國產(chǎn)與進口齊多夫定膠囊在健康人體的藥代動力學(xué)和生物等效性_圖文

1、論 著O ri g ina l國產(chǎn)與進口齊多夫定膠囊在健康人體的藥代動力學(xué)和生物等效性Phar m acoki netics and bi oequi valence of do m estic and i m ported zi dovudine capsules i n healthy vol unteers李小利,王本杰,倪梅媛,郭瑞臣(山東大學(xué)齊魯醫(yī)院臨床藥理研究所,濟南 250012LI X i a o-l,i WANG Ben-jie,N IM ei-yuan,GUO Rui-chen(Instit u te of C li n ical Phar m acology, Q ilu

2、 H os p it a l of Shandong University, J inan 250012,China收稿日期:2005-12-19修回日期:2006-06-19作者簡介:李小利(1975-,女,碩士,主要從事臨床藥理學(xué)研究通訊作者:郭瑞臣,教授,博士生導(dǎo)師Te:l(053182169636E-ma i:l grc7636126.co m 摘要:目的 研究國產(chǎn)與進口齊多夫定膠囊(抗艾滋病藥在健康志愿者體內(nèi)的藥代動力學(xué)和生物等效性。方法 20名健康男性受試者隨機交叉單劑量口服國產(chǎn)與進口齊多夫定膠囊300m g,用高效液相色譜法測定給藥后不同時間的血漿濃度,計算主要藥代動力學(xué)參數(shù)。結(jié)

3、果 國產(chǎn)與進口齊多夫定膠囊主要藥代動力學(xué)參數(shù):t1/2分別為(1.72 0.42,(1.53 0.27h;t ma x分別為(0.86 0.42,(0.88 0.30h;Cm ax分別為(1.60 0.61,(1.60 0.55g mL-1;A UC08分別為(2.06 0.37,(2.08 0.34 g h mL-1;AUC0-分別為(2.11 0.37,(2.12 0.34 g h m L-1。國產(chǎn)齊多夫定膠囊相對生物利用度F為(99.02 5.02%。結(jié)論 2制劑具有生物等效性。關(guān)鍵詞:齊多夫定膠囊;藥代動力學(xué);生物等效性;高效液相色譜中圖分類號:R969.1;R978.7 文獻標識碼:

4、A文章編號:1001-6821(200704-0288-04Abstract:Objective To study the phar m acok i n etics and b i o equ i v a lence after si n gle o ral adm i n istration o f do m estic(testand i m ported (referencezi d ovudine capsu les i n20healt h y vo l u nteers.M ethods A sing le ora l dose o f zidovudine test and r

5、eference w ere g iven accord i n g to a rando m ized t w o way cross-over desi g n.Plas m a concentration o f zi d ovu dine(300m gw as deter m ined by HPLC.R esults M ean phar m acok i netic para m eters after o ral adm i n istration of zidovud i n e test and re ference w ere as follo w s:t1/2w ere(

6、1.72 0.45,(1.53 0.27h;t m ax w ere (0.86 0.42,(0.88 0.30h;C m ax w ere(1.60 0.61,(1.60 0.56 g mL-1;AUC0-8w ere(2.06 0.36,(2.08 0.34h g mL-1;AUC0- w ere(2.11 0.36,(2.12 0.34h g m L-1.The b i o ava ilab ility of zi d ovudine test to reference w as(99.02 5.02%.Conc l u sion The results de m onstrated t

7、hat the test and refer ence of zi d ovudine capsu les w ere b i o equ i v a len.tKey words:zi d ovud i n e capsu les;phar m acokinetics;b i o equ i v a lence;H PLC齊多夫定是世界上第一個獲準生產(chǎn)的抗艾滋病藥物。1987年,在美國首次上市,主要用于治療人類免疫缺陷病毒感染及預(yù)防H I V 母嬰傳染。齊多夫定可競爭性地抑制病毒逆轉(zhuǎn)錄酶并終止病毒DNA 鏈的延伸;在2種或3種藥物合并用藥方案中,齊多夫定與具有類似288第23卷 第4期 20

8、07年7月(總第108期或不同作用機制的多種藥物間存在協(xié)同或相加抗病毒活性1。齊多夫定可競爭性抑制病毒DNA合成并終止病毒DNA鏈的延伸,增進細胞介導(dǎo)免疫并增加特異性無效病毒抗體的滴度2。本研究通過單次口服國產(chǎn)與進口齊多夫定膠囊的標準雙交叉試驗,評價2種制劑的人體生物等效性。材料、對象與方法1 藥品與儀器試驗制劑:齊多夫定膠囊,批號:20040517,規(guī)格:每粒:100mg,山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所提供;參比制劑:齊多夫定膠囊,批號:B NX9271,規(guī)格:每粒100 m g,G laxo Sm ith K line(美國生產(chǎn);齊多夫定對照品,含量:99.7%,由山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所提供;內(nèi)標:替

