胚胎工程2020-2

1、 第七章第七章 胚胎工程（三）胚胎工程（三）胚胎工程簡介胚胎工程簡介胚胎工程技術(shù)胚胎工程技術(shù)試管動物試管動物三、試管動物三、試管動物1、定義：、定義： 將供體的精子和卵子在體外受精、體外培將供體的精子和卵子在體外受精、體外培養(yǎng)胚胎，然后將發(fā)育到一定程度的胚胎移植入養(yǎng)胚胎，然后將發(fā)育到一定程度的胚胎移植入受體，可以得到各種動物。由于體外受精一般受體，可以得到各種動物。由于體外受精一般都在試管內(nèi)進(jìn)行，所以稱為都在試管內(nèi)進(jìn)行，所以稱為試管動物。也有稱試管動物。也有稱為為“體外受精動物體外受精動物”。 2 2、試管嬰兒：、試管嬰兒： 體 外 受 精 結(jié) 合 胚 胎 移 植 技 術(shù)體 外 受 精 結(jié) 合

2、 胚 胎 移 植 技 術(shù)（IVF-ET），是指分別將卵子與精子），是指分別將卵子與精子取出后，在體外（培養(yǎng)皿中）使其受精，取出后，在體外（培養(yǎng)皿中）使其受精，并發(fā)育成胚胎后，再植回母體子宮內(nèi)發(fā)并發(fā)育成胚胎后，再植回母體子宮內(nèi)發(fā)育育。l自自29年前全球首個年前全球首個“試管嬰兒試管嬰兒”路易絲路易絲布朗誕生后，通過試管體外受精布朗誕生后，通過試管體外受精出生的嬰兒已超過出生的嬰兒已超過300萬人，在所有嘗試此類治療受孕的個案中，歐洲占萬人，在所有嘗試此類治療受孕的個案中，歐洲占了了56%。圖為世界第一例成功出世的。圖為世界第一例成功出世的“試管嬰兒試管嬰兒”布朗參加布朗參加“試管嬰兒試管嬰兒25

3、周年周年”聚會。聚會。 體外受精、胚胎移植技術(shù) （IVF-ET） 第一代“試管嬰兒” 是指精子與卵子在體外受精，經(jīng)人工培養(yǎng)，當(dāng)受是指精子與卵子在體外受精，經(jīng)人工培養(yǎng)，當(dāng)受精卵分裂成精卵分裂成28個卵裂球時(shí)，再移植到母體子宮內(nèi)發(fā)個卵裂球時(shí)，再移植到母體子宮內(nèi)發(fā)育直到分娩。由于這個過程的最早階段是在體外試育直到分娩。由于這個過程的最早階段是在體外試管內(nèi)進(jìn)行的，俗稱管內(nèi)進(jìn)行的，俗稱試管嬰兒試管嬰兒。IVF-ET技術(shù)于技術(shù)于1974年年在英國首先建立，在英國首先建立，1978年年7月在英國劍橋誕生了世月在英國劍橋誕生了世界上第一例試管嬰兒，界上第一例試管嬰兒，1988年年3月在北京醫(yī)科大學(xué)月在北京醫(yī)科

4、大學(xué)三院誕生了我國第一例試管嬰兒三院誕生了我國第一例試管嬰兒。 該方法主要適應(yīng)于各種女性原因的不孕、免疫性該方法主要適應(yīng)于各種女性原因的不孕、免疫性不孕、輕度少精癥。不孕、輕度少精癥。lIVF-ET 的操作過程的操作過程 卵巢刺激以募集多個卵子（超排卵）卵巢刺激以募集多個卵子（超排卵）發(fā)育成熟發(fā)育成熟取卵取卵體外受精體外受精胚胎移植胚胎移植妊娠的評價(jià)妊娠的評價(jià)(一一)IVF-ET助孕助孕病例選擇1.輸卵管輸卵管粘連、粘連、梗阻或缺如梗阻或缺如；2.子宮內(nèi)膜異位癥子宮內(nèi)膜異位癥 ；3.免疫因素免疫因素 ；4.不明原因的不育癥不明原因的不育癥 。（二）控制性超排卵（COH）： 在使用促性腺激素治療

