第一章植物組培快繁實驗室(學(xué)時)

1、現(xiàn)代農(nóng)業(yè)與生物科技學(xué)院張麗瓊第一章第一章 植物組培快繁實驗室植物組培快繁實驗室新建組培室地址的選擇：新建組培室地址的選擇：1 1、首先要保證水電供應(yīng)；、首先要保證水電供應(yīng)；2 2、為節(jié)省能源，充分利用自然光，實驗室應(yīng)向南建設(shè)，、為節(jié)省能源，充分利用自然光，實驗室應(yīng)向南建設(shè)，使采光面積和時數(shù)達(dá)到最大；使采光面積和時數(shù)達(dá)到最大；3 3、對于商業(yè)性實驗室，交通條件是否便利是一個應(yīng)該考、對于商業(yè)性實驗室，交通條件是否便利是一個應(yīng)該考慮因素。慮因素。 4 4、組培室最好避免建立在繁忙的交通線的附近；、組培室最好避免建立在繁忙的交通線的附近；5 5、避免與溫室、微生物實驗室、昆蟲實驗室、種子或其、避免與溫

2、室、微生物實驗室、昆蟲實驗室、種子或其他植物材料儲藏室相鄰，以免由于空氣流通造成難以他植物材料儲藏室相鄰，以免由于空氣流通造成難以克服的污染?？朔奈廴尽?新建組培室需考慮的問題新建組培室需考慮的問題：+所從事的實驗的性質(zhì)所從事的實驗的性質(zhì)，即是生產(chǎn)性的還是研究性的，即是生產(chǎn)性的還是研究性的，是基本層次的還是較高層次的；，是基本層次的還是較高層次的；+實驗室的規(guī)模實驗室的規(guī)模，規(guī)模主要取決于經(jīng)費和實驗性質(zhì)。，規(guī)模主要取決于經(jīng)費和實驗性質(zhì)。+植物組織培養(yǎng)實驗室設(shè)計應(yīng)遵守的原則：植物組織培養(yǎng)實驗室設(shè)計應(yīng)遵守的原則：+實驗室設(shè)置的基本原則是：實驗室設(shè)置的基本原則是：科學(xué)、高效、經(jīng)濟和實用科學(xué)、高效、

3、經(jīng)濟和實用。+一個組織培養(yǎng)實驗室必須滿足一個組織培養(yǎng)實驗室必須滿足3 3個基本的需要：個基本的需要：實驗準(zhǔn)備實驗準(zhǔn)備、無菌操作無菌操作和和控制培養(yǎng)控制培養(yǎng)。 保證絕對清潔保證絕對清潔 植物組織培養(yǎng)一般需要光照和控溫，為節(jié)省能源，應(yīng)充植物組織培養(yǎng)一般需要光照和控溫，為節(jié)省能源，應(yīng)充分利用自然光，同時房間設(shè)計要便于控溫。分利用自然光，同時房間設(shè)計要便于控溫。 實驗室的設(shè)計按自然工作程序的先后安排成一條連續(xù)的實驗室的設(shè)計按自然工作程序的先后安排成一條連續(xù)的生產(chǎn)線，避免環(huán)節(jié)倒排。生產(chǎn)線，避免環(huán)節(jié)倒排。 實驗室設(shè)置防止昆蟲、鳥類、鼠類等動物進(jìn)入的設(shè)施。實驗室設(shè)置防止昆蟲、鳥類、鼠類等動物進(jìn)入的設(shè)施。 實

4、驗室內(nèi)的地面、墻壁和頂棚等，要采用最小的產(chǎn)生灰實驗室內(nèi)的地面、墻壁和頂棚等，要采用最小的產(chǎn)生灰塵建筑材料。塵建筑材料。 實驗室內(nèi)安裝的洗手池、下水道的位置要適宜，不得對實驗室內(nèi)安裝的洗手池、下水道的位置要適宜，不得對培養(yǎng)帶來污染。培養(yǎng)帶來污染。 實驗室應(yīng)有消防火栓、報警裝置等安全設(shè)施。實驗室應(yīng)有消防火栓、報警裝置等安全設(shè)施。植物組織培養(yǎng)實驗室的設(shè)計+組織培養(yǎng)實驗室布局的總體要求+ 功能齊全+ 布局合理+ 環(huán)境清潔+ 易于滅菌基本實驗室布局平面圖實驗臺擱架培養(yǎng)架培養(yǎng)架培養(yǎng)架培養(yǎng)架藥品及儀器柜無菌臺無菌臺擱架拉窗冰箱擱 架水槽電爐門4.5m3.0m3.5m4.0m準(zhǔn)備室準(zhǔn)備室緩沖室緩沖室無菌室無菌

