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文檔簡(jiǎn)介
1、微生物復(fù)習(xí)題一、選擇題1、微生物是一些個(gè)體微小、構(gòu)造簡(jiǎn)單的低等生物的總稱(chēng),它們的大小一般小于( C )A 、1cm B、1mm C、0.1mm D、1m2、在微生物學(xué)發(fā)展史上曾出現(xiàn)過(guò)尋找重要病原菌的“黃金時(shí)期”,其原因主要是( C )A 、顯微鏡的應(yīng)用 B、消毒滅菌術(shù)的建立C 、微生物純種分離技術(shù)的成功 D、純種微生物培養(yǎng)技術(shù)的創(chuàng)立3、人類(lèi)已消滅的第一個(gè)傳染病是( C )A 、麻疹 B、脊髓灰質(zhì)炎 C、天花 D、水痘4、微生物五大共性的基礎(chǔ)是( A )。A 、體積小,面積大 B、吸收多,轉(zhuǎn)化快 C、生長(zhǎng)旺,繁殖快D 、適應(yīng)強(qiáng),易變異 E、分布廣,種類(lèi)多5、在以下四大類(lèi)微生物中,只含DNA 或R
2、NA 一種核酸的是( D )。A、真菌 B、真細(xì)菌 C、古生菌 D、病毒6、土壤中三大類(lèi)群體微生物以數(shù)量排序?yàn)椋?A )A 、細(xì)菌放線菌真菌 B、細(xì)菌真菌放線菌C 、放線菌細(xì)菌真菌 D、真菌細(xì)菌放線菌7、在以下六類(lèi)微生物中,細(xì)胞壁不含肽聚糖的是( C )。A 、真細(xì)菌 B、放線菌 C、古生菌 D、藍(lán)細(xì)菌E 、支原體 F、立克次氏體8、在G 細(xì)菌細(xì)胞壁中缺乏的化學(xué)成分是( D )A 、肽聚糖 B、磷壁酸 C、類(lèi)脂質(zhì) D、蛋白質(zhì)9、在G 細(xì)菌細(xì)胞壁中缺乏的化學(xué)成分是( B )A 、肽聚糖 B、磷壁酸 C、類(lèi)脂質(zhì) D、蛋白質(zhì)10、革蘭氏染色的關(guān)鍵步驟是( C )A. 結(jié)晶紫(初染) B.碘液(媒染)
3、 C.酒精(脫色) D.蕃紅(復(fù)染)11、多數(shù)霉菌細(xì)胞壁的主要成分為( B )A 、纖維素 B、幾丁質(zhì) C、肽聚糖 D、葡聚糖和甘露聚糖12、下列微生物能通過(guò)細(xì)菌濾器的是( C )A 、細(xì)菌 B、酵母菌 C、病毒 D、霉菌 +13、在放線菌發(fā)育過(guò)程中, 吸收水分和營(yíng)養(yǎng)的為( A )A 、基質(zhì)菌絲 B、氣生菌絲 C、孢子絲 D、孢子14、 分生孢子頭呈掃帚狀的霉菌是( C )A. 毛霉 B. 根霉 C. 青霉 D. 曲霉15、用溶菌酶水解G 細(xì)菌的細(xì)胞壁通??色@得一種稱(chēng)為( D )的缺壁細(xì)菌。A 、支原體 B、L 型細(xì)菌 C、原生質(zhì)體 D、球狀體16、目前用于解釋細(xì)胞膜功能的學(xué)說(shuō),主要是( B
4、)A 、滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說(shuō) B、液態(tài)鑲嵌模型C 、化學(xué)滲透學(xué)說(shuō) D、構(gòu)象假說(shuō)17、異染粒在細(xì)菌中的生理功能是( D )A 、碳源貯藏物 B、氮源貯藏物 C、能源貯藏物 D、磷素貯藏物18、有一種芽孢桿菌可產(chǎn)生具有殺蟲(chóng)作用的伴孢晶體,這種細(xì)菌稱(chēng)為( B )。A 、地衣芽孢桿菌 B、蘇云金芽孢桿菌 C、蕈狀芽孢桿菌 D、凝結(jié)芽孢桿菌19、在以下六類(lèi)微生物中,不屬于真核微生物的是( D )A 、真菌 B、微藻 C、原生動(dòng)物 D、藍(lán)綠藻 E、地衣F 、黏菌20、在固態(tài)基質(zhì)上會(huì)不斷蔓延,以致不能形成菌落的霉菌是( D )。A 、青霉 B、曲霉 C、白地霉 D、根霉21、決定病毒感染專(zhuān)一性的物質(zhì)基礎(chǔ)是(
5、 B )A 、核酸 B、蛋白質(zhì) C、脂類(lèi) D、糖類(lèi)22、病毒對(duì)( C )不敏感A 、高溫 B、紫外線 C、抗生素 D、干擾素23、下列微生物耐溫順序?yàn)椋?B )A. 營(yíng)養(yǎng)體孢子芽孢 B.芽孢孢子營(yíng)養(yǎng)體C.孢子營(yíng)養(yǎng)體芽孢 D.芽孢營(yíng)養(yǎng)體孢子24、動(dòng)物病毒在其宿主的單層細(xì)胞培養(yǎng)物上所形成的聚集體,稱(chēng)為( C )A 、包含體 B、噬菌斑 C、空斑 D、枯斑25、在噬菌體一步生長(zhǎng)曲線中,若人為地用氯仿等破壞宿主細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液呈現(xiàn)侵染性,此期稱(chēng)( C )。A 、潛伏期 B、隱晦期 C、胞內(nèi)累積期 D、裂解期 26、噬菌體屬于病毒類(lèi)別中的( A )A. 微生物病毒 B. 昆蟲(chóng)病毒 C. 植物病毒 D.
