Bpcl應(yīng)用舉例PPT課件

1、微弱發(fā)光測(cè)量?jī)x器 可以用于各種發(fā)光分析： 超微弱發(fā)光分析 生物發(fā)光分析 自由基、抗氧化劑分析 化學(xué)發(fā)光分析 發(fā)光免疫分析應(yīng)用第1頁(yè)/共38頁(yè)科學(xué)問(wèn)題-樣品設(shè)計(jì)-儀器測(cè)量生物發(fā)光傳感器化學(xué)發(fā)光傳感器電化學(xué)發(fā)光傳感器化學(xué)發(fā)光免疫傳感器生物芯片？發(fā)光檢測(cè)試劑盒第2頁(yè)/共38頁(yè)在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)農(nóng)學(xué)、食品科學(xué)中的應(yīng)用第3頁(yè)/共38頁(yè)P(yáng)MA刺激巨嗜細(xì)胞不僅產(chǎn)生活性氧還有NO第二峰來(lái)自 NO 比第一峰晚出現(xiàn)幾分鐘第4頁(yè)/共38頁(yè)Cytochrome c (細(xì)胞色素 c)對(duì)線粒體中超氧陰離子和過(guò)氧化氫的生成和清除作用過(guò)氧化氫： luminol 加 horseradish peroxidase 誘發(fā)的化學(xué)發(fā)光超氧

2、陰離子：lucigenin 誘發(fā)的化學(xué)發(fā)光以heart muscle preparation（HMP）為材料測(cè)量結(jié)果如下： 不含細(xì)胞色素c超氧陰離子和過(guò)氧化氫的產(chǎn)量提高7-8倍 再加入細(xì)胞色素c則超氧陰離子和過(guò)氧化氫的產(chǎn)量恢復(fù)至低水平J.B.C 生物物理所 徐建興 第5頁(yè)/共38頁(yè)茶多酚對(duì)于羥自由基（OH）引起的DNA損傷發(fā)光有抑制作用0150300450600750900012345Non-DNADNA0.125g/ml0.25g/ml0.5g/ml1.0g/ml2.0g/ml隨著茶多酚濃度增加DNA損傷發(fā)光逐漸減弱第6頁(yè)/共38頁(yè)抗氧化劑對(duì)DNA損傷發(fā)光動(dòng)力學(xué)影響 分三種類型發(fā)光峰降低發(fā)光

3、峰后移發(fā)光峰降低又后移第7頁(yè)/共38頁(yè)雙環(huán)醇對(duì)刀豆蛋白A所致小鼠肝細(xì)胞核DNA損傷的保護(hù)作用醫(yī)科院藥物所 劉耕陶 院士 化學(xué)發(fā)光法測(cè)定雙環(huán)醇體內(nèi)給藥對(duì)Con ACon A損傷小鼠肝細(xì)胞核在體外對(duì)CuS04CuS04一鄰啡羅啉一維生素C CHz02Hz02的影響：由圖3 3可以看出，與正常對(duì)照組小鼠相比，注射Con ACon A組小鼠肝細(xì)胞核DNADNA對(duì)該系統(tǒng)損傷的敏感性降低表現(xiàn)為后峰明顯降低，曲線下面積顯著減少。而于注射Con ACon A前預(yù)先分別給予雙環(huán)醇50 mg50 mgkgkg及150 mg150 mgkg 3kg 3次組小鼠肝細(xì)胞核DNADNA對(duì)該體系損傷的敏感性增高，后峰明顯升

4、高，曲線下面積顯著增加。第8頁(yè)/共38頁(yè)葛根多糖對(duì)PC12細(xì)胞增殖的損傷作用 田亞平 教授 301醫(yī)院 用次黃嘌呤一黃嘌呤氧化酶的化學(xué)發(fā)光體系測(cè)定細(xì)胞外液中的SODSOD酶活性。測(cè)定體系總體積為1 ml1 ml，魯米諾濃度為1 16 6 mmolmmolmlml-1-1，黃嘌呤氧化酶5 ml5 ml加入魯米諾中，1 min1 min時(shí)的化學(xué)發(fā)光值為空白，再加入10 ml10 ml不同濃度的多糖，濃度分別為0 0、0 0001001、0 00101、0 01 1、1 10 mg0 mgmlml-1-1 ，避光平衡1 1 minmin，記錄1 rain1 rain時(shí)的化學(xué)發(fā)光值，并計(jì)算抑制率( (

