儀器分析教案給學(xué)生

1、16P湖南工學(xué)院教案用紙課 程 教 案課程名稱(chēng)： 儀器分析實(shí)驗(yàn) 任課教師 歐麗娟，劉開(kāi)建，張德春 所屬院部： 材料與化學(xué)工程學(xué)院 教學(xué)班級(jí)： 化工1201-04班 教學(xué)時(shí)間：2014 2015 學(xué)年第 二 學(xué)期湖 南 工 學(xué) 院實(shí)驗(yàn)一 高效液相色譜法測(cè)定苯酚和苯一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1掌握高效液相色譜法測(cè)定苯酚和苯的方法；2了解流動(dòng)相流速對(duì)色譜分離的影響。二、實(shí)驗(yàn)原理 酚類(lèi)屬于高毒物質(zhì)，主要污染源是煉油、木材防腐及某些工廠(chǎng)的工業(yè)廢水。人體攝入一定量酚類(lèi)物質(zhì)后，會(huì)出現(xiàn)急性中毒，長(zhǎng)期飲用被酚類(lèi)污染的水可引起頭昏、貧血及神經(jīng)系統(tǒng)障礙。因此，酚類(lèi)物質(zhì)被列為環(huán)境優(yōu)先控制的污染物。酚類(lèi)化合物種類(lèi)繁多，如甲酚、氯酚

2、、硝基酚、氨基酚等。由于取代基位置和取代基數(shù)目睥不同又分為對(duì)甲酚、間甲酚、鄰甲酚、2，4，6-三甲酚等，不同的酚地人體的毒害作用不同，容量法和分光光度法測(cè)得的是總酚含量，液相色譜將分離和測(cè)定結(jié)合成來(lái)，可對(duì)各種不同的酚類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行定量測(cè)定。本實(shí)驗(yàn)采用十八烷基硅烷鍵合相為固定相，甲醇-水溶液為流動(dòng)相分離苯酚和苯混合物，因固定相的極性小于流動(dòng)相的極性，此法稱(chēng)為反相液液相色譜法。當(dāng)兩組分在固定相和流動(dòng)相中分配時(shí)，極性大的物質(zhì)在流動(dòng)相中的溶解度較大，而極性小的物質(zhì)在流動(dòng)相中的溶解度較小，組分的流出順序是極性大的化合物在前，極性小的化合物在后。三、儀器和試劑 主要儀器：高效液相色譜儀；2. 色譜柱：15 c

3、m 4.6 mm，KR100-C18，10 mm；3. 0.45 mm有機(jī)相濾膜；4. 1 mL注射器；5. 標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)進(jìn)針頭。試劑：1 甲醇：色譜純；2. 超純水：使用前過(guò)濾；3. 苯酚、苯混合液：3 mL苯酚、4 mL苯溶于10 mL甲醇-水（85：15）中。四、實(shí)驗(yàn)步驟 1. 開(kāi)機(jī)按操作規(guī)程開(kāi)機(jī)，并使儀器處于工作關(guān)態(tài)。色譜條件如下：流動(dòng)相：甲醇-水（85：15，體積比）；流速：1.0 mL/min, 1.5 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm；柱溫30 ；進(jìn)樣量20 mL。2. 試樣測(cè)定首先設(shè)定流速為1.0 mL/min，待基線(xiàn)穩(wěn)定后，進(jìn)樣測(cè)定；然后把流速改為1.5mL/min，待基線(xiàn)穩(wěn)定后

