2021年全國卷高中生物選修一知識點

1、高中生物選修畢生物技術(shù)實踐專項一老式發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用課題1果酒和果醋制作1、發(fā)酵：通過微生物技術(shù)培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物過程。2、有氧發(fā)酵：醋酸發(fā)酵谷氨酸發(fā)酵無氧發(fā)酵：酒精發(fā)酵乳酸發(fā)酵3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌酵母菌生殖方式：出芽生殖（重要）分裂生殖池子生殖4、在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖。C6H12O6+6O2-6CO2+6H2O5、在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。C6H12O6-2c2H5OH+2CO26、20c左右最適當(dāng)酵母菌繁殖酒精發(fā)酵時普通將溫度控制在18C-25C7、在葡萄酒自然發(fā)酵過程中，起重要作用是附著在葡萄皮表面野生型酵母菌.在發(fā)酵過程中，隨著酒精濃度提高

2、,紅葡萄皮色素也進入發(fā)酵液，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色.在缺氧呈酸性發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其她微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。8、醋酸菌是單細(xì)胞細(xì)菌（原核生物，代謝類型是異養(yǎng)需氧型，生殖方式為二分裂9、當(dāng)氧氣、糖源都充分時，醋酸菌將葡萄汁中糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?C2H5OH+4O2CH3COOH+6H2O10、控制發(fā)酵條件作用醋酸菌對氧氣含量特別敏感，當(dāng)進行深層發(fā)酵時，雖然只是短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡。醋酸菌最適生長溫度為3035C,控制好發(fā)酵溫度，使發(fā)酵時間縮短，又減少雜菌污染機會。有兩條途徑生成醋酸：直接氧化和以

3、酒精為底物氧化。11、實驗流程：挑選葡萄一沖洗一榨汁一酒精發(fā)酵一果酒（一醋酸發(fā)酵一果醋）12、酒精檢查：果汁發(fā)酵后與否有酒精產(chǎn)生，可以用重銘酸鉀來檢查。在酸性條件下，重銘酸鉀與酒精反映呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入發(fā)酵液2mL,再滴入物質(zhì)量濃度為3mol/LH2SO43滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽和重銘酸鉀溶液3滴，振蕩試管，觀測顏色13、充氣口是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣用；排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳；出料口是用來取樣。排氣口要通過一種長而彎曲膠管與瓶身相連接，其目是防止空氣中微生物污染。開口向下目是有助于二氧化碳排出。使用該裝置制酒時，應(yīng)當(dāng)關(guān)閉充氣口；制醋時，應(yīng)當(dāng)充氣口連接氣泵

4、，輸入氧氣。疑難解答(1)你以為應(yīng)當(dāng)先沖洗葡萄還是先除去枝梗？為什么？應(yīng)當(dāng)先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增長被雜菌污染機會。(2)你以為應(yīng)當(dāng)從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？如：要先沖洗葡萄，再除去枝梗；榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈，并進行酒精消毒；每次排氣時只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋等。(3)制葡萄酒時，為什么要將溫度控制在1825C?制葡萄醋時，為什么要將溫度控制在3035C?溫度是酵母菌生長和發(fā)酵重要條件。20C左右最適合酵母菌繁殖。因而需要將溫度控制在其最適溫度范疇內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為3035C,因而要將溫度控制在3035C。課題2腐乳制作1、各種微

5、生物參加了豆腐發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起重要作用是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。代謝類型是異養(yǎng)需氧型。生殖方式是抱子生殖。營腐生生活。2、原理：毛霉等微生物產(chǎn)生蛋白酶能將豆腐中蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3、實驗流程：讓豆腐上長出毛霉-加鹽腌制-加鹵湯裝瓶-密封腌制4、釀造腐乳重要生產(chǎn)工序是將豆腐進行前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。前期發(fā)酵重要作用：1.創(chuàng)造條件讓毛霉生長。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)酵重要是酶與微生物協(xié)同參加生化反映過程。通過各種輔料與酶緩和作用，生成腐乳香氣。5、將豆腐切成3cmX3cmX1cm若干塊。所用豆腐含水量為70%