5、溫度保持存3737度）第9頁(yè)/共38頁(yè)光果甘草毛狀根培養(yǎng)過(guò)程中對(duì)活性氧清除能力和總黃酮含量的變化丁家宜 教授 中國(guó)藥科大學(xué) 采用化學(xué)發(fā)光法，分析了光果甘草毛狀根培養(yǎng)過(guò)程中對(duì)3 3種活性氧(ROS(ROS：0 02 2. .、HOHO和H H2 20 02 2) )清除能力的動(dòng)態(tài)變化，并測(cè)定了培養(yǎng)過(guò)程中總黃酮含量的動(dòng)態(tài)變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，毛狀根在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期(20(2028 d)28 d)對(duì) 3 3種ROSROS都有很強(qiáng)的清除能力，在生長(zhǎng)停滯期(29(2940 d)40 d)對(duì)HOHO和H H2 20 02 2的清除能力仍維持較高的水平，而對(duì)0 02 2. .的清除能力隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸下降：總

6、黃酮含量在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期呈現(xiàn)增加的趨勢(shì)，至31 d31 d時(shí)達(dá)到最高含量) )，隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)含量逐漸降低。第10頁(yè)/共38頁(yè)白細(xì)胞呼吸暴發(fā)形態(tài)學(xué)改變及銀杏葉提取物干預(yù)作用（徐州心血管所，醫(yī)科院阜外醫(yī)院）第11頁(yè)/共38頁(yè)微粒子化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定促甲狀腺素敏感性方法的建立與應(yīng)用 王永寧 中國(guó)科學(xué)院理化技術(shù)研究所 Fig 5 Comparison of determination serum TSH between CLEIA and ACS-180 system將北京大學(xué)第三醫(yī)院經(jīng)丫啶酯標(biāo)記的發(fā)光ACS-180系統(tǒng)測(cè)定并確診的105例正常人、25例甲亢患者、及42例甲低患者的血清樣品，用CLEIA

7、法平行檢測(cè)TSH的濃度，結(jié)果完全相符。對(duì)64例用CLEIA法測(cè)定的結(jié)果與丫啶酯標(biāo)記的直接化學(xué)發(fā)光免疫分析（CLIA）測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析的結(jié)果見圖5。相關(guān)方程為Y = - 0.04 1.05 X（Y為CLEIA法測(cè)定的TSH的濃度，X為CLIA法測(cè)定的TSH的濃度）相關(guān)系數(shù)r = 0.98 ,兩種方法具有良好的相關(guān)性。第12頁(yè)/共38頁(yè)微粒子化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定促甲狀腺素敏感性方法的建立與應(yīng)用 王永寧 中國(guó)科學(xué)院理化技術(shù)研究所 圖1 酶促化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)曲線Fig 1 Kinetics curve of enzyme -accelerating chemilumine-scence rea

8、ction a: 50 mIU/L TSH ; b: 25 mIU/L TSH; c: 10 mIU/L TSH.圖4 TSH標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig 4 TSH calibration curve第13頁(yè)/共38頁(yè)J.Agric.Food Chem. 2001,49,2137-2141indoxyl-b b-glucuronide (IBG)特異性檢測(cè)羥自由基及其應(yīng)用于食品水提物羥自由基清除效能第14頁(yè)/共38頁(yè)indoxyl-b b-glucuronide (IBG)特異性檢測(cè)羥自由基及其應(yīng)用于食品水提物羥自由基清除效能Fenton試劑加indoxyl-b b-glucuronide (IBG)in

9、doxyl-b b-glucuronide (IBG)被羥自由基誘導(dǎo)產(chǎn)生超弱發(fā)光，發(fā)光強(qiáng)度可提高2個(gè)數(shù)量級(jí)以上indoxyl-b b-glucuronide (IBG)對(duì)超氧陰離子無(wú)發(fā)光反應(yīng)反應(yīng)體系中加入羥自由基淬滅劑可抑制發(fā)光，發(fā)光的降低程度可用來(lái)檢測(cè)羥自由基的淬滅能力IC50 ( g/mL)：發(fā)光的抑制會(huì)飽和，使發(fā)光量達(dá)到半抑制的自由基淬滅劑濃度為監(jiān)測(cè)指標(biāo)Yuans General Hospital, Taiwan 劉燦榮第15頁(yè)/共38頁(yè)胡柚皮中黃酮類化合物提取及抗氧化性研究浙江大學(xué) 葉興乾 利用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定了這些黃酮類化合物的抗氧化能力，實(shí)驗(yàn)證明胡柚皮中黃酮類化合物作為自由基清除劑存

