糖尿病的實(shí)驗(yàn)室檢

1、糖尿病的實(shí)驗(yàn)室檢查糖尿病的實(shí)驗(yàn)室檢查 糖尿病（糖尿?。╠iabetes mellitus，DM）l由遺傳和環(huán)境因素共同引起的一組以糖代謝紊亂為主要表現(xiàn)的臨床綜合征。分類l1型糖尿病l2型糖尿病l其他特殊類型糖尿病l妊娠糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)（WHO，1999）l癥狀+隨機(jī)血糖11.1mmol/L l空腹血糖7.0mmol/Ll75g葡萄糖負(fù)荷后2小時(shí)血糖11.1mmol/L實(shí)驗(yàn)室檢查實(shí)驗(yàn)室檢查lOGTT-胰島素（或C-肽）釋放試驗(yàn)lHbA1cl胰島自身抗體l尿系列蛋白 1. 禁食12-14小時(shí)，早晨空腹采抗凝靜脈血2ml，測(cè)血糖， 口服75克葡萄糖（溶入200-300ml水中），3-5分鐘 內(nèi)全部服完

2、，記錄開始服糖時(shí)間，在服糖后2小時(shí) （2小時(shí)的血糖值是診斷糖耐量異?；蛱悄虿〉闹匾?標(biāo)）采抗凝靜脈血2ml，測(cè)血糖，必要時(shí)可采服糖后 第1、3、4小時(shí)的血。一、口服葡萄糖糖耐量試驗(yàn)（OGTT） 2正常參考值： 空腹靜脈血漿血糖 6.1mmol / L 服糖2小時(shí)靜脈血漿血糖7.8 mmol / L 3注意事項(xiàng)和影響因素： 試驗(yàn)中禁用茶、咖啡、食物和乙醇，禁煙，可站立、 慢走和端坐，不能激烈活動(dòng)。 對(duì)糖代謝有影響的主要藥物包括噻嗪類利尿劑、受體 阻斷劑、口服避孕藥、甲狀腺激素、煙酸、利福平和 水楊酸等，試驗(yàn)前應(yīng)停用3天以上，正在服用糖皮質(zhì)激素 者不適于作糖耐量試驗(yàn)。一、口服葡萄糖糖耐量試驗(yàn)（一

3、、口服葡萄糖糖耐量試驗(yàn)（OGTTOGTT） 病人無急性疾病和影響試驗(yàn)的慢性疾病，每天至少攝入 碳水化合物150g，3天以上。 如已診斷糖尿病，可不作該試驗(yàn)（除非為作胰島素或C肽釋 放試驗(yàn)）。 兒童服葡萄糖按每公斤體重1.75g計(jì)算，總量不超過75g。 血糖測(cè)定采用葡萄糖氧化酶法，血清與血漿血糖無明顯差別， 采血后應(yīng)盡早測(cè)血糖，不要超過3時(shí)，否則血糖會(huì)降低。 根據(jù)WHO糖耐量試驗(yàn)要求，葡萄糖應(yīng)是75g無水葡萄糖 或82.5g含一分子水的葡萄糖。 由于受體內(nèi)吸收等因素的影響糖耐量試驗(yàn)的結(jié)果重復(fù)性較差。一、口服葡萄糖糖耐量試驗(yàn)（OGTT）2試驗(yàn)方法： 3正常參考值（化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法）：采用75克葡

4、萄糖法同糖耐量試驗(yàn)。 采用饅頭餐法，空腹采靜脈血后，吃2兩饅頭（100克面粉） 空腹胰島素 627 m IU/ L，胰島素濃度在服糖后（或饅頭 餐后）0.5-1小時(shí)達(dá)高峰，可比空腹胰島素濃度高數(shù)倍至10倍， 3小時(shí)后降至接近正常水平。二、胰島素釋放試驗(yàn) 4注意事項(xiàng)和影響因素： 如已確診為糖尿病，為了解胰島功能可考慮用饅頭餐試驗(yàn)， 對(duì)糖耐量試驗(yàn)有影響的藥物和疾病同樣會(huì)影響胰島素釋放 試驗(yàn)。 試驗(yàn)當(dāng)天早上不能使用降糖藥物和胰島素。 有些藥盒不能區(qū)分胰島素原和胰島素原裂解產(chǎn)物，注射外源 性胰島素產(chǎn)生的胰島素抗體可干擾胰島素測(cè)定。 正在使用胰島素的病人，特別是中長(zhǎng)效胰島素，會(huì)影響測(cè)定 結(jié)果（測(cè)定值包括