6、左右，水分過多則腐乳不易成形。*水分測定辦法如下：精準(zhǔn)稱取經(jīng)研缽研磨成糊狀樣品510g(精準(zhǔn)到0.02mg),置于已知重量蒸發(fā)皿中，均勻攤平后，在100105c電熱干燥箱內(nèi)干燥4h,取出后置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫后稱重，然后再烘30min,直至所稱重量不變?yōu)橹?。樣品水分含?)計算公式如下：1518C,并保持一定溫度。(烘干前容器和樣品質(zhì)量-烘干后容器和樣品質(zhì)量)/烘干前樣品質(zhì)量毛霉生長：條件：將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，將籠屜中控制在來源：1.來自空氣中毛霉抱子，2.直接接種優(yōu)良毛霉菌種時間：5天加鹽腌制：將長滿毛霉豆腐塊分層整潔地擺放在瓶中，同步逐級加鹽，隨著層數(shù)加高而增長鹽量，接近瓶口表面鹽要鋪

7、厚某些。加鹽腌制時間約為8天左右。用鹽腌制時，注意控制鹽用量：鹽濃度過低，局限性以抑制微生物生長，也許導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽濃度過高會影響腐乳口味食鹽作用：1抑制微生物生長，避免腐敗變質(zhì)2.析出水分，是豆腐變硬，在后期制作過程中不易酥爛3.調(diào)味作用，給腐乳以必要咸味4.浸提毛酶菌絲上蛋白酶。配制鹵湯：鹵湯直接關(guān)系到腐乳色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成。鹵湯中酒含量普通控制在12%左右。酒作用：1.防止雜菌污染以防腐2.與有機酸結(jié)合形成酯，賦予腐乳風(fēng)味3.酒精含量高低與腐乳后期發(fā)酵時間長短有很大關(guān)系，酒精含量越高，對蛋白酶抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，蛋白酶活性高，加快

8、蛋白質(zhì)水解，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗，難以成塊。香辛料作用：1.調(diào)味作用2.殺菌防腐作用3.參加并增進發(fā)酵過程防止雜菌污染：用來腌制腐乳玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒。裝瓶時，操作要迅速小心。整潔地擺放好豆腐、加入鹵湯后，要用膠條將瓶口密封。封瓶時，最佳將瓶口通過酒精燈火焰，防止瓶口被污染。疑難解答(1)運用所學(xué)生物學(xué)知識，解釋豆腐長白毛是怎么一回事？豆腐生長白毛是毛霉白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲，在豆腐中尚有匍匐菌絲。(2)為什么要撒許多鹽，將長毛豆腐腌起來？鹽能防止雜菌污染，避免豆腐腐敗。(3)咱們尋常吃豆腐，哪種適合用來做腐乳？含水量為70%左右豆腐適于作腐乳。用含水量高豆腐制作腐乳，不易

9、成形。(4)吃腐乳時，你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密皮”。這層皮”是如何形成呢？它對人體有害嗎？它作用是什么？體”，使腐乳成皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長菌絲(匍匐菌絲)，對人體無害。它能形成腐乳形。課題3制作泡菜制作泡菜所用微生物是乳酸菌，其代謝類型是異養(yǎng)厭氧型。在無氧條件下，降糖分解為乳酸。分裂方式酶是二分裂。反映式為：C6H12O62c3H6O3+能量含抗生素牛奶不能生產(chǎn)酸奶因素是抗生素殺死乳酸菌。常用乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌慣用于生產(chǎn)酸奶。亞硝酸鹽為白色粉末，易溶于水，在食品生產(chǎn)中用作食品添加劑。膳食中亞硝酸鹽普通不會危害人體健康，國家規(guī)定肉制品中不超過30mg/kg,醬腌

10、菜中不超過20mg/kg,嬰兒奶粉中不超過2mg/kg。亞硝酸鹽被吸取后隨尿液排出體外，但在適當(dāng)pH、溫度和一定微生物作用下專項二微生物培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物實驗室培養(yǎng)培養(yǎng)基：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)不同需求，配制出供其生長繁殖營養(yǎng)基質(zhì)，是進行微生物培養(yǎng)物質(zhì)基O培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂（是從紅藻中提取一種多糖，在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑）后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見菌落。依照菌落特性可以判斷是哪一種菌。液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn)，固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生物分離和鑒定，半固體培養(yǎng)基則慣用于觀測微