6、動(dòng)物病毒27、對(duì)多數(shù)微生物來(lái)說(shuō),最適宜的碳源是( B )A 、C G I B N 類(lèi) B、C H O 類(lèi) C、C H 類(lèi) D、C O 類(lèi)28、在C H O 類(lèi)化合物中,微生物最適宜的碳源是( A )A 、糖類(lèi) B、有機(jī)酸類(lèi) C、醇類(lèi) D、脂類(lèi)29、培養(yǎng)真菌時(shí), 培養(yǎng)基常加0.3%乳酸, 其目的是( D )A. 提供能源 B.提供碳源 C.調(diào)節(jié)pH D.三者都是30、微酸環(huán)境下適宜生長(zhǎng)的微生物是( C )A 、細(xì)菌 B、放線菌 C、真菌 D、病毒31、下列哪種培養(yǎng)法適用于厭氧菌的培養(yǎng)( D )A. 固體平板 B. 固體斜面 C. 液體表面 D. 高層瓊脂柱32、以高糖培養(yǎng)酵母菌, 其培養(yǎng)基類(lèi)型為
7、( A )A. 加富培養(yǎng)基 B. 選擇培養(yǎng)基 C. 鑒別培養(yǎng)基 D. 普通培養(yǎng)基33、向培養(yǎng)基中加入青霉素篩選轉(zhuǎn)化子, 此培養(yǎng)基屬( C )A. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 B.加富培養(yǎng)基 C.選擇培養(yǎng)基 D.鑒別培養(yǎng)基34、藍(lán)細(xì)菌屬于( A )微生物。A 、光能自養(yǎng)型 B、光能異養(yǎng)型 C、化能自養(yǎng)型D 、化能異養(yǎng)型35、葡萄糖和果糖等營(yíng)養(yǎng)物進(jìn)入原核生物細(xì)胞膜的機(jī)制是通過(guò)( D )A 、單純擴(kuò)散 B、促進(jìn)擴(kuò)散 C、主動(dòng)運(yùn)送 D、基團(tuán)移位36、發(fā)酵是以( D )作為最終電子受體的生物氧化過(guò)程A.O2 B.CO2 C.無(wú)機(jī)物 D.有機(jī)物37、高氏1號(hào)培養(yǎng)基適合培養(yǎng)( B )A 、細(xì)菌 B、放線菌 C、酵母菌 D、
8、霉菌38、要對(duì)含菌量較少的水樣進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù),較好的方法是應(yīng)用固體培養(yǎng)基中的(A 、固化培養(yǎng)基 B、非可逆性固化培養(yǎng)基C 、濾膜固體培養(yǎng)基 D、天然固態(tài)培養(yǎng)基39、要對(duì)細(xì)菌進(jìn)行動(dòng)力觀察,最好采用( C )A 、液體培養(yǎng)基 B、固體培養(yǎng)基 C、半固體培養(yǎng)基 )法。 CD 、脫水培養(yǎng)基40、下列哪種結(jié)構(gòu)與細(xì)菌的侵襲力無(wú)直接關(guān)系( C )A. 菌毛 B. 鏈激酶 C. 細(xì)胞膜 D. 莢膜41、新陳代謝研究中的核心問(wèn)題是( C )。A 、分解代謝 B、合成代謝 C、能量代謝 D、物質(zhì)代謝42、反硝化作用的最終產(chǎn)物( C )A. NH3 B. HNO3 C. N2 D. HNO243、在典型生長(zhǎng)曲線中,細(xì)
9、胞形態(tài)最大的時(shí)期是( A )。A. 延滯期 B. 指數(shù)期 C. 穩(wěn)定期 D. 衰亡期44、在典型生長(zhǎng)曲線中,代時(shí)最短的時(shí)期是( )A. 延滯期 B. 指數(shù)期 C. 穩(wěn)定期 D. 衰亡期45、質(zhì)粒是細(xì)菌的( B )。A. 核質(zhì)DNA B. 胞質(zhì)DNA C. 胞質(zhì)RNA D. 核質(zhì)DNA46、黏質(zhì)沙雷氏菌在25培養(yǎng)時(shí)會(huì)產(chǎn)生深紅色的靈桿菌素,可是,當(dāng)培養(yǎng)基在37下時(shí)就不產(chǎn)此色素,但若再降到25時(shí)又重新恢復(fù)產(chǎn)色素能力,此即(D )A. 遺傳型 B. 表型 C. 變異 D. 飾變47、今從土壤中分離到一株菌,欲對(duì)其進(jìn)行鑒定,首先應(yīng)進(jìn)行的是:( A )A 、獲得該菌株的純培養(yǎng) B、細(xì)胞形態(tài)和習(xí)性水平研究C
10、 、查找權(quán)威鑒定手冊(cè) D、基因或DNA 水平鑒定48、干熱滅菌法要求的溫度和時(shí)間為( C )A. 105,2小時(shí) B. 121,30分鐘 C. 160,2小時(shí) D. 160,4小時(shí)49、下列哪種情況不屬于微生物與生物間共生關(guān)系的體現(xiàn)。( D )A. 根瘤 B. VA菌根C. 反芻動(dòng)物的瘤胃 D. 固氮菌與纖維素分解菌的共培養(yǎng)50、下列微生物耐溫順序?yàn)椋?B )A 、營(yíng)養(yǎng)體孢子芽孢 B、芽孢孢子營(yíng)養(yǎng)體C、孢子營(yíng)養(yǎng)體芽孢 D、芽孢營(yíng)養(yǎng)體孢子三、填空1、根據(jù)形態(tài)、結(jié)構(gòu)等生物學(xué)特征,可將微生物劃分為 原核微生物 、 真核微生物 、 非細(xì)胞型微生物 三大類(lèi)。2、專(zhuān)性活細(xì)胞內(nèi)寄生的微生物有 衣原體 、 立
