結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室生物安全

1、結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室生物安全結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室生物安全自治區(qū)疾控中心結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室自治區(qū)疾控中心結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室什么是生物安全什么是生物安全生物安全是指對(duì)由現(xiàn)代生物技術(shù)的開(kāi)發(fā)和生物安全是指對(duì)由現(xiàn)代生物技術(shù)的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用應(yīng)用過(guò)程中過(guò)程中可能產(chǎn)生的可能產(chǎn)生的負(fù)面影響負(fù)面影響，所采取，所采取的有效預(yù)防和控制措施的有效預(yù)防和控制措施. .l保護(hù)人保護(hù)人（實(shí)驗(yàn)人員、同事、實(shí)驗(yàn)室輔助實(shí)驗(yàn)人員、同事、實(shí)驗(yàn)室輔助人員）人員）l物品物品( (標(biāo)本和器材等標(biāo)本和器材等) ) l環(huán)境環(huán)境( (空氣、土壤、水空氣、土壤、水) )生物安全的目的生物安全的目的n國(guó)家發(fā)展與改革委員會(huì)國(guó)家發(fā)展與改革委員會(huì)n科技部科技部n建設(shè)部建設(shè)部n國(guó)家環(huán)保部國(guó)

2、家環(huán)保部n國(guó)家質(zhì)檢總局（中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可中心）國(guó)家質(zhì)檢總局（中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可中心）n國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委n農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)部n民航局民航局n其它有關(guān)部門(mén)其它有關(guān)部門(mén)實(shí)驗(yàn)室管理部門(mén)實(shí)驗(yàn)室管理部門(mén)國(guó)家對(duì)病原微生物實(shí)行國(guó)家對(duì)病原微生物實(shí)行分類管理分類管理，對(duì)實(shí)驗(yàn)室實(shí)，對(duì)實(shí)驗(yàn)室實(shí)行行分級(jí)管理分級(jí)管理。 國(guó)家實(shí)行國(guó)家實(shí)行統(tǒng)一統(tǒng)一的實(shí)驗(yàn)室生物安全的實(shí)驗(yàn)室生物安全標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和要求。應(yīng)當(dāng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和要求?；疽?guī)定基本規(guī)定病原微生物的分類和管理病原微生物的分類和管理 國(guó)家根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者群體的危害國(guó)家根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者群體的

3、危害程度，將病原微生物分為程度，將病原微生物分為四類四類：第一類病原微生物第一類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)未發(fā)現(xiàn)或者或者已經(jīng)宣布消滅已經(jīng)宣布消滅的微生物。的微生物。第二類病原微生物第二類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病嚴(yán)重疾病，比較容易直比較容易直接或者間接在人與人接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。播的微生物。第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物高致病性病原微生物

4、。第三類病原微生物第三類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物疾病疾病，但一般，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。施的微生物。第四類病原微生物第四類病原微生物，是指在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物，是指在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物。疾病的微生物。結(jié)核分枝桿菌危害等級(jí)結(jié)核分枝桿菌危害等級(jí)n 根據(jù)衛(wèi)生部病原微生物危害等級(jí)分類，結(jié)核分枝桿菌屬于第二類，即指能夠引起

5、人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。實(shí)驗(yàn)室的設(shè)立與管理實(shí)驗(yàn)室的設(shè)立與管理國(guó)家根據(jù)實(shí)驗(yàn)室對(duì)病原微生物的生物安全防護(hù)水平，并依照實(shí)驗(yàn)室生物安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，將實(shí)驗(yàn)室分為一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)。 BSL-1BSL-2BSL-3 原則：定向氣流原則：定向氣流設(shè)施設(shè)備設(shè)施設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)操作程序標(biāo)準(zhǔn)操作程序個(gè)人防護(hù)裝備個(gè)人防護(hù)裝備管理管理實(shí)驗(yàn)室生物安全控制要素實(shí)驗(yàn)室生物安全控制要素4結(jié)核菌是通過(guò)氣溶膠傳播結(jié)核菌是通過(guò)氣溶膠傳播l涂片l培養(yǎng)液的傾倒和轉(zhuǎn)移；l高速混合含菌液體；l滴加、接種培養(yǎng)物；l取樣器和振蕩器的使用；l容器內(nèi)外壓力不同時(shí)打開(kāi)容器可能產(chǎn)生氣溶膠