11、生物運動及菌種保藏等。天然培養(yǎng)基是用化學(xué)成分不明天然物質(zhì)配制而成，慣用于實按照成分培養(yǎng)基可分為人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基是用成分已知化學(xué)物質(zhì)配制而成，其中成分種類比例明確，慣用于微生物分離鑒定。際工業(yè)生產(chǎn)。按照培養(yǎng)基用途，可將培養(yǎng)基分為選取培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選取培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要微生物生長，增進所需要微生物生長。鑒別培養(yǎng)基是依照微生物特點，在培養(yǎng)基中加入某種批示劑或化學(xué)藥物配制而成，用以鑒別不同類別微生物。培養(yǎng)基化學(xué)成分涉及水、無機鹽、碳源、氮源、生長因子等。碳源：能為微生物代謝提供碳元素物質(zhì)。如CO2、NaHCO3等無機碳源；糖類、石油、花生粉餅

12、等有機碳源。異養(yǎng)微生物只能運用有機碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。氮源：能為微生物代謝提供氮元素物質(zhì)。如N2、NH3、NO3-、NH4+（無機氮源）蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白臍（有機氮源）等。只有固氮微生物才干運用N2。培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣規(guī)定。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時須將培養(yǎng)基pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無氧條件無菌技術(shù)獲得純凈培養(yǎng)物核心是防止外來雜菌入侵，要注意如下幾種方面：對實驗操作空間、操作者衣著和手，進行清潔和消毒。將用于微生物培養(yǎng)器皿、接種用品和培養(yǎng)基等器具進行滅菌

13、。為避免周邊環(huán)境中微生物污染，實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行。實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌解決材料用品與周邊物品相接觸。無菌技術(shù)除了用來防止實驗室培養(yǎng)物被其她外來微生物污染外，尚有什么目？答：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。消毒與滅菌區(qū)別消毒指使用較為溫和物理或化學(xué)辦法僅殺死物體表面或內(nèi)部一某些對人體有害微生物（不涉及芽抱和抱子）。消毒辦法慣用煮沸消毒法，巴氏消毒法（對于某些不耐高溫液體）尚有化學(xué)藥劑（如酒精、氯氣、石炭酸等）消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強烈理化因素殺死物體內(nèi)外所有微生物，涉及芽抱和抱子。滅菌辦法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌辦法：接種環(huán)、接種針、試管口等

14、使用灼燒滅菌法；玻璃器皿、金屬用品等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱；培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈比較項理化因素作用強度消滅微生物數(shù)量芽抱和抱子能否被消滅較為溫和某些生活狀態(tài)微生物不能火菌強烈所有微生物能制作牛肉膏蛋白月東固體培養(yǎng)基(1)辦法環(huán)節(jié)：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)倒平板操作環(huán)節(jié)：將滅過菌培養(yǎng)皿放在火焰旁桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基錐形瓶，左手拔出棉塞。右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰。用左手拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍不不大于瓶口縫隙，右手將錐形瓶中培養(yǎng)基(約1020mL)倒入培養(yǎng)皿，左

15、手及時蓋上培養(yǎng)皿皿蓋。等待平板冷卻凝固，大概需510min。然后，將平板倒過來放置，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。倒平板操作討論1 .培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50c左右時，才干用來倒平板。你用什么辦法來預(yù)計培養(yǎng)基溫度？提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基錐形瓶，感覺錐形瓶溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。2 .為什么需要使錐形瓶瓶口通過火焰？答：通過灼燒滅菌，防止瓶口微生物污染培養(yǎng)基。3 .平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后培養(yǎng)基表面濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基，導(dǎo)致污染。4 .在倒平板過程中，如

16、果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答：空氣中微生物也許在皿蓋與皿底之間培養(yǎng)基上滋生，因而最佳不要用這個平板培養(yǎng)微生物。純化大腸桿菌(1)微生物接種辦法最慣用是平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面持續(xù)劃線操作。將匯集菌種逐漸稀釋分散到培養(yǎng)基表面。在多次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一種細(xì)胞繁殖而來肉眼可見子細(xì)胞群體，這就是菌落。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列梯度稀釋，然后將不同稀釋度菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面，進行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。(4)用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種目是：使匯集

17、在一起微生物分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落，以便于純化菌種。(5)平板劃線法操作環(huán)節(jié)：將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞。將試管口通過火焰。將已冷卻接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。將試管通過火焰，并塞上棉塞。左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)皿。灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)劃線與第一區(qū)相連。將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。平板劃線操作討論1 .為什么在操作第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種

