判斷腫瘤預(yù)后的免疫組化標(biāo)志物

1、判斷腫瘤預(yù)后的免疫組化標(biāo)志物判斷腫瘤預(yù)后的免疫組化標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物是病理學(xué)研究的熱點(diǎn)之一，當(dāng)前所涉及的腫瘤標(biāo)志物種類繁雜，方法多 樣，結(jié)果不一。本文力爭(zhēng)從實(shí)用性出發(fā)，對(duì)目前眾多醫(yī)院已能常規(guī)開(kāi)展免疫組化檢測(cè)的有助于判斷腫瘤預(yù)后的標(biāo)志物進(jìn)行綜述。1腫瘤分期1.1 微浸潤(rùn)與假性浸潤(rùn)：癌的微浸潤(rùn)通常指癌侵透基底膜，含基底膜成分的抗 有助于確定基底膜的完整性，兩種最常用的抗體是IV型膠原或?qū)诱车鞍?LN)抗 體。免疫組化染色顯示基底膜缺如或明顯斷裂可確定有微浸潤(rùn)。在乳腺及前列腺病 變中，良性假性浸潤(rùn)性病變與浸潤(rùn)性癌難以區(qū)別的情況較為多見(jiàn)。乳腺組織其基底 細(xì)胞層由肌上皮細(xì)胞組成，通過(guò)特異性肌動(dòng)蛋白(act

2、in)抗體標(biāo)記可以很容易地識(shí) 別肌上皮細(xì)胞。浸潤(rùn)性小管成分如包繞有肌上皮細(xì)胞則提示良性病變。在前列腺組 織，通過(guò)不同種類細(xì)胞角蛋白中間絲的表達(dá)情況可以將基底細(xì)胞與腔面的細(xì)胞加以 區(qū)別，現(xiàn)已有幾種專一性抗體，如基底細(xì)胞表達(dá)高分子量細(xì)胞角蛋白，而腔面的細(xì) 胞表達(dá)低分子量細(xì)胞角蛋白。這些免疫反應(yīng)特性可用于良惡性前列腺上皮的區(qū)別, 如基底細(xì)胞幾乎見(jiàn)于所有良性前列腺增生病例，而決不出現(xiàn)在惡性腺上皮的外周。1.2 隱匿性微轉(zhuǎn)移：免疫組化檢測(cè)骨髓及淋巴結(jié)隱匿性轉(zhuǎn)移癌，其原理是利用 抗體能區(qū)別不同組織來(lái)源細(xì)胞的能力，從而將上皮癌細(xì)胞與骨髓及淋巴結(jié)內(nèi)的正常 結(jié)構(gòu)區(qū)別開(kāi)來(lái)。通過(guò)這種手段，可以檢測(cè)出不同腫瘤骨髓或淋

3、巴結(jié)隱匿性微轉(zhuǎn)移, 包括結(jié)腸癌、前列腺癌、卵巢癌、惡性黑色素瘤及神經(jīng)母細(xì)胞瘤的轉(zhuǎn)移等。Gute rson等發(fā)現(xiàn)，通過(guò)較細(xì)致的組織形態(tài)學(xué)觀察或免疫組化方法來(lái)尋找淋巴結(jié)隱匿性微 轉(zhuǎn)移，約有8%-30%常規(guī)淋巴結(jié)組織病理檢查“陰性”的乳腺癌病人可被檢出有隱匿性微轉(zhuǎn)移。2 .腫瘤相關(guān)抗原2.1 癌胚抗原（CEA）： CEA表達(dá)可見(jiàn)于正常胃腸和膽囊上皮細(xì)胞、胃、結(jié)腸息肉 和癌旁粘膜、卵巢粘液性囊腺瘤及各類汗腺腺瘤等，陽(yáng)性表達(dá)多呈膜性分布或灶性 胞漿陽(yáng)性。CEA在惡性腫瘤中的表達(dá)包括胃癌、結(jié)腸癌、小腸癌、胰腺癌、膽管 癌、宮頸癌、膀胱癌和乳腺癌等，陽(yáng)性分布多為胞漿著色，少數(shù)為胞膜陽(yáng)性，染色 強(qiáng)度與腫瘤的組