5、室培養(yǎng)室培養(yǎng)室基本實驗室輔助實驗室實驗室組成準(zhǔn)備室緩沖室無菌操作室培養(yǎng)室細(xì)胞生物學(xué)實驗室溫 室生化分析實驗室二、實驗室組成基本實驗室包括準(zhǔn)備室、無菌操作室、培養(yǎng)室、緩沖間，是組織培養(yǎng)實驗所必須具備的基本條件。（一）基本實驗室功能：又叫化學(xué)實驗室，進(jìn)行一切與實驗有關(guān)的準(zhǔn)備工作。要求：最好有20平方米左右。要求寬敞明亮、以便于放置多個實驗臺和相關(guān)設(shè)備，方便多人同時工作；同時要求通風(fēng)條件好，便于氣體交換；實驗室地面應(yīng)便于清潔，并應(yīng)進(jìn)行防滑處理。1、準(zhǔn)備室分類：（1）分體式-研究性質(zhì)實驗室。（2）通間式-規(guī)?；瘜嶒炇?。設(shè)備：準(zhǔn)備室應(yīng)具備工作臺、柜櫥、水池、儀器、藥品等。功能：也叫接種室，進(jìn)行材料的立體

6、無菌操作。要求：房間一般不宜過大，10-20平方米即可。要求封閉性好，干燥清潔，能較長時間保持無菌；地面及內(nèi)墻壁都應(yīng)采用防水和耐腐蝕材料；地面要求平坦無縫；防止空氣對流。 2、無菌操作室一般新建實驗室的無菌室在使用之前應(yīng)進(jìn)行滅菌處理，處理方法是甲醛和高錳酸鉀熏蒸，并需定期滅菌處理，還可用紫外線照射1-2h/周，或每次使用前照射10-30min。設(shè)備：無菌操作室安裝有紫外燈和空調(diào)，工作臺和擱架，還有超凈工作臺和整套滅菌接種儀器、藥品等。功能：對接種到培養(yǎng)瓶等器皿中的植物離體材料進(jìn)行控制條件下的培養(yǎng)。要求：約需10-20平方米左右。應(yīng)保持清潔和適度干燥；安裝排風(fēng)窗和換氣扇等培養(yǎng)室的換氣裝置；配置適

7、宜的培養(yǎng)架，并安裝日光燈照明。設(shè)備：培養(yǎng)架、光照培養(yǎng)箱或人工氣候箱、邊臺用于拍攝培養(yǎng)物生長狀況，除濕機、顯微鏡、溫濕度計、空調(diào)等。3、培養(yǎng)室功能：是進(jìn)入無菌室前的一個緩沖場地，減少人體從外界帶入的塵埃等污染物。工作人員在此換上工作服、拖鞋，戴上口罩，才能進(jìn)入無菌室和培養(yǎng)室。要求：緩沖間需3-5平方米，可建在準(zhǔn)備室外或無菌操作室外，應(yīng)保持清潔無菌；備有鞋架和衣帽掛鉤，并有清潔的實驗用拖鞋、已滅菌過的工作服；墻頂用1-2盞紫外燈定時照射，對衣物進(jìn)行滅菌。設(shè)備：1-2盞紫外燈、滅菌后的工作服、拖鞋、口罩。4、緩沖間1、細(xì)胞學(xué)實驗室功能：對培養(yǎng)材料進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定和研究，由制片室和顯微觀察室組成。要求：

8、明亮、清潔、干燥、防止潮濕和灰塵污染。2、生化分析實驗室功能：培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)物為主要目的的實驗室，應(yīng)建立相應(yīng)的分析化驗實驗室，隨時對培養(yǎng)物成分進(jìn)行取樣檢查。大型次生代謝物生產(chǎn)，還需有效分離實驗室。（二）輔助實驗室+標(biāo)準(zhǔn)的植物組織培養(yǎng)實驗室應(yīng)該包括：標(biāo)準(zhǔn)的植物組織培養(yǎng)實驗室應(yīng)該包括： 洗滌室洗滌室 貯存室貯存室 滅菌室滅菌室 化學(xué)實驗室或培養(yǎng)基配制室化學(xué)實驗室或培養(yǎng)基配制室 無菌室或接種室無菌室或接種室 培養(yǎng)室培養(yǎng)室 觀察與鑒定室觀察與鑒定室 溫室或苗圃溫室或苗圃 +洗滌室主要對組織培養(yǎng)用的玻璃器皿、塑料器皿和其洗滌室主要對組織培養(yǎng)用的玻璃器皿、塑料器皿和其他實驗用具進(jìn)行清洗。他實驗用具進(jìn)行清洗。