18、環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，依然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答：操作第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上也許存在微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上菌種直接來源于上次劃線末端，從而通過劃線次數(shù)增長，使每次劃線時菌種數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2 .在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3 .在作第二次以及其后劃線操作時，為什么總是從上一次劃線末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細(xì)菌數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次

19、劃線末端開始，能使細(xì)菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)增長而逐漸減少，最后能得到由單個細(xì)菌繁殖而來菌落。(6)涂布平板操作環(huán)節(jié)：將涂布器浸在盛有酒精燒杯中。取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。將沾有少量酒精涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻810s。用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布平板操作討論涂布平板所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋無菌操作規(guī)定，想一想，第2步應(yīng)如何進行無菌操作？提示：應(yīng)從操作各個細(xì)節(jié)保證無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿距離要適當(dāng)、吸管頭不要接觸任何其她物體、吸管要在酒精燈火焰周邊；等等。菌種保存(1)對于頻繁使用菌種，可以采用暫時保藏辦法。暫時保藏辦法將菌種接種到試管固

20、體斜面培養(yǎng)基上，在適當(dāng)溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后，將試管放入4c冰箱中保藏。后來每36個月，都要重新將菌種從舊培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上。缺陷：這種辦法保存時間不長，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。(2)對于需要長期保存菌種，可以采用甘油管藏辦法。在3mL甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在20C冷凍箱中保存。疑難解答(1)生物營養(yǎng)營養(yǎng)是指生物攝取、運用營養(yǎng)物質(zhì)過程。營養(yǎng)物質(zhì)是指維持機體生命活動，保證發(fā)育、生殖所需外源物質(zhì)。人及動物營養(yǎng)物質(zhì)：水、無機鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類。植物營養(yǎng)物質(zhì)：礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類。微生物營養(yǎng)物質(zhì)：水、無機

21、鹽、碳源、氮源及特殊營養(yǎng)物質(zhì)五類。(2)擬定培養(yǎng)基制作與否合格辦法將未接種培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12天，無菌落生長，闡明培養(yǎng)基制備是成功，否則需要重新制備。課題2土壤中分解尿素細(xì)菌分離與計數(shù)尿素是一種重要農(nóng)業(yè)氮肥，尿素并不能直接被農(nóng)作物吸取。只有當(dāng)土壤中細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才干被植物運用。土壤中細(xì)菌之因此能分解尿素，是由于她們能合成月尿酶尿素最初是從人尿液中發(fā)現(xiàn)篩選菌株(1)實驗室中微生物篩選應(yīng)用原理人為提供有助于目菌株生長條件(涉及營養(yǎng)、溫度、pH等)，同步抑制或制止其她微生物生長。(2)選取性培養(yǎng)基在微生物學(xué)中，將容許特定種類微生物生長，同步抑制或制止其她種類微生物生長培養(yǎng)基，稱作選取培

22、養(yǎng)基。(3)配制選取培養(yǎng)基根據(jù)依照選取培養(yǎng)菌種生理代謝特點加入某種物質(zhì)以達到選取目。例如，培養(yǎng)基中不加入有機物可以選取培養(yǎng)自養(yǎng)微生物；培養(yǎng)基中不加入氮元素，可以選取培養(yǎng)能固氮微生物；加入高濃度食鹽可選取培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。記錄菌落數(shù)目(1)測定微生物數(shù)量慣用辦法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)。(2)稀釋涂布平板法記錄樣品中活菌數(shù)目原理當(dāng)樣品稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長一種菌落，來源于樣品稀釋液中一種活菌。通過記錄平板上菌落數(shù)，就能推測出樣品中大概具有多少活細(xì)菌。為了保證成果精確，普通設(shè)立35個平板，選取菌落數(shù)在30300平板進行計數(shù)，并取平均值。記錄菌落數(shù)往往比活菌實際數(shù)目低，因而，記錄