11、克次氏體 、 病毒 。3、真核微生物的鞭毛為 9+2 型。4、列出四種觀察細(xì)菌鞭毛的方法 電鏡觀察 、 鞭毛染色法 、 懸滴法 、 半固體穿刺法 。5、測(cè)定噬菌體效價(jià)的常用方法是 雙層平板法 。6、細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)中,與致病性直接相關(guān)的是 菌毛 和 莢膜 。7、連續(xù)培養(yǎng)器的原理按控制方式可分為 恒濁器 和 恒化器 。8、細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖需要營(yíng)養(yǎng) , 溫度 , pH , 氣體 條件。9、細(xì)菌的6類(lèi)營(yíng)養(yǎng)要素包括 碳源 、 氮源 、 能源 、 生長(zhǎng)因子 、無(wú)機(jī)鹽 和 水 。10、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式有四種,其中可以逆濃度梯度運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的方式有 主動(dòng)運(yùn)輸 和 基團(tuán)轉(zhuǎn)運(yùn) 。11、將病毒分為三種對(duì)稱(chēng)體制。例
12、如,腺病毒屬于 二十面立體 對(duì)稱(chēng)體制,TMV 屬于 螺旋 對(duì)稱(chēng)體制。12、利用“曲頸瓶試驗(yàn)”否定自然發(fā)生學(xué)說(shuō)的是 巴斯德 ,首次分離到衣原體的是我國(guó)的微生物學(xué)家 湯飛凡 。13、肽聚糖是細(xì)菌細(xì)胞壁的特有成分,是由肽和聚糖骨架鏈組成,而后者是 乙酰胞壁酸 和 乙酰葡糖胺 經(jīng) 、糖苷鍵 連接而成。14、絲狀真菌的結(jié)構(gòu)由孢子和菌絲體組成,其中菌絲按功能分為 營(yíng)養(yǎng)菌絲 和 氣生菌絲 兩種。15、細(xì)菌的基本形態(tài)包括 球狀 , 桿狀 , 螺形狀 三種。16、采用原生質(zhì)體融合進(jìn)行微生物遺傳育種時(shí),制備細(xì)菌的原生質(zhì)體常用 青霉素 處理,酵母菌常用 蝸牛酶 處理獲得相應(yīng)的原生質(zhì)體。17、根據(jù)核酸的形式,病毒可分
13、為 dsRAN 病毒, dsDNA 病毒, -ssRNA病毒 , +ssRNA病毒, ssDNA病毒 , 反轉(zhuǎn)錄病毒 六種。18、衣原體的生活史包括 始體 和原體 兩個(gè)階段,無(wú)繁殖能力的階段是 原體 。19、證實(shí)核酸是遺傳物質(zhì)的3個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)分別是 轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)、_噬菌體侵染實(shí)驗(yàn)和_植物病毒重建實(shí)驗(yàn) 。20、證明基因突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)分別是 變量實(shí)驗(yàn) , 涂布實(shí)驗(yàn) 、 影印實(shí)驗(yàn) 。四、名詞解釋1、microorganism :微生物, 指一大類(lèi)形體微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的低等生物的總稱(chēng)。包括真核細(xì)胞型、原核細(xì)胞型和非細(xì)胞結(jié)構(gòu)三大類(lèi)微生物。2、真核微生物:是一大類(lèi)群具有真核生物特點(diǎn)的微生物,
14、包括菌物界的真菌、屬于植物界的顯微藻類(lèi)和屬于動(dòng)物界的原生動(dòng)物。3、原核生物:是一大類(lèi)細(xì)胞微小、只有核區(qū)的單細(xì)胞生物,包括真細(xì)菌和古生菌兩大類(lèi)。原核生物和真核生物的主要區(qū)別是:原核生物細(xì)胞膜無(wú)核膜包裹,缺少由單位膜分隔而成的細(xì)胞器,核糖體為70S 型。4、古生菌:又稱(chēng)古細(xì)菌,是一類(lèi)在進(jìn)化早期就與真細(xì)菌和真核生物的遠(yuǎn)祖相互獨(dú)立演化的原核生物,主要包括一些與地球早期環(huán)境有聯(lián)系的極端微生物,如嗜熱菌、嗜酸菌、嗜鹽菌和產(chǎn)甲烷菌等。主要特點(diǎn)為細(xì)胞壁無(wú)肽聚糖,細(xì)胞膜脂由醚鍵連接,以及與細(xì)菌有明顯差別的16S rRNA序列等。5、立克次氏體:是大小介于通常的細(xì)菌與病毒之間,在許多方面類(lèi)似細(xì)菌,專(zhuān)性活細(xì)胞內(nèi)寄生
15、的原核微生物。主要特征為:專(zhuān)性寄生于真核細(xì)胞內(nèi)的原核生物;有細(xì)胞壁,細(xì)胞較大, G-;產(chǎn)能代謝途徑不完整;以二分裂方式進(jìn)行繁殖;需在相應(yīng)的細(xì)胞中進(jìn)行培養(yǎng)繁殖;對(duì)熱敏感;對(duì)青霉素等抗生素敏感;為斑疹傷寒、恙蟲(chóng)病等疾病的病原體;采用“外斐氏反應(yīng)”檢測(cè)病原;通過(guò)節(jié)肢動(dòng)物叮咬和排泄物傳播給人和其他動(dòng)物。6、莢膜:糖被的一種,包裹在細(xì)菌細(xì)胞壁外、有固定層次的膠黏物,一般成分為多糖,少數(shù)為多肽或多糖與多肽的復(fù)合物。莢膜具有保護(hù)、貯藏、附著和堆積代謝廢物等生理功能。7、糖被:包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度不定的膠狀物,其成分一般為多糖。因厚度不同等原因,可把糖被分成莢膜、黏液層或菌膠團(tuán)等。糖被德生理功能是