9、+房間要配備自來水管、水池或水槽、工作臺和各種清房間要配備自來水管、水池或水槽、工作臺和各種清洗器具的洗滌試劑，地面要光滑堅硬，要求有很好的洗器具的洗滌試劑，地面要光滑堅硬，要求有很好的排水設(shè)施。排水設(shè)施。+為了保證玻璃器皿的潔凈干燥，還需要電熱鼓風(fēng)干燥為了保證玻璃器皿的潔凈干燥，還需要電熱鼓風(fēng)干燥箱箱( (烘箱烘箱) ) 。+ 貯存室用以對各類器皿和用具的存放和保管。貯存室用以對各類器皿和用具的存放和保管。+植物組織培養(yǎng)需要較多的玻璃器皿，而且生產(chǎn)中使用植物組織培養(yǎng)需要較多的玻璃器皿，而且生產(chǎn)中使用數(shù)量有一定的周期性，宜用專門房間和專門貨架、貨數(shù)量有一定的周期性，宜用專門房間和專門貨架、貨柜

10、等貯存，以免破損、臟污。柜等貯存，以免破損、臟污。+化學(xué)實驗室主要用來完成培養(yǎng)基配制的各個環(huán)節(jié)的工作，如化學(xué)實驗室主要用來完成培養(yǎng)基配制的各個環(huán)節(jié)的工作，如藥品的稱量、溶解、培養(yǎng)基的配制和分裝等。藥品的稱量、溶解、培養(yǎng)基的配制和分裝等。+要有較大的平面工作臺或?qū)嶒炁_，低溫冰箱或冰柜，各種櫥要有較大的平面工作臺或?qū)嶒炁_，低溫冰箱或冰柜，各種櫥架、藥品柜及化學(xué)藥品，各種型號玻璃器皿或其他器皿，各架、藥品柜及化學(xué)藥品，各種型號玻璃器皿或其他器皿，各種型號的天平和稱量器具，酸度計和攪拌器，蒸餾水器、離種型號的天平和稱量器具，酸度計和攪拌器，蒸餾水器、離子交換系統(tǒng)或其他過濾滲透系統(tǒng)。子交換系統(tǒng)或其他過濾

11、滲透系統(tǒng)。 + 滅菌室用于對培養(yǎng)基、玻璃器皿及接種工具的滅菌。滅菌室用于對培養(yǎng)基、玻璃器皿及接種工具的滅菌。+一般采用醫(yī)用或微生物研究用的一般采用醫(yī)用或微生物研究用的手提式高壓蒸汽滅菌鍋手提式高壓蒸汽滅菌鍋，或大型的立式、臥式高壓滅菌鍋。滅菌室室內(nèi)應(yīng)裝備，或大型的立式、臥式高壓滅菌鍋。滅菌室室內(nèi)應(yīng)裝備水、電、煤氣等有關(guān)設(shè)備，墻壁宜防潮濕、耐高溫。另水、電、煤氣等有關(guān)設(shè)備，墻壁宜防潮濕、耐高溫。另要配備鐘表和計時器。要配備鐘表和計時器。 +接種室應(yīng)該保證潔凈、無菌。接種室應(yīng)該保證潔凈、無菌。+目前多用目前多用超凈工作臺超凈工作臺來代替這種要求嚴(yán)格的接種室。除超來代替這種要求嚴(yán)格的接種室。除超凈工