9、硝唑,含量:99.6%,由山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所提供。1100高效液相色譜儀,美國安捷倫公司產(chǎn)品; XK96-A快速混勻器,姜堰市新康醫(yī)療器械有限公司產(chǎn)品;AX-205電子天平,梅特勒-托利多儀器(上海有限公司產(chǎn)品;TDL-4型高速臺式離心機,上海安亭科學(xué)儀器廠產(chǎn)品。2 受試者選擇20名健康男性志愿者,年齡(23.45 1.10歲,體質(zhì)量(69.35 6.15kg;試驗前經(jīng)病史詢問、體格檢查和實驗室檢查(心電圖、臨床血液學(xué)、血液生化和尿常規(guī)未發(fā)現(xiàn)異常。無藥物過敏史、藥物依賴史、精神病史及其他慢性病史。試驗前向志愿者說明試驗?zāi)康?、藥物特性、適應(yīng)癥、試驗期間的注意事項及可能出現(xiàn)的不良反應(yīng),并簽定書面

10、知情同意書。試驗方案經(jīng)本院倫理委員會批準。3 分組與給藥方法采用雙周期隨機交叉試驗設(shè)計。20名志愿者按體質(zhì)量指數(shù)進行分層隨機分組,2組志愿者個人資料及實驗室檢查數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析無顯著性差異,條件相當。志愿者于試驗前1天晚10時后禁食,試驗當日晨抽取空白血樣后,立即空腹口服試驗制劑或參比制劑300mg。110號志愿者服用試驗制劑齊多夫定膠囊;1120號志愿者服用參比制劑齊多夫定膠囊,溫開水200m L送服。服藥2h后方能飲水,4h后進食標準低脂肪、低蛋白早餐。1周后, 2組交叉服藥,進行第2周期試驗。劑量、飲食、觀察方法等與第1周期相同。服藥期間,禁用其他藥物和含咖啡因類飲料、吸煙和飲酒。4 樣

11、本采集于服藥前和服藥后0.25,0.5,0.75, 1.0,1.5, 2.0,2.5,3.0,4.0,5.0,6.0,8.0h取肘靜脈血4m L,并立即移入塑料試管中,3500r m i n-1離心15m in,取血漿分雙份于-20 低溫保存。5 血藥濃度測定3-45.1 色譜條件D ia m onsilTM C18(5 m,4.6mm 250mm色譜柱;流動相為0.005m o l L-1磷酸二氫鈉緩沖液-乙腈(80 20,用前經(jīng)0.45 m微孔濾膜過濾,超聲脫氣;流量為1.5mL m i n-1;柱溫:24 ;檢測波長: 265nm;進樣量20 L。5.2 樣本處理取血漿0.5mL加50

12、g m L-1內(nèi)標替硝唑60 L,加入2m oL L-1高氯酸100 L沉淀蛋白,10000 r m i n-1離心5m i n,進樣20 L測定。6 方法學(xué)考察與評價6.1 標準曲線制備用空白人血漿將齊多夫定標準儲備液稀釋成不同濃度(0.01,0.1,0.2,1,2,4 g m L-1的標準液,按樣品處理方法,進樣測定。以齊多夫定和替硝唑峰面積比值(Y對齊多夫定濃度(X進行線性回歸,直線回歸方程為Y=0.92X-0.002,相關(guān)系數(shù) = 0.9999;血漿最低檢出濃度為0.01 g mL-1。齊多夫定在0.014.00 g mL-1內(nèi),線性關(guān)系良好。6.2 回收率、日內(nèi)及日間精密度配制濃度0

13、.02,1,4 g mL-1的齊多夫定標準血漿各5份,于1日內(nèi)連續(xù)測定,計算日內(nèi)相對標準差(RSD。每日配制濃度0.02,1,4 g mL-1齊多夫定標準血漿各1份,連續(xù)測定3日,計算日間相對標準差(RSD。結(jié)果見表1。Tab l e1.Recove ry rate and prec ision o f z i d ovud ineAdded ( g mL-1W it h i n-day( g mL-1RSD(%Bet w een-day( g mL-1RSD(%R ecovery rate(%0.020.02 0.006.460.02 0.004.5697.00 2.741.001.00 0