5、周期前的黃體期開始在使用促性腺激素治療周期前的黃體期開始使用促性腺激素釋放激素激動劑，對正常反應(yīng)使用促性腺激素釋放激素激動劑，對正常反應(yīng)者者,月經(jīng)第三天起使用，開始劑量為月經(jīng)第三天起使用，開始劑量為23支支/d，在用在用 FSH第第6天起連續(xù)天起連續(xù)B超監(jiān)測卵泡，根據(jù)卵超監(jiān)測卵泡，根據(jù)卵泡發(fā)育情況調(diào)整用藥量，當(dāng)主導(dǎo)卵泡直徑達(dá)泡發(fā)育情況調(diào)整用藥量，當(dāng)主導(dǎo)卵泡直徑達(dá)18mm以上時(shí)，注射以上時(shí)，注射hCG 。（三）采卵 在在hCG注射后注射后36小時(shí)，陰道小時(shí)，陰道B超引導(dǎo)下穿刺取超引導(dǎo)下穿刺取卵，局部麻醉。采卵過程需卵，局部麻醉。采卵過程需5-20分鐘，患者痛分鐘，患者痛苦小，可重復(fù)操作。苦小，可

6、重復(fù)操作。成熟卵細(xì)胞圖片成熟卵細(xì)胞圖片卵細(xì)胞圖片原核期圖片胚胎圖片桑椹胚期桑椹胚期囊胚期囊胚期（四）體外受精及胚胎移植l獲得的卵母細(xì)胞置培養(yǎng)箱培養(yǎng)獲得的卵母細(xì)胞置培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-6小時(shí)后，小時(shí)后，加精子體外受精，受精后加精子體外受精，受精后16-20小時(shí)觀察受小時(shí)觀察受精情況，將受精卵繼續(xù)培奍至精情況，將受精卵繼續(xù)培奍至72小時(shí)，進(jìn)小時(shí)，進(jìn)行胚胎移植，一般移植行胚胎移植，一般移植3個胚胎，移植后用個胚胎，移植后用黃體酮支持黃體，移植黃體酮支持黃體，移植14天后驗(yàn)晨尿天后驗(yàn)晨尿hCG，檢查是否妊娠。檢查是否妊娠。冷凍胚胎 一個促排卵周期可以得到多個卵子，并在一個促排卵周期可以得到多個卵子，并在體外

7、授精，形成多個胚胎，移植后尚有剩體外授精，形成多個胚胎，移植后尚有剩余的胚胎可以冷凍儲存。如果這個周期治余的胚胎可以冷凍儲存。如果這個周期治療失敗，可以在以后的自然周期中解凍這療失敗，可以在以后的自然周期中解凍這些胚胎并進(jìn)行移植，自然周期的內(nèi)分泌環(huán)些胚胎并進(jìn)行移植，自然周期的內(nèi)分泌環(huán)境有利于胚胎植入。境有利于胚胎植入。配子及胚胎的冷凍保存技術(shù)該項(xiàng)技術(shù)的實(shí)用意義是：配子及胚胎的冷凍保存技術(shù)該項(xiàng)技術(shù)的實(shí)用意義是：（1）精子庫或卵子庫的建立，為精子或卵子的贈送提）精子庫或卵子庫的建立，為精子或卵子的贈送提供極大的方便；供極大的方便；（2）生殖保險(xiǎn)的功能，如化療、放射治療前的配子的）生殖保險(xiǎn)的功能，如

8、化療、放射治療前的配子的保存；保存；（3）治療過程中如獲得過多的胚胎，可進(jìn)行冷凍保存；）治療過程中如獲得過多的胚胎，可進(jìn)行冷凍保存；（4）在某些情況下，如附睪取精或睪丸活檢取精作卵）在某些情況下，如附睪取精或睪丸活檢取精作卵漿內(nèi)單精子顯微注射，如能保存部分精子以備下一同漿內(nèi)單精子顯微注射，如能保存部分精子以備下一同期使用則可避免再次的取精手術(shù)；期使用則可避免再次的取精手術(shù)；（5）當(dāng)治療周期發(fā)生卵巢過度刺激綜合征，感染等并）當(dāng)治療周期發(fā)生卵巢過度刺激綜合征，感染等并發(fā)癥時(shí)，不進(jìn)行移植的胚胎給予凍存。發(fā)癥時(shí)，不進(jìn)行移植的胚胎給予凍存。卵子胞漿內(nèi)單精子注射（ICSI） 第二代試管嬰兒，又稱顯微授精。