12、作臺外，應(yīng)配備接種用的酒精燈、各種醫(yī)用鑷子、解凈工作臺外，應(yīng)配備接種用的酒精燈、各種醫(yī)用鑷子、解剖刀、手術(shù)刀、接種針、貯藏剖刀、手術(shù)刀、接種針、貯藏7070酒精棉球的廣口瓶、試酒精棉球的廣口瓶、試管架和載物臺等工具。管架和載物臺等工具。+培養(yǎng)室用于對植物組織器官、細(xì)胞或原生質(zhì)體等外植體開始培養(yǎng)室用于對植物組織器官、細(xì)胞或原生質(zhì)體等外植體開始的各階段的培養(yǎng)，以及各種形式和方法的培養(yǎng)。的各階段的培養(yǎng)，以及各種形式和方法的培養(yǎng)。+為了達(dá)到培養(yǎng)所需的各種光照、溫度、濕度、空氣等條件，為了達(dá)到培養(yǎng)所需的各種光照、溫度、濕度、空氣等條件，要在培養(yǎng)室裝有監(jiān)測這些條件因子的儀器，如溫度計、濕度要在培養(yǎng)室裝有監(jiān)

13、測這些條件因子的儀器，如溫度計、濕度計、照度計或自動監(jiān)測記錄溫度、濕度的裝置等。計、照度計或自動監(jiān)測記錄溫度、濕度的裝置等。+一般要用自動控溫的空調(diào)、加熱器、制冷機、電爐等。一般要用自動控溫的空調(diào)、加熱器、制冷機、電爐等。 +由于培養(yǎng)材料與方法的不同，還須配置各種搖床、轉(zhuǎn)床等特由于培養(yǎng)材料與方法的不同，還須配置各種搖床、轉(zhuǎn)床等特殊設(shè)備。殊設(shè)備。 +觀察室用來對培養(yǎng)材料及培養(yǎng)后結(jié)果的觀察、鑒定、記錄和觀察室用來對培養(yǎng)材料及培養(yǎng)后結(jié)果的觀察、鑒定、記錄和分析。分析。+一般要配置高倍顯微鏡、倒置顯微鏡、實體顯微鏡、恒溫箱一般要配置高倍顯微鏡、倒置顯微鏡、實體顯微鏡、恒溫箱、切片機、烤片臺、恒溫水浴、

14、滴瓶、載玻片、蓋玻片等制、切片機、烤片臺、恒溫水浴、滴瓶、載玻片、蓋玻片等制片觀察設(shè)備；還要配置記錄本、繪圖及照相或錄像設(shè)備，用片觀察設(shè)備；還要配置記錄本、繪圖及照相或錄像設(shè)備，用以記錄觀察結(jié)果。以記錄觀察結(jié)果。+如果是研究性實驗室，還要配備更多的儀器，用以細(xì)胞學(xué)方如果是研究性實驗室，還要配備更多的儀器，用以細(xì)胞學(xué)方面的研究；同時應(yīng)同時有攝影室或暗室，進(jìn)行攝影、顯影、面的研究；同時應(yīng)同時有攝影室或暗室，進(jìn)行攝影、顯影、印像、放大等操作。印像、放大等操作。+溫室用來對培養(yǎng)的再生植株的馴化和移栽。溫室用來對培養(yǎng)的再生植株的馴化和移栽。+溫室對于從培養(yǎng)室或?qū)嶒炇遗囵B(yǎng)后的試管苗仍不能作為溫室對于從培養(yǎng)

15、室或?qū)嶒炇遗囵B(yǎng)后的試管苗仍不能作為成品苗出售的生產(chǎn)性實驗室是必要的。溫室或苗圃除應(yīng)成品苗出售的生產(chǎn)性實驗室是必要的。溫室或苗圃除應(yīng)配備有一定的供水設(shè)施外，還要有彌霧裝置、蔭蓬、移配備有一定的供水設(shè)施外，還要有彌霧裝置、蔭蓬、移植床、缽、盆、塑料布、草炭、蛭石、粗沙及其他一些植床、缽、盆、塑料布、草炭、蛭石、粗沙及其他一些移栽及管理設(shè)備。移栽及管理設(shè)備。（一）、基本設(shè)備配置1、常規(guī)設(shè)備1）天平 2）冰箱3）酸度計 4）離心機5）加熱器 6）其它：純水器、分裝設(shè)備三、儀器設(shè)備和器皿用具2、滅菌設(shè)備1）高壓滅菌鍋2）干熱消毒柜3）過濾滅菌器3、無菌操作設(shè)備1）接種箱2）凈化工作臺4、培養(yǎng)設(shè)備1）培養(yǎng)架2）培養(yǎng)箱3）搖床4）生物反應(yīng)器5、其