4、織類型和分化程度無(wú)關(guān)。CEA的表達(dá)類型可分為三型：胞膜或腔面 型、胞漿型和胞漿間質(zhì)混合型，前者預(yù)后好，后二者預(yù)后差。2.2 甲胎蛋白（AFP）AFP主要用于原發(fā)性或性腺外某些生殖細(xì)胞腫瘤（如內(nèi)胚 竇瘤）的診斷和鑒別診斷。病例癌組織中AFP的陽(yáng)性表達(dá)率約為60%70%左右。生 殖細(xì)胞腫瘤中的AFP表達(dá)可見(jiàn)于單純性內(nèi)胚竇瘤和混合性生殖細(xì)胞腫瘤，以及胚胎 癌中的卵黃囊分化的區(qū)域。精原細(xì)胞瘤、無(wú)性細(xì)胞瘤、畸胎瘤、絨毛膜上皮癌等不 表達(dá)AFP，但一些非肝性腫瘤，尤其是胃肝樣腺癌，AFP可呈陽(yáng)性反應(yīng)。2.3 前列腺特異性抗原（PSA）PSA是前列腺及其腫瘤的特異性標(biāo)記。PSA陽(yáng)性 分布于正常前列腺細(xì)胞和導(dǎo)

5、管上皮細(xì)胞漿及其腔內(nèi)分泌物中，良性前列腺增生有較 強(qiáng)的PSA表達(dá)，前列腺癌的表達(dá)率在87%100%,與腫瘤的分化程度無(wú)關(guān)。由于PS A有較好的組織特異性，因此在男性病例的惡性腫瘤鑒別診斷，尤其是骨髓和淋巴 結(jié)轉(zhuǎn)移癌的鑒別中，在形態(tài)學(xué)上很難作出原發(fā)病變的診斷時(shí)，作PSA免疫組化染色 是非常必要的。2.4 甲狀腺球蛋白（Tg）正常甲狀腺濾泡上皮、濾泡膠質(zhì)、所有類型的甲狀腺 腺瘤及甲狀腺癌均可有Tg的陽(yáng)性表達(dá)。一般說(shuō)來(lái)，高分化的甲狀腺癌Tg陽(yáng)性率最 高，甲狀腺間變癌和巨細(xì)胞癌陽(yáng)性率最低。甲狀腺髓樣癌一般Tg陰性。臨床上甲 狀腺癌首發(fā)癥狀常常表現(xiàn)為淋巴結(jié)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，Tg是一種確認(rèn)轉(zhuǎn)移性甲狀腺癌還是 非

6、轉(zhuǎn)移性甲狀腺癌的可靠標(biāo)記。3 .腫瘤細(xì)胞增生標(biāo)志物？目前被廣泛采用的兩種增殖相關(guān)標(biāo)志物是Ki-67 及PCNA （增埴細(xì)胞核抗原）。Ki-67與PCNA免疫反應(yīng)性與細(xì)胞增生的形態(tài)學(xué)特征關(guān)系密切，特別是與有絲分裂數(shù)及腫瘤分級(jí)相關(guān)。在乳腺腫瘤中，其表達(dá)還與其他 分化及預(yù)后指標(biāo)相關(guān)，如與雌孕激素受體表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，而與P53基因異常呈正相 關(guān)。在乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、肺癌、肝癌、胃癌和一些淋巴瘤及肉瘤，采用 Ki-67 與PCNA免疫組化分析，均顯示有增殖證據(jù)，提示這些腫瘤病人更容易進(jìn)展。高Ki-67及PCNA標(biāo)記指數(shù)病人無(wú)病生存率及總生存率明顯下降。4 .癌基因、生長(zhǎng)因子與受體4.1 c-erb