4、，再次進(jìn)樣測(cè)定。3. 關(guān)機(jī)實(shí)驗(yàn)完畢后，清洗色譜柱，關(guān)機(jī)。五、數(shù)據(jù)處理 論g 根據(jù)不同流速下所得各組分的保留時(shí)間和半峰高寬計(jì)算塔板數(shù)和分離度。N = (tR/s)2 = 16(tR)2/W = 5.54(tR/W1/2)2其中：W峰寬；s曲線(xiàn)拐點(diǎn)處峰寬的一半，即峰高0.607處峰寬的一半；W1/2半峰高寬；tR保留時(shí)間。R = 2(tR2tR1)/(W1+W2)tR保留時(shí)間；W峰寬。一般說(shuō)當(dāng)R1時(shí)，兩峰有部分重疊；當(dāng)R=1.0時(shí)，分離度可達(dá)98%；當(dāng)R=1.5時(shí)，分離度可達(dá)99.7%。通常用R=1.5作為相鄰兩組分已完全分離的標(biāo)志。R1.5稱(chēng)為完全分離。六、思考題 1、若降低甲醇含量，保留時(shí)間t

5、R和分離度是否有改變？如何變化？2、根據(jù)實(shí)驗(yàn)的色譜條件判斷各組分的流出順序。教學(xué)后記實(shí)驗(yàn)二 氣相色譜法測(cè)定苯系物一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1了解氣相色譜的儀器組成、工作原理及數(shù)據(jù)采集、數(shù)據(jù)分析的基本操作。2面積歸一化法測(cè)定苯、甲苯和二甲苯混合物中各組分的含量。二、實(shí)驗(yàn)原理 氣相色譜方法是利用試樣中各組份在氣相和固定液相間的分配系數(shù)不同將混合物分離、測(cè)定的儀器分析方法，特別適用于分析含量少的氣體和易揮發(fā)的液體。當(dāng)汽化后的試樣被載氣帶入色譜柱中運(yùn)行時(shí)，組份就在其中的兩相間進(jìn)行反復(fù)多次分配，由于固定相對(duì)各組份的吸附或溶解能力不同，因此各組份在色譜柱中的運(yùn)行速度就不同，經(jīng)過(guò)一定的柱長(zhǎng)后，便彼此分離，按流出順序離開(kāi)

6、色譜柱進(jìn)入檢測(cè)器，被檢測(cè)，在記錄器上繪制出各組份的色譜峰流出曲線(xiàn)。在色譜條件一定時(shí)，任何一種物質(zhì)都有確定的保留參數(shù)，如保留時(shí)間、保留體積及相對(duì)保留值等。因此，在相同的色譜操作條件下，通過(guò)比較已知純樣和未知物的保留參數(shù)或在固定相上的位置，即可確定未知物為何種物質(zhì)。測(cè)量峰高或峰面積，采用外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法或歸一化法，可確定待測(cè)組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。三、儀器和試劑 1儀器設(shè)備1）天美GC-8A型氣相色譜儀，Chromato-Solution Light色譜工作站。2）進(jìn)樣口: 毛細(xì)柱進(jìn)樣口 (S/SL)。3）檢測(cè)器：TCD檢測(cè)器。4）色譜柱：PEG-6000/6201，42m。5）5ul微量注射器。2氣體：高

7、純N2 (99.999%)，載氣流速：30mL/min。3、藥品：苯、 甲苯 、二甲苯。四、實(shí)驗(yàn)步驟 1檢查N2氣源的狀態(tài)及壓力，然后打開(kāi)氣源，檢漏。2. 按下列條件設(shè)置參數(shù)：柱箱溫度：110； 進(jìn)樣器溫度（或氣化室溫度）：120；檢測(cè)器TCD溫度：120。3. 開(kāi)啟電腦中的工作站程序及色譜儀。15min后設(shè)置橋流：80mA。升溫結(jié)束，待基線(xiàn)平穩(wěn)后，即可進(jìn)樣。4用微量注射器準(zhǔn)確抽取0.5L溶液，注射入進(jìn)樣口。注意不要將氣泡抽入針筒。進(jìn)樣的同時(shí)，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊工作站上的“開(kāi)始”綠色按鈕，待準(zhǔn)備結(jié)束（1-2s），按下色譜工作站“CH1”按鈕，開(kāi)始記錄圖譜，儲(chǔ)存并處理圖譜數(shù)據(jù)。 若想在設(shè)定的“采集時(shí)間”