6、的操作可能產(chǎn)生氣溶膠的操作實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備操作及其危險(xiǎn)性實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備操作及其危險(xiǎn)性 在實(shí)驗(yàn)室中使用離心機(jī)、攪拌機(jī)、勻漿機(jī)、在實(shí)驗(yàn)室中使用離心機(jī)、攪拌機(jī)、勻漿機(jī)、振蕩器、超聲波粉碎儀和混合儀處理含有感振蕩器、超聲波粉碎儀和混合儀處理含有感染性結(jié)核菌的材料時(shí)，以及打開(kāi)培養(yǎng)容器；染性結(jié)核菌的材料時(shí)，以及打開(kāi)培養(yǎng)容器；凍干和過(guò)濾也可以產(chǎn)生感染性氣溶膠凍干和過(guò)濾也可以產(chǎn)生感染性氣溶膠 保證實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)保證實(shí)驗(yàn)室通風(fēng) 保證實(shí)驗(yàn)室的窗戶可以通風(fēng)將含有氣溶膠保證實(shí)驗(yàn)室的窗戶可以通風(fēng)將含有氣溶膠的空氣與室外空氣進(jìn)行交換，以排出或稀釋的空氣與室外空氣進(jìn)行交換，以排出或稀釋氣溶膠濃度。氣溶膠濃度。 如果實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了正

7、確的試驗(yàn)操作，如果實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了正確的試驗(yàn)操作，那么與患者的一次不加防護(hù)的咳嗽相那么與患者的一次不加防護(hù)的咳嗽相比，在操作中產(chǎn)生的氣溶膠是很少的。比，在操作中產(chǎn)生的氣溶膠是很少的。實(shí)驗(yàn)室危險(xiǎn)實(shí)驗(yàn)室危險(xiǎn) 給予口罩或面巾給予口罩或面巾 教會(huì)如何較衛(wèi)生的方式咳嗽教會(huì)如何較衛(wèi)生的方式咳嗽 分開(kāi)的區(qū)域侯診分開(kāi)的區(qū)域侯診 盡快接受相關(guān)檢查盡快接受相關(guān)檢查(在排隊(duì)前在排隊(duì)前) 轉(zhuǎn)診到專門(mén)的結(jié)核病診斷和治療場(chǎng)所轉(zhuǎn)診到專門(mén)的結(jié)核病診斷和治療場(chǎng)所(機(jī)構(gòu)機(jī)構(gòu))對(duì)結(jié)核病可疑癥狀者或結(jié)核病患者對(duì)結(jié)核病可疑癥狀者或結(jié)核病患者應(yīng)該采?。簯?yīng)該采?。?根據(jù)我國(guó)發(fā)布的根據(jù)我國(guó)發(fā)布的人間傳染的病原微生物人間傳染的病原微生物名錄名錄的

8、要求，對(duì)于結(jié)核分枝桿菌大量活菌操的要求，對(duì)于結(jié)核分枝桿菌大量活菌操作須在符合生物安全三級(jí)（作須在符合生物安全三級(jí)（BSL-3）的環(huán)境中）的環(huán)境中進(jìn)行；進(jìn)行； 樣本檢測(cè)，包括樣本的病原菌分離純化、樣本檢測(cè)，包括樣本的病原菌分離純化、藥物敏感性實(shí)驗(yàn)、生化鑒定、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、藥物敏感性實(shí)驗(yàn)、生化鑒定、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、PCR核酸提取、涂片、顯微觀察等初步檢測(cè)活核酸提取、涂片、顯微觀察等初步檢測(cè)活動(dòng)，可以在符合生物安全二級(jí)（動(dòng)，可以在符合生物安全二級(jí)（BSL-2）的環(huán)）的環(huán)境中進(jìn)行。境中進(jìn)行。結(jié)核分枝桿菌實(shí)驗(yàn)操作要求結(jié)核分枝桿菌實(shí)驗(yàn)操作要求用于保護(hù)操作人員、處理樣品安全與環(huán)境安用于保護(hù)操作人員、處理樣品安全與

9、環(huán)境安全的通風(fēng)安全柜，柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，適用全的通風(fēng)安全柜，柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，適用于生物危險(xiǎn)度等級(jí)為于生物危險(xiǎn)度等級(jí)為1 1、2 2、3 3的媒質(zhì)的操作。的媒質(zhì)的操作。級(jí)生物安全柜為臨床生物防護(hù)中應(yīng)用最普級(jí)生物安全柜為臨床生物防護(hù)中應(yīng)用最普遍的一類生物安全柜。遍的一類生物安全柜。級(jí)生物安全柜級(jí)生物安全柜安全柜的最佳放置位置安全柜的最佳放置位置安全柜應(yīng)該放在什么地方？安全柜應(yīng)該放在什么地方？盡量隔離安全柜盡量隔離安全柜-降低人流降低人流-盡量離開(kāi)風(fēng)管出口盡量離開(kāi)風(fēng)管出口-盡量離開(kāi)門(mén)和窗口盡量離開(kāi)門(mén)和窗口注注 意意ABCDA ， B : 不可不可 D ，C : 建議建議Installation生物

