勻，制成1:100檢液。吸取2mL，分別注入到兩個(gè)滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL。如樣品含菌量高，還可再稀釋成1：1000、1：10000、，每種稀釋度更換一支吸管。（2）將融化并冷至4550的卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注到平皿內(nèi)，每皿約15mL，隨即轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使樣品與培養(yǎng)基充分混合均勻，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平民，置36±1培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48&

7、#177;2小時(shí)。另取一個(gè)不加樣品的滅菌空平皿，加入約15mL卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，置36±1培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48±2小時(shí)，為空白對(duì)照。（3）為便于區(qū)別化妝品中的顆粒與菌落，可在沒100mL卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂中加入1mL0.5%的TTC溶液，如有細(xì)菌存在，培養(yǎng)后菌落呈紅色，而化妝品的顆粒顏色無變化。2、菌落計(jì)數(shù)方法先用肉眼觀察，點(diǎn)數(shù)菌落數(shù)，然后再用放大510倍的放大鏡檢查，以防遺漏。記下各平皿的菌落數(shù)后，求出同一稀釋度各平皿生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)。若平皿中有連成片狀的菌落或花點(diǎn)樣菌落蔓延生長(zhǎng)時(shí)，該平皿不宜計(jì)數(shù)。若片狀菌落不到平皿中的一半，而其余一半

8、中菌落數(shù)分布很均勻，則可將此半個(gè)平皿菌落計(jì)數(shù)后乘以2，以代表全皿菌落數(shù)。3、菌落計(jì)數(shù)及報(bào)告方法（1）首先選取平均菌落數(shù)在30300個(gè)之間的平皿，作為菌落總數(shù)測(cè)定的范圍，每當(dāng)有一個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時(shí)，即以該平皿菌落數(shù)乘其稀釋倍數(shù)（見表9-1中例1）。（2）若有兩個(gè)稀釋度，其平均菌落數(shù)均在30300個(gè)之間，則應(yīng)求出兩菌落總數(shù)之比值來決定，若其比值小于或等于2，應(yīng)報(bào)告其平均數(shù)，若大于2則報(bào)告期中稀釋度較低的平皿的菌落數(shù)（見表9-1中例2及例3）。（3）若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均>300個(gè)，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見表9-1例4）。（4）若所有稀釋度的平均菌落

9、數(shù)均<30個(gè)，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見表9-1例5）。（5）若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30300個(gè)之間，其中一個(gè)稀釋度>300個(gè)，而相鄰的另一稀釋度<30個(gè)時(shí)，則以接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見表9-1中例6）（6）若所有的稀釋度均無菌生長(zhǎng)，報(bào)告數(shù)為每克或每毫升<10CFU。（7）菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告，菌落數(shù)在10以內(nèi)時(shí)，按實(shí)有數(shù)值報(bào)告之，>100時(shí)，采用兩位有效數(shù)字，在兩位有效數(shù)字后面的數(shù)值，應(yīng)以四舍五入法計(jì)算。為了縮短數(shù)字后面零的個(gè)數(shù)，可用10的指數(shù)來表示（見表9-1報(bào)告方式欄）。在報(bào)告菌落數(shù)為“不可計(jì)”時(shí)，應(yīng)注明樣

10、品的稀釋度。表9-1 細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果及報(bào)告方式例次不同稀釋度平均菌落數(shù)兩稀釋度菌數(shù)之比菌落總數(shù)CFU/mL或CFU/g報(bào)告方式CFU/mL或CFU/g10-110-210-31136516420-1640016000或1.6×10422760295461.63800038000或3.8×10432890271602.22710027000或2.7×1044不可計(jì)4650513-或5.1×105527115-270270或2.7×1026不可計(jì)30512-3050031000或3.1×1047000-<1×10<10

11、CFU：菌落形成單位（二）糞大腸菌群糞大腸菌群（Fecal conliforms）系一群需氧及兼性厭氧革蘭陰性無芽胞桿菌，在44.5±0.5培養(yǎng)2448小時(shí)能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。該菌直接來自糞便，是重要衛(wèi)生指標(biāo)菌。1、檢驗(yàn)步驟（1）取10mL 1:10稀釋的檢液，加到10mL雙倍乳糖膽鹽（含中和劑）培養(yǎng)基中，置44±0.5培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2448小時(shí)，如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報(bào)告為糞大腸菌群陰性。（2）如產(chǎn)酸產(chǎn)氣，劃線接種到伊紅亞甲藍(lán)瓊脂平板上，置36±1培養(yǎng)1824小時(shí)。同時(shí)取該培養(yǎng)液12滴接種到蛋白胨水中，置44±0.5培養(yǎng)24±2小時(shí)。經(jīng)培養(yǎng)后，在

12、上述平板上觀察有無典型菌落生長(zhǎng)。糞大腸菌群在伊紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基上典型菌落呈深紫黑色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤(rùn)，常具有金屬光澤。也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紫色，中心較深的菌落，亦常為糞大腸菌群，應(yīng)注意挑選。（3）挑取上述可疑菌落，涂片革蘭染色鏡檢。（4）在蛋白胨水培養(yǎng)液中，加入靛基質(zhì)試劑約0.5mL，觀察靛基質(zhì)反應(yīng)。陽性者液面呈玫瑰紅色；陰性反應(yīng)液面呈試劑本色。2、檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告根據(jù)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，平板上有典型菌落，并經(jīng)證實(shí)為革蘭陰性短桿菌，靛基質(zhì)試驗(yàn)陽性，則可報(bào)告被檢樣品中檢出糞大腸菌群。（三）銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）屬于假單

13、胞菌屬，為革蘭陰性桿菌，氧化酶陽性，能產(chǎn)生綠膿菌素。此外還能液化明膠，還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，在42±1條件下能生長(zhǎng)。該菌對(duì)人有致病力，可使傷處化膿，引起敗血癥等。1、檢驗(yàn)步驟（1）增菌培養(yǎng)：取1:10樣品稀釋液10mL加到90mL SCDLP液體培養(yǎng)基中，置36±1培養(yǎng)1824小時(shí)。如有銅綠假單胞菌生長(zhǎng)，培養(yǎng)液表面多有一層薄菌膜，培養(yǎng)液常呈黃綠色或藍(lán)綠色。（2）分離培養(yǎng)：從培養(yǎng)液的薄膜處跳取培養(yǎng)物，劃線接種在十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板上，置36±1培養(yǎng)1824小時(shí)。凡銅綠假單胞菌在此培養(yǎng)基上，其菌落扁平無定型，向周邊擴(kuò)散或略有蔓延，表面濕潤(rùn)，菌落呈灰白色，菌落周圍

14、培養(yǎng)基常擴(kuò)散有水溶性色素，此培養(yǎng)基選擇性強(qiáng)，大腸埃希菌不能生長(zhǎng)，革蘭陽性菌生長(zhǎng)較差。在缺乏十六烷基三甲基溴化銨瓊脂時(shí)也可以用乙酰胺培養(yǎng)基進(jìn)行分離，將菌液劃線接種于平板上，置36±1培養(yǎng)1824小時(shí)。銅綠假單胞菌在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，菌落扁平，邊緣不整，菌落周圍培養(yǎng)基略帶粉紅色，其他菌不生長(zhǎng)。（3）染色鏡檢：挑取可疑的菌落，涂片，革蘭染色，鏡檢為革蘭陰性者應(yīng)進(jìn)行氧化酶試驗(yàn)。（4）氧化酶試驗(yàn)：取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內(nèi)，用無菌玻璃棒挑取銅綠假單胞菌可疑菌涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基對(duì)苯二胺試液，在1530秒鐘之內(nèi)，出現(xiàn)粉紅色或紫紅色時(shí)，為氧化酶試驗(yàn)陽性；