8、前終止實(shí)驗(yàn)，可用鼠標(biāo)點(diǎn)擊工作站上的“停止”紅色按鈕。在相同的色譜條件下，分別測(cè)定苯、 甲苯 、二甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液及混合樣品。五、思考題 1、如何確定色譜圖上各主要峰的歸屬？2、如何確定各組分的含量？教學(xué)后記實(shí)驗(yàn)三 火焰原子吸收光譜法測(cè)定水中鈣含量（4學(xué)時(shí)）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1、了解原子吸收光譜儀的構(gòu)造及使用方法。2、了解火焰原子吸收分光光度法分析原理。3、掌握標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法測(cè)定元素含量的分析技術(shù)。 二、實(shí)驗(yàn)原理 原子吸收光譜法是基于氣態(tài)基態(tài)原子外層的電子對(duì)共振線(xiàn)的吸收。氣態(tài)的基態(tài)原子數(shù)與物質(zhì)的含量成正比。當(dāng)式樣組成復(fù)雜，配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液與式樣組成之間差別較大時(shí)，常采用標(biāo)準(zhǔn)法，本實(shí)驗(yàn)就使用標(biāo)準(zhǔn)加入法，基本方法

9、是在五個(gè)容量瓶中加等量的待測(cè)式樣，分別加入不等量（倍增）的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用適當(dāng)溶劑稀釋至一定體積后，依次測(cè)出它們的吸光度。以加入標(biāo)樣的質(zhì)量為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)，圖中橫坐標(biāo)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)正常的交點(diǎn)與原點(diǎn)的距離X即為容量瓶所含待測(cè)元素的質(zhì)量，再通過(guò)計(jì)算求出式樣的含量。三、儀器和試劑 主要儀器：AA-6300C型原子吸收分光光度計(jì)，乙炔鋼瓶，空氣壓縮機(jī)、鈣空心陰極燈，容量瓶， 移液管。 試劑： 鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液：2.0 4.0 6.0 8.0 10.0ug/ml，自來(lái)水樣 四、實(shí)驗(yàn)步驟 1、鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制A、精確稱(chēng)取1.400g標(biāo)準(zhǔn)品氧化鈣，用蒸餾水定容至1000mL，此溶液含鈣1.

10、000mg/mL。（貯備液）B、用吸管吸取10mL 1.000mg/mL鈣的貯備液于100ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，此溶液含鈣0.1000mg/mL。C、用10ml吸管分別吸取2、4、6、8、10mL 0.1000mg/ml的鈣溶液于5個(gè)100ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋到刻線(xiàn)，搖勻。此系列標(biāo)準(zhǔn)溶液分別含鈣2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 ug/mL。 2、自來(lái)水樣的制備用10ml吸管吸取自來(lái)水樣于100ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度。 3、參照AA-6300C火焰法操作規(guī)程完成鈣系列標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光值的測(cè)定。 測(cè)量條件： 分析線(xiàn)：422.7nm 燈電流: 3mA 燃燒器

11、高度: 5mm 狹縫寬度: 0.4mm4、在相同測(cè)量條件下完成樣品自來(lái)水中鈣含量的測(cè)定。5、記錄測(cè)定值，換算成樣品濃度。6、實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生整理，完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。五、AA-6300C操作規(guī)程(火焰法)1、 開(kāi)機(jī) 打開(kāi)電源（穩(wěn)壓器），依次打開(kāi)計(jì)算機(jī)電源，自動(dòng)啟動(dòng)完Windows（DOS）后，再打開(kāi)儀器電源開(kāi)關(guān)。2、 初始化 啟動(dòng)WizAArd系統(tǒng)，選擇聯(lián)機(jī)。系統(tǒng)很快就會(huì)進(jìn)入初始化，初始化成功“OK”（確定）。每次開(kāi)機(jī)都必須經(jīng)過(guò)初始化才能控制儀器。3、尋峰3.1 初始化后出現(xiàn)元素?zé)暨x擇窗口，如需更改元素?zé)艨梢愿鶕?jù)需要進(jìn)行選擇。3.2 選擇元素?zé)艉?，系統(tǒng)將會(huì)彈出被調(diào)整元素?zé)魠?shù)對(duì)話(huà)框，根據(jù)需要進(jìn)行相關(guān)的參數(shù)