23、成果普通用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表達。采用此辦法注意事項：1.普通選用菌落數(shù)在30300之間平板進行計數(shù)2.為了防止菌落蔓延，影響計數(shù)，可在培養(yǎng)基中加入TTC3.本法僅限于形成菌落微生物設(shè)立對照設(shè)立對照重要目是排除實驗組中非測試因素對實驗成果影響，提高實驗成果可信度。對照實驗是指除了被測試條件以外，其她條件都相似實驗，其作用是比照實驗組，排除任何其她也許因素干擾，證明的確是所測試條件引起相應(yīng)成果。實驗設(shè)計實驗設(shè)計涉及實驗方案，所需儀器、材料、用品和藥物，詳細(xì)實行環(huán)節(jié)以及時間安排等綜合考慮和安排。(1)土壤取樣：同其她生物環(huán)境相比，土壤中微生物，數(shù)量最大，種類最多。在富具有機質(zhì)土壤表層，有更多微生

24、物生長。從富具有機物、潮濕、pH-7土壤中取樣。鏟去表層土，在距地表約38cm土壤層取樣。(2)樣品稀釋：樣品稀釋限度將直接影響平板上生長菌落數(shù)目。在實際操作中，普通選用一定稀釋范疇樣品液進行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30300之間、適于計數(shù)平板。測定土壤中細(xì)菌數(shù)量，普通選用104105106測定放線菌數(shù)量，普通選用103104105測定真菌數(shù)量，普通選用102103104(3)微生物培養(yǎng)與觀測不同種類微生物，往往需要不同培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間。細(xì)菌3037c12天放線菌2528C5-7天霉菌2528C3-4天每隔24小時記錄一次菌落數(shù)目，選用菌落數(shù)目穩(wěn)定期記錄作為成果，這樣可以防止因培養(yǎng)時間局限性

25、而導(dǎo)致一樓菌落數(shù)目。普通來說，在一定培養(yǎng)條件下(相似培養(yǎng)基、唯獨及培養(yǎng)時間)，同種微生物體現(xiàn)出穩(wěn)定菌落特性。形狀、大小、隆起限度、顏色疑難解答(1)如何從平板上菌落數(shù)推測出每克樣品中菌落數(shù)？記錄某一稀釋度下平板上菌落數(shù)，最佳能記錄3個平板，計算出平板菌落數(shù)平均值每克樣品中菌落數(shù)=(C/V)*M其中，C代表某一稀釋度下平板上生長平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用稀釋液體積(ml),M代表稀釋倍數(shù)課題3分解纖維素微生物分離纖維素，一種由葡萄糖首尾相連而成高分子化合物，是地球上含量最豐富多糖類物質(zhì)。纖維素與纖維素酶(1)棉花是自然界中纖維素含量最高天然產(chǎn)物，木材、作物秸稈等也富含纖維素。(2)纖維素酶

26、是一種復(fù)合酶，普通以為它至少涉及三種組分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖昔酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素最后被水解成葡萄糖，為微生物生長提供營養(yǎng)。纖維素分解菌篩選(1)篩選辦法：剛果紅染色法?？梢酝ㄟ^顏色反映直接對微生物進行篩選。(2)剛果紅染色法篩選纖維素分解菌原理剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反映。當(dāng)咱們在具有纖維素培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會浮現(xiàn)以纖維素分解菌為中心透明圈。這樣，咱

27、們就可以通過與否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。分離分解纖維素微生物實驗流程土壤取樣-選取培養(yǎng)(此步與否需要，應(yīng)依照樣品中目菌株數(shù)量多少來擬定)-梯度稀釋-將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌培養(yǎng)基上-挑選產(chǎn)生透明圈菌落(1)土壤采集選取富含纖維素環(huán)境。(2)剛果紅染色法分離纖維素分解菌環(huán)節(jié)倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板(3)剛果紅染色法種類一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反映，另一種是在倒平板時就加入剛果紅。課題延伸對分解纖維素微生物進行了初步篩選后，只是分離純化第一步，為擬定得到是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶實驗，纖維素酶發(fā)酵辦法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶測定辦法，普通是

28、對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生葡萄糖進行定量測定。疑難解答(1)為什么要在富含纖維素環(huán)境中尋找纖維素分解菌？由于生物與環(huán)境互相依存關(guān)系，在富含纖維素環(huán)境中，纖維素分解菌含量相對提高，因而從這種土樣中獲得目微生物幾率要高于普通環(huán)境。(2)將濾紙埋在土壤中有什么作用？你以為濾紙應(yīng)當(dāng)埋進土壤多深？將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對匯集，事實上是人工設(shè)立纖維素分解菌生存適當(dāng)環(huán)境。普通應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。（3）兩種剛果紅染色法比較辦法一是老式辦法，缺陷是操作繁瑣，加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；其長處是這樣顯示出顏色反映基本上是纖維素分解菌作用。辦法二長處是操作簡便，不存在菌