7、B-2c-erbB-2基因的擴(kuò)增與c-erbB-2的免疫反應(yīng)性存在明顯的關(guān)聯(lián)， 因此免疫組化可作為分析c-erbB-2基因擴(kuò)增的標(biāo)準(zhǔn)方法。幾種腫瘤系統(tǒng)有c-erbB- 2的過(guò)表達(dá)擴(kuò)增，報(bào)道最多的是乳腺癌，c-erbB-2過(guò)表達(dá)見(jiàn)于25-30%的原發(fā)性乳腺 癌病例，并且僅限于癌細(xì)胞，而不出現(xiàn)于正常乳腺上皮。c-erbB-2擴(kuò)增與雌、孕激 素受體表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，與腫瘤級(jí)別較高有關(guān)。淋巴結(jié)陽(yáng)性的乳腺癌c-erbB-2蛋白 的過(guò)表達(dá)是預(yù)后不良的重要因素。c-erbB-2的過(guò)表達(dá)病人通常對(duì)常規(guī)輔助化療反應(yīng) 性差，而這些病例往往需通過(guò)改變化療藥物的類型來(lái)獲得較好的療效。4.2 其他癌基因ras基因由K-ra

8、s、H-ras和N-ras家族組成，編碼產(chǎn)物的分子 量為21ku。目前有各型的現(xiàn)5抗體，但用于病理研究和診斷最常用為混合性單抗p 21蛋白。陽(yáng)性表達(dá)率各家報(bào)道不一，國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道，大腸癌rasp21的陽(yáng)性率為6 070%,胃癌為5060%,膀胱癌為51.8%,乳腺癌為68.7%。此外，rasp21的表 達(dá)還見(jiàn)于肝細(xì)胞癌、腎癌及前列腺腫瘤等。原癌基因myc家族(c-myc和N-myc) 變化與細(xì)胞增殖有關(guān)。小細(xì)胞肺癌c-myc和N-myc擴(kuò)增與預(yù)后不良有關(guān)，有N-myc 擴(kuò)增的小細(xì)胞肺癌往往對(duì)化療反應(yīng)不敏感。因此N-myc擴(kuò)增的評(píng)價(jià)對(duì)制定有效的治 療計(jì)劃有一定幫助。4.3 生長(zhǎng)因子及受體表皮生長(zhǎng)因

9、子受體(EGFR)廣泛存在于各種組織中，但主要在上皮細(xì)胞上表達(dá)，定位于細(xì)胞膜或細(xì)胞漿。在許多腫瘤，EGFR的表達(dá)與腫瘤進(jìn)展有關(guān)。大約30%的乳腺癌表達(dá)EGFR, EGFR陽(yáng)性病人的預(yù)后明顯差于EGFR陰性病人，這在ER陰性和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌中表現(xiàn)得更為明顯。EGFR的表達(dá)與ER的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，EGFR陽(yáng)性病人通常對(duì)激素療法不敏感。EGFR和Cerb-B2均陽(yáng)性的乳腺癌病人預(yù)后最差。5 .腫瘤抑制基因與基因產(chǎn)物5.1 Rb特異性識(shí)別Rb基因蛋白的抗體已經(jīng)問(wèn)世，許多人類腫瘤可出現(xiàn)Rb基因 的變化，包括成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、骨肉瘤、其他肉瘤、白血病、淋巴瘤和某些類型的 癌（包括乳腺癌、肺癌、前列腺癌、