10、安全柜的使用生物安全柜的使用準(zhǔn)備：準(zhǔn)備：l在開(kāi)始工作前應(yīng)考慮實(shí)驗(yàn)中的操作步驟和所在開(kāi)始工作前應(yīng)考慮實(shí)驗(yàn)中的操作步驟和所需設(shè)備，充分做好準(zhǔn)備工作。需設(shè)備，充分做好準(zhǔn)備工作。l準(zhǔn)備好消毒劑和處理遺撒事件的物品。準(zhǔn)備好消毒劑和處理遺撒事件的物品。l盡量減少房間內(nèi)的走動(dòng)，保證正常氣流。盡量減少房間內(nèi)的走動(dòng)，保證正常氣流。l前窗開(kāi)至適當(dāng)高度，打開(kāi)安全柜的燈和風(fēng)前窗開(kāi)至適當(dāng)高度，打開(kāi)安全柜的燈和風(fēng)機(jī)。機(jī)。l讓生物安全柜工作區(qū)排氣幾分鐘之后再開(kāi)始讓生物安全柜工作區(qū)排氣幾分鐘之后再開(kāi)始工作工作生物安全柜的使用生物安全柜的使用操作：操作：l消毒桌面（消毒桌面（75%75%酒精，使用紫外線作為表面消毒酒精，使用紫

11、外線作為表面消毒的效果不一定能完全無(wú)菌）的效果不一定能完全無(wú)菌）l安全柜內(nèi)只放本次實(shí)驗(yàn)所需的物品。所有物品安全柜內(nèi)只放本次實(shí)驗(yàn)所需的物品。所有物品離前窗至少離前窗至少15cm15cm，即在隔柵之后，所有污染性即在隔柵之后，所有污染性的操作盡量遠(yuǎn)離工作區(qū)域的后部。的操作盡量遠(yuǎn)離工作區(qū)域的后部。l大物體之間要保持一定距離。大物體之間要保持一定距離。生物安全柜的使用生物安全柜的使用操作：操作：l干凈和被污染的物品分開(kāi)放置；被污染的物品干凈和被污染的物品分開(kāi)放置；被污染的物品盡量不要進(jìn)入干凈區(qū)域，應(yīng)放置在工作區(qū)域的盡量不要進(jìn)入干凈區(qū)域，應(yīng)放置在工作區(qū)域的后部。后部。l操作時(shí)物品和手臂不要操作時(shí)物品和手

12、臂不要頻繁穿過(guò)前窗。頻繁穿過(guò)前窗。l操作完畢后，將物品表面用適當(dāng)?shù)南疽翰潦貌僮魍戤吅螅瑢⑽锲繁砻嬗眠m當(dāng)?shù)南疽翰潦煤笠瞥?，用消毒液擦拭安全柜?nèi)面。后移出，用消毒液擦拭安全柜內(nèi)面。污染區(qū)工作區(qū)清潔區(qū)不要覆蓋前、后、側(cè)邊的隔柵不要覆蓋前、后、側(cè)邊的隔柵操作完畢后用消毒操作完畢后用消毒液擦拭安全柜內(nèi)面液擦拭安全柜內(nèi)面生物安全柜內(nèi)發(fā)生意外應(yīng)急處理生物安全柜內(nèi)發(fā)生意外應(yīng)急處理用蘸取消毒液的紗布或紙巾覆蓋濺出物，靜置使消毒用蘸取消毒液的紗布或紙巾覆蓋濺出物，靜置使消毒液和濺出物接觸至少液和濺出物接觸至少1515分鐘分鐘用適當(dāng)?shù)南疽翰潦脼R出物周圍表面或其他容器表面用適當(dāng)?shù)南疽翰潦脼R出物周圍表面或其他容

13、器表面換新手套，凈化安全柜幾分鐘換新手套，凈化安全柜幾分鐘將污染物高壓滅菌將污染物高壓滅菌生物安全柜外發(fā)生意外應(yīng)急處理生物安全柜外發(fā)生意外應(yīng)急處理發(fā)生重大濺灑事故時(shí)，所有人應(yīng)立即離開(kāi)發(fā)生重大濺灑事故時(shí)，所有人應(yīng)立即離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室，待氣溶膠沉降完全后再處理。實(shí)驗(yàn)室，待氣溶膠沉降完全后再處理。可以在可以在 BSCBSC內(nèi)用火焰內(nèi)用火焰 ? ?在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒(méi)有微生物的在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒(méi)有微生物的環(huán)境中，應(yīng)避免使用明火。使用明火會(huì)對(duì)氣環(huán)境中，應(yīng)避免使用明火。使用明火會(huì)對(duì)氣流產(chǎn)生影響。流產(chǎn)生影響。在對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌時(shí)，可以使用微型燃燒在對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌時(shí)，可以使用微型燃燒器或電爐，而