16、保護(hù)細(xì)胞、貯藏養(yǎng)料、附著和堆積代謝產(chǎn)物等。8、 L型細(xì)菌:實(shí)驗(yàn)室或宿主體內(nèi)通過(guò)自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷菌株。對(duì)滲透壓敏感,在固體培養(yǎng)基上形成“油煎蛋”似的小菌落。9、 鞭毛:某些細(xì)菌細(xì)胞表面著生的一至數(shù)十條長(zhǎng)絲狀、螺旋形的附屬物,具有推動(dòng)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)功能,為細(xì)菌的“運(yùn)動(dòng)器官”。10、水活度:在天然環(huán)境中,微生物可實(shí)際利用的自由水或游離水的含量,一般用在一定的溫度和壓力條件下, 溶液的蒸汽壓力與同樣條件下純水蒸汽壓力之比表示,即:w =Pw/Pow。11、伴孢晶體:少數(shù)芽孢桿菌形成芽孢時(shí)產(chǎn)生的菱形、方形或不規(guī)則堿溶性蛋白質(zhì)晶體,可作為生物農(nóng)藥。12、溶原性細(xì)菌:溫和噬菌體基因組整合到宿
17、主基因組中去,并隨細(xì)菌基因組的復(fù)制而復(fù)制,不能形成子代噬菌體。此時(shí)的宿主菌就是溶原性細(xì)菌。13、前噬菌體: 溫和噬菌體感染宿主菌后, 其基因整合到宿主染色體上, 隨宿主染色體的復(fù)制而復(fù)制.14、呼吸:又稱(chēng)好氧呼吸,指葡萄糖等底物按一定途徑脫氫后,氫經(jīng)完整呼吸鏈的傳遞,最終被外源分子氧接受并釋放水,在此過(guò)程中完成氧化磷酸化作用而產(chǎn)生ATP 形式的能量。15、無(wú)氧呼吸:又稱(chēng)厭氧呼吸,一類(lèi)呼吸鏈末端的氫受體為外源無(wú)機(jī)氧化物或有機(jī)氧化物的生物氧化,是在無(wú)氧條件下進(jìn)行的、產(chǎn)能效率較低的特殊呼吸。其特點(diǎn)是葡萄糖等底物按常規(guī)途徑脫氫后,經(jīng)呼吸鏈傳遞氫(或電子),最終由氧化態(tài)的無(wú)機(jī)物(NO 3,SO 4等)或
18、有機(jī)物受氫,并完成氧化磷酸化產(chǎn)ATP 功能。16、發(fā)酵:在無(wú)氧條件下,底物脫氫后所產(chǎn)生的還原力H未經(jīng)呼吸鏈而直接交中間產(chǎn)物接受;以實(shí)現(xiàn)底物水平磷酸化產(chǎn)能的一類(lèi)生物氧化反應(yīng)。17、LPS :脂多糖(LPS ):是位于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁最外層的一層較厚的類(lèi)脂多糖類(lèi)物質(zhì),由類(lèi)脂A 、核心多糖和O-特異側(cè)鏈三部分組成。18、PHB : 聚-羥丁酸。是一種存在于某些細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的一類(lèi)顆粒狀物質(zhì),具有貯存能源、碳源和降低細(xì)胞內(nèi)滲透壓的物質(zhì)。19、一步生長(zhǎng)曲線:一步生長(zhǎng)曲線是指能定量描述烈性噬菌體生長(zhǎng)規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線。一步生長(zhǎng)曲線可分為三個(gè)時(shí)期:潛伏期; 裂解期; 穩(wěn)定期20、菌落形成單位(cfu ):用平
19、板菌落計(jì)數(shù)法對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)的一個(gè)計(jì)數(shù)單位,對(duì)充分分散、稀釋度合適的單細(xì)胞微生物來(lái)講,1 cfu 即表示樣品中有一個(gè)活細(xì)胞,但對(duì)成團(tuán)或呈鏈狀、絲狀生長(zhǎng)的微生物來(lái)說(shuō),則cfu 并非一個(gè)活細(xì)胞。21、生長(zhǎng)因子:通常指那些微生物生長(zhǎng)所必需而且需要量很小,但微生物自身不能合成的或合成量不足以滿足機(jī)體生長(zhǎng)需要的有機(jī)化合物。根據(jù)生長(zhǎng)因子的化學(xué)結(jié)構(gòu)與它們?cè)跈C(jī)體內(nèi)的生理功能不同,可以將生長(zhǎng)因子分為維生素、氨基酸和嘌呤及嘧啶堿基三大類(lèi)。22、正常菌群: 在正常人體與外界相通的部位,長(zhǎng)期寄居的不同種類(lèi)和不同數(shù)量的微生物。一般對(duì)人體無(wú)害,與機(jī)體相互制約相互依存,與機(jī)體保持動(dòng)態(tài)平衡的關(guān)系。23、條件致病菌:人體的正常
