醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)講稿-閾刺激、閾上刺激和最大刺激 骨骼肌的單收縮和強(qiáng)直收縮

1、生理學(xué)實(shí)驗(yàn)講稿實(shí)驗(yàn)一閾刺激、閾上刺激和最大刺激骨骼肌的單收縮和強(qiáng)直收縮Threshold,Suprathreshold and Maximal StimulusSingle Twitch and Tetanus of Skeletal Muscle 前 言1.應(yīng)穿工作服。2.保持環(huán)境的安靜，以免動物受驚嚇激怒而咬人3.捉拿動物后切記將蓋蓋好，以免動物逃跑，咬傷人或其它物品(如電源線）4.未經(jīng)老師同意不許使用電腦，不許隨意開啟電腦，更不許添加或刪除程序。一經(jīng)發(fā)現(xiàn)將嚴(yán)肅處理。5.每個(gè)實(shí)驗(yàn)小組，排一名代表到509室領(lǐng)取實(shí)驗(yàn)物品，當(dāng)面清點(diǎn).如有誤，及時(shí)更正。實(shí)驗(yàn)結(jié)束清洗干凈實(shí)驗(yàn)物品后到領(lǐng)取物處還取實(shí)驗(yàn)

2、物品。6.班長或?qū)W習(xí)委員安排值日生，經(jīng)老師驗(yàn)收簽字后方可離去。 7.垃圾口分別在走廊東西頭北墻（鐵蓋）處。8.實(shí)驗(yàn)報(bào)告應(yīng)在下次實(shí)驗(yàn)前由學(xué)習(xí)委員收齊后交給實(shí)驗(yàn)老師。實(shí)驗(yàn)一閾刺激、閾上刺激和最大刺激骨骼肌的單收縮和強(qiáng)直收縮Threshold,Suprathreshold and Maximal StimulusSingle Twitch and Tetanus of Skeletal Muscle 目的要求掌握閾刺激、閾上刺激和最大刺激的概念觀察刺激頻率和肌肉收縮反應(yīng)之間的關(guān)系了解強(qiáng)直收縮的形成過程基本原理 對于多細(xì)胞 的組織來說，在一定范圍內(nèi)，刺激與反應(yīng)之間表現(xiàn)并非“全或無”的關(guān)系。當(dāng)單個(gè)方波電

3、刺激作用于坐骨神經(jīng)或腓腸肌時(shí)，如果刺激強(qiáng)度太小，則不能引起肌肉收縮，只有當(dāng)刺激強(qiáng)度達(dá)到閾值時(shí)，才能引起肌肉發(fā)生最微弱的收縮，這時(shí)引起的肌肉收縮稱閾收縮。隨著刺激強(qiáng)度的增加，肌肉收縮幅度也相應(yīng)增大，這種刺激強(qiáng)度超過閾值的刺激稱為閾上刺激。再繼續(xù)增大刺激強(qiáng)度，肌肉的收縮幅度不再增大。 單收縮全過程可分為潛伏期、收縮期和舒張期。當(dāng)給肌肉連續(xù)的脈沖刺激時(shí)，如果后一個(gè)刺激落在前一次收縮的舒張期內(nèi)，每次新的收縮都出現(xiàn)在產(chǎn)次收縮的舒張過程中，收縮過程呈現(xiàn)鋸齒狀，此收縮稱為不完全強(qiáng)直收縮。當(dāng)刺激頻率繼續(xù)增加時(shí)，后一個(gè)刺激落在前一次收縮的收縮期內(nèi)，肌肉則處于完全的持續(xù)收縮狀態(tài)，看不出舒張的痕跡，此收縮稱為完全強(qiáng)

4、直收縮。實(shí)驗(yàn)器材蛙類手術(shù)器械，鐵架臺，雙凹夾，鋅銅弓，張力換能器，刺激器線、任氏液生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、手術(shù)器械實(shí)驗(yàn)方法動物手術(shù)觀察項(xiàng)目微機(jī)操作手術(shù)過程1.領(lǐng)取蟾蜍。2.破壞腦和脊髓3.后肢皮膚剝除4.分離腓腸肌，結(jié)扎并在遠(yuǎn)端剪斷跟腱5.分離坐骨神經(jīng)6.連接生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目觀察閾刺激、最大刺激值觀察單收縮、不完全強(qiáng)直收縮及完全強(qiáng)直收縮的形式實(shí)驗(yàn)二 期前收縮和代償間歇、蛙心起搏點(diǎn)的分析Analysis of Heart Pacemaker,Premature Systole and Compensatory Pause in Frog目的要求通過在心臟活動不同時(shí)期給予刺激，以驗(yàn)證心肌在興奮過

5、程中興奮周期性變化的特征。采用斯氏結(jié)扎法觀察蛙心起搏點(diǎn)，并分析心臟興奮傳導(dǎo)順序基本原理1.心臟特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)具有自律性，不同部位的自律組織自律性不同。正常心臟興奮傳導(dǎo)由竇房結(jié)開始，經(jīng)心肌特殊傳導(dǎo)組織相繼引起心房、心室的興奮和收縮。哺乳類動物的心臟起搏點(diǎn)是竇房結(jié)，兩棲類動物的心臟起搏點(diǎn)是靜脈竇。2.心肌在興奮時(shí)，興奮性可發(fā)生周期性的改變。蛙心興奮性的特點(diǎn)是有效不應(yīng)期很長，相當(dāng)于整個(gè)收縮期或舒張?jiān)缙?，在此期間任何強(qiáng)大的刺激均不能引起心肌的興奮和收縮。但在舒張?jiān)缙谥?，即在相對不?yīng)期，一次較強(qiáng)的刺激可在正常竇房結(jié)興奮到達(dá)之前產(chǎn)生一次提前出現(xiàn)的興奮和收縮，稱之為期前興奮和期前收縮。而期前興奮也有不應(yīng)期，