14、不應(yīng)使用明火。器或電爐，而不應(yīng)使用明火。高壓滅菌器使用高壓滅菌器使用u負(fù)責(zé)高壓滅菌的人員應(yīng)接受過(guò)良好的培訓(xùn)負(fù)責(zé)高壓滅菌的人員應(yīng)接受過(guò)良好的培訓(xùn)并持證上崗。并持證上崗。u滅菌前：滅菌前：l檢查滅檢查滅菌容器的菌容器的蓋蓋子，子，將蓋將蓋子旋子旋松后松后再放再放入入消毒物品。消毒物品。l容器內(nèi)容器內(nèi)各種液體約裝各種液體約裝八分八分滿滿，切勿，切勿裝滿。裝滿。l具有具有揮發(fā)性的物質(zhì)揮發(fā)性的物質(zhì)，不可，不可高壓滅菌。高壓滅菌。l滅菌滅菌前前務(wù)必確定務(wù)必確定水位在水位在正常要求水位正常要求水位以上。以上。高壓滅菌器使用高壓滅菌器使用滅菌過(guò)程中：滅菌過(guò)程中：l隨時(shí)隨時(shí)查看所查看所設(shè)設(shè)定定溫度（溫度（121

15、121度）、壓力度）、壓力是否是否正確正確。（。（121121度，度，3030分鐘）分鐘）滅菌后：滅菌后：l開(kāi)門(mén)前務(wù)必確定開(kāi)門(mén)前務(wù)必確定內(nèi)內(nèi)鍋壓力表已經(jīng)歸零鍋壓力表已經(jīng)歸零。l滅菌滅菌器中各器中各項(xiàng)項(xiàng)物品及物品及滅滅菌器本身均高菌器本身均高溫溫，取出物品取出物品時(shí)應(yīng)戴時(shí)應(yīng)戴手套手套。l隨時(shí)隨時(shí)保持保持鍋鍋內(nèi)內(nèi)清潔清潔，以延，以延長(zhǎng)長(zhǎng)使用年限使用年限。個(gè)人防護(hù)裝備個(gè)人防護(hù)裝備 (PPE)(PPE) 在生物安全實(shí)驗(yàn)室中，這些器材和用品主要是在生物安全實(shí)驗(yàn)室中，這些器材和用品主要是保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員免于暴露于生物危害物質(zhì)（氣溶膠、保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員免于暴露于生物危害物質(zhì)（氣溶膠、噴濺物以及意外接種等）危險(xiǎn)的一種

16、物理屏障。噴濺物以及意外接種等）危險(xiǎn)的一種物理屏障。防護(hù)部位防護(hù)部位 防護(hù)裝備防護(hù)裝備眼睛眼睛眼鏡（安全鏡、護(hù)目鏡）眼鏡（安全鏡、護(hù)目鏡）頭面部、呼吸道頭面部、呼吸道口罩（口罩（N95N95）、面罩、帽）、面罩、帽子子 軀體軀體防護(hù)服防護(hù)服( (實(shí)驗(yàn)服、隔離衣實(shí)驗(yàn)服、隔離衣) )手、足手、足手套、鞋套手套、鞋套N95N95是感染防是感染防護(hù)的最低標(biāo)準(zhǔn)，護(hù)的最低標(biāo)準(zhǔn)，N95N95口罩非?？谡址浅Ｖ匾匾?，“NIOSHNIOSH”認(rèn)證。認(rèn)證。不合格不合格個(gè)人防護(hù)裝置選擇原則個(gè)人防護(hù)裝置選擇原則要求工作人員應(yīng)掌握的要點(diǎn)要求工作人員應(yīng)掌握的要點(diǎn)l必須十分了解和掌握自己工作性質(zhì)和特點(diǎn)必須十分了解和掌握自己工作性質(zhì)和特點(diǎn)l所涉及的實(shí)驗(yàn)工作需要使用個(gè)人防護(hù)裝備所涉及的實(shí)驗(yàn)工作需要使用個(gè)人防護(hù)裝備的類型的類型l正確的使用方法正確的使用方法l使用前應(yīng)仔細(xì)檢查，不使用標(biāo)志不清、破使用前應(yīng)仔細(xì)檢查，不使用標(biāo)志不清、破損或泄漏的防護(hù)用品損或泄漏的防護(hù)用品個(gè)人防護(hù)個(gè)人防護(hù)出實(shí)驗(yàn)室前，一定要洗手！出實(shí)驗(yàn)室前，一定要洗手！廢棄物處理廢棄物處理l傳染性廢棄