12、設(shè)置。設(shè)置好參數(shù)后，下一步進(jìn)行相應(yīng)的元素?zé)魧し濉?.3 單擊“尋峰”按鈕對(duì)當(dāng)前工作波長(zhǎng)進(jìn)行尋峰。當(dāng)需要對(duì)當(dāng)前元素的其他特征波長(zhǎng)進(jìn)行尋峰，可在“特征譜線(xiàn)”下拉框中選擇相應(yīng)的波長(zhǎng)。3.4 當(dāng)需要查看儀器當(dāng)前能量狀態(tài)或需要對(duì)能量進(jìn)行調(diào)整時(shí)，可依次選擇主菜單的【應(yīng)用】/【能量調(diào)試】，4、參數(shù)設(shè)置尋峰結(jié)束后，程序進(jìn)入系統(tǒng)測(cè)試狀態(tài)，選擇系統(tǒng)菜單的“儀器”下的“燃燒器參數(shù)設(shè) 置”，對(duì)燃?xì)饬髁?、燃燒器高度和位置進(jìn)行設(shè)置。一般為1200-1800ml/min（燃?xì)饬髁浚?。調(diào)整位置使光斑正好切入燃燒器中縫上方6-8mm。4.1在進(jìn)入測(cè)量之前，對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行設(shè)置。單擊工具按鈕 即可打開(kāi)樣品設(shè)置向?qū)А?.2對(duì)測(cè)量參數(shù)

13、進(jìn)行設(shè)置。單擊工具按鈕 即可打開(kāi)測(cè)量參數(shù)設(shè)置對(duì)話(huà)框。選擇計(jì)算方式為連續(xù)、積分時(shí)間為1-3秒、濾波系數(shù)0.6秒。5、測(cè)量 使用火焰法時(shí)，在進(jìn)入測(cè)量前,請(qǐng)依次打開(kāi)空壓機(jī)電源、乙炔鋼瓶閥門(mén)，使乙炔分表壓力在0.05-0.06Mpa.，并認(rèn)真檢查氣路以及水封。當(dāng)您確認(rèn)無(wú)誤后，可單擊工具按鈕即可將火焰點(diǎn)燃。再單擊測(cè)量鍵進(jìn)行測(cè)量。6、關(guān)機(jī)在關(guān)機(jī)前必須經(jīng)過(guò)火焰狀態(tài)下，先關(guān)閉乙炔鋼瓶閥門(mén)，待火焰熄滅后再關(guān)閉空壓機(jī)。退出AA系統(tǒng)、再關(guān)閉主機(jī)、最后關(guān)閉電源。六、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng) 1、AA-6300C型原子吸收分光光度計(jì)系精密貴重儀器，在未熟悉儀器的性能及操作方法之前，不得隨意撥動(dòng)主機(jī)記錄器的各個(gè)開(kāi)關(guān)和旋鈕。 2、儀器