6、因此，一次正常的竇房結(jié)興奮到時(shí)正好落在期前興奮的有效不應(yīng)期內(nèi)，則不能引起心肌興奮和收縮，會出現(xiàn)一個(gè)較長的舒張期，稱為代償間歇。 實(shí)驗(yàn)對象：蟾 蜍實(shí)驗(yàn)器材1.蛙類手術(shù)器械，絲線，鐵架臺，雙凹夾，張力換能器，刺激器線，任氏液2.生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)方法1.動物手術(shù)2.觀察項(xiàng)目3.微機(jī)操作手術(shù)過程11.領(lǐng)取蟾蜍2.破壞腦和脊髓3.暴露心臟4.將蛙心夾夾住心尖，并與張力換能器和刺激器相連5.觀察期前收縮和代償間歇。手術(shù)過程21.領(lǐng)取蟾蜍2.破壞腦和脊髓3.暴露心臟4.識別心臟各結(jié)構(gòu)，觀察心臟靜脈竇、心房和心室的活動順序及各部位的速率 5.進(jìn)行斯氏結(jié)扎并觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果蛙心解剖位置前面觀蛙心解剖位置后面觀1

7、.在靜脈竇和心房交界處的竇房溝出結(jié)扎，阻斷靜脈竇和心房之間的傳導(dǎo)。觀察蛙心各部博動的變化，并記錄。2.在上述步驟完成后，在心房和心室間的房室溝處進(jìn)行第二次結(jié)扎，觀察結(jié)扎后蛙心各部搏動的變化，并記錄。注意事項(xiàng)1.使用蛙心夾時(shí),盡量少夾一些。在蛙心舒張期時(shí)夾蛙心夾2.在和張力換能器相連時(shí)，用力不宜過大，以免損傷應(yīng)變片實(shí)驗(yàn)三家兔呼吸運(yùn)動的調(diào)節(jié)(各種因素對呼吸運(yùn)動的調(diào)節(jié))Regulation of Respiration目的要求學(xué)習(xí)測定家兔呼吸運(yùn)動的方法觀察并分析影響呼吸運(yùn)動的各種因素觀察兔呼吸運(yùn)動過程中胸膜腔內(nèi)壓的變化規(guī)律基本原理 正常節(jié)律性的呼吸運(yùn)動是中樞節(jié)律性活動的反映，是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)參與下，

8、通過多種傳入沖動的作用，反射性調(diào)節(jié)呼吸的頻率和深度來完成的。其中較為重要的調(diào)節(jié)活動有呼吸中樞的直接調(diào)節(jié)和肺牽張反射等的反射性調(diào)節(jié)。因此，體內(nèi)外各種刺激可以作用中樞或通過不同的感受器反射性地影響呼吸運(yùn)動。 平靜呼吸時(shí)，胸膜腔內(nèi)壓力雖然隨著呼氣和吸氣而升降，隨著呼吸深度的變化而變化，但其數(shù)值始終低于大氣壓力而為負(fù)值，故胸膜腔內(nèi)壓也稱為胸內(nèi)負(fù)壓。實(shí)驗(yàn)對象家兔實(shí)驗(yàn)器材1.手術(shù)器械、兔手術(shù)臺、氣管插管、注射器（20mL、5mL、 1ml ）、長橡皮管、壓力換能器、紗布、手術(shù)線，粗穿刺針頭、20氨基甲酸乙酯溶液、3乳酸溶液、缺氧瓶、CO2瓶、生理鹽水。2.生物信號處理器。實(shí)驗(yàn)方法1.動物手術(shù)2.觀察項(xiàng)目3

9、.微機(jī)操作手術(shù)過程1.領(lǐng)取動物2.稱重3.麻醉、固定4.手術(shù)、分離氣管5.氣管插管并與壓力換能器相連接6.分離兩側(cè)迷走神經(jīng)7.待各項(xiàng)結(jié)果出來后，進(jìn)行胸膜腔穿刺觀察項(xiàng)目1.正常呼吸曲線2.增加無效腔3.連接缺氧瓶4.連接CO2發(fā)生器5.靜脈注射3乳酸6.切斷一側(cè)迷走神經(jīng)7.切斷另一側(cè)迷走神經(jīng)8.觀察胸膜腔內(nèi)壓及在呼吸周期內(nèi)的規(guī)律變化實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)四 影響尿生成的因素(各種因素對尿生成的影響)Affecting Factors of Urine Forming目的要求1.學(xué)習(xí)家兔尿液收集的實(shí)驗(yàn)方法2.觀察某些神經(jīng)、體液因素對尿生成的影響基本原理尿的生成過程包括腎小球?yàn)V過、腎小 管和集合管重吸收及分泌

10、、排泄過程。 腎小球?yàn)V過作用受濾過膜通透性、腎小球有效濾過壓和腎小球血漿流量等因素的影響。腎小管和集合管重吸收受小管液的溶質(zhì)濃度和血液中血管升壓素及腎素血管緊張素醛固酮系統(tǒng)等因素的影響。凡能影響上述各種因素者，均可影響尿的生成實(shí)驗(yàn)對象家兔實(shí)驗(yàn)器材 手術(shù)器械、 兔手術(shù)臺、 紗布、 手術(shù)線、 注射器（20mL、2mL） 、 氣管插管、 膀胱漏斗、速尿、 尿糖試紙、 20氨基甲酸乙酯溶液、 垂體后葉素、 20葡萄糖溶液、 生理鹽水、 1：10000去甲腎上腺素。實(shí)驗(yàn)方法1.動物手術(shù)2.觀察項(xiàng)目手術(shù)過程1.領(lǐng)取動物2.稱重3.麻醉、固定4.手術(shù)、分離氣管5.腹部手術(shù)6.插膀胱漏斗觀察項(xiàng)目1.記錄基礎(chǔ)尿