29、落混雜問題，缺陷是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都具有淀粉類物質(zhì)，可以使可以產(chǎn)生淀粉酶微生物浮現(xiàn)假陽性反映。但這種只產(chǎn)生淀粉酶微生物產(chǎn)生透明圈較為模糊，由于培養(yǎng)基中纖維素占重要地位，因而可以與纖維素酶產(chǎn)生透明圈相區(qū)別。辦法二另一缺陷是：有些微生物具備降解色素能力，它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅形成明顯透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)別。（4）為什么選取培養(yǎng)可以濃縮”所需微生物？在選取培養(yǎng)條件下，可以使那些可以適應(yīng)這種營養(yǎng)條件微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件微生物繁殖被抑制，因而可以起到濃縮”作用。專項六植物有效成分提取6.1 植物芳香油提取1 .天然香料重要來源是植物和動物。動|物香料

30、重要來源于麝、靈出海貍和抹香鯨等。不同用物根、莖、葉、花、果實、而皿以提取芳香油。2 .植物芳香油具備很強揮標(biāo)口:要涉及菇類后而及其衍生物。|提取川法有蒸儲、壓樹、萃取等，詳細(xì)采用哪種辦法要依照植物原料特點砌定。1.1 蒸氣蒸儲法耳植物芳香油提取慣用辦法,它原理是運用水蒸汽將揮發(fā)性物雖芳香油攜帶出椀成油水混合物，冷卻后水油分層。涉及水m畫（原料放在沸水中加熱蒸儲）、水上蒸儲叵u邛鬲放在沸水上加熱蒸儲）和怎§儲（運用外來高溫水蒸氣加熱蒸儲）。4 .水中蒸儲法會導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解：對于有些原料（如柑橘和檸檬）不合用，通慣用壓榨法。5 .蒸儲裝置所有儀器必要萼花壬燥套蒸儲裝置可分為

31、左、中、右三某些，其中左邊某些通過力口熱進行蒸儲】中部將蒸儲物冷制廠同進某些用來接受。匠詢器普通都按照目下而上、從左到右順產(chǎn)?？稍谡魞ζ恐屑訋琢７惺?，防止液體過度沸騰。要先通水再加熱。在整個蒸儲過程中，應(yīng)保證溫度計水銀球上常有因冷凝作用而形成液滴?？刂普魞r間和速度，普通以每秒12滴為宜。蒸儲完畢，應(yīng)先撤出熱服T珠后停止眄永T餐巾拆卸蒸陛串,拆卸順序與安裝時相反。6 .玫瑰精油提取1）玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)足口電司，易溶巨亞溶劑，能隨水蒸氣1glM可用水中蒸儲法梃嬴2）提取玫瑰精油實驗流程：降玫瑰花+清水：采集盛花期（5月中上旬）玫瑰花，清水清洗瀝干；稱取50g玫瑰花放入蒸儲瓶,除去水分：向油層中

32、加入無水硫酸鈉吸取油層中水分，24h后過濾，得到玫瑰油。7.橘皮精油提取1）橘皮精油重要成分為檸檬烯，重要分布在橘皮中，由于橘皮精油有效成分在用水蒸氣蒸儲時會發(fā)生某些水解使用水中蒸儲法又會產(chǎn)生原料慳糊問題,|因此普通用萃取法。|2）提取橘皮精油實驗流程：石灰水浸泡：新鮮橘皮含大量果帽、果膠和水分其干燥去水,并用石灰水浸泡，可以提高出油禮并防止壓榨時滑脫，減少壓榨液黏稠度,過濾不堵塞篩眼。漂洗：浸泡好橘皮用流水徹底漂洗干凈，瀝干。壓榨：將橘皮粉碎，加入相稱于橘皮質(zhì)量0.25%（蘇打和5%怖酸鈉市（增進油一水分離），|用壓榨機壓榨得到壓榨液。過濾：用布袋過濾除去固快物和殘渣，河液再高速離心解決除去質(zhì)量較小固體殘留物，再用分派漏斗或吸管分離出上層橘皮油。靜置：將橘皮油在510c冰箱中靜置57d