15、若培養(yǎng)物不變色，為氧化酶試驗(yàn)陰性。（5）綠膿菌素試驗(yàn)：取可疑菌落23個(gè)，分別接種在綠膿菌素測(cè)定培養(yǎng)基上，置36±1培養(yǎng)24±2小時(shí)，加入氯仿35mL，充分振蕩使培養(yǎng)物中的綠膿菌素溶解于氯仿液內(nèi)，待氯仿提取液呈藍(lán)色時(shí)，用吸管將氯仿移到另一試管中加入1mol/L的鹽酸1mL左右，振蕩后，靜置片刻。如上層鹽酸液內(nèi)出現(xiàn)粉紅色到紫紅色時(shí)為陽性，表示被檢物中有綠膿菌素存在。（6）硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)：挑取可疑的銅綠假單胞菌純培養(yǎng)物，接種在硝酸鹽胨水培養(yǎng)基中，置36±1培養(yǎng)24±2小時(shí)，觀察結(jié)果。凡在硝酸鹽胨水培養(yǎng)基內(nèi)的小導(dǎo)管中有氣體者，即為陽性，表明該菌能還原硝酸鹽，

16、并將亞硝酸鹽分解產(chǎn)生氮?dú)?。?）明膠液化試驗(yàn)：取銅綠假單胞菌可疑菌落的純培養(yǎng)物，穿刺接種在明膠培養(yǎng)基中，置36±1培養(yǎng)24±2小時(shí)，取出放冰箱1030分鐘，如仍呈溶解狀或表面溶解時(shí)即為明膠液化試驗(yàn)陽性；如凝固不溶者為陰性。（8）42生長(zhǎng)試驗(yàn)：挑取可疑的銅綠假單胞菌純培養(yǎng)物，接種在普通瓊脂斜面培養(yǎng)基上，放在42±1培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)2448小時(shí)，銅綠假單胞菌能生長(zhǎng)，為陽性，而近似的熒光假單胞菌則不能生長(zhǎng)。2、檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告被檢樣品經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，經(jīng)證實(shí)為革蘭陰性桿菌，氧化酶就綠膿菌素試驗(yàn)皆為陽性者，即可報(bào)告被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌；如綠膿菌素試驗(yàn)陰性而液化明膠、硝酸鹽

17、還原產(chǎn)氣和42生長(zhǎng)試驗(yàn)三者皆為陽性時(shí)，仍可報(bào)告被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌。（四）金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）為革蘭陽性球菌，呈葡萄狀排列，無牙胞，無莢膜，能分解甘露醇，血漿凝固酶陽性。該菌是葡萄球菌中對(duì)人內(nèi)致病力最強(qiáng)的一種，能引起人體局部化膿性病灶，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致敗血癥。1、檢驗(yàn)步驟（1）增菌：取1:10稀釋的樣品接種到90mL SCDLP液體培養(yǎng)基中，置36±1培養(yǎng)箱，培養(yǎng)24±2小時(shí)。注：如無此培養(yǎng)基也可用7.5%氯化鈉肉湯。（2）分離：自上述增菌培養(yǎng)液中，取12接種環(huán)，劃線接種在Baird Parker培養(yǎng)基，如無此培養(yǎng)基也

18、可劃線接種到血瓊脂平板，置36±1培養(yǎng)2448小時(shí)。在血瓊脂平板上菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。在Baird Parker培養(yǎng)基上為圓形，光滑，凸起，濕潤(rùn)，直徑為23mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一渾濁帶，在其外層有一透明帶。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的軟度。偶然會(huì)遇到非脂肪溶解的類似菌落，但無混濁帶及透明帶。挑取單個(gè)菌落分純?cè)谘傊桨迳?，?6±1培養(yǎng)24±2小時(shí)。（3）染色鏡檢：挑取分純菌落，涂片，進(jìn)行革蘭染色，鏡檢。金黃色葡萄球菌為革蘭陽性菌，排列成葡萄狀，無芽胞，無莢膜，致病性葡萄球菌，菌體較小，直徑約為0.

19、51m。（4）甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)：取上述分純菌落接種到甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)基液面上加入23mm的滅菌液狀石蠟，置36±1培養(yǎng)24±2小時(shí)，金黃色葡萄球菌應(yīng)能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸。（5）血漿凝固酶試驗(yàn)：吸取1：4新鮮血漿0.5mL，放入滅菌小試管中，加入待檢菌24±2小時(shí)肉湯培養(yǎng)物0.5mL?；靹?，放36±1恒溫箱或恒溫水浴中，每半小時(shí)觀察一次，6小時(shí)之內(nèi)如呈現(xiàn)凝塊即為陽性。同時(shí)以已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養(yǎng)物及肉湯培養(yǎng)基各0.5mL，分別加入滅菌1:4血漿0.5mL混勻，作為對(duì)照。2、檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告凡在上述選擇平板上有可以菌落生長(zhǎng)，經(jīng)染色鏡檢，證明為革

20、蘭陽性葡萄球菌，并能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，血漿凝固酶試驗(yàn)陽性者，可報(bào)告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。（五）霉菌和酵母菌霉菌和酵母菌數(shù)測(cè)定（Determination of molds and yeast count）是指化妝品檢樣在一定條件下培養(yǎng)后，1g或1mL化妝品中所污染的活的霉菌和酵母菌數(shù)量，借以判明化妝品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般衛(wèi)生狀況。本方法根據(jù)霉菌和酵母菌特有的形態(tài)和培養(yǎng)性，在虎紅培養(yǎng)基上，置28±2培養(yǎng)72小時(shí)，計(jì)算所生長(zhǎng)的霉菌和酵母菌數(shù)。檢驗(yàn)操作步驟（1）樣品稀釋：建菌落總數(shù)測(cè)定（2）取1:10、1:100、1:1000的檢液各1mL分別注入滅菌平板內(nèi)，每個(gè)稀釋度各用2

21、平板，注入融化并冷至45±1左右的虎紅培養(yǎng)基，充分搖勻。凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置28±1培養(yǎng)72±2小時(shí)，計(jì)數(shù)平板內(nèi)生長(zhǎng)的霉菌和酵母菌數(shù)。若有霉菌蔓延生長(zhǎng)，為避免影響其他霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)時(shí)，于48±2小時(shí)應(yīng)及時(shí)將此平板取出計(jì)數(shù)。（3）計(jì)算方法：先點(diǎn)數(shù)每個(gè)平板上生長(zhǎng)的霉菌和酵母菌菌落數(shù)，求出每個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)。判定結(jié)果時(shí)，應(yīng)選取菌落數(shù)在550個(gè)范圍之內(nèi)的平皿計(jì)數(shù)。乘以稀釋倍數(shù)后，即為每g（或每mL）檢樣中所含的霉菌和酵母菌數(shù)。其他范圍內(nèi)的菌落數(shù)報(bào)告應(yīng)參照菌落總數(shù)的報(bào)告方法報(bào)告之。（4）每g（或每mL）化妝品含霉菌和酵母菌數(shù)以CFU/g（mL）表示。第二節(jié)