11、量（滴/分）2.注射生理鹽水（37 、20ml）3.注射20葡萄糖5ml4.注射甘露醇（2ml/kg體重）5.注射速尿（5mg/kg體重）6.注射垂體后葉素（25U）7.注射去甲腎上腺素（1：10000、0.5ml）病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)講稿實(shí)驗(yàn)五水腫（影響血管內(nèi)外液體交換的因素及實(shí)驗(yàn)性水腫）實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)蟾蜍灌流標(biāo)本制備和復(fù)制蟾蜍水腫模型的方法觀察灌注液滲透壓、微血管壁通透性及淋巴回流等因素在水腫發(fā)生中的作用實(shí)驗(yàn)原理1.采用結(jié)扎動物軀干（阻斷淺表淋巴及靜脈回流）2.靜脈滴注中分子右旋糖酐（改變血漿膠體滲透壓）3.靜脈滴注組胺（增加毛細(xì)血管通透性）4.以體循環(huán)灌注量和流出量的差值為指標(biāo)，判定血管內(nèi)外液體

12、交換平衡與組織液生成情況。實(shí)驗(yàn)動物牛蛙或蟾蜍實(shí)驗(yàn)器材蛙類手術(shù)器戒一套、1%肝素林格液、0.1%組胺林格液、中分子右旋糖酐液、林格液。實(shí)驗(yàn)步驟一. 安裝蟾蜍動、靜脈灌流裝置 將3套10ml輸液器掛在輸液架上，灌流杯距蟾蜍約30cm。向輸液器中分別加入10ml的0.1%組胺林格液、中分子右旋糖酐液、林格液，依次打開調(diào)節(jié)器驅(qū)盡麥菲管以下部分的氣泡，最后以林格液充滿輸液管道和動脈插管，旋緊調(diào)節(jié)器備用。二.蟾蜍體循環(huán)灌流系統(tǒng)的制備 1.毀髓 2.固定，開胸3.插動脈插管4.插排液管三.灌流1.在蟾蜍背部穿過一根絲線，結(jié)扎軀干，灌入林格液8ml,記錄出入。2.關(guān)閉林格液，灌入中分子右旋糖苷8ml,記錄出入

13、。3.關(guān)閉中分子，灌入組胺液2ml，關(guān)閉。再灌入林格液8ml，記錄出入。 注意事項(xiàng)1.結(jié)扎左主動脈前要先肝素化，心室收縮時(shí)注射1%肝素0.2ml，防止血液凝固。2.安裝灌流裝置時(shí)，要使麥菲管以下全部充滿林格液，不能留有氣體。操作步驟 安裝灌流裝置（以林格液充滿輸液管道和動脈插管） 毀髓 固定開胸 分離左主動脈穿線2條 ，注射1%肝素0.2ml ，動脈插管（結(jié)扎近心，插管向遠(yuǎn)心） 滴注林格液10滴/分 ， 插入排液導(dǎo)管 ， 灌流（包括結(jié)扎軀干后灌入林格液8ml;灌入中分子右旋液8ml;灌入組胺液2ml、再灌入林格液8ml，每次均記錄出入。實(shí)驗(yàn)六缺 氧(實(shí)驗(yàn)性缺氧及影響機(jī)體缺氧耐受性因素）實(shí)驗(yàn)原理

14、1.通過腹腔注射中樞興奮劑（可拉明）和抑制劑（烏拉坦）改變中樞神經(jīng)活動狀態(tài)。加一新生小鼠，以存活時(shí)間為指標(biāo)，觀察小鼠對缺氧的耐受性2.在高濃度co環(huán)境下，促使動物體內(nèi)形成大量HbCO，導(dǎo)致血液性缺氧。3.腹腔注射過量亞硝酸鈉，動物體內(nèi)形成大量高鐵血紅蛋白，引起血液性缺氧。實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.復(fù)制低張性、血液性缺氧的動物模型。2.觀察不同類型缺氧時(shí)呼吸和皮膚粘膜及臟器的顏色變化。實(shí)驗(yàn)器材和試劑缺氧瓶5個(gè)；試管（50ml）1個(gè)；試管夾1個(gè)；酒精燈1個(gè)；一氧化碳連接條1個(gè)；鼠籠1個(gè)；治療盤1個(gè)；1ml注射器4個(gè)；手術(shù)剪1個(gè)；手術(shù)鑷1個(gè)；火柴電子秤+稱重盒（講臺上放，共用）10%烏拉坦【0.1ml/10g】；

15、10%可拉明【0.2ml/10g】；生理鹽水【0.4ml/只】；5%亞硝酸鈉【0.3ml/只】；甲酸；濃硫酸；5ml注射器2個(gè)（講臺上放）實(shí)驗(yàn)動物小白鼠8只；新生鼠1只。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.年齡及中樞神經(jīng)功能狀態(tài)不同對缺氧耐受性的影響2.一氧化碳中毒性缺氧3.亞硝酸鹽中毒性缺氧4.不同類型缺氧時(shí)血液及臟器顏色比較 5.年齡及中樞神經(jīng)功能狀態(tài)不同對缺氧耐受性的影響；稱重后腹腔注射。實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果10%烏拉坦10%可拉明生理鹽水新生小鼠呼吸變化    皮膚顏色    活動變化    死