10、膀胱癌、胃癌和睪丸癌）。在許多腫瘤，Rb基 因變化與腫瘤高分級(jí)和分期有關(guān)。此外，越來(lái)越多的證據(jù)表明，Rb基因變化對(duì)確定 原發(fā)性腫瘤高危險(xiǎn)轉(zhuǎn)移有很大幫助。5.2 P53p53基因改變是人類癌癥中最常見(jiàn)的遺傳學(xué)異常。已報(bào)道涉及許多人類 腫瘤，包括結(jié)腸癌、膀胱癌、肺癌、乳腺癌和其他類型癌、星形細(xì)胞瘤、白血病、 肉瘤和間皮瘤等。與Rb改變類似，P53改變與腫瘤級(jí)別高以及高增生指數(shù)有關(guān)。在 乳腺腫瘤病人，P53改變與激素受體表達(dá)的缺失相關(guān)。越來(lái)越多的證據(jù)認(rèn)為，至少 在某些類型腫瘤，有p53改變病人無(wú)病生存率較短，總生存率較低。在許多腫瘤， P53改變似乎是腫瘤發(fā)生的早期標(biāo)志，可在原位癌（乳腺及膀胱）、不

11、典型增生 （前列腺及結(jié)腸癌）中檢出。因此，進(jìn)展危險(xiǎn)極高的腫瘤甚至可在出現(xiàn)浸潤(rùn)前即得以確認(rèn)。5.3 nm23nm23又稱為抗轉(zhuǎn)移癌基因，目前已克隆出兩株人nm23cDNA，并篩選出 高表達(dá)的nm23蛋白產(chǎn)物，制備成單克隆抗體，可用于石蠟切片的檢測(cè)。對(duì)一些腫 瘤nm23的研究發(fā)現(xiàn)，具有轉(zhuǎn)移傾向的肝細(xì)胞癌nm23表達(dá)量明顯低于無(wú)轉(zhuǎn)移傾向的 病人，nm23的高表達(dá)亦與存活期長(zhǎng)相關(guān)。在乳腺癌進(jìn)展過(guò)程中，nm23的表達(dá)水平 降低。nm23表達(dá)降低的乳腺癌分化較低，ER表達(dá)水平低，并常常出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn) 移，預(yù)后不良。6 .預(yù)測(cè)治療反應(yīng)6.1 ER和PR免疫組化法檢測(cè)ER、PR變化與乳腺癌病人預(yù)后密切相關(guān)，亦與

12、其 他公認(rèn)的預(yù)后因素，如腫瘤分級(jí)、倍體性及分期有關(guān)。高分化腫瘤或臨床分期較低 的腫瘤ER、PR更可能陽(yáng)性，受體陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞的明顯減少與細(xì)胞增殖分級(jí)增高、c -erbB-2癌基因擴(kuò)增增加及EGFR表達(dá)增加有關(guān)。免疫組化抗受體檢測(cè)可預(yù)測(cè)乳腺癌 對(duì)激素治療的反應(yīng)性。無(wú)ER或PR表達(dá)的腫瘤對(duì)激素治療通常反應(yīng)性差，而ER及PR陽(yáng)性腫瘤則對(duì)激素治療反應(yīng)性高。6.2 雄激素受體由于前列腺癌能表達(dá)雄激素受體，抗雄激素治療可控制前列腺 癌的生長(zhǎng)，常常效果明顯?？剐奂に厥荏w的測(cè)定可預(yù)測(cè)前列腺癌內(nèi)分泌治療的反應(yīng) 性和預(yù)后。但僅少數(shù)研究報(bào)道了免疫組化雄激素受體測(cè)定與治療反應(yīng)和預(yù)后的關(guān)系。6.3 多藥耐藥（MDR）P糖蛋白（P-gp）： Pgp是一種跨膜蛋白，對(duì)其他化療 劑尤其是蒽環(huán)類和長(zhǎng)春花堿類化療劑，具有固有和獲得性耐藥。P-gp表達(dá)可見(jiàn)于高 度固有耐藥的腫瘤，如腎癌、結(jié)腸癌和腎上腺皮質(zhì)癌。在這些腫瘤，P-gp的高水平 表達(dá)亦見(jiàn)于產(chǎn)生這些腫瘤的正常組織。對(duì)化療敏感的腫瘤通常P-gp表達(dá)率低，那 些對(duì)系統(tǒng)化療最敏感的實(shí)體瘤（精原細(xì)胞瘤和胚胎性癌）很