22、 公共場(chǎng)所衛(wèi)生管理及監(jiān)督監(jiān)測(cè)（第一部分：公共場(chǎng)所衛(wèi)生管理規(guī)定及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)）一、公共場(chǎng)所衛(wèi)生管理?xiàng)l例公共場(chǎng)所衛(wèi)生管理?xiàng)l例是為創(chuàng)造良好的公共場(chǎng)所衛(wèi)生條件，預(yù)防疾病，保障人體健康而制定的。公共場(chǎng)所衛(wèi)生管理?xiàng)l例適用于下列公共場(chǎng)所：1、賓館、飯館、旅店、招待所、車馬店、咖啡館、酒吧、茶座；2、公共浴室、理發(fā)店、美容店；3、影劇院、錄像廳（室）、游藝廳（室）、舞廳、音樂廳；4、體育場(chǎng)（館）、游泳場(chǎng)（館）、公園；5、展覽館、博物館、美術(shù)館、圖書館；6、商場(chǎng)（店）、書店；7、候診室、候車（機(jī)、船）室、公共交通工具。公共場(chǎng)所的下列項(xiàng)目應(yīng)符合國(guó)家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)和要求：1、空氣、微小氣候（濕度、溫度、風(fēng)速）；2、水質(zhì)；3、

23、采光、照明；4、噪聲；5、顧客用具和衛(wèi)生設(shè)施。公共場(chǎng)所的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)和要求，由衛(wèi)生部負(fù)責(zé)制定。國(guó)家對(duì)公共場(chǎng)所以及新建、改建、擴(kuò)建的公共場(chǎng)所的選址和設(shè)計(jì)實(shí)行“衛(wèi)生許可證”制度。“衛(wèi)生許可證”由縣以上衛(wèi)生行政部門簽發(fā)。公共場(chǎng)所的主管部門應(yīng)當(dāng)建立衛(wèi)生管理制度，配備專職或者兼職衛(wèi)生管理人員，對(duì)所屬經(jīng)營(yíng)單位（包括個(gè)體經(jīng)營(yíng)者，下同）的衛(wèi)生狀況進(jìn)行經(jīng)常性檢查，并提供必要的條件。經(jīng)營(yíng)單位應(yīng)負(fù)責(zé)所經(jīng)營(yíng)的公共場(chǎng)所的衛(wèi)生管理，建立衛(wèi)生責(zé)任制度，對(duì)本單位的從業(yè)人員進(jìn)行衛(wèi)生知識(shí)的培訓(xùn)和考核工作。公共場(chǎng)所直接為顧客服務(wù)的人員，持有“健康合格證”方能從事本職工作?；加辛〖病?、病毒性肝炎、活動(dòng)期肺結(jié)核、化膿性或者滲出性皮膚病

24、以及其他有礙公共衛(wèi)生的疾病的，治愈前不得從事直接為顧客服務(wù)的工作。經(jīng)營(yíng)單位須取得“衛(wèi)生許可證”后，方可向工商行政管理部門申請(qǐng)登記，辦理營(yíng)業(yè)執(zhí)照。在本條例實(shí)施前已開業(yè)的，須經(jīng)衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)驗(yàn)收合格后，補(bǔ)發(fā)“衛(wèi)生許可證”。“衛(wèi)生許可證”兩年復(fù)核一次。公共場(chǎng)所因不符合衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)和要求造成危害健康事故的，經(jīng)營(yíng)單位應(yīng)妥善處理，并及時(shí)報(bào)告衛(wèi)生防御機(jī)構(gòu)。各級(jí)衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)，負(fù)責(zé)管轄范圍內(nèi)的公共場(chǎng)所衛(wèi)生監(jiān)督工作。民航、鐵路、交通、廠（場(chǎng)）礦衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)對(duì)管轄范圍內(nèi)公共場(chǎng)所，施行衛(wèi)生監(jiān)督，并接受當(dāng)?shù)匦l(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)的業(yè)務(wù)指導(dǎo)。衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)根據(jù)需要設(shè)立公共場(chǎng)所衛(wèi)生監(jiān)督員，執(zhí)行衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)交給的任務(wù)。公共場(chǎng)所衛(wèi)生監(jiān)督員由同級(jí)

25、人民政府發(fā)給證書。民航、鐵路、交通、工礦企業(yè)衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)的公共場(chǎng)所衛(wèi)生監(jiān)督員，由其上級(jí)主管部門發(fā)給證書。衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)對(duì)公共場(chǎng)所的衛(wèi)生監(jiān)督職責(zé)：1、對(duì)公共場(chǎng)所進(jìn)行衛(wèi)生監(jiān)測(cè)和衛(wèi)生技術(shù)指導(dǎo)。2、監(jiān)督從業(yè)人員健康檢查，指導(dǎo)有關(guān)部門對(duì)從業(yè)人員進(jìn)行衛(wèi)生知識(shí)的教育和培訓(xùn)。3、對(duì)新建、擴(kuò)建、改建的公共場(chǎng)所的選址和設(shè)計(jì)衛(wèi)生審查，并參加竣工驗(yàn)收。衛(wèi)生監(jiān)督員有權(quán)對(duì)公共場(chǎng)所進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢查，索取有關(guān)資料，經(jīng)營(yíng)單位不得拒絕或隱瞞。衛(wèi)生監(jiān)督員對(duì)所提供的技術(shù)資料有保密的責(zé)任。公共場(chǎng)所衛(wèi)生監(jiān)督員在執(zhí)行任務(wù)時(shí)，應(yīng)佩戴證章、出示證件。凡有下列行為之一的單位或者個(gè)人，衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)可以根據(jù)情節(jié)輕重，給予警告、罰款、停業(yè)整頓、吊銷“衛(wèi)生許

26、可證”的行政處罰：1、衛(wèi)生質(zhì)量不符合國(guó)家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)和要求，而繼續(xù)營(yíng)業(yè)的。2、未獲得“健康合格證”，而從事直接為顧客服務(wù)的。3、拒絕衛(wèi)生監(jiān)督的。4、為取得“衛(wèi)生許可證”，擅自營(yíng)業(yè)的。罰款一律上繳國(guó)庫。違反公共衛(wèi)生管理?xiàng)l例的規(guī)定造成嚴(yán)重危害公民健康的事故或中毒事故的單位或者個(gè)人，應(yīng)當(dāng)對(duì)受害人賠償損失。違反公共衛(wèi)生管理?xiàng)l例致人殘疾或者死亡，構(gòu)成犯罪的，應(yīng)由司法機(jī)關(guān)依法追究直接責(zé)任人員的刑事責(zé)任。對(duì)罰款、停業(yè)整頓及吊銷“衛(wèi)生許可證”的行政處罰不服的，在接到處罰通知之日起15天內(nèi)，可以向當(dāng)?shù)厝嗣穹ㄔ浩鹪V。但對(duì)公共場(chǎng)所衛(wèi)生質(zhì)量控制的決定應(yīng)立即執(zhí)行。對(duì)處罰的決定不履行又逾期不起訴的，由衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)向人民法院申