14、.010.981.01 0.010.8599.74 0.864.004.01 0.040.974.03 0.030.7399.90 0.38 n=5,m ean SD6.3 穩(wěn)定性考察存放期間 取健康人空白全血數(shù)份,分別加入齊多夫定標準溶液,使血漿中齊多夫定的濃度分別為0.02,1,4 g mL -1,放置在-60 冰箱中,分別于第0,2,7天取樣分析,考察其在存放期間的穩(wěn)定性。結(jié)果表明,血漿樣品在-60 至少能保存7天。多次凍融 取健康人空白血漿數(shù)份,分別加入齊多夫定標準溶液,使血漿中齊多夫定的濃度分別為0.02,1,4 g mL -1,-60 放置,然后反復(fù)凍融2次測定其濃度,考察其凍融穩(wěn)

15、定性。結(jié)果表明,血漿樣品凍融2次后,血藥濃度無明顯變化。6.4 方法的專屬性在選定色譜條件下測得的色譜圖見圖1。由圖1可見,齊多夫定與內(nèi)標替硝唑的保留時間分別為4.78m i n 和6.43m in ,2者峰形良好,分離完全,無雜質(zhì)峰 干擾。F igure 1.Chromatogra m s of z i dovud i neA.Z i dovudi n st andard ;B.In t ernal st andard;C.Z i dovud i n e and i n ternal standard ;D.B l ank plas m a ;E.B l ank plas m a sp i

16、ked w it h zidovud i ne and i n t ernal standard;F .Plas ma sa mp le s p i k ed w it h i n ternal standard7 數(shù)據(jù)處理用DAS 2.0程序計算藥代動力學(xué)參數(shù)及相對生物利用度,主要藥代動力學(xué)參數(shù)進行方差分析、雙單側(cè)t 檢驗和(1-2 置區(qū)間分析,評價受試制劑和參比制劑的生物等效性。結(jié) 果1 血藥濃度-時間曲線20名健康志愿者單次口服齊多夫定膠囊受試制劑與參比制劑300m g 后的平均血濃度-時間曲線見圖2。2 藥代動力學(xué)參數(shù)20名健康志愿者口服齊多夫定膠囊受試制劑和參比制劑后300m g 主

17、要藥代動力學(xué)參數(shù)見表2。3 生物等效性評價齊多夫定膠囊受試制劑和參比制劑的C max 、t max 、AUC 0-8和AUC 0- 經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后進行方差分析、雙單側(cè)檢驗及90%可信限考察,結(jié)果顯示,制劑間和周期290第23卷 第4期 2007年7月(總第108期間無顯著差異;但個體間存在顯著差異。In AUC 0-8、I nAUC 0- 、I n C max 、t max 90%雙單側(cè)檢驗結(jié)果分別為97.00%100.84%,97.48%101.30%,91.70%104.86%,90.11%107.03%,提示2制劑具有生物 等效性。F i gu re 2.M ean p las ma co

18、ncentrati on -ti m e curves of z i dovudi n e after as i ngle oral dos e of 300mg test and ref eren ce i n 20heal thy vol unteersTab l e 2.The ma in phar m acokine tic pa rame t e rs a fter sing le o ra l dose o f 300mg z i d ovud ine t e st and re f e rence in 20hea lt hy vo lunteersPara m eterTest

19、 Ref eren ce AUC 0-8( g h mL -1 2.06 0.362.08 0.34AUC 0- ( g h mL -1 2.11 0.372.12 0.34C m ax ( g mL -11.60 0.611.60 0.55t m ax (h0.86 0.420.88 0.30t 1/2ke (h 1.72 0.421.53 0.27F (%99.02 5.02討 論本文用高效液相色譜法測定血漿中齊多夫定濃度,方法簡便、經(jīng)濟、靈敏度高,重現(xiàn)性好。在本條件下,齊多夫定及內(nèi)標測定均不受血漿中內(nèi)源性物質(zhì)的干擾,最低定量限、精密度、準確度、回收率以及穩(wěn)定性完全符合生物樣本中藥物分析的

20、方法學(xué)要求。20名健康志愿者單次口服國產(chǎn)或進口齊多夫定300m g 后,2制劑在健康人體內(nèi)的吸收、分布過程相似。主要藥代動力學(xué)參數(shù)個體間存在統(tǒng)計學(xué)差異,但周期間及制劑間均無統(tǒng)計學(xué)差異。與文獻報道2一致。國產(chǎn)齊多夫定膠囊相對生物利用度F 為(99.02 5.02%,表明2制劑的吸收程度相似。方差分析和雙單側(cè)t 檢驗證明,2制劑具有生物等效性。參考文獻:1Langtry HD,Ca m poli-R i chards D M.Z i dovud i ne :A revie w of its phar m acodyn a m ic and phar m acok i n etic prop erties and t herap euti c efficacy J.D rug s ,1989;37:408-450.2