20、微生物菌群一旦進(jìn)入非正常聚居部位,或生態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而引起人類(lèi)疾病的微生物。主要包括(1)由于機(jī)體的防衛(wèi)功能減弱2)由于正常菌群寄居部位的改變 ()不合理使用抗生素等。 -2-24、消毒:采用一種較溫和的理化因素,僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分有害的病原菌,而以被消毒的對(duì)象基本無(wú)害的措施。25、巴氏消毒法:用于啤酒、牛奶等不耐熱的食品德低溫消毒法。主要是消除不耐熱的無(wú)芽孢的病原體。有低溫維持法(63 min )和高溫瞬時(shí)法( s )五、簡(jiǎn)答題1、科赫定律的內(nèi)容及其在科學(xué)研究中的指導(dǎo)意義。內(nèi)容:在患病的動(dòng)物體內(nèi)總能發(fā)現(xiàn)特定微生物,而健康的動(dòng)物體內(nèi)則沒(méi)有;在動(dòng)物體外可以純培養(yǎng)此微生物;將該培養(yǎng)物接種到
21、易感動(dòng)物體內(nèi)會(huì)引起同樣的疾??;從試驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)物中重新分離得到的微生物應(yīng)該是同種微生物。意義:鑒定一種微生物;確定一種新微生物種類(lèi)。2、試述細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)與功能。細(xì)胞壁細(xì)胞壁的主要功能有:固定細(xì)胞外形和提高機(jī)械強(qiáng)度;為細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂和鞭毛運(yùn)動(dòng)所必需。阻攔酶蛋白和某些抗生素等大分子物質(zhì). 賦予細(xì)菌具有特定的抗原性、致病性以及對(duì)抗生素和噬菌體的敏感性。革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌細(xì)胞壁含90%肽聚糖和10%磷壁酸。革蘭氏陽(yáng)性菌肽聚糖厚,層數(shù)多,呈網(wǎng)格狀分子交織成的網(wǎng)套覆蓋在整個(gè)細(xì)胞上。肽聚糖分子是由肽與聚糖兩部分組成,其中的肽有四肽尾和肽橋兩種,聚糖則由N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸相互間隔連接而成,
22、呈長(zhǎng)鏈骨架狀。磷壁酸是結(jié)合在革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌細(xì)胞壁上的一種酸性多糖,主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。磷壁酸可分為壁磷壁酸和膜磷壁酸。革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁由肽聚糖和外膜。其肽聚糖薄 僅由12層,呈網(wǎng)狀分子,只形成較為疏稀、機(jī)械強(qiáng)度較差的肽聚糖網(wǎng)套沒(méi)有特殊的肽橋。外膜位于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁外層,由脂多糖、磷脂和脂蛋白等若干種蛋白質(zhì)組成的膜。3、有關(guān)鞭毛運(yùn)動(dòng)的機(jī)制曾有過(guò)“旋轉(zhuǎn)論”和“揮鞭論”的爭(zhēng)議。1974年,美國(guó)學(xué)者M(jìn).Silverman 和M.Simon 曾通過(guò)“逆向思維”方式創(chuàng)造性地設(shè)計(jì)了一個(gè)巧妙的“拴菌”試驗(yàn),即設(shè)法把單毛菌鞭毛的游離端用相應(yīng)抗體牢固地“拴”在載玻片上,然后在光鏡下觀察該細(xì)
23、胞的行為,結(jié)果發(fā)現(xiàn),該菌只能在載玻片上不斷打轉(zhuǎn)而未作伸縮“揮動(dòng)”。從該試驗(yàn)所提供的事實(shí),你認(rèn)為細(xì)菌是以何種方式運(yùn)動(dòng)的?該試驗(yàn)的“逆向思維”逆在哪里?“拴菌”試驗(yàn)指把單毛菌鞭毛的游離端用相應(yīng)抗體牢固地”拴”在載玻片上,然后在光鏡下觀察該細(xì)菌的運(yùn)動(dòng),結(jié)果發(fā)現(xiàn),該菌只能在載玻片上不斷打轉(zhuǎn)而未作伸縮揮動(dòng),證明了細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)是因?yàn)楸廾D(zhuǎn)的結(jié)果,而不是鞭毛“揮動(dòng)”的結(jié)果。其創(chuàng)新思維在于“逆向思維“,通過(guò)固定鞭毛的游離端,使細(xì)菌細(xì)胞變成了指示鞭毛運(yùn)動(dòng)的指示物,進(jìn)而在光鏡下就可觀察鞭毛的作用機(jī)制。4、如何初步判斷并進(jìn)一步驗(yàn)證某一細(xì)菌是否長(zhǎng)有鞭毛?初步判斷可采用半固體瓊脂穿刺培養(yǎng)法和懸滴法(水封片法),進(jìn)一步驗(yàn)