27、請(qǐng)強(qiáng)制執(zhí)行。公共場(chǎng)所衛(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)和衛(wèi)生監(jiān)督員必須盡職盡責(zé)，依法辦事。對(duì)玩忽職守，濫用職權(quán)，收取賄賂的，由上級(jí)主管部門給予直接責(zé)任人員行政處分。構(gòu)成犯罪的，由司法機(jī)關(guān)依法追究直接責(zé)任人員的刑事責(zé)任。二、公共場(chǎng)所衛(wèi)生監(jiān)督工作各級(jí)衛(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)以及民航、鐵路、交通、廠（場(chǎng)）礦衛(wèi)生職能部門和衛(wèi)生防疫站對(duì)所轄區(qū)域?qū)嵤┕矆?chǎng)所衛(wèi)生監(jiān)督。準(zhǔn)備開業(yè)的公共場(chǎng)所需要到衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)辦理“衛(wèi)生許可證”，“衛(wèi)生許可證”每?jī)赡陱?fù)核1次。從業(yè)人員需要進(jìn)行健康檢查，持有“健康合格證”才可上崗。經(jīng)常性衛(wèi)生監(jiān)督檢查的內(nèi)容包括：1、衛(wèi)生組織、衛(wèi)生制度是否建立、健全及執(zhí)行情況；2、基本衛(wèi)生設(shè)施是否具備；3、公共場(chǎng)所內(nèi)外環(huán)境衛(wèi)生狀況；4

28、、消毒制度、消毒設(shè)施是否健全、完好及運(yùn)行情況；5、公共場(chǎng)所衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中“有關(guān)規(guī)定”部分執(zhí)行情況；6、抽查部分從業(yè)人員“健康合格證”和“考核合格”章；7、符合從業(yè)人員名單是否準(zhǔn)確無誤，以確定直接為顧客服務(wù)人員（含臨時(shí)工）為體檢、培訓(xùn)對(duì)象。衛(wèi)生監(jiān)督員在監(jiān)督檢查中，應(yīng)認(rèn)真填寫“現(xiàn)場(chǎng)衛(wèi)生監(jiān)督記錄”。衛(wèi)生監(jiān)督員在執(zhí)行任務(wù)時(shí)，不得當(dāng)場(chǎng)作出行政處罰的決定。在開展公共場(chǎng)所衛(wèi)生監(jiān)測(cè)時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守各項(xiàng)操作規(guī)程，認(rèn)真填寫“樣品采集記錄表”，采樣記錄的編號(hào)應(yīng)于樣品編號(hào)一致。采樣后應(yīng)填寫“衛(wèi)生監(jiān)測(cè)樣品送檢單”，連同樣品及時(shí)送至檢驗(yàn)單位。檢驗(yàn)者應(yīng)出具“衛(wèi)生監(jiān)測(cè)結(jié)果報(bào)告單”退還承辦衛(wèi)生監(jiān)督員。衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)依據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果填寫“衛(wèi)生

29、監(jiān)督監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)書”送被監(jiān)督單位。凡涉及行政觸發(fā)者，都必須立案?，F(xiàn)場(chǎng)調(diào)查、核實(shí)必須有兩名以上衛(wèi)生監(jiān)督員或助理衛(wèi)生監(jiān)督員（其中衛(wèi)生監(jiān)督員不少于1名）同行，赴現(xiàn)場(chǎng)時(shí)，衛(wèi)生監(jiān)督員必須著裝整齊，佩戴“中國(guó)衛(wèi)生監(jiān)督”證章，出世“中國(guó)衛(wèi)生監(jiān)督”證件。認(rèn)證、無證、地點(diǎn)、時(shí)間及情節(jié)是執(zhí)行行政處罰的主要依據(jù)。在訴訟過程中不得再向被處罰者或證人收集證據(jù)，經(jīng)人民法院同意的除外。涉及國(guó)家機(jī)密或技術(shù)專利的證據(jù)，監(jiān)督機(jī)構(gòu)及調(diào)查取證人員要予以保密。由3名以上衛(wèi)生監(jiān)督員或助理衛(wèi)生監(jiān)督員（其中衛(wèi)生監(jiān)督員不少于兩名）對(duì)經(jīng)營(yíng)單位的違法事實(shí)進(jìn)行合議，填寫行政控制或行政處罰審批表，并附上述現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查所得材料，按行政處罰的批注權(quán)限逐級(jí)上報(bào)。對(duì)

30、停業(yè)整頓及超過3000元的罰款處罰須經(jīng)同級(jí)衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)。地、市級(jí)以下衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)應(yīng)報(bào)省、自治區(qū)、直轄市衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)備案。行政處罰實(shí)施完畢后，由主辦衛(wèi)生監(jiān)督員填寫結(jié)案報(bào)告單，予以結(jié)案。結(jié)案卷宗應(yīng)包括與本案有關(guān)的各種文書、證據(jù)。三、公共交通工具衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求公共交通工具衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了旅客列車車廂、輪船客艙、飛機(jī)客艙的微小氣候、空氣質(zhì)量、噪聲、照度得個(gè)標(biāo)準(zhǔn)值及其衛(wèi)生要求?；疖?、輪船、飛機(jī)上的飲水水質(zhì)應(yīng)符合GB 5749-2006要求。貯水水箱及蓄水設(shè)施應(yīng)定期清洗消毒。旅客使用的臥具、鋪位、席位必須整潔衛(wèi)生?；疖囉才P車廂臥具應(yīng)單程更換，軟席車廂臥餐應(yīng)一客一換。輪船供三等艙以上旅客使用的臥具應(yīng)一客一換

31、，供應(yīng)四、五等艙的臥具應(yīng)保持清潔。飛機(jī)旅客座位頭片應(yīng)做到一客一換，公用毯用后應(yīng)及時(shí)消毒、加封?；疖嚒⑤喆瑧?yīng)有茶餐消毒設(shè)備，未經(jīng)消毒的公用茶具不得供旅客使用。飛機(jī)上供旅客使用的茶具、餐布等消毒后上機(jī)，應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行儲(chǔ)藏規(guī)定。旅客用畢的一次性塑料餐具等容器應(yīng)及時(shí)處理，集中銷毀。旅客列車、輪船、飛機(jī)上的衛(wèi)生間的衛(wèi)生設(shè)施應(yīng)保持完整。衛(wèi)生間內(nèi)應(yīng)無積水、無積糞、無明顯臭味?；疖嚭洼喆瑑?nèi)的廁所不應(yīng)設(shè)坐式便器。飛機(jī)內(nèi)的廁所應(yīng)按要求在馬桶內(nèi)投放劃糞劑和消毒劑。車廂和客艙內(nèi)的蚊、蠅、蟑螂指數(shù)及鼠密度影達(dá)到全國(guó)愛衛(wèi)會(huì)考核規(guī)定。若發(fā)現(xiàn)四害，應(yīng)立即殺滅。車廂和客艙用于消毒的殺蟲和滅鼠的藥物，不得有損于人體健康。旅客的固體廢

32、棄物應(yīng)統(tǒng)一裝袋，應(yīng)停站時(shí)集中處理，不得隨意向窗外拋棄。車廂和客艙內(nèi)禁止吸煙，應(yīng)有禁煙的明顯標(biāo)志和管理制度。宜在通風(fēng)處設(shè)置吸煙區(qū)。嚴(yán)謹(jǐn)攜帶腥、臭物品及其有礙公共衛(wèi)生的物品進(jìn)入車廂或客艙?；疖囆旭偸袇^(qū)、大橋、隧道和停車5分鐘以上的車站量，應(yīng)封閉廁所，不得傾倒污水、污物，保持周圍環(huán)境清潔。公共交通工具的設(shè)計(jì)衛(wèi)生應(yīng)執(zhí)行本標(biāo)準(zhǔn)的要求。四、公共浴室衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容公共浴室衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了公共浴室包括更衣室、浴室（淋、池、盆?。⑸Ｄ迷∈业氖覝?、空氣質(zhì)量和水溫等標(biāo)準(zhǔn)值及其衛(wèi)生要求。公共浴室應(yīng)設(shè)有更衣室、浴室、廁所和消毒等房間。更衣室（包括兼做休息室）必須由保暖、換氣設(shè)備，地面要防滲、防滑。浴室應(yīng)設(shè)氣窗，保持良好通