16、亡時(shí)間    一氧化碳中毒性缺氧 將小白鼠放入廣口瓶,觀察皮膚及黏膜顏色后與氣體發(fā)生器相連； 取甲酸3ml+濃硫酸1ml，生成一氧化碳；觀察小白鼠皮膚及黏膜顏色,直至死亡。實(shí)驗(yàn)結(jié)果  CO中毒前 CO中毒早期 CO深度中毒呼吸變化   皮膚顏色  活動變化   死亡時(shí)間    亞硝酸鹽中毒性缺氧1.取1只小鼠，觀察皮膚顏色后，腹腔注射，5%亞硝酸鹽0.3ml。2.觀察注射藥物后鼠的呼吸及皮膚顏色變化。3.記錄小鼠的死亡時(shí)間不同類型缺氧時(shí)

17、血液及臟器顏色比較1.拉頸椎處死正常小白鼠1只。2.剪開以上死亡小白鼠（低張性缺氧小鼠、CO中毒性缺氧小鼠、亞硝酸鹽中毒性缺氧小鼠)胸、腹腔，觀察血液及內(nèi)臟的顏色，并與正常小鼠進(jìn)行比較。注意事項(xiàng)1.注射藥量要準(zhǔn)確，腹腔注射選左側(cè)，以免損壞肝臟。2.缺氧裝置瓶塞要密閉。3.制備CO，切記向試管中先加甲酸，后加硫酸。 預(yù)習(xí)下次內(nèi)容 清點(diǎn)器材準(zhǔn)備操作實(shí)驗(yàn)七家兔急性右心衰竭 （心血管活動的生理調(diào)節(jié)及實(shí)驗(yàn)性心力衰竭）實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.復(fù)制家兔急性右心衰的動物模型。2.觀察心衰時(shí)的各項(xiàng)生理指標(biāo)（呼吸、血壓、心率 、中心靜脈壓）3.探討家兔急性右心衰的發(fā)病機(jī)制。實(shí)驗(yàn)原理1.注入栓塞劑增加右心后負(fù)荷2.快速輸液增加

18、右心前負(fù)荷實(shí)驗(yàn)動物家兔1只實(shí)驗(yàn)器材手術(shù)器械一套實(shí)驗(yàn)試劑20%烏拉坦【5ml/kg】； 0.1%肝素生理鹽水 ；0.3%肝素生理鹽水【2ml/kg】；生理鹽水 ；液體石蠟【1ml/只】。實(shí)驗(yàn)步驟1.稱重耳緣靜脈注射20%烏拉坦【5ml/Kg】2.檢查麻醉深度3.仰臥位固定，剪毛備皮4.分離氣管、頸總動脈和另一側(cè)頸外靜脈，分別穿線備用，頸部正中甲狀軟骨下方皮膚剪一小口，然后向上下豎直剪開，開口約5-6厘米。鈍性分離頸前肌群。5.耳緣靜脈注射0.3%肝素溶液【2ml/kg】6.插管 分別進(jìn)行氣管、頸總動脈和頸外靜脈插管。氣管插管，頸總動脈插管先結(jié)扎頸總動脈的遠(yuǎn)心端。然后用動脈夾夾住動脈的近心端，在其

19、間靠遠(yuǎn)心端處剪V形口，向近心端插入動脈插管。結(jié)扎固定。記錄血壓變化，另一側(cè)頸外靜脈插管，結(jié)扎頸外靜脈的遠(yuǎn)心端，剪口，向心臟方向插入靜脈導(dǎo)管，結(jié)扎固定，以10滴分的速度緩慢輸液。記錄中心靜脈壓。7.記錄心衰前生理指標(biāo)：用濕紗布覆蓋頸部切口，讓動物穩(wěn)定5分鐘，記錄心衰前生理指標(biāo)：呼吸（次/min）；心率（次/min）； 血壓 （mmHg）；中心靜脈壓（cmH2O）。 8.靜脈注入液體石蠟從耳緣靜脈緩慢注入液體石蠟【1ml/只；0.1ml/分鐘】，大約10分鐘才能注射完。同時(shí)密切觀察血壓和中心靜脈壓，如果血壓和中心靜脈壓改變后又恢復(fù)到正常水平時(shí)，可再緩慢注入液體石蠟，直至石蠟注射完或血壓下降10-2

20、0 mmHg，或中心靜脈壓明顯升高并穩(wěn)定為止。液體石蠟輸入總量不得超過0.5ml/Kg。記錄靜脈注入液體石蠟后呼吸、心率、血壓、中心靜脈壓等指標(biāo)。9.靜脈快速輸液：5分鐘后，從靜脈插管快速輸入生理鹽水【5ml/Kg/分鐘】，同時(shí)記錄下列實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：呼吸、心率、血壓、中心靜脈壓。每增加25ml/kg輸液量（相當(dāng)于每5分鐘一次），記錄各項(xiàng)指標(biāo)，直至死亡。10.動物解剖觀察動物死亡后用手?jǐn)D壓胸壁，觀察氣管插管內(nèi)有無分泌物溢出。 打開胸、腹腔，觀察有無胸、腹水，記錄胸、腹水水量；觀察心臟各腔的體積。 觀察肝、脾等腹腔臟器有無水腫。實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)前注射石蠟后快速輸液后收縮壓  

