病毒與寄主的相互作用-改

1、幻燈片1病毒與寄主的相互作用噬菌體與細菌的相互作用病毒與動物寄主的相互作用病毒與植物寄主的相互作用幻燈片2噬菌體與細菌的相互作用烈性噬菌體感染后短時間內(nèi)能連續(xù)完成繁殖過程而使宿主細胞裂解的噬菌體。比如T噬菌體系列(T1-T7) ?；脽羝?烈性噬菌體T4噬菌體 l 典型的蝌蚪狀外形：六角形的頭部和可收縮的長的尾部； l 頭部的蛋白質(zhì)外殼內(nèi)含有折疊的DNA分子； l 頭部大小為9060納米（nm)，尾部10020納米。 l 是研究最廣泛和深入的細菌噬菌體，侵染大腸桿菌B菌株。 幻燈片4繁殖過程（烈性噬菌體）：幻燈片5噬菌體的復制吸附：最初的吸附是隨機的，當噬菌體以尾絲作為吸附點，通過尾部的刺突與細

2、菌的表面的特殊受體相結合后，則具有特異性侵入:噬菌體通過收縮尾鞘，將核酸物質(zhì)注入寄主細胞內(nèi)噬菌體的復制:烈性噬菌體的復制過程包括核酸的復制、蛋白質(zhì)殼體（頭部、尾部和尾絲）和釋放噬菌體所需要的酶，該過程是一個非常復雜的過程幻燈片6增殖過程的3階段轉錄： 大幻燈片7幻燈片8裝配、釋放噬菌體的各個部分有序地組裝在一起，形成完整的病毒粒子，成熟的病毒粒子引起寄主細胞的裂解，釋放處病毒粒子 幻燈片9幻燈片10烈性噬菌體感染細菌的結果：液體培養(yǎng)基：渾濁菌液變清亮雙層（上層含菌）固體平板：出現(xiàn)噬菌斑一步生長曲線（Debruck，1939） 定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的實驗曲線，用于反映各種噬菌體潛伏期、裂解

3、期和裂解量的特征曲線。幻燈片11 潛伏期：(侵入到裝配): 隱悔期；胞內(nèi)累計期裂解期：平穩(wěn)期：效價最高期裂解量：每個受染細胞產(chǎn)生的噬菌體的總數(shù)。（平穩(wěn)期pfu/ 受染細胞？）幻燈片12溫和噬菌體感染后其基因組整合到宿主的基因組上，并隨宿主基因組的復制而同步，而不引起宿主細胞的裂解。比如P1和噬菌體 。溫和噬菌體溶原菌：受溫和噬菌體感染的宿主稱之為溶原菌。前噬菌體：整合在宿主基因組上的溫和噬菌體的核酸。幻燈片13溫和噬菌體噬菌體l 線形dsDNA，分子為48.5kb；l 編碼61個基因，其中38個較為重要；l 生活史可分為裂解周期和溶原周期；l 為中等大小的溫和噬菌體；溶源原因-合成阻遏蛋白（C

4、I蛋白 ），阻遏某些基因的轉錄；-關閉某些噬菌體蛋白基因(晚期蛋白）的表達-整合酶的合成（int基因編碼）整合位點l 噬菌體的整合位點盡限于gal及bio等少數(shù)幾個基因內(nèi)。 幻燈片14 噬菌體整合過程幻燈片15溫和性噬菌體的去向：多數(shù)情況：噬菌體進入寄主細胞后，將其核酸整合到寄主的染色體上，或游離在寄主的細胞質(zhì)中，并隨著寄主細胞的生長繁殖而傳下去，宿主細胞不裂解少數(shù)情況：原噬菌體進行復制，裝配成為成熟噬菌體，使寄主裂解裂解方式：自發(fā)裂解：機率較小，10-5誘發(fā)裂解：用物理、化學因素處理，誘導原噬菌體復制，導致寄主細胞裂解幻燈片16噬菌體感染結果幻燈片17溶原細菌的特點：l 可以自發(fā)的消除噬菌體

5、DNA，但不能自發(fā)產(chǎn)生；2. 溫和噬菌體可以自發(fā)或人工誘發(fā)變?yōu)槎拘允删w;3. 溶原細菌可失去噬菌體的核酸后復愈;4. 溶原細菌對同源噬菌體的感染具有免疫性;5. 某些溶原細菌可以合成特殊的代謝產(chǎn)物，如白喉桿菌只有在被 噬菌體感染形成溶原細菌后才能產(chǎn)生白喉毒素;6.溫和噬菌體有 噬菌體與P1噬菌體等。它們都可以感染宿主細胞后形成溶原細菌，兩者區(qū)別在于： 噬菌體DNA通常整合到宿主染色體上; P1噬菌體感染宿主后主在游離在細胞質(zhì)中?；脽羝?8噬菌體在基因工程中的利用噬菌體基因有一半左右基因為非必需基因；當它們被外源基因取代之后，不影響噬菌體的生命周期。由外源基因取代非必需基因所形成的重組噬菌體D

6、NA，可以隨寄主細胞一起被復制和增殖。 常用的噬菌體載體類型插入型載體；免疫功能失活插入型載體；-半乳糖苷酶失活插入型載體。替換型載體；柯斯質(zhì)粒載體?；脽羝?9人類病毒病的防治一、疫苗和疫苗治療二、基因治療三、抗病毒藥物四、其它藥物幻燈片20一、疫苗和疫苗治療l 疫苗是將病原微生物（如細菌、立克次氏體、病毒等）及其代謝產(chǎn)物，經(jīng)過人工減毒、滅活或利用基因工程等方法制成的用于預防傳染病的自動免疫制劑。 死疫苗 活疫苗 現(xiàn)代新型病毒疫苗幻燈片21(1)死疫苗(killed vaccine) 滅活全病毒疫苗 應用物理或化學方法使病毒完全滅活而制成的疫苗。常用的有乙型腦炎、狂犬病、流感等滅活疫苗。(2)