5、了內(nèi)源性和外源性胰島素），應(yīng)測(cè)定C-肽 水平。 糖尿病人的胰島細(xì)胞功能受糖尿病類型、體重、病程和 血糖高低等因素的影響。二、胰島素釋放試驗(yàn) 5臨床意義和應(yīng)用： 用于了解胰島細(xì)胞的功能，協(xié)助糖尿病的分型和指導(dǎo)治療。 典型1型糖尿病胰島素分泌曲線低平， 2型糖尿病胰島素分泌與病程、體重和血糖高低關(guān)系密切， 病程短、肥胖和血糖控制好者，胰島素分泌曲線有一定峰值， 但峰值后延。 病程長(zhǎng)、消瘦和血糖控制差者，胰島素分泌曲線低平。 用于胰島細(xì)胞瘤的診斷，胰島細(xì)胞瘤病人有空腹低血糖 和不適當(dāng)增高的胰島素水平。 胰島素自身免疫綜合征時(shí)胰島素水平較高，體內(nèi)同時(shí)存在 胰島素自身抗體。 二、胰島素釋放試驗(yàn)二、胰島素

6、釋放試驗(yàn) 1原理：同胰島素釋放試驗(yàn)。 2試驗(yàn)方法： 75克葡萄糖法見糖耐量試驗(yàn)。 饅頭餐試驗(yàn)見胰島素釋放試驗(yàn)。 胰高血糖素刺激試驗(yàn)，胰高血糖素可刺激胰島細(xì)胞分泌 胰島素，其方法如下，清晨空腹靜脈注射1mg胰高血糖素， 在注射前和注射后6分鐘采靜脈血測(cè)血糖和C肽水平。 三、C肽釋放試驗(yàn) 3正常參考值（化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法）： 空腹 C肽 2981324 pmol / L， 正常人采用75克葡萄糖法或饅頭餐試驗(yàn)，C肽濃度在服糖后 （或饅頭餐后）0.5-1小時(shí)達(dá)高峰，可比空腹C肽濃度高3-5倍， 3小時(shí)后降至接近正常水平。 胰高血糖素刺激后C肽峰值在6分鐘左右。 4注意事項(xiàng)和影響因素： 見胰島素釋放試

7、驗(yàn)。 胰高血糖素刺激試驗(yàn)禁用于對(duì)其成分過敏者和疑有腎上腺 腺瘤者，空腹血糖7mmol/L時(shí)試驗(yàn)結(jié)果不好分析，胰高血 糖素刺激試驗(yàn)與75克葡萄糖法或饅頭餐試驗(yàn)比較重復(fù)性好、 時(shí)間短和不受慢性高血糖的影響。三、C肽釋放試驗(yàn) 5臨床應(yīng)用與分析： 了解胰島細(xì)胞的分泌功能, 協(xié)助糖尿病的分型, 特別是 正在使用胰島素的病人。 幫助指導(dǎo)用藥和胰島素的使用，有報(bào)告認(rèn)為胰高血糖素 刺激后C肽水平600 pmol /L時(shí)應(yīng)考慮用胰島素治療。三、C肽釋放試驗(yàn)HbA1c HbA1c是葡萄糖分子和血紅蛋白A某些部位分子經(jīng)緩慢而不可逆非酶促反應(yīng)而形成的產(chǎn)物血紅蛋白的糖基化Glucose enters red blood

8、 cells where it reacts with the hemoglobin 成人糖化和非糖化的血紅蛋白HbHbHbA0HbA0HbA1HbA1HbA1aHbA1aHbA1bHbA1bHbA1cHbA1cHbAHbA()HbA2HbA2()HbFHbF()97%97%0.5%0.5%2.5%2.5%Adult HbAdult HbFetal HbFetal HbNon-Non-glycatedglycatedGlycatedGlycatedIs increased in patientswith -thalassemia, while HbA1c is reduced; in this

9、 case GHb should be measured6%6%94%94%- main glycohemoglobin- used since 20 years for glycemic control with HPLC5%5%A1a and A1b:concentrationvery low HbA1c形成的動(dòng)力學(xué)壽命：120 days.50% 的HbA1c值與過去30天內(nèi)的平均血糖水平相關(guān) 40%的HbA1c值與過去31 90 天平均血糖水平相關(guān).10% HbA1c 與 過去91 120天平均血糖水平相關(guān).檢測(cè)方法l陽離子交換樹脂微柱層析法l HPLCl電泳法l親和色譜微柱法l放免法l

10、免疫比濁法l免疫競(jìng)爭(zhēng)抑制法影響因素 血紅蛋白分子病、地中海貧血、溶血性貧血、懷孕等紅細(xì)胞壽命縮短，從而糖化血紅蛋白的量降低； 腎功能不全、慢性酒精中毒等減慢HB的代謝，使其壽命延長(zhǎng)，從而使糖化血紅蛋白的量增加。診斷：優(yōu)點(diǎn)比血糖檢測(cè)穩(wěn)定性好，精確度高，實(shí)驗(yàn)室變異系數(shù)小個(gè)體內(nèi)變異率小，日間差僅35歲，發(fā)病時(shí)沒有酮癥，發(fā)病半年內(nèi)不需要胰島素治療，但起病后功能逐步衰減，一般在56年后大多（94%)需要都需要胰島素治療。病理上亦表現(xiàn)為胰島炎。發(fā)病時(shí)自身抗體的檢測(cè)對(duì)LADA的診斷具有重要作用，有人認(rèn)為自身抗體陽性是診斷LADA的必備條件。 a)5%10的2型糖尿病自身免疫抗體陽性；b) 58的LADA表現(xiàn)