24、證可采用暗視野顯微鏡法和鞭毛染色法。1)半固體培養(yǎng)基穿刺接種法:將欲檢查的細(xì)菌穿刺接種至牛肉膏蛋白胨半固體直立柱培養(yǎng)基中培養(yǎng),若細(xì)菌有運(yùn)動(dòng)能力,就會(huì)沿著穿刺線向四周擴(kuò)散生長(zhǎng),使穿刺線變粗且周緣不整齊。無(wú)運(yùn)動(dòng)能力的細(xì)菌僅能沿穿刺線生長(zhǎng),穿刺線顯得纖細(xì)濃密和整齊。2)懸滴法:將菌液滴加在潔凈的蓋玻片中央,在其四周涂上凡士林,然后將它覆蓋在凹玻片上,使菌液對(duì)準(zhǔn)凹槽中央,直接觀察。此法快速、簡(jiǎn)便。3)暗視野顯微鏡法:裝暗視野聚光器,調(diào)節(jié)光源,將1小滴香柏油滴于聚光器頭頸頂端平面上,再將樣品的水封片置于鏡臺(tái)上,使玻片的下表面與透鏡上的香柏油接觸,然后觀察。4)鞭毛染色法:染色前用媒染劑處理,讓其沉積在鞭
25、毛上,使鞭毛直徑加粗,然后再進(jìn)行染色。常用染色方法有銀染色法、Leifson 氏染色法、Bailey 氏染色法等。5、試述劃線分離的操作方法。1)取9ml 無(wú)菌平板一套在火焰旁按無(wú)菌操作法倒人15-20ml 營(yíng)養(yǎng)瓊脂, 讓其冷凝成平板。2)左手拿上述平板, 右手拿接種環(huán)在火焰上滅菌后沾取原始分離物在平板上平行劃線三條。3)將接種環(huán)在火焰上滅菌, 左手平板轉(zhuǎn)動(dòng)大約70度, 用滅菌接種環(huán)通過(guò)第一次劃線的地方作二次劃線, 以此類(lèi)推, 重復(fù)操作多次。6、簡(jiǎn)述微生物純種分離方法中的平板表面劃線法、平板表面涂布法和瓊脂培養(yǎng)基澆注法,并說(shuō)說(shuō)它們有何優(yōu)點(diǎn)。平板劃線法:將混雜在一起的不同種微生物或同種微生物群體
26、中的不同細(xì)胞,通過(guò)在分區(qū)的平板表面上作多次畫(huà)線稀釋?zhuān)纬奢^多的獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)而繁殖成相互獨(dú)立的多個(gè)單菌落。澆注平板法:將待分離的試樣用生理鹽水等稀釋液作梯度系列稀釋后,取其中一合適稀釋度的少量菌懸液加至無(wú)菌培養(yǎng)皿中,立即倒入融化的固體培養(yǎng)基,經(jīng)充分混勻后,置適溫下培養(yǎng),在其表面和內(nèi)層出現(xiàn)的許多單菌落。該法適合兼性厭氧的細(xì)菌和酵母菌分離。涂布平板法:取少量梯度稀釋菌懸液,置于已凝固的無(wú)菌平板培養(yǎng)基表面,然后用無(wú)菌的涂布玻棒把菌液均勻地涂布在整個(gè)平板表面,經(jīng)培養(yǎng)后,在平板培養(yǎng)基表面會(huì)形成多個(gè)獨(dú)立分布的單菌落。該法適合好氧性或有氣生菌絲的放線菌和細(xì)菌分離。優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)便、設(shè)備簡(jiǎn)單、分離效
27、果好。7、某微生物發(fā)酵廠的發(fā)酵液出現(xiàn)疑似噬菌體感染的異常情況,試設(shè)計(jì)一簡(jiǎn)便快速實(shí)驗(yàn)證實(shí)之。在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基平板上涂布接種大腸桿菌,同時(shí)接種疑似噬菌體感染的發(fā)酵液(提前進(jìn)行適當(dāng)稀釋?zhuān)囵B(yǎng)后若出現(xiàn)噬菌斑,即證明該發(fā)酵液受到噬菌體感染。8、 何謂病毒?以噬菌體為例,試述病毒的增殖周期。病毒是超顯微的,沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的,具有以下特點(diǎn):無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),專(zhuān)性活細(xì)胞內(nèi)寄生;沒(méi)有酶或酶系統(tǒng)極不完全,不能進(jìn)行代謝活動(dòng);個(gè)體極小,能通過(guò)細(xì)菌濾器;對(duì)抗生素不敏感,對(duì)干擾素敏感。它們?cè)诨罴?xì)胞外具有一般化學(xué)大分子特征,一旦進(jìn)入宿主細(xì)胞又具有生命特征。病毒增殖周期五個(gè)階段1、吸附 吸附是病毒感染宿主細(xì)胞的前提,具有高
28、度的專(zhuān)一性。在通常情況下,敏感細(xì)胞表面具有特異性表面接受部位,可與相應(yīng)的病毒結(jié)合。2、侵入 病毒侵入的方式 取決于宿主細(xì)胞的性質(zhì),尤其是它的表面結(jié)構(gòu)。一般來(lái)說(shuō)有三種情況:整個(gè)病毒粒子進(jìn)入宿主細(xì)胞;核衣殼進(jìn)入宿主細(xì)胞;只有核酸進(jìn)入宿主細(xì)胞。3、生物生物合成 包括核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成。首先,噬菌體以其核酸中的遺傳信息向宿主細(xì)胞發(fā)出指令并提供“藍(lán)圖”,使宿主細(xì)胞的代謝系統(tǒng)按次序地逐一轉(zhuǎn)向合成噬菌體的組分和“部件”,合成所需“原料”可通過(guò)宿主細(xì)胞原有核酸等的降解、代謝庫(kù)內(nèi)的貯存物或從環(huán)境中取得。烈性噬菌體體的增殖方式按核酸類(lèi)型的不同主要分成三類(lèi):即按早期、次早期和晚期基因的順序來(lái)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯和復(fù)