7、減毒活疫苗 通常是用自然或人工選擇法(如溫度敏感株)篩選的對人低毒或無毒的變異株制成的疫苗，如脊髓灰質(zhì)炎、流感、麻疹的減毒活疫苗等?；脽羝?2減毒活疫苗與死疫苗優(yōu)缺點比較幻燈片23(3)現(xiàn)代新型病毒疫苗 應用基因工程技術，控制病毒變異，或利用DNA重組技術，插入和定向缺失病毒基因，將保護性病毒蛋白的編碼基因插入活載體中或選擇性地去除病毒的某一個或幾個致病基因而達到減毒作用制備的可在機體內(nèi)增殖，誘發(fā)抗病毒免疫應答的疫苗。1.亞單位疫苗(subunit vaccine)制備不含有病毒核酸、僅含有能誘發(fā)中和抗體的病毒衣殼蛋白或包膜表面抗原，是最理想的疫苗。 2.合成肽病毒疫苗 人工合成與病毒保護性抗

8、原決定簇的氨基酸序列相同的肽段，制備成免疫原后免疫動物或人體，使機體產(chǎn)生保護性抗體  3.基因工程疫苗(geneenginering vaccine)利用基因工程技術，分離、重組、轉化和表達基因，制備出的能引起人體保護性免疫應答疫苗。 4. DNA疫苗 又稱基因疫苗或核酸疫苗，這種核酸分子是一種細菌的質(zhì)粒，在克隆了特異性的基因以后，能在真核細胞中表達蛋白質(zhì)抗原，刺激機產(chǎn)生特異性體液和細胞免疫 。 5.新型多價聯(lián)合疫苗、口服疫苗的研究幻燈片24二、基因治療 1.反義寡核苷酸藥物 反義寡核苷酸是根據(jù)核酸雜交原理設計的，它能夠與特定疾病相關基因根據(jù)堿基配對原理特異性結合(雜交)，進而激活體

9、內(nèi)的RNaseH酶將結合的靶基因切斷，最終達到阻斷基因表達和疾病治療的目的。目前，反義寡核苷酸應用于腫瘤、病毒感染、寄生蟲病的研究； 2.干擾RNA 藥物 用雙股短小RNA，導致相同序列病毒基因的靜止，同源mRNA降解，通常雙鏈RNA的長度要小于26個核苷酸。 3.核酶 既能與靶基因序列結合又具有酶活性的一類RNA分子。核酶一方面能識別特異的靶RNA序列，并與之互補結合。另一方面具有酶活性，能通過特異性位點切割降解靶RNA。4.病毒基因轉錄抑制劑這類核苷衍生物模擬天然二脫氧核苷底物，經(jīng)一系列磷酸化成為5-三磷酸后，作為相似的底物競爭性抑制病毒逆轉錄酶活性。被磷酸化的藥物分子與核苷酸分子相似，在

10、RNA模板合成DNA過程中被嵌入DNA中。此DNA再轉錄時，由于其中的藥物分子不是正常的核苷酸，因而轉錄酶不能識別，從而使轉錄受阻。 幻燈片25三、抗病毒藥物 （1）核苷類藥物 核苷類藥物的作用機制有主要是抑制病毒基因復制模擬核苷成分摻入病毒基因組：合成的異常嘧啶取代病毒DNA前體的胸腺嘧啶，病毒在復制過程中，這種異常的嘧啶分子摻入子代DNA中使子代病毒結構基因的合成和表達無法進行，從而抑制病毒的復制，或復制出的病毒為缺陷病毒。競爭病毒復制酶1.無環(huán)鳥苷 (acyclovir,ACV，阿昔洛韋)和丙氧鳥苷（ganciclovir GCV，庚昔洛韋）為鳥嘌呤或脫氧鳥嘌呤核苷類似物。 該

11、藥細胞毒性很小，是目前最有效的抗皰疹病毒藥物之一。廣泛用于皰疹病毒感染引起的單純皰疹、生殖器皰疹及帶狀皰疹2.疊氮胸苷 (azidothymidine,AZT) 胸腺嘧啶核苷類似物，通過阻斷前病毒DNA的合成而抑制HIV的復制，AZT對病毒逆轉錄酶的抑制比對細胞DNA多聚酶敏感100倍以上。可以有效地降低AIDS的發(fā)病率與病死率。耐藥株的出現(xiàn)系由基因突變導致逆轉錄酶具有耐藥性。因有抑制骨髓作用和形成病毒的耐藥而面臨被淘汰。 3.病毒唑 對多種RNA和DNA病毒的復制都有抑制作用，但主要用于RNA病毒感染的治療，對細胞的核酸也有抑制作用。目前臨床主要用于流感病毒和呼吸道合胞病毒幻燈片2

12、6（2）化學類藥物制劑 1.金剛烷胺和甲基金剛烷胺 金剛烷胺為合成胺類，甲基金剛烷胺是其衍生物，兩者有相同的抗病毒譜和副作用，能阻止脫殼，主要用于治療甲型流感。 2.甲酸磷霉素 無機焦磷酸