14、在開(kāi)機(jī)進(jìn)行測(cè)量時(shí)必須嚴(yán)格按照操作規(guī)程的方法進(jìn)行。 3、本實(shí)驗(yàn)使用易燃?xì)怏w乙炔，故在實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)禁煙火，以免發(fā)生事故。 4、點(diǎn)燃火焰時(shí)，必須先開(kāi)空氣，后開(kāi)乙炔，熄滅火焰時(shí)，則應(yīng)先關(guān)乙炔，后關(guān)空氣，防止回火，爆炸事故的發(fā)生。七、結(jié)果處理1、在坐標(biāo)紙上畫(huà)出：鈣的校準(zhǔn)曲線(xiàn)（注意空白值如何處理）。2、由校準(zhǔn)曲線(xiàn)查出并計(jì)算未知樣品中鈣的含量。八、思考題 1、為什么燃助比和燃燒器高度的變化會(huì)明顯影響鈣的測(cè)量靈敏度？2、空白溶液的含義是什么？3、為什么原子吸收光譜儀的光源需要調(diào)制？教學(xué)后記實(shí)驗(yàn)四 熒光分光光度法測(cè)定維生素B2的含量（4學(xué)時(shí)）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌握標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法定量分析維生素B2的基本原理。2、了解熒光分

15、光光度計(jì)的基本原理、結(jié)構(gòu)及性能，掌握其基本操作。二、實(shí)驗(yàn)原理1、維生素B2（又叫核黃素，VB2）是橘黃色無(wú)臭的針狀結(jié)晶，其結(jié)構(gòu)式為： 維生素B2易溶于水而不溶于乙醚等有機(jī)溶劑，在中性或酸性溶液中穩(wěn)定，光照易分解，對(duì)熱穩(wěn)定。維生素B2溶液在430440 nm藍(lán)光的照射下，發(fā)出綠色熒光，熒光峰在535 nm。維生素B2在pH=67的溶液中熒光強(qiáng)度最大，在pH=11的堿性溶液中熒光消失，所以可以用熒光光度法測(cè)維生素B2的含量。維生素B2在堿性溶液中經(jīng)光線(xiàn)照射會(huì)發(fā)生分解而轉(zhuǎn)化為光黃素，光黃素的熒光比核黃素的熒光強(qiáng)的多，故測(cè)維生素B2的熒光時(shí)溶液要控制在酸性范圍內(nèi)，且在避光條件下進(jìn)行。2、熒光分光光度計(jì)

16、 （1）常溫下，處于基態(tài)的分子吸收一定的紫外可見(jiàn)光的輻射能成為激發(fā)態(tài)分子，激發(fā)態(tài)分子通過(guò)無(wú)輻射躍遷至第一激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)，再以輻射躍遷的形式回到基態(tài)，發(fā)出比吸收光波長(zhǎng)長(zhǎng)的光而產(chǎn)生熒光。在稀溶液中，熒光強(qiáng)度IF與物質(zhì)的濃度c有以下的關(guān)系： 當(dāng)實(shí)驗(yàn)條件一定時(shí)，熒光強(qiáng)度IF與熒光物質(zhì)的濃度成線(xiàn)性關(guān)系： 這是熒光光譜法定量分析的理論依據(jù)。（2）熒光分析法的特點(diǎn)A、與紫外-可見(jiàn)分光度法比較，熒光分析法具有更高的靈敏度。B、選擇性好。熒光法既能依據(jù)發(fā)射光譜，又能依據(jù)吸收光譜來(lái)鑒定物質(zhì)。C、所需試樣量少、操作方法簡(jiǎn)便。（3）熒光分析儀器A、常用的熒光分析儀器由激發(fā)光源、單色器、液槽、檢測(cè)器和顯示記錄器五

17、部分構(gòu)成，如下圖所示： 光源單色器吸收池單色器檢測(cè)器B、熒光分析儀器與分光光度計(jì)比較主要差別有兩點(diǎn)：（a）熒光分析儀器采用垂直測(cè)量方式，以消除透射光的影響；（b）熒光分析儀器有兩個(gè)單色器，能夠獲得單色性較好的激發(fā)光并消除其它雜散光干擾。（c）熒光分光光度計(jì)工作原理：由光源氙弧燈發(fā)出的光通過(guò)切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后，此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光，被測(cè)的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光，經(jīng)過(guò)單色器變成單色熒光后照射于測(cè)樣品用的光電倍增管上，由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過(guò)放大器放大輸至記錄儀，激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動(dòng)機(jī)帶動(dòng)的凸輪所控制，當(dāng)測(cè)繪熒光發(fā)射光譜時(shí)，將激發(fā)光單色