21、; 舒張壓   中心靜脈壓   呼吸頻率   心率   BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)需要掌握的是:1.主菜單:輸入實(shí)驗(yàn)人員名單，定標(biāo)調(diào)零2.輸入信號：四個(gè)通道的生物信號的選擇3.實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的選擇4.實(shí)驗(yàn)標(biāo)記：實(shí)驗(yàn)標(biāo)記的編輯5.刺激器：刺激器參數(shù)的設(shè)置實(shí)驗(yàn)步驟稱重-麻醉-固定-頸部備皮-分離氣管(穿一根線)、頸總動脈及頸外靜脈(分別穿兩根線)-耳緣靜脈注射肝素2ml/-氣管插管頸總動脈插管(遠(yuǎn)心端結(jié)扎、近心端夾閉） 另一側(cè)頸外靜脈插管(遠(yuǎn)心端結(jié)扎、近心端夾閉)

22、10滴分輸液 記錄心率、呼吸、血壓、中心靜脈壓 、耳靜脈注射1ml石蠟 ，再次記錄上述指標(biāo) 快速輸液5ml/Kg/分鐘，每增加25ml/kg輸液量測各項(xiàng)指標(biāo)一次,直至動物死亡。 實(shí)驗(yàn)八 家兔失血性休克實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.復(fù)制失血性休克動物模型。2.觀察休克時(shí)的各項(xiàng)生理指標(biāo)（呼吸、血壓、心率等），及搶救后各項(xiàng)指標(biāo)的變化。3.探討失血性休克的發(fā)病機(jī)制。實(shí)驗(yàn)原理1.采用動脈放血的方法，引起組織灌流量急劇減少，重要臟器灌流不足，微循環(huán)障礙。2.通過及時(shí)回輸血液和補(bǔ)液，有效補(bǔ)充血容量，搶救休克。實(shí)驗(yàn)動物家兔1只實(shí)驗(yàn)器材手術(shù)器械一套實(shí)驗(yàn)試劑20%烏拉坦【5ml/kg】；0.1%肝素生理鹽水 ；1%肝素生理鹽水【1

23、ml/kg】；生理鹽水。實(shí)驗(yàn)步驟1.稱重2. 麻醉耳緣靜脈注射20%烏拉坦【5ml/Kg】，檢查麻醉深度。3.仰臥位固定，剪毛備皮4.分離氣管、一側(cè)的頸總動脈和頸外靜脈，分別穿線備用頸部正中甲狀軟骨下方皮膚剪一小口，然后向上下豎直剪開，開口約5-6厘米。鈍性分離頸前肌群。5.耳緣靜脈注射1%肝素溶液【1ml/kg】6.插管分別進(jìn)行氣管、頸總動脈和頸外靜脈插管。氣管插管在甲狀軟骨下0.5cm處剪一橫切口，再向頭端剪一縱切口，使成形，向肺臟方向插入Y形氣管插管，結(jié)扎，再向插管的側(cè)管上打結(jié)，連接BL-410，描記呼吸。頸總動脈插管先結(jié)扎頸總 動脈的遠(yuǎn)心端。然后用動脈夾夾住動脈的近心端，在其間靠遠(yuǎn)心端

24、處剪V形口，向近心端插入動脈插管。結(jié)扎固定。記錄血壓變化另一側(cè)頸外靜脈插管 結(jié)扎頸外靜脈的遠(yuǎn)心端，剪口，向心臟方向插入靜脈導(dǎo)管，結(jié)扎固定，以10滴分的速度緩慢輸液。記錄中心靜脈壓。7.觀察記錄放血前生理指標(biāo)：觀察記錄內(nèi)容包括：一般狀況、皮膚黏膜的顏色、呼吸、血壓、心率、中心靜脈壓等，并記錄。 8.放血打開三通的側(cè)管，從頸總動脈緩慢放血至一空瓶中【放血量為20mlkg】，維持5分鐘；觀察記錄放血后皮膚黏膜、呼吸、心率、血壓、中心靜脈壓等指標(biāo)的變化。9.搶救將放出的血液快速從靜脈回輸，再輸入與失血量相等的生理鹽水【150滴分】；觀察輸血輸液搶救后動物皮膚黏膜、呼吸、心率、血壓、中心靜脈壓等指標(biāo)的改

25、變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果 放血前放血后5min搶救后收縮壓  舒張壓 Ü脈壓差Ü中心靜脈壓 呼吸幅度  呼吸頻率   心率    藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)講稿實(shí)驗(yàn)九影響藥物作用的因素前 言1.應(yīng)穿工作服。2.保持環(huán)境的安靜，以免動物受驚嚇激怒而咬人3.捉拿動物后切記將蓋蓋好，以免動物逃跑，咬傷人或其它物品(如電源線）4.未經(jīng)老師同意不許使用電腦，不許隨意開啟電腦，更不許添加或刪除程序。一經(jīng)發(fā)現(xiàn)將嚴(yán)肅處理。5.每個(gè)實(shí)驗(yàn)小組，排一名代表到503室領(lǐng)取實(shí)驗(yàn)物品，當(dāng)面清點(diǎn).如有誤