33、風(fēng)，起床面積為地面面積的5%。浴室地面坡度不<2%，屋頂應(yīng)有一定弧度。新建、改建、擴(kuò)建的浴室內(nèi)不得設(shè)池浴。目前尚不能取消的池浴，在池浴間內(nèi)必須設(shè)置淋浴噴頭，池浴內(nèi)的噴頭天數(shù)按更衣室床位數(shù)的1/5設(shè)置。相鄰淋浴噴頭的間距不<0.9m。池浴每晚要徹底清洗，經(jīng)過消毒后再換水，池水每日至少要補(bǔ)充2次新水，每次補(bǔ)充水量不小于池水總量的20%。盆浴間須設(shè)淋浴噴頭，顧客用畢的浴盆應(yīng)清洗消毒。公用茶具應(yīng)做到一客一洗一消毒，拖鞋和修腳工具每客用后應(yīng)消毒。茶具、毛巾和拖鞋應(yīng)按照規(guī)定消毒。修腳工具應(yīng)參照有關(guān)理發(fā)用具消毒要求。浴室內(nèi)不設(shè)公用臉巾、浴巾。更衣室（包括兼作休息室）所用墊巾應(yīng)及時(shí)更換，保持清潔整

34、齊。浴室內(nèi)機(jī)器衛(wèi)生間應(yīng)及時(shí)清掃、消毒，做到無積水、無異味。應(yīng)設(shè)有禁止患性病和各種傳染性皮膚?。ㄈ缃戬?、化膿性皮膚病、廣泛性皮膚霉菌病等）的顧客就浴的明顯標(biāo)志。有顧客住宿的公共浴室，住宿用床上用品應(yīng)符合旅店業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)規(guī)定。公共浴室附設(shè)的理發(fā)店、美容店應(yīng)執(zhí)行GB 9666-1996規(guī)定。五、理發(fā)店、美容店衛(wèi)生保準(zhǔn)的內(nèi)容理發(fā)店、美容店衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了理發(fā)店、美容院（店）的空氣衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)值及其衛(wèi)生要求。經(jīng)常性衛(wèi)生要求包括：理發(fā)店、美容院（店）的環(huán)境應(yīng)整潔、明亮、舒適。理發(fā)店、美容院（店）應(yīng)有健全的衛(wèi)生制度。店內(nèi)應(yīng)有消毒設(shè)施或消毒間。工作人員操作應(yīng)穿清潔干凈的工作服，清面時(shí)應(yīng)戴口罩。理發(fā)用大小圍布要經(jīng)

35、常清洗更換。臉巾應(yīng)潔凈，每客用后應(yīng)清洗消毒，其細(xì)菌數(shù)應(yīng)符合GB 9663-1996中表2要求。美容工具、理發(fā)工具、胡刷用后應(yīng)消毒，不得檢出大腸菌群和金黃色葡萄球菌。胡刷宜使用一次性胡刷。理發(fā)工具宜采用無臭氧紫外線消毒。理發(fā)刀具、美容工具配備的數(shù)量應(yīng)滿足消毒周轉(zhuǎn)所需。理發(fā)、燙發(fā)、染發(fā)的毛巾及刀具應(yīng)分開使用，清洗消毒后的工具應(yīng)分類存放。供顧客使用的化妝品應(yīng)符合GB 7916-1987規(guī)定。必須備有供患頭癬等皮膚傳染病顧客專用的理發(fā)用具，并且明顯標(biāo)志，用后及時(shí)消毒，并單獨(dú)存放。正特、副特、甲、乙級(jí)燙發(fā)店、燃發(fā)電和美容院必須設(shè)有單獨(dú)操作間，并有機(jī)械排風(fēng)裝置。無單獨(dú)操作間的普通理發(fā)店應(yīng)設(shè)燙發(fā)、染發(fā)工作區(qū)

36、，還應(yīng)設(shè)有效的抽風(fēng)設(shè)備，控制風(fēng)速不低于0.3m/s。毛巾與座位的比：正副物質(zhì)級(jí)5:1，甲乙級(jí)4:1，丙丁級(jí)不少于3:1.干毛巾3:1。美容院（店）工作人員在美容前雙手必須清洗消毒，工作時(shí)應(yīng)戴口罩。美容用唇膏、唇筆等應(yīng)做到一次性使用，一般美容店不得做創(chuàng)傷性美容術(shù)。理發(fā)店和美容店地下的碎發(fā)要及時(shí)清掃，保持室內(nèi)清潔。理發(fā)和美容工具應(yīng)擺放整齊，做到操作臺(tái)上和刀具等用品表面無碎發(fā)殘留。六、旅店業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容旅店業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了各類旅店客房的空氣質(zhì)量、噪聲、照度和公共用品消毒燈標(biāo)準(zhǔn)值及其衛(wèi)生要求。經(jīng)常性衛(wèi)生要求：各類旅店的店容、店貌和周圍環(huán)境應(yīng)整潔、美觀、地面無果皮、痰跡和垃圾。各類旅店應(yīng)有健全的衛(wèi)生制

37、度。被套、枕套（巾）、床單等臥具應(yīng)一客一換，常住旅客的床上臥具至少一周一換。星級(jí)賓館還應(yīng)執(zhí)行星級(jí)賓館有關(guān)床上用品更換規(guī)定。清潔的臥具應(yīng)符合相關(guān)規(guī)定。公用茶具應(yīng)每日清洗消毒。清潔的茶具必須表面光潔，無油漬、無水漬、無異味、其細(xì)菌數(shù)必須達(dá)到相關(guān)規(guī)定?？头?jī)?nèi)衛(wèi)生間的洗漱池、浴盆和抽水恭桶應(yīng)每日清洗消毒并應(yīng)符合表2規(guī)定。無衛(wèi)生間的客房，每個(gè)床位應(yīng)配備有不同標(biāo)記的臉盆和腳盆各一個(gè)。臉盆、腳盆和拖鞋應(yīng)做到一客一換，清潔的臉（腳）盆、拖鞋的表面應(yīng)光潔、無污垢、無油漬，并不得檢出致病菌。旅店的公共衛(wèi)生間（盥洗間和廁所）應(yīng)該每日清掃、消毒，做到并保持無積水、無積糞、無蚊蠅、無異味。各類旅店應(yīng)有防蚊、蠅、蟑螂和防

38、鼠害的設(shè)施，并經(jīng)常檢查設(shè)施使用情況，發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)改進(jìn)。各類旅店應(yīng)做到室內(nèi)外無蚊蠅孳生場(chǎng)所。蚊、蠅、蟑螂等病媒昆蟲指數(shù)及鼠密度應(yīng)符合全國(guó)愛衛(wèi)會(huì)考核規(guī)定。店內(nèi)自備水源與二次供水水質(zhì)應(yīng)符合GB5749-2006規(guī)定。二次供水蓄水池應(yīng)有衛(wèi)生防護(hù)措施，蓄水池容器內(nèi)的涂料應(yīng)符合輸水管材衛(wèi)生要求，做到定期清洗消毒。旅客廢棄的衣物應(yīng)進(jìn)行登記，統(tǒng)一銷毀。旅店內(nèi)附設(shè)的理發(fā)店、娛樂場(chǎng)所、浴室等應(yīng)執(zhí)行相應(yīng)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。地下室旅店的空氣質(zhì)量、噪聲、照度和衛(wèi)生要求等執(zhí)行人防工程平時(shí)使用環(huán)境衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。七、商場(chǎng)（店）、書店衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容商場(chǎng)（店）、書店衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了商場(chǎng)（店）、書店的微小氣候、空氣質(zhì)量、噪聲、照度等標(biāo)準(zhǔn)值

