實(shí)驗(yàn)一特殊顯微鏡的工作原理和使用

1、放大倍數(shù)和數(shù)值孔徑放大倍數(shù)和數(shù)值孔徑10/0.25 ， 40/0.65 ，100/1.3標(biāo)準(zhǔn)機(jī)械筒長(zhǎng)和蓋玻片厚度標(biāo)準(zhǔn)機(jī)械筒長(zhǎng)和蓋玻片厚度160/0.17160/0或或160/160/-/0或或/-油浸物鏡：油浸物鏡：oil、oel、Hi等等水浸物鏡：水浸物鏡：W或或Water甘油浸物鏡：甘油浸物鏡：Glyz和和Glye復(fù)消色差物鏡：復(fù)消色差物鏡：APO半復(fù)消色差物鏡：半復(fù)消色差物鏡：FL平場(chǎng)物鏡：平場(chǎng)物鏡：PL丁達(dá)爾現(xiàn)象丁達(dá)爾現(xiàn)象明場(chǎng)普通顯微鏡成像光路圖明場(chǎng)普通顯微鏡成像光路圖暗場(chǎng)照明光路圖暗場(chǎng)照明光路圖普通顯微鏡普通顯微鏡暗視場(chǎng)顯微鏡暗視場(chǎng)顯微鏡相差顯微鏡相差顯微鏡人口腔上皮細(xì)胞在不同顯微鏡

2、下的圖像人口腔上皮細(xì)胞在不同顯微鏡下的圖像-明相差明相差+暗相差暗相差相差環(huán)相差環(huán)特點(diǎn)特點(diǎn):鑒定活體細(xì)胞最實(shí)用、最經(jīng)濟(jì)的方法鑒定活體細(xì)胞最實(shí)用、最經(jīng)濟(jì)的方法缺點(diǎn)缺點(diǎn):需要光強(qiáng)高需要光強(qiáng)高切片不能太厚切片不能太厚(510um)蓋片、載片需符合標(biāo)準(zhǔn)蓋片、載片需符合標(biāo)準(zhǔn)最好配用單色濾光鏡最好配用單色濾光鏡熒光效果不如明場(chǎng)物鏡熒光效果不如明場(chǎng)物鏡激發(fā)方式激發(fā)方式 激發(fā)波長(zhǎng)激發(fā)波長(zhǎng) 應(yīng)用范圍應(yīng)用范圍U U激發(fā)激發(fā)334334病理切片，細(xì)菌、病理切片，細(xì)菌、FITCFITC染料、染料、V V激發(fā)激發(fā)365.405.365.405.435435自發(fā)熒光、一般熒光抗自發(fā)熒光、一般熒光抗體、四環(huán)素染色物體、四環(huán)

3、素染色物B B激發(fā)激發(fā)405.435.405.435.490490FITCFITC染料、吖啶橙染色、染料、吖啶橙染色、染色體、紅細(xì)胞、癌細(xì)染色體、紅細(xì)胞、癌細(xì)胞、蛔蟲胞、蛔蟲G G激發(fā)激發(fā)546546浮爾根染色、浮爾根染色、DNADNA熒光素?zé)晒馑丶ぐl(fā)波長(zhǎng)激發(fā)波長(zhǎng) 發(fā)射波長(zhǎng)發(fā)射波長(zhǎng)DAPI372372456456AMCA350350450450Hoechst 33258365365465465FITC490490520520Acridine Orange490490590590Acridine Yellow470470550550CY3552552565565TRITC541541572572Propidium Iodide530530615615優(yōu)點(diǎn)：n檢出能力高n對(duì)細(xì)胞的刺激小n能進(jìn)行多重染色用途：n物體構(gòu)造的觀察n熒光的有無(wú)、色調(diào)比較進(jìn)行物質(zhì)判別n發(fā)熒光量的測(cè)定對(duì)物質(zhì)定性、定量分析熒光顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)和用途熒光顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)和用途 WUWU WIBWIBDUALDUAL BANDBANDWIBAWIBAWIGWIGWIBWIB雙重染色標(biāo)本的單色和雙色觀察雙重染色標(biāo)本的單色和雙色觀察原位雜交技術(shù)原位雜交技術(shù) 用于培養(yǎng)細(xì)胞用于培養(yǎng)細(xì)胞的觀察或者