26、，及時(shí)更正。實(shí)驗(yàn)結(jié)束清洗干凈實(shí)驗(yàn)物品后到領(lǐng)取物處還取實(shí)驗(yàn)物品。6.班長或?qū)W習(xí)委員安排值日生，經(jīng)老師驗(yàn)收簽字后方可離去。 7.垃圾口分別在走廊東西頭北墻（鐵蓋）處。8.實(shí)驗(yàn)報(bào)告應(yīng)在下次實(shí)驗(yàn)前由學(xué)習(xí)委員收齊后交給實(shí)驗(yàn)老師。實(shí)驗(yàn)室規(guī)則遵守紀(jì)律，因故外出或早退應(yīng)向老師請假。進(jìn)實(shí)驗(yàn)室必須穿隔離衣。實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)嚴(yán)肅認(rèn)真，不進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的活動。實(shí)驗(yàn)者必須先熟悉儀器使用要點(diǎn)，儀器損壞或失靈，應(yīng)請老師修理或調(diào)換。違章操作致使儀器損壞者，應(yīng)按章賠償。實(shí)驗(yàn)器械，用后洗凈擦干，如數(shù)歸還。若有損壞或遺失，應(yīng)及時(shí)報(bào)告，酌情賠償。愛護(hù)公物，節(jié)約器材、藥品和動物。實(shí)驗(yàn)物品不得擅自帶離實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)結(jié)束，將本組實(shí)驗(yàn)器材和桌凳收拾干

27、凈，將動物尸體及污物投放指定處。實(shí)驗(yàn)室由各組輪流打掃，保持整潔。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)知識（一）實(shí)驗(yàn)動物的標(biāo)記（二）實(shí)驗(yàn)動物（大、小鼠）的捉持和給藥方法（三）實(shí)驗(yàn)動物給藥量的計(jì)算（四）實(shí)驗(yàn)記錄、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的整理和實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫作（五）實(shí)驗(yàn)動物的處死方法1、實(shí)驗(yàn)動物的標(biāo)記 大、小鼠和白色家兔的標(biāo)記常用35黃色苦味酸溶液涂于皮毛上標(biāo)號。常用的方法： 1號左前腿 2號左腰部 3號左后腿 4號頭部 5號正中 6號尾根部 7號右前腿 8號右腰部 9號右后腿 10號不標(biāo)記2、小鼠的捉持和給藥方法 ig: 一般給藥量為0.10.3ml/10g。 H: 一般給藥量為0.050.2ml/10g。 ip: 一般給藥量為0.

28、10.3ml/10g。 im: 一般每腿不超過0.1ml。 iv(尾靜脈）：一般給藥量為0.10.2ml/10g。2、大鼠的捉持和給藥方法 實(shí)驗(yàn)動物的給藥劑量一般按mg/kg(有時(shí)也用g/kg)。為了方便，大鼠和豚鼠可按每100g計(jì)算,小鼠可按每10g計(jì)算。那么，給藥劑量=藥物濃度×給藥體積。例：小白鼠體重22g，ip鹽酸嗎啡10mg/kg，藥物濃度0.1%，應(yīng)注射多少？計(jì)算方法：0.1%=0.1g/100ml=100mg/100ml=1mg/ml10mg/kg10ml/kg22g0.022kg10ml/kg×0.022kg=0.22ml或：10ml/kg0.1ml/10g

29、給藥量：0.1ml/10g×(2.2×10g)小鼠體重 =0.22ml3、實(shí)驗(yàn)記錄的內(nèi)容和實(shí)驗(yàn)報(bào)告的整理實(shí)驗(yàn)記錄一般應(yīng)包括：（1）時(shí)間、天氣、溫度（2）實(shí)驗(yàn)標(biāo)本：如動物的種類、體重、標(biāo)記和標(biāo)號等。（3）實(shí)驗(yàn)藥物：如藥物的來源、批號、劑型、濃度、劑量及給藥途徑等。（4）實(shí)驗(yàn)進(jìn)程、步驟及方法的詳細(xì)記錄。（5）觀測指標(biāo)的變化或原始描記圖紙的資料。 每次實(shí)驗(yàn)必須隨時(shí)做記錄。告一段落后對所獲結(jié)果進(jìn)行整理，畫出必要的表格進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析做出結(jié)論。實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫作實(shí)驗(yàn)報(bào)告一般應(yīng)包括：實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)材料包括儀器、藥品和動物。實(shí)驗(yàn)方法簡明扼要的敘述，關(guān)鍵步驟寫清。實(shí)驗(yàn)結(jié)果 根據(jù)實(shí)驗(yàn)獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行整

30、理、歸納、分析和對比。討論包括對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析、思考題的探討、實(shí)驗(yàn)方法及實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)異?，F(xiàn)象的分析、認(rèn)識、體會和建議等。結(jié)論實(shí)驗(yàn)動物的處死 1、頸椎脫臼法 2、空氣栓塞法 3、擊打法 4、斷頭法1、頸椎脫臼法 此法常用于小鼠。用左手拇指、食指或鑷子用力壓住小鼠的后頭部，同時(shí)用右手抓住鼠尾用力向后上方牽拉，使之頸椎脫臼，鼠立即死亡。2、空氣栓塞法 此法常用于家兔的處死。用注射器將空氣快速注入靜脈，可使動物立即死亡。3、擊打法 適用于較小的動物，如家兔、大鼠和小鼠等。提起動物的尾部，用力敲擊動物頭部，或用要木錘打擊頭部，致使動物死亡。4、斷頭法 此法適用于蛙、蟾蜍、小鼠和大鼠。用剪刀將動物頭部剪斷，

31、由于脊髓分離且大量出血，動物很快死亡。二、藥理學(xué)總論實(shí)驗(yàn)（一）藥物劑量對藥物作用的影響（二）給藥途徑對藥物作用的影響（三）藥物的拮抗作用 藥物劑量對藥物作用的影響實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解藥物劑量與藥物作用的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)材料 小白鼠、鼠籠、注射器及針頭、小燒杯、 0.05 %、0.4%和1 %的戊巴比妥鈉溶液。實(shí)驗(yàn)方法 取小鼠3只，分別標(biāo)記，稱重，觀察其一般活動狀態(tài)和痛覺反應(yīng)。然后分別ip不同濃度的戊巴比妥鈉溶液，1號鼠5mg /kg; 2號鼠40mg/kg；3號鼠100mg /kg。給藥體積均為0.1ml/10g。隨時(shí)觀察各鼠的反應(yīng)，注意其不同點(diǎn)。 給藥途徑對藥物作用的影響實(shí)驗(yàn)?zāi)康?比較硫酸鎂口服給藥和注