39、及其衛(wèi)生要求，適用于城市營(yíng)業(yè)面積在300m2以上和縣、鄉(xiāng)、鎮(zhèn)營(yíng)業(yè)面積在200m2以上的室外內(nèi)場(chǎng)所、書店。衛(wèi)生要求：商場(chǎng)（店）、書店?duì)I業(yè)廳應(yīng)有機(jī)械通風(fēng)設(shè)備。有空調(diào)裝置的商場(chǎng)（店）、書店，新風(fēng)量不低于20m3/(h·人)，進(jìn)風(fēng)口應(yīng)遠(yuǎn)離污染源。新建、改建、擴(kuò)建商場(chǎng)（店）、書店?duì)I業(yè)廳應(yīng)利用自然采光，采光系數(shù)不<1/6。店內(nèi)應(yīng)清潔整齊。采用濕式清掃，垃圾日產(chǎn)日清。店內(nèi)禁止吸煙，大型商場(chǎng)應(yīng)設(shè)顧客休息室。大中型商場(chǎng)須設(shè)顧客衛(wèi)生間，衛(wèi)生間應(yīng)有良好通風(fēng)排氣裝置，做到清潔無異味。綜合商場(chǎng)內(nèi)出售食品、藥品、化妝品等商品的柜臺(tái)應(yīng)分設(shè)在清潔的地方。出售農(nóng)藥、油漆、化學(xué)試劑等商品，應(yīng)有單獨(dú)售貨室，并采取防

40、護(hù)措施。出售舊衣物等生活用品的商店，應(yīng)有消毒措施和消毒制度，舊衣物必須經(jīng)消毒后方可出售。商場(chǎng)（店）/書店作其他公共場(chǎng)所使用時(shí)應(yīng)執(zhí)行相應(yīng)的公共場(chǎng)所衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。八、體育館衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容體育館衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了體育館內(nèi)的微小氣候、空氣質(zhì)量、通風(fēng)等標(biāo)準(zhǔn)值及其衛(wèi)生要求。適用于觀眾座位在1000個(gè)以上的體育館。衛(wèi)生要求：體育館應(yīng)有機(jī)械通風(fēng)裝置。使用空調(diào)時(shí)觀眾席的新風(fēng)量每人每小時(shí)不低于20m3。體育館內(nèi)禁止吸煙。根據(jù)觀眾廳的座位數(shù)分設(shè)有相對(duì)蹲位的男女廁所，廁所應(yīng)有單獨(dú)通風(fēng)排氣設(shè)施并無異味。供觀眾飲用的水須經(jīng)消毒，其水質(zhì)應(yīng)符合GB 5749-2006規(guī)定。應(yīng)采取濕式清掃，及時(shí)清除垃圾，保護(hù)環(huán)境整潔。公用茶具、口巾等

41、要在專用消毒間消毒，消毒的茶具應(yīng)達(dá)到GB 9663-1996中表2的要求。體育館作其他公共場(chǎng)所使用時(shí)應(yīng)執(zhí)行相應(yīng)的公共場(chǎng)所衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。九、圖書館、博物館、美術(shù)館、展覽館衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容規(guī)定了圖書館、博物館、美術(shù)館和展覽館的微小氣候、空氣質(zhì)量、噪聲、照度等標(biāo)準(zhǔn)值及其衛(wèi)生要求。衛(wèi)生要求：使用面積超過300m2的圖書館、博物館、美術(shù)館和展覽館均應(yīng)有機(jī)械通風(fēng)裝置。館內(nèi)采用濕式清掃，及時(shí)清除垃圾、污物，保持館內(nèi)整潔。館內(nèi)禁止吸煙。閱覽室內(nèi)不得進(jìn)行印刷和復(fù)印，保持室內(nèi)空氣清潔。廳內(nèi)自然采光系數(shù)不<1/6，人工照明應(yīng)達(dá)到光線均勻、柔和、不眩目。館內(nèi)的衛(wèi)生間應(yīng)有單獨(dú)的通風(fēng)排氣設(shè)施，做到無異味。圖書館、博物館、

42、美術(shù)館、展覽館作其他公共場(chǎng)所使用時(shí)，應(yīng)執(zhí)行相應(yīng)的公共場(chǎng)所衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。十、文化娛樂場(chǎng)所衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容文化娛樂場(chǎng)所衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定文化娛樂場(chǎng)所的微小氣候、空氣質(zhì)量、噪聲、通風(fēng)等衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)值及衛(wèi)生要求。適用于影劇院（俱樂部）、音樂廳、錄像廳（室）、游藝廳、舞廳（包括卡拉OK歌廳）、酒吧、茶座、咖啡廳及多功能文化娛樂場(chǎng)所等。經(jīng)常性衛(wèi)生要求：文化娛樂場(chǎng)所室內(nèi)外環(huán)境應(yīng)整潔、美觀，地面無果皮、痰跡和垃圾。文化娛樂場(chǎng)所要有健全的衛(wèi)生制度。影劇院、音樂廳、錄像廳（室）、游藝廳（室）、舞廳等場(chǎng)所內(nèi)禁止吸煙，宜設(shè)專門吸煙室。放映電影的場(chǎng)次間隔時(shí)間不得少于30分鐘，空?qǐng)鰰r(shí)間不少于10分鐘。換場(chǎng)時(shí)間應(yīng)加強(qiáng)通風(fēng)換氣。觀眾廳及其他

43、文化娛樂場(chǎng)所的座位套應(yīng)定期清洗保持清潔。立體電影院供觀眾使用的眼鏡每場(chǎng)用后應(yīng)經(jīng)紫外線消毒?；蚴褂靡淮涡匝坨R。呼吸道傳染病流行季節(jié)必須加強(qiáng)室內(nèi)外機(jī)械通風(fēng)換氣和空氣消毒。劇場(chǎng)及其他文化娛樂場(chǎng)所內(nèi)嚴(yán)禁使用有害觀眾健康的煙霧機(jī)。舞廳在營(yíng)業(yè)時(shí)間內(nèi)嚴(yán)禁使用殺菌波長(zhǎng)的紫外燈和滑石粉。錄像廳及其他場(chǎng)所廳（室）內(nèi)使用的裝飾材料不得對(duì)人體有潛在危害。放映錄像電視最近距離為顯示屏幕對(duì)角線長(zhǎng)度的4倍。采用投影的視距為屏幕寬度的1.5倍。酒吧、茶座、咖啡廳等場(chǎng)內(nèi)供顧客使用的飲（餐）具應(yīng)符合茶具消毒判定標(biāo)準(zhǔn)。十一、醫(yī)院侯診室衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容醫(yī)院侯診室衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了醫(yī)院侯診室的微小氣候、空氣質(zhì)量、噪聲和照度等標(biāo)準(zhǔn)值及其衛(wèi)生要