10、在構(gòu)一效關(guān)系，是一種良好的自由基清除劑。利用胡柚皮黃酮類化合物粗提物較好的抗氧化能力可開發(fā)許多產(chǎn)品，如老年功能性食品、天然化妝品、天然增味劑、天然色素等，而且它在胡柚皮中含量豐富，這對(duì)于胡柚皮的綜合開發(fā)利用是極其有利的。 第16頁(yè)/共38頁(yè)鹽脅迫下綠豆幼苗的超微弱發(fā)光 河北大學(xué) 李光 植物的超微弱發(fā)光與其代謝生理反應(yīng)密切相關(guān)。發(fā)光分析的優(yōu)越在于可以在不損傷和不干擾植物生理反應(yīng)的情況下，較早地了解生物系統(tǒng)內(nèi)部的生化反應(yīng)的狀況，而不必進(jìn)行大量的生化分析。研究方法的改進(jìn)和突破對(duì)于研究植物鹽脅迫機(jī)理有一定的實(shí)際意義和促進(jìn)作用第17頁(yè)/共38頁(yè)杏花開放過(guò)程中超弱發(fā)光和ATP及活性氧含量的變化 山東農(nóng)業(yè)大

11、學(xué) 楊洪強(qiáng) 活性氧是導(dǎo)致UWLUWL產(chǎn)生的重要因素。綜合各花期UWLUWL衰減曲線與ATPATP和呼吸速率的變化，露萼期與露瓣期杏花整體代謝活性較低，所以其UWLUWL也處于一較低的水平，發(fā)光衰減速率低。可見，杏花UWLUWL水平及衰減趨勢(shì)與花體生活力水平有更密切的關(guān)系，其新陳代謝的活躍程度是決定杏花UWLUWL的主要因素。第18頁(yè)/共38頁(yè)楊梅果汁的抗氧化特性研浙江大學(xué)食品科學(xué)系 陳健初不同品種的楊梅汁對(duì)羥自由基的抑制率有較大的差異.同時(shí)可以發(fā)現(xiàn),楊梅汁清除羥自由基的能力與楊梅汁中所含的酚、黃酮及花色苷等生物活性成分存在較一定的相關(guān)性,即酚類、黃酮及花色苷含量較高的楊梅品種其清除羥自由基的能

12、力較強(qiáng). 遲大種的生物活性成分含量最高,其清除羥自由基的能力也最強(qiáng).第19頁(yè)/共38頁(yè)紅景天提取物清除O2和OH的體外實(shí)驗(yàn)研究北京聯(lián)合大學(xué)生物活性物質(zhì)與功能食品北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室我國(guó)衛(wèi)生部1991年批準(zhǔn)紅景天為新食品資源。紅景天具有抗疲勞、抗缺氧、抗輻射、增強(qiáng)免疫力等作用。在Phen-Cu-VC-H2O2 -DNA法的檢測(cè)結(jié)果中，通過(guò)檢測(cè)OH攻擊DNA伴隨DNA氧化降解產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，不僅觀察到紅景天提取物清除OH的作用，而且間接反應(yīng)出紅景天提取物對(duì)DNA的保護(hù)作用。第20頁(yè)/共38頁(yè)番茄中抗氧化色素的提取及其清除羥自由基能力的研究湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生化與發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)室 田云 通過(guò)微弱發(fā)光測(cè)量?jī)x檢測(cè)抗氧

13、化色素清除BF的能力發(fā)現(xiàn)，所提取的抗氧化色素具有較強(qiáng)的清除BF的能力，且其清除BF的能力具有劑量效應(yīng)關(guān)系。這些結(jié)果為我們更合理開發(fā)利用番茄資源提供了很好的依據(jù)。第21頁(yè)/共38頁(yè)草莓愈傷組織的超弱發(fā)光及活性氧代謝變化的研究 中國(guó)林科院亞熱帶林業(yè)研究所 田敏 取初生的不同類型的愈傷組織在相同的條件下測(cè)定它們的超弱發(fā)光強(qiáng)度,發(fā)現(xiàn)1型愈傷組織的發(fā)光值最高, 2型和3型的發(fā)光值相差不大； 通過(guò)對(duì)22和2的測(cè)定,發(fā)現(xiàn)相對(duì)1型愈傷組織來(lái)說(shuō),2和3型愈傷組織具有較高的活性氧水平, 3型愈傷組織22和2的的產(chǎn)生速率分別約是1型愈傷組織的9倍和4倍。在繼代培養(yǎng)基上,1型愈傷組織生長(zhǎng)得較快,2和3型則較緩慢。因此