18、器的光柵，固定在最適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)光波長(zhǎng)處，而讓熒光單色器凸輪轉(zhuǎn)動(dòng)，將各波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度訊號(hào)輸出至記錄儀上，所記錄的光譜即發(fā)射光譜，簡(jiǎn)稱(chēng)熒光光譜。當(dāng)測(cè)繪熒光激發(fā)光譜時(shí)，將熒光單色器的光柵固定在最適當(dāng)?shù)臒晒獠ㄩL(zhǎng)處，只讓激發(fā)光單色口的凸輪轉(zhuǎn)動(dòng)，將各波長(zhǎng)的激發(fā)光的強(qiáng)度訊號(hào)輸出至記錄儀，所記錄的光譜即激發(fā)光譜。當(dāng)進(jìn)行樣品溶液的定量分析時(shí)，將激發(fā)光單色器固定在所選擇的激發(fā)光波長(zhǎng)處，將熒光單色器調(diào)節(jié)至所選擇的熒光波長(zhǎng)處，由記錄儀得出的信號(hào)是樣品溶液的熒光強(qiáng)度。三、實(shí)驗(yàn)儀器和試劑主要儀器：熒光分光光度計(jì)，1cm石英皿，25mL容量瓶，移液管試劑：維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液：10.0g/mL，待測(cè)樣品溶液四、實(shí)驗(yàn)步驟1、系列

19、標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備取維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液（10.0g/mL）0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL分別置于25mL的容量瓶中，各加入去離子水稀釋至刻度，搖勻。得濃度依次為0.20g/mL、0.40g/mL、0.60g/mL、0.80g/mL、1.00g/mL的一系列維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液，待測(cè)。2、標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品的熒光測(cè)定將激發(fā)波長(zhǎng)固定在最大激發(fā)波長(zhǎng)，熒光發(fā)射波長(zhǎng)固定在最大熒光發(fā)射波長(zhǎng)處。測(cè)量上述系列標(biāo)準(zhǔn)維生素B2溶液的熒光發(fā)射強(qiáng)度。記錄數(shù)據(jù)，以溶液的熒光發(fā)射強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。 在同樣條件下測(cè)定未知溶液的熒光強(qiáng)度，并由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)確定未知試樣中維

20、生素B2的濃度，計(jì)算待測(cè)樣品溶液中的維生素B2的含量。五、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1、使用熒光分光光度計(jì)時(shí)，要按照儀器使用規(guī)定使用，不可隨意操作。2、使用石英比色皿時(shí)，要注意勿用手直接觸摸比色皿表面，因握住側(cè)棱。六、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄及處理1、在EXCEL上擬合系列標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與熒光發(fā)射強(qiáng)度的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖。2、由校準(zhǔn)曲線(xiàn)查出并計(jì)算待測(cè)樣品溶液中的維生素B2的含量。七、思考題 1、試解釋熒光光度法較吸收光度法靈敏度高的原因?2、維生素B2在pH67時(shí)熒光最強(qiáng)，本實(shí)驗(yàn)為何在酸性溶液中測(cè)定？教學(xué)后記實(shí)驗(yàn)五 紫外吸收光譜法測(cè)定苯酚含量（4學(xué)時(shí)）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1、了解紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)、性能及使用方法。2、熟悉定性、