32、射給藥的不同藥理作用。實(shí)驗(yàn)材料 小白鼠、鼠籠、注射器及針頭、小鼠灌胃針頭、小燒杯、10%硫酸鎂溶液等。實(shí)驗(yàn)方法 取小鼠2只，標(biāo)記，稱重。觀察小鼠的一般活動情況。1號鼠im 10% 硫酸鎂溶液0.1ml/10g; 2 號鼠灌胃給10%硫酸鎂溶液0.1ml/10g。觀察兩只小鼠給藥后行為活動等有何變化，并記錄之。(三)、藥物的拮抗作用【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹坑^察藥物的拮抗作用【實(shí)驗(yàn)材料】小白鼠、鼠籠、小鼠灌胃器、1ml注射器、10硫酸鎂溶液、10氯化鈣溶液等。實(shí)驗(yàn)方法 取小鼠2只，于腹腔內(nèi)注射10硫酸鎂溶液0.1ml/10g后，其中1號小鼠立即腹腔內(nèi)再注射5氯化鈣溶液0.08ml/10g，2號小鼠不注射氯化鈣

33、溶液。觀察兩只小鼠給藥后行為活動等有何變化，并記錄之。鼠號 體重 藥物及劑量 給藥途徑 動物反應(yīng) ( g ) (mg/kg) 1 2 3實(shí)驗(yàn)十 藥物對家兔離體腸平滑肌的作用實(shí)驗(yàn)前的預(yù)習(xí)要求 :1.乙酰膽堿、阿托品和氯化鋇對平滑肌的藥理作用及作用機(jī)制。2.家兔的解剖知識。實(shí)驗(yàn)?zāi)康?觀察藥物對兔離體腸平滑肌的作用。實(shí)驗(yàn)材料一、處理動物1.取家兔一只，用木捶擊其枕骨部處死。2.開腹，找到十二指腸3.找回盲瓣，剪取回腸4.置盛有臺氏液的培養(yǎng)皿中，分離腸系膜。動作輕柔，避免牽拉腸管；用臺氏液沖凈腸管，剪成1cm小段備用。5.取制備腸管一段，同側(cè)兩端穿線打筘（小筘直徑2mm）。二、介紹恒溫平滑肌槽。1.

34、將儀器右側(cè)面的排液口和排水口關(guān)閉。2.在儀器內(nèi)加入清水，到達(dá)水位線刻度。3.將臺式營養(yǎng)液加入預(yù)熱藥筒中約100ml。4.接通電源，按下開關(guān)。5.按下自動加液按鈕讓其自流到實(shí)驗(yàn)藥筒約10ml。6.按下溫度設(shè)定旋鈕，調(diào)節(jié)設(shè)定熱度38三、開始實(shí)驗(yàn)恒溫平滑肌槽、離體腸管、電腦BL-420系統(tǒng)1.通氣鉤掛好腸管，沒入實(shí)驗(yàn)藥筒營養(yǎng)液中，調(diào)節(jié)通氣。2.調(diào)節(jié)儀器前板的氣量調(diào)節(jié)旋鈕及側(cè)面板的氣量微調(diào)旋鈕，放氣12個(gè)/秒。3.待腸管穩(wěn)定10分鐘左右，描記一段正常收縮曲線， 加入1:10萬乙酰膽堿0.2ml(2g)，標(biāo)記，觀察、記錄收縮曲線。4.待收縮達(dá)最高點(diǎn)時(shí)， 加入0.1%硫酸阿托品0.1ml,標(biāo)記，觀察、記錄

35、收縮曲線。5.待收縮曲線穩(wěn)定后，再加入1:10萬乙酰膽堿0.2ml(2g),觀察并紀(jì)錄收縮幅度，與結(jié)果相比較6.用臺氏液換洗3次，加入1% 氯化鋇溶液1ml，掃描圖形 7.待作用至最高點(diǎn)時(shí)，加入0.1% 硫酸阿托品溶液0.1ml， 8.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，按下排液閥，排出實(shí)驗(yàn)藥筒中營養(yǎng)液，將預(yù)熱藥筒中殘留藥液排出。 9.關(guān)閉電源，打開排水口閥門，將儀器中清水排空。 實(shí)驗(yàn)結(jié)束記錄儀器使用登記本歸還實(shí)驗(yàn)器械安排一組打掃衛(wèi)生寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告思考題：乙酰膽堿、阿托品和氯化鋇對腸平滑肌有何影響？四、熟悉BL-420實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)1、打開電腦，點(diǎn)擊桌面中的圖標(biāo)“BL-420”2.點(diǎn)擊輸入信號，點(diǎn)擊1通道，選擇張力?！拜斎胄盘?/p>