14、愈傷組織超弱發(fā)光的強(qiáng)度主要與細(xì)胞的分裂增殖及分化活動(dòng)有關(guān),而與活性氧的產(chǎn)生水平無(wú)太大的相關(guān)性。第22頁(yè)/共38頁(yè) 分析生物發(fā)光 監(jiān)測(cè)環(huán)境污染第23頁(yè)/共38頁(yè)應(yīng)用發(fā)光桿菌檢測(cè)京杭運(yùn)河水體污染 杭州大學(xué) 黃純農(nóng)12345678910 11 12 13 1400.10.20.30.40.50.6發(fā)光抑制率采樣點(diǎn)編號(hào)第24頁(yè)/共38頁(yè)納米材料催化化學(xué)發(fā)光法測(cè)定車間廢氣中的丁酮 北京聯(lián)合大學(xué) 周考文 丁酮在納米級(jí)MgOMgO和AlAl2 20 03 3表面都有較強(qiáng)的發(fā)光現(xiàn)象，但在MgOMgO與AlAl2 20 03 3 摩爾比為4:14:1的混合物上有較好的選擇性。分析波長(zhǎng)為440 nm440 nm；

15、測(cè)定溫度為335335左右；載氣流速為145 mL145 mLminmin；方法的檢出限為6.2 mg6.2 mgm m3 3；線性范圍為20201000 1000 mgmgm m3 3 ；相關(guān)系數(shù)為。應(yīng)用本法可快速測(cè)定車間空氣中的丁酮。第25頁(yè)/共38頁(yè)研究植物生理鑒定作物品質(zhì)第26頁(yè)/共38頁(yè)大豆發(fā)芽過(guò)程超弱發(fā)光強(qiáng)度變化發(fā)芽期大豆Lox-1缺失體發(fā)光強(qiáng)度明顯高于正常大豆農(nóng)科院 種質(zhì)所超弱發(fā)光測(cè)量挑選鑒定無(wú)豆腥味大豆原料第27頁(yè)/共38頁(yè)幾種薔薇帶莖葉簇冷凍后幾種薔薇帶莖葉簇冷凍后熒光增強(qiáng)倍率熒光增強(qiáng)倍率1234567890510152025301.玫瑰2.報(bào)春刺玫. 3.木香 4.黃刺玫

16、5.美薔薇6.寬刺薔薇 7.疏花薔薇8.毛葉疏花薔薇眪 9.彎刺薔薇發(fā)光增強(qiáng)倍率植物解凍發(fā)光增強(qiáng)比率與抗寒性能有關(guān) 林業(yè)大學(xué)第28頁(yè)/共38頁(yè)研究發(fā)光分析化學(xué)第29頁(yè)/共38頁(yè)Determination of Sulpiride by Capillary Electrophoresis with End - ColumnElectrogenerated Chemiluminescence Detection 長(zhǎng)春應(yīng)化所 汪爾康Clinical Chemistry 2002第30頁(yè)/共38頁(yè)New technique for capillary electrophoresis directlyc

17、oupledwith end-column electrochemiluminescence detection 長(zhǎng)春應(yīng)化所 汪爾康Electrophoresis 2002第31頁(yè)/共38頁(yè)安乃近在吐溫80和聚乙二醇-400增敏介質(zhì)中的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度比較A0.1 g /ml 安乃近在吐溫80增敏介質(zhì)中的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度。B0.1 g /ml安乃近在乙二醇-400增敏介質(zhì)中的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度AB相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度相 對(duì) 時(shí) 間 坐 標(biāo)清華大學(xué) 張新榮第32頁(yè)/共38頁(yè)Development of a Gas Sensor UtilizingChemiluminescence on NanosizedTitani

18、um Dioxide清華大學(xué) 張新榮Analytical Chemistry 2002第33頁(yè)/共38頁(yè)P(yáng)lant Tissue-based Chemiluminescence Flow Biosensor for Glycolic Acid 陜西師大 章竹君Analytical Chemistry 2001 第34頁(yè)/共38頁(yè)Electrochemiluminescent Detection of Chiorpromazine by Selective Preconcentration at aLauric Acid-modified Carbon Paste Electrode Using Tris (2,2-bipyridine)ruthenium(ii)中科院長(zhǎng)春應(yīng)化所 董紹俊Analytical Chemistry 2000第35頁(yè)/共38頁(yè)Chemiluminescence determination of tetracycline bas