21、定量測(cè)定的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理 紫外分光光度法，又稱(chēng)紫外吸收光譜法，它是研究分子吸收200.0800.0nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)的吸收光譜。紫外吸收光譜主要產(chǎn)生于分子價(jià)電子在電子能級(jí)間的躍遷，是研究物質(zhì)電子光譜的分析方法。通過(guò)測(cè)定分子對(duì)紫外光的吸收，可以對(duì)大量的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物進(jìn)行定性和定量測(cè)定。苯酚已經(jīng)被列入有機(jī)污染物的黑名單。但在一些藥品、食品添加劑、消毒液等產(chǎn)品中均含有一定量的苯酚。如果其含量超標(biāo)，就會(huì)產(chǎn)生很大的毒害作用。苯酚在紫外光區(qū)的最大吸收波長(zhǎng)max=270nm。對(duì)苯酚溶液進(jìn)行掃描時(shí)，在270nm處有較強(qiáng)的吸收峰。 定性分析時(shí)，可在相同的條件下，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品進(jìn)行波長(zhǎng)掃描，通過(guò)比較未知樣品

22、和標(biāo)準(zhǔn)樣品的光譜圖對(duì)未知樣進(jìn)行鑒定。在沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)樣品的情況下，可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)譜圖或有關(guān)的電子光譜數(shù)據(jù)表進(jìn)行比較。 定量分析是在270nm處測(cè)定不同濃度苯酚的標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光值，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。再在相同的條件下測(cè)定未知樣品的吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)可得出未知樣中苯酚的含量。三、儀器和試劑 主要儀器：紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，容量瓶（1000ml、250ml、50ml），移液管（5ml、10ml）試劑：苯酚（AR） + Q, 1 Z: # j- N 四、實(shí)驗(yàn)步驟 于5支50ml的容量瓶中，用吸量管分別加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，用蒸餾水定容至刻度，搖勻。9 -

23、 v# A O V* w: E在標(biāo)準(zhǔn)系列溶液所測(cè)的紫外圖中找到最大吸收波長(zhǎng)，并記錄最大吸收波長(zhǎng)和每種溶液的吸光度。實(shí)驗(yàn)完畢后，清洗，關(guān)機(jī)。五、數(shù)據(jù)處理1、苯酚的吸收曲線(xiàn)圖2、苯酚濃度的測(cè)定，在相同情況下，直接測(cè)定未知樣品的吸光度。3、根據(jù)回歸曲線(xiàn)方程計(jì)算出待測(cè)苯酚濃度。測(cè)得樣品的A，代人標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程計(jì)算得樣品濃度c=？ug/ml 六、思考題: X2 / Q/ l& : S- a2. - da6 L& s+ C0紫外可見(jiàn)分光光度法的定性、定量分析的依據(jù)是什么？9 教學(xué)后記實(shí)驗(yàn)六 苯甲酸紅外吸收光譜的測(cè)繪（4學(xué)時(shí)）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1、學(xué)習(xí)用紅外吸收光譜進(jìn)行化合物的定性分析，2、掌握用壓片法制作固體試樣晶片的方法；3、熟悉紅外分光光度儀的工作原理及其使用方法。二、實(shí)驗(yàn)原理 在化合物分子中，具有相同化學(xué)鍵的原子基團(tuán)，其基本振動(dòng)頻率吸收峰(簡(jiǎn)稱(chēng)基頻峰)基本上出現(xiàn)在同一頻率區(qū)域內(nèi)，例如，CH3(CH2)5CH3、CH3(CH2)4CN和CH3(CH2)5CH=CH2等分子中都有-CH3，-CH2-基團(tuán)，它們的伸縮振動(dòng)基頻峰與圖1 CH3(CH2)6CH3分子的紅外吸收光譜中-CH3，-CH2-基團(tuán)的伸縮振動(dòng)基頻峰都出現(xiàn)在同一頻率區(qū)域內(nèi)，即在3000cm-1波數(shù)附近，但又有所不同，這是因?yàn)橥活?lèi)型原子基團(tuán)，在不同化合物分子中所處的化學(xué)環(huán)境有所不同，使基頻峰頻率發(fā)生一定移動(dòng)，例如