44、求。適用于區(qū)、縣級(jí)以上醫(yī)院（含區(qū)、縣級(jí)）的候診室（包括掛號(hào)、取藥等候室）。衛(wèi)生要求：候診室應(yīng)保持清潔、整齊、安靜。室內(nèi)應(yīng)采用濕式清掃，垃圾廢棄物應(yīng)日產(chǎn)日清。衛(wèi)生間應(yīng)隨時(shí)清掃、消毒、保潔。候診室應(yīng)有通風(fēng)設(shè)施，保持室內(nèi)空氣新鮮。候診室內(nèi)禁止吸煙及從事污染環(huán)境的其他活動(dòng)。候診室內(nèi)應(yīng)設(shè)有痰盂和污物箱。痰盂和污物箱應(yīng)每日清洗和消毒。不得在候診室內(nèi)出售商品和食物。候診室內(nèi)不設(shè)公用飲水杯。應(yīng)有健全的消毒制度，疾病流行時(shí)應(yīng)加強(qiáng)消毒（傳染病?？漆t(yī)院一天一消毒）新建區(qū)、縣級(jí)以上的醫(yī)院應(yīng)設(shè)分科候診室。十二、游泳場(chǎng)所衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容游泳場(chǎng)所衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了室內(nèi)外游泳場(chǎng)所的水質(zhì)和游泳館的空氣質(zhì)量等標(biāo)準(zhǔn)值及其衛(wèi)生要求。適用于

45、一切人工和天然游泳場(chǎng)所。經(jīng)常性衛(wèi)生要求：游泳場(chǎng)所的通道及衛(wèi)生設(shè)施應(yīng)保持清潔無異味并應(yīng)定期消毒。為防止人工游泳池生長(zhǎng)藻類，池水中加入0.250.5mg/L硫酸銅。發(fā)現(xiàn)藻類時(shí)的最大加藥量不應(yīng)超過1.0mg/L。浸較消毒池水的余氯含量應(yīng)保持510mg/L，需4小時(shí)更換一次。兒童涉水池連續(xù)供給的新水中余氯濃度應(yīng)保持0.30.5mg/L。人工游泳池在開放時(shí)間內(nèi)應(yīng)每日定時(shí)補(bǔ)充新水，保證池水水質(zhì)有良好的衛(wèi)生狀況。嚴(yán)禁患有肝炎、心臟病、皮膚癬疹（包括腳癬）、重癥沙眼、急性結(jié)膜炎、中耳炎、腸道傳染病、精神病等患者和酗酒者進(jìn)入人工游泳池游泳。禁止出租游泳衣褲。（第2部分：公共場(chǎng)所衛(wèi)生監(jiān)測(cè)方法）一、空氣微生物樣品采

46、集及處理（一）撞擊法1、選擇有代表性的位置設(shè)置采樣點(diǎn)。將采樣器消毒，按儀器使用說明進(jìn)行采樣。2、樣品采完后，將帶菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板置36±1恒溫箱中，培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)菌落數(shù)，并根據(jù)采樣器的流量和采樣時(shí)間，換算成沒m3空氣中的菌落數(shù)。以CFU/m3報(bào)告結(jié)果。3、選擇撞擊式空氣微生物采樣器的基本要求：（1）對(duì)空氣中細(xì)菌捕獲率達(dá)95%。（2）操作簡(jiǎn)單，攜帶方便，性能穩(wěn)定，便于消毒。 （二）自然沉降法1、設(shè)置采樣點(diǎn)時(shí)，應(yīng)根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)的大小，選擇有代表性的位置作為空氣細(xì)菌檢測(cè)的采樣點(diǎn)。通常設(shè)置5個(gè)采樣點(diǎn)，即室內(nèi)墻角對(duì)角線交叉點(diǎn)為一采樣點(diǎn)與四墻角連線的中點(diǎn)為另外4個(gè)采樣點(diǎn)。采樣高度為1.21.5m。采

47、樣點(diǎn)應(yīng)遠(yuǎn)離墻壁1m以上，并避開空調(diào)、門窗等空氣流通處。2、將營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板置于采樣點(diǎn)處，打開皿蓋，暴露5分鐘，蓋上皿蓋，翻轉(zhuǎn)平板，置36±1恒溫箱中，培養(yǎng)48小時(shí)。3、計(jì)數(shù)每塊平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)，求出全部采樣點(diǎn)的平均菌落數(shù)。以CFU/皿報(bào)告結(jié)果。二、差距微生物檢測(cè)樣品采集機(jī)處理（一）細(xì)菌總數(shù)測(cè)定1、隨機(jī)抽取清洗消毒后準(zhǔn)備使用的茶具。2、用滅菌生理鹽水濕潤(rùn)棉拭子，在茶具內(nèi)、外緣，涂抹50cm2，即11.5cm高處一圈（口唇接觸處）。應(yīng)滅菌剪刀剪去棉簽手接觸的部位，將棉拭子放入10mL生理鹽水內(nèi)，4小時(shí)內(nèi)送檢。3、將放有棉拭子的試管充分振搖。此液為1:10稀釋液。4、以無菌操作，吸取2mL

48、檢樣，分別注入到兩塊滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL。如污染嚴(yán)重，可十倍遞增稀釋，即吸取1mL加到9mL滅菌生理鹽水中，混勻，此液為1:100稀釋液。每個(gè)稀釋度做兩塊平皿。（二）大腸菌群測(cè)定1、隨機(jī)抽取清洗消毒后準(zhǔn)備使用的茶具。2、采用涂抹法檢測(cè)時(shí)，可用上述測(cè)定細(xì)菌總數(shù)采集的樣品，無需重采。采用紙片法檢測(cè)時(shí)，用滅菌生理鹽水濕潤(rùn)5cm×5cm大腸菌群快速測(cè)定紙片兩張，分別粘貼在茶具內(nèi)、外緣口唇接觸處，約30秒鐘后取下，置于無菌塑料袋內(nèi)。三、毛巾、床上臥具微生物檢測(cè)樣品采集及處理（一）細(xì)菌總數(shù)測(cè)定1、隨機(jī)抽取清洗消毒后準(zhǔn)備使用的毛巾、床上臥具。2、用滅菌生理鹽水濕潤(rùn)棉拭子，在毛巾、枕巾對(duì)折后兩面的

49、中央各25cm2（5cm×5cm）面積范圍；床單、被單在上下兩部分25cm2面積范圍內(nèi)有順序地來回涂抹，用滅菌剪刀剪去棉簽手接觸的部位，將棉拭子放入10mL生理鹽水內(nèi)，4小時(shí)內(nèi)送檢。3、將放有棉拭子的試管充分振搖。此液為1:10稀釋液。4、以無菌操作，吸取2mL檢樣，分別注入到兩塊滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL。如污染嚴(yán)重，可十倍遞增稀釋，即吸取1mL加到9mL滅菌生理鹽水中，混勻，此液為1:100稀釋液。每個(gè)稀釋度做兩塊平皿。（二）大腸菌群測(cè)定1、隨機(jī)抽取清洗消毒后準(zhǔn)備使用的毛巾、床上臥具。2、采用涂抹法檢測(cè)時(shí)可用上述測(cè)定細(xì)菌總數(shù)采集的樣品，無需重采。采用紙片法檢測(cè)時(shí)，用滅菌生理鹽水濕潤(rùn)5

50、cm×5cm大腸菌群快速測(cè)定紙片兩張，分別粘貼在毛巾、床上臥具規(guī)定不為和面積范圍內(nèi)，約30秒鐘后取下，置于無菌塑料袋內(nèi)。四、理發(fā)用具微生物檢測(cè)樣品采集及處理（一）大腸菌群測(cè)定采樣應(yīng)在無菌操作下進(jìn)行。間蘸有無菌生理鹽水的無菌棉拭子在推子前部上下均勻各涂抹三次，或在使用的刀、剪刀的兩側(cè)各涂抹一次采樣。將采樣后的棉拭子剪去受接觸部位，放入10mL滅菌生理鹽水中，充分振搖，取5mL放入雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管中，置36±1溫箱培養(yǎng)24小時(shí)。（二）金黃色葡萄球菌測(cè)定采樣方法同理發(fā)用具微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法中大腸菌群檢測(cè)的采樣，可將大腸菌群檢測(cè)后剩余的5mL待檢樣品進(jìn)行金黃色葡萄球菌測(cè)定。五、拖