11、為單一抗體陽性；c) 51成年發(fā)病的1型糖尿病為單一抗體陽性；只有14的兒童糖尿病為單一抗體陽性，LADA的抗體滴度明顯低于典型的1型糖尿病。d) IA-2A在LADA檢出率低，幾乎與其他抗體同時(shí)存在。3) 自身抗體檢測(cè)對(duì)1型糖尿病的預(yù)報(bào)作用l1）自身抗體在1型糖尿病的前期就存在，而且研究發(fā)現(xiàn)自身抗體陽性者以后發(fā)生1型糖尿病的機(jī)率遠(yuǎn)高于自身抗體陰性者，因此自身抗體的檢測(cè)在預(yù)測(cè)1型糖尿病中被廣泛采用。l2）研究表明無論在1型糖尿病的1級(jí)親屬還是在普通人群（兒童）中，1型糖尿病只發(fā)生在那些最初有多個(gè)抗體陽性者，目前大多報(bào)道認(rèn)為如果初查時(shí)有2個(gè)以上抗體陽性，那么6年后發(fā)生1型糖尿病的可能是50；在多

12、項(xiàng)大規(guī)模的前瞻性研究中均發(fā)現(xiàn)最初自身抗體檢測(cè)陰性者在隨訪68年后不發(fā)現(xiàn)1型糖尿病。l3）IA2As和GADA是最常用的作為篩查的第一線抗體。 4) 自身抗體與糖尿病的治療l1）典型1型糖尿病發(fā)病即需要胰島素治療，因此自身抗體對(duì)其治療指導(dǎo)作用很小；l2）對(duì)成人發(fā)病的糖尿病，自身抗體的檢測(cè)可以預(yù)告其胰島細(xì)胞功能衰竭的發(fā)生，因此在這類病人早期測(cè)定自身抗體，及時(shí)采取適當(dāng)措施，可能保護(hù)殘存的細(xì)胞，起到穩(wěn)定病情的作用。5)自身抗體與1型糖尿病的預(yù)防l預(yù)報(bào)1型糖尿病的目的是預(yù)防其進(jìn)一步發(fā)展為糖尿病l自身抗體的檢測(cè)可以預(yù)報(bào)1型糖尿病，從而為發(fā)現(xiàn)高危人群提供了手段l在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，多種方法可以預(yù)防1型糖尿病的發(fā)生l

13、但在人類預(yù)防1型糖尿病的發(fā)生還需要經(jīng)過艱苦的努力 小結(jié) 自身抗體的檢測(cè)對(duì)1型糖尿病的診斷與分型、預(yù)報(bào)及防治等方面均具有重要作用。尿系列蛋白測(cè)定尿系列蛋白測(cè)定l糖尿病腎病的早期診斷十分重要，臨床上糖尿病腎病的早期診斷主要依賴于對(duì)尿蛋白的檢測(cè)。尿蛋白種類白蛋白白蛋白(Alb)，最常用（中分子），最常用（中分子）轉(zhuǎn)鐵蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF，中分子），中分子）IgG（大分子）（大分子）微球蛋白測(cè)定（微球蛋白測(cè)定（a1-或或B2-微球蛋白，小分子）微球蛋白，小分子）視黃醛結(jié)合蛋白視黃醛結(jié)合蛋白(RBP，小分子，小分子)胱抑素胱抑素-C（小分子）（小分子）TammHorsfall protein (THP，遠(yuǎn)曲小管分泌），遠(yuǎn)曲小管分泌）N-乙酰乙酰-B-氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶 （NAG，近曲小管排泌），近曲小管排泌）血血漿漿蛋蛋白白腎腎小小球球?yàn)V濾過過l正常情況下血清蛋白：不易被腎小球?yàn)V過可被近端腎小管以吞飲方式重吸收蛋白尿的形成原因l腎小球內(nèi)跨毛細(xì)血管壓力過高腎小球內(nèi)跨毛細(xì)血管壓力過高l腎小球?yàn)V過屏障機(jī)制障礙，包括濾孔改變腎小球?yàn)V過屏障機(jī)制障礙，包括濾孔改變或電荷改變或電荷改變l腎小球足細(xì)胞結(jié)構(gòu)和代謝障礙腎小球足細(xì)胞結(jié)構(gòu)和代謝障礙l腎小管損傷腎小管損傷測(cè)定方法與注意事項(xiàng)常用測(cè)定