29、制的雙鏈DNA 噬菌體的增殖方式;按“滾環(huán)”模型復(fù)制單鏈DNA 的增殖方式;按“花朵”模式復(fù)制A 蛋白(成熟蛋白)、衣殼蛋白和復(fù)制酶蛋白的增殖方式。4、裝配 病毒核酸的復(fù)制與病毒蛋白質(zhì)的合成是分開(kāi)進(jìn)行的,由分別合成好的核酸與蛋白質(zhì)組成完整的新的病毒粒子的過(guò)程。5、釋放 成熟的病毒粒子從被感染細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到外界的過(guò)程稱(chēng)為病毒釋放。病毒的釋放是多樣的,有的通過(guò)破裂,出芽作用或通過(guò)細(xì)胞之間的接觸而擴(kuò)散。9、培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)要素的含量間一般遵循何種規(guī)律?其中的原因是什么?由于微生物細(xì)胞內(nèi)各種成分間的比例是穩(wěn)定的,因此,設(shè)計(jì)微生物培養(yǎng)基時(shí),考慮微生物細(xì)胞組成元素的比例有重要的意義。培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的濃
30、度配比直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,其中碳氮比(C N )的影響較大。在大多數(shù)化能異養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中,除水分外,碳源的含量最高,其次是氮源、大量元素和生長(zhǎng)因子,它們之間大體上存在著10倍序列的遞減趨勢(shì),即:要素:含量: H 2O C 源+能源 N 源 P 、S K 、Mg 生長(zhǎng)因子 (10-1) (10-2) (10-3 ) (10-4 ) (10-5 ) (10-6 )10、試述革蘭氏染色的步驟及機(jī)理。革蘭氏染色的步驟: 結(jié)晶紫初染、碘液媒染、 95 乙醇脫色、紅色染料復(fù)染 4 步; 革蘭氏染色的機(jī)制: 革蘭氏染色結(jié)果的差異主要基于細(xì)菌細(xì)胞壁的構(gòu)造和化學(xué)組分不同。通
31、過(guò)初染和媒染,在細(xì)菌細(xì)胞膜或原生質(zhì)體上染上了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的大分子復(fù)合物。G + 細(xì)菌由于細(xì)胞壁較厚、肽聚糖含量較高和交聯(lián)緊密,故用乙醇洗脫時(shí),肽聚糖層網(wǎng)孔會(huì)因脫水而明顯收縮,再加上的 G + 細(xì)菌細(xì)胞壁基本上不含類(lèi)脂,故乙醇處理不能在壁上溶出縫隙,因此,結(jié)晶紫與碘復(fù)合物仍牢牢阻留在其細(xì)胞壁內(nèi),使其呈現(xiàn)藍(lán)紫色。G - 細(xì)菌因其細(xì)胞壁薄、肽聚糖含量低和交聯(lián)松散,故遇乙醇后,肽聚糖層網(wǎng)孔不易收縮,加上它的類(lèi)脂含量高,所以當(dāng)乙醇將類(lèi)脂溶解后,在細(xì)胞壁上就會(huì)出現(xiàn)較大的縫,這樣結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物就極易被溶出細(xì)胞壁。因此,通過(guò)乙醇脫色,細(xì)胞又呈現(xiàn)無(wú)色。這時(shí),再經(jīng)番紅等紅色染料復(fù)染,就使 G - 細(xì)菌
32、獲得了新的顏色 紅色,而 G + 細(xì)菌則仍呈藍(lán)紫色(實(shí)為紫中帶紅)。11、什么是溶源菌?它有何特點(diǎn)?如何檢出溶源菌?在染色體組上整合有溫和噬菌體并能進(jìn)行正常生長(zhǎng)繁殖的宿主稱(chēng)為溶源菌。 特點(diǎn):能“收養(yǎng)”溫和噬菌體并能與其長(zhǎng)期共存,通常不呈現(xiàn)對(duì)宿主細(xì)胞有害的影響;常以較低頻率(1010)進(jìn)行自發(fā)裂解(能使位于宿主基因組上的整合態(tài)前噬菌體從染色體上解離出來(lái)),使前噬菌體由整合態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)態(tài)(脫離宿主核基因組而處于積極復(fù)制、合成和裝配的狀態(tài));溶源菌對(duì)同種或關(guān)系密切與的噬菌體具有免疫性(免遭其再侵染指特性);溶源菌也會(huì)失去前噬菌體而復(fù)愈為正常菌株。 -3-5檢測(cè)某一菌株是否屬于溶源菌,可利用溶
33、源菌所攜帶的前噬菌體的低頻裂解性,與其相對(duì)應(yīng)敏感菌株以適當(dāng)比例混合,然后與瓊脂培養(yǎng)基混合后倒平板,經(jīng)培養(yǎng)后形成特殊菌落(中央有溶源菌的小菌落,四周有透明圈圍著)。12、為什么說(shuō)土壤是人類(lèi)最豐富的菌種資源庫(kù)?如何從中篩選所需要的菌種(以酵母菌為例)?土壤具備了各種微生物生長(zhǎng)發(fā)育的優(yōu)越條件,包括營(yíng)養(yǎng)、水分、空氣、酸堿度、滲透壓和溫度等,故其中各種微生物的含量極為豐富,尤以細(xì)菌、放線菌居多,真菌居中,藻類(lèi)、原生動(dòng)物較少。篩選的一般步驟有:采集菌樣富集培養(yǎng)純種分離性能測(cè)定菌種保藏。13、試從形態(tài)、結(jié)構(gòu)、大小、繁殖方式及生活條件等方面比較放線菌、酵母菌及病毒的異同。 放線菌 酵母菌 病毒形態(tài)比較 多為絲