51、鞋微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法霉菌和酵母菌測(cè)定1、將無菌棉拭子蘸取無菌生理鹽水，在每只拖鞋鞋面與腳趾接觸處5cm×5cm面積上，有順序地均勻涂抹3次（一雙拖鞋為一份樣品）后，用滅菌剪刀將棉拭子手執(zhí)部分剪斷，將棉拭子放入10mL狀有玻璃珠的無菌鹽水管中。2、將盛有棉拭子的鹽水管在手心用力振蕩100次，再用帶橡皮乳頭的1mL滅菌吸管反復(fù)吹吸50次，使霉菌孢子呈分散開。此液為1:10稀釋液。3、用滅菌吸管吸取1:10檢液2mL，分別注入到2個(gè)滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL。另取1mL注入9mL家有玻璃珠的滅菌鹽水管中，換1支1mL滅菌吸管吹吸5次，此液為1:100稀釋液。4、按上述操作順序作10被稀釋遞增稀

52、釋液，每稀釋一次，換一支1mL滅菌吸管，根據(jù)樣品的污染情況，選擇3個(gè)合適的稀釋度。5、將融化并冷卻至45左右的培養(yǎng)基注入滅菌的平皿中，待瓊脂凝固后，倒置于2528溫箱中，3天后開始觀察，共培養(yǎng)觀察1周。注：一只拖鞋的涂抹面積是5cm×5cm=25cm2；一雙拖鞋的涂抹面積則為25cm2×2=50cm2。六、游泳池水微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)方法（一）細(xì)菌總數(shù)測(cè)定1、采樣瓶的要求和預(yù)處理 用于微生物分析的采樣瓶要無酸、無堿、無毒的玻璃容器。采樣瓶在滅菌前加入足量的10%（m/m）硫代硫酸鈉（Na2S2O3）溶液。一般情況下125mL的采樣瓶加0.1mL，加完后121高壓滅菌20分鐘。2、

53、用滅菌吸管吸取均勻水樣1mL，注入到滅菌平皿內(nèi)，另取1mL注入到另一滅菌平皿內(nèi)做平行接種。再取1mL加到9mL無菌生理鹽水中作1:10稀釋，混勻后取2mL分別加到兩個(gè)無菌平皿內(nèi)，每皿1mL。3、將融化并冷卻至45的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注平皿內(nèi)，每皿約15mL，另取一個(gè)不加樣品的無菌平皿作空白對(duì)照。立即旋搖平皿，使水樣和培養(yǎng)基充分混勻。待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿，置36±1恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48小時(shí)。（二）大腸菌群測(cè)定1、多管發(fā)酵法在2個(gè)裝有50mL三倍濃縮乳糖膽鹽培養(yǎng)液的大試管或燒杯內(nèi)各加入水樣100mL。在10支裝有5mL三倍濃縮乳糖膽鹽培養(yǎng)液的試管里各加入水樣10mL。輕搖試管，使液體充分混勻，

54、置36±1培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24小時(shí)。觀察每管是否產(chǎn)氣，如不產(chǎn)氣則報(bào)告為達(dá)成菌群陰性；若有氣體產(chǎn)生則為推測(cè)性試驗(yàn)陽性，需做進(jìn)一步的證實(shí)試驗(yàn)。2、濾膜法（1）濾膜滅菌：將濾膜放入含蒸餾水的燒杯中，煮沸滅菌3次，每次15分鐘。前兩次煮沸后需更換水洗滌23次，以除去殘留溶劑。（2）濾器滅菌：用121高壓滅菌29分鐘或點(diǎn)燃的酒精棉球火焰滅菌。（3）水樣過濾：用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣部分，將粗糙面向上，貼放在慮床上。固定好濾器，將100mL水樣（如水樣含菌數(shù)較多，可減少慮水樣量或?qū)⑺畼酉♂專┳⑷霝V器中，打開濾器閥門，在-0.5個(gè)大氣壓下抽濾。（4）培養(yǎng)：水樣濾完后，再抽氣約5秒鐘，關(guān)上濾器閥門，

55、取下濾器。用滅菌鑷子莢取濾膜邊緣部分，移放在乳糖瓊脂分離培養(yǎng)基上，濾膜截留細(xì)菌面向上，濾膜應(yīng)與培養(yǎng)基完全貼緊，兩者之間不得留有旗袍。然后將平皿倒置，放入36±1恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)1824小時(shí)。七、浴盆、臉（腳）盆微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法（一）細(xì)菌總數(shù)測(cè)定1、采樣必須在無菌操作下進(jìn)行，采樣用具應(yīng)高壓滅菌12120分鐘。2、采樣部位，選擇在盆內(nèi)側(cè)壁1/2至1/3高度采樣。3、采樣布點(diǎn)，浴盆可在四壁及盆底呈梅花布點(diǎn)，臉（腳）盆可在相對(duì)兩側(cè)壁布點(diǎn)。4、采樣方法（1）涂抹法：用浸有無菌生理鹽水的棉拭子在規(guī)格板5cm×5cm內(nèi)來回均勻涂滿整個(gè)方格，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，剪去手接觸部位后，將涂抹浴盆的5

56、個(gè)棉拭子一并放入125mL的生理鹽水燒瓶中，涂抹臉（腳）盆的2個(gè)棉拭子一并放入50mL的生理鹽水三角燒瓶中，充分振搖或在漩渦振蕩器上振蕩1分鐘，此1mL的菌濃度相當(dāng)于1cm2的菌量。（2）斑貼法：將5cm×5cm無菌濾紙片放入滅菌平皿中，注入滅菌生理鹽水1mL/片（吸滿為止），以無菌操作將濾紙片貼到采樣部位，1分鐘后按序取下，將貼浴盆的5片濾紙一并放入125mL生理鹽水中，貼臉（腳）盆的2片濾紙一并放入50mL生理鹽水瓶中，充分振搖或在漩渦振蕩器上振蕩1分鐘，此1mL的菌濃度相當(dāng)于1cm2的菌量。（二）大腸菌群測(cè)定1、涂抹法和斑貼法采樣如同細(xì)菌總數(shù)測(cè)定?？捎眉?xì)菌總數(shù)檢測(cè)后剩余的樣品檢測(cè)達(dá)成菌群，無需重新采樣。2、紙片法用無菌生理鹽水濕潤(rùn)大腸菌群快速測(cè)定紙片5cm×5cm分別貼于采樣處，約30秒取下，置無菌塑料袋內(nèi)。第三節(jié) 生活飲用水水質(zhì)微生物檢測(cè)一、水樣的采集和保存方法1、對(duì)容器的要求容器及瓶塞、瓶蓋應(yīng)能經(jīng)受滅菌的溫度，并且在這個(gè)溫度下不釋放或產(chǎn)生任何能抑制生物活動(dòng)或?qū)е滤劳龌虼龠M(jìn)生長(zhǎng)的化學(xué)物質(zhì)。玻璃或聚丙烯塑料容器用自來水和洗滌劑洗滌，然后用自來水徹底沖洗。用硝酸溶液1+1浸泡，再用自來水，蒸餾水洗凈。為了出去余氯，在滅菌前