36、” 選擇通道從下拉菜單中找所需的項(xiàng)目（如張力、動作電位、腦電、心電、血壓等）啟動開始按鈕“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”從下拉菜單中找所需的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容啟動開始按鈕1、增益：按左鍵增大增益，按右鍵減小增益。根據(jù)波形的大小使調(diào)節(jié)在合適的位置。2、時(shí)間常數(shù)：低頻濾波（高通濾波），作用是衰減生物信號中所帶入的低頻噪聲，而讓高頻信號通過。3、濾波：高頻濾波（低通濾波），作用是衰減生物信號中帶入的高頻噪聲，而讓低頻信號通過。4、掃描速度調(diào)節(jié)：拖動箭頭可調(diào)節(jié)掃描速度的快慢。5.顯示參數(shù)調(diào)節(jié)區(qū) 到下分為5個(gè)區(qū)域:前景色選擇區(qū)、背景色選擇區(qū)、標(biāo)尺格線色選擇區(qū)、標(biāo)尺格線類型選擇區(qū)和監(jiān)聽音量調(diào)節(jié)區(qū)6.編輯實(shí)驗(yàn)標(biāo)記。設(shè)置組標(biāo)打開右下角（B

37、L-420為右上方）的”L”（特殊標(biāo)記編輯對話框）在實(shí)驗(yàn)標(biāo)記組編輯區(qū)下按“添加”按鈕出現(xiàn)“新實(shí)驗(yàn)標(biāo)記組”，在此對話框輸入新實(shí)驗(yàn)組的名稱 。 7.編輯實(shí)驗(yàn)名稱、實(shí)驗(yàn)藥物設(shè)置實(shí)驗(yàn)標(biāo)記從實(shí)驗(yàn)標(biāo)記組列表中找到所進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的組右邊出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)標(biāo)記列表 按“新建”標(biāo)記，填入需加入的實(shí)驗(yàn)標(biāo)記即可。8.實(shí)驗(yàn)結(jié)果的編輯（1）保存 實(shí)驗(yàn)結(jié)束，停止實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)“另存為”對話框 任意輸入文件名（不許與原文件名相同）點(diǎn)擊保存（2）打開 從“文件” 點(diǎn)擊“打開”找到所保存的文件，打開； （3）剪輯 點(diǎn)擊“圖形剪輯”按鈕選取需要的一段波形所選的波形以圖片的形式放在了圖形編輯的頁面拖住鼠標(biāo)將該段圖形拖至適當(dāng)?shù)奈恢?從圖形編輯右邊的工具

38、欄中選“退出” 回到所保存的實(shí)驗(yàn)記錄中（4）編輯編輯所需要的所有的波形，并拼接成一幅完整的圖形。對編輯的頁面，可以進(jìn)行整理，如可用工具欄中的復(fù)制、粘貼、選取及移動、可寫入文字等功能；編輯好的頁面，按“保存”，另起新的文件名保存起來。對編輯好的頁面，打印圖形。按次序打印。實(shí)驗(yàn)十一、 傳出神經(jīng)系統(tǒng)藥物對家兔血壓的影響止血 組織滲血，可用紗布壓迫等方法止血。 較大血管出血，應(yīng)用止血鉗夾住出血點(diǎn)及周圍少許組織，結(jié)扎止血。 肌肉組織出血時(shí)，由于肌肉的血管豐富，要將肌肉組織及出血點(diǎn)一同結(jié)扎。 為避免肌肉組織出血，在分離肌肉時(shí)，如果肌纖維走向與切口一致，應(yīng)鈍性分離。神經(jīng)和血管的分離 神經(jīng)和血管都是易損傷的組

39、織，在分離過程中切不可用有齒鑷子剝離，也不可用止血鉗或鑷子夾持。分離時(shí)，掌握先神經(jīng)后血管，先細(xì)后粗原則。分離完畢后，在神經(jīng)或血管的下方穿一浸透生理鹽水的絲線，供提起或結(jié)扎之用。學(xué)習(xí)麻醉動物急性血壓實(shí)驗(yàn)的方法，觀察傳出神經(jīng)藥物對家兔血壓的影響。實(shí)驗(yàn)材料 家兔、手術(shù)器械、氣管插管、動脈插管、動脈夾、壓力換能器、電腦、注射器、螺旋夾、戊巴比妥鈉溶液、肝素溶液、生理鹽水、腎上腺素溶液、異丙腎上腺素溶液、酚妥拉明溶液等。 取家兔一只，稱重，耳緣靜脈注射20% 的烏拉坦溶液5ml/kg,麻醉后，將動物背位固定于手術(shù)臺上。 剪去頸部的毛，正中切開頸部皮膚，分離氣管。在氣管上做一倒“T”形切口，插入氣管插管，

40、結(jié)扎固定。 找到耳緣靜脈，插入與注射器相連的頭皮靜脈針頭,推注肝素。緩慢連續(xù)推注生理鹽水，以保證其暢通。在氣管一側(cè)的頸動脈鞘內(nèi)分離頸總動脈（并分離與其伴行的迷走神經(jīng)）絲線結(jié)扎遠(yuǎn)心端，用動脈夾夾住近心端在靠近絲線結(jié)扎處剪一V字形切口，插入動脈插管（動脈插管與壓力換能器相連，內(nèi)充滿肝素溶液），結(jié)扎固定。然后松開動脈夾 打開電腦，點(diǎn)擊桌面上的BL-420圖標(biāo)，記錄血壓變化，描記一段正常血壓曲線。依次由耳緣靜脈注射藥物，觀察血壓變化。 擬腎上腺素藥物對血壓的影響 腎上腺素 0.15ml/kg 異丙腎上腺素0.15ml/kg 受體阻斷藥對擬腎上腺素藥物作用的影響 酚妥拉明0.1ml/kg 腎上腺素0.15ml/kg 1、本實(shí)驗(yàn)用家兔進(jìn)行，家兔的耐受性較差，且有些反應(yīng)不典型。2、實(shí)驗(yàn)中的劑量是按一般情況進(jìn)行計(jì)算的，必要時(shí)可根據(jù)具體情況適當(dāng)增減。實(shí)驗(yàn)結(jié)果 打印