34、狀放射狀 多為圓形,卵圓形 球狀,絲狀,磚頭狀等 結(jié)構(gòu)比較 菌絲和孢子 單細(xì)胞 無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)大小比較 直徑較?。?m 左右) 直徑較大(幾m ) 最小(100nm 左右),繁殖方式比較 孢子和菌絲 芽殖,裂殖,孢子 復(fù)制 生活條件 可人工培養(yǎng),偏堿性 可人工培養(yǎng),偏酸性 活細(xì)胞或組織培養(yǎng)14、什么是細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線?生長(zhǎng)曲線對(duì)微生物發(fā)酵生產(chǎn)有何指導(dǎo)意義?細(xì)菌接種到適當(dāng)?shù)囊后w培養(yǎng)基后,以時(shí)間為橫坐標(biāo),以菌數(shù)為縱坐標(biāo),根據(jù)不同培養(yǎng)時(shí)間時(shí)細(xì)菌數(shù)量的變化,可以作出一條反映細(xì)菌在整個(gè)培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線,這種曲線稱(chēng)為生長(zhǎng)曲線稱(chēng)為生長(zhǎng)曲線。一條典型的生長(zhǎng)曲線至少可以分為遲緩期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期等四
35、個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期。遲緩期:細(xì)菌的數(shù)量維持恒定。在工業(yè)發(fā)酵和科研中遲緩期會(huì)增加生產(chǎn)周期而產(chǎn)生不利的影響,因此應(yīng)該采取一定的措施:通過(guò)遺傳學(xué)方法遲緩期縮短;利用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞作為“種子”; 接種前后培養(yǎng)基組成不要相差太大;適當(dāng)擴(kuò)大接種量等方式縮短遲緩期。對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期:細(xì)菌數(shù)量呈對(duì)數(shù)增加,細(xì)菌生長(zhǎng)是平衡生長(zhǎng)。對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)菌的代謝活性、酶活性高而穩(wěn)定,大小比較一致,生活力強(qiáng),因而它廣泛地在生產(chǎn)上用作“種子”和在科研上作為理想的實(shí)驗(yàn)材料。穩(wěn)定生長(zhǎng)期:由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗,代謝產(chǎn)物積累和pH 等環(huán)境變化,逐步不適宜于細(xì)菌生長(zhǎng),細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等于細(xì)菌死亡數(shù)量。穩(wěn)定生長(zhǎng)期的活細(xì)菌數(shù)最高并維持穩(wěn)定。如果及時(shí)采取措施,
36、補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或取走代謝產(chǎn)物或改善培養(yǎng)條件,如對(duì)好氧菌進(jìn)行通氣、攪拌或振蕩等可以延長(zhǎng)穩(wěn)定生長(zhǎng)期,獲得更多的菌體物質(zhì)或代謝產(chǎn)物。衰亡期:細(xì)菌死亡速率逐步增加和活細(xì)菌逐步減少。細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶。15、什么是大腸菌群?檢驗(yàn)飲用水的質(zhì)量時(shí),為什么要選用大腸桿菌群數(shù)做為主要指標(biāo)?我國(guó)衛(wèi)生部門(mén)對(duì)此有何規(guī)定?大腸菌群指任何可發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣的G 、桿狀、無(wú)芽孢、兼性厭氧的腸道桿菌,主要是大腸桿菌和一些產(chǎn)氣腸桿菌等。因?yàn)檫@類(lèi)細(xì)菌是溫血?jiǎng)游锬c道中的正常菌群,數(shù)量極多,用它作指標(biāo),可以靈敏地推斷該水源是否曾與動(dòng)物糞便接觸以及污染程度如何,由此即可避免直接去計(jì)算出數(shù)量極少的腸道傳染?。ɑ魜y、傷寒、痢疾等)病原體所帶來(lái)的難題。我國(guó)衛(wèi)生部門(mén)規(guī)定的飲用水標(biāo)準(zhǔn)是:1mL 自來(lái)水中的細(xì)菌總數(shù)不可超過(guò)100個(gè)(37,培養(yǎng)24h ),1000mL 自來(lái)水中大腸菌群數(shù)則不超過(guò)3個(gè)(37,培養(yǎng)48h )。16、簡(jiǎn)述濕熱滅菌法效果較干熱滅菌法效果好的原因。1) 濕熱滅菌法特點(diǎn):溫度低
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