9、將精子第二代試管嬰兒，又稱顯微授精。將精子通過很細(xì)的針注入卵子胞漿內(nèi)，然后培養(yǎng)通過很細(xì)的針注入卵子胞漿內(nèi)，然后培養(yǎng)成胚胎。適用于男性因素不育，常規(guī)試管成胚胎。適用于男性因素不育，常規(guī)試管嬰兒治療無法受精或失敗者嬰兒治療無法受精或失敗者ICSI的優(yōu)點(diǎn)在的優(yōu)點(diǎn)在于，只要能獲得一顆精子，就有可能成功。于，只要能獲得一顆精子，就有可能成功。這是輔助生育治療領(lǐng)域里程碑的突破，為這是輔助生育治療領(lǐng)域里程碑的突破，為廣大男性因素不育患者帶來希望。常規(guī)試廣大男性因素不育患者帶來希望。常規(guī)試管嬰兒需要男性能提供足管嬰兒需要男性能提供足 夠數(shù)量的高質(zhì)量精子。夠數(shù)量的高質(zhì)量精子。精子卵漿內(nèi)注射(ICSI)第三代試管

10、嬰兒第三代試管嬰兒 （Preimplantation Preimplantation genetic diagnosis genetic diagnosis PGDPGD） 是指從體外受精的胚胎取部分細(xì)胞進(jìn)行基是指從體外受精的胚胎取部分細(xì)胞進(jìn)行基因診斷，排除帶致病基因的胚胎后才移植，使因診斷，排除帶致病基因的胚胎后才移植，使人們實(shí)現(xiàn)胚胎著床前即診斷出遣傳病的愿望，人們實(shí)現(xiàn)胚胎著床前即診斷出遣傳病的愿望，預(yù)防遺傳病、提高出生人口素質(zhì)等，預(yù)防遺傳病、提高出生人口素質(zhì)等， 將有廣將有廣闊的前景。闊的前景。PGD: Genetic testing performed prior to embryo t

11、ransferPreimplantation genetic diagnosis (PGD)Polar body PGD Blastomere PGD可利用可利用PGDPGD進(jìn)行檢測的遺傳病進(jìn)行檢測的遺傳病l常染色體顯性遺傳常染色體顯性遺傳馬凡氏綜合征馬凡氏綜合征Huntingtons綜合征綜合征強(qiáng)直性肌萎縮強(qiáng)直性肌萎縮家族性腺纖維囊腫家族性腺纖維囊腫常染色體隱性遺傳常染色體隱性遺傳囊性纖維瘤囊性纖維瘤TaU-Sachs病病Lesch-Nyhan綜合征綜合征地中海貧血地中海貧血鐮刀細(xì)胞病鐮刀細(xì)胞病脊柱肌萎縮脊柱肌萎縮lx連鎖遺傳病連鎖遺傳病X連鎖隱性遺傳病中鑒定胎連鎖隱性遺傳病中鑒定胎兒性別兒

12、性別假性肥大型肌營養(yǎng)不良假性肥大型肌營養(yǎng)不良血友病血友病A脆性脆性x綜合征綜合征嚴(yán)重的復(fù)合免疫缺陷嚴(yán)重的復(fù)合免疫缺陷白化病白化病非整倍體非整倍體平衡易位攜帶者平衡易位攜帶者性腺嵌合型性腺嵌合型 這三種技術(shù)各有針對性，而沒有升級換代這三種技術(shù)各有針對性，而沒有升級換代的關(guān)系，在治療時(shí)可針對不同情況選擇使用。的關(guān)系，在治療時(shí)可針對不同情況選擇使用。試管嬰兒和自然懷孕生育的比較：試管嬰兒和自然懷孕生育的比較： 試管嬰兒試管嬰兒 自然懷孕自然懷孕 說明說明 流產(chǎn)流產(chǎn) 14-30% 15-20% 稍有增多，可能是因?yàn)樵嚬軏雰旱膵寢尩钠骄挲g較大的緣故 宮外孕宮外孕 2-5.8% 3-5% 沒有顯著差別 早產(chǎn)早產(chǎn) 24-30% 6-7% 早產(chǎn)的增多與多胎及產(chǎn)婦年齡較大有關(guān)有關(guān) 新生兒體重偏輕新生兒體重偏輕 27-32% 5-7% 和早產(chǎn)有關(guān) 死嬰死嬰 1.2% 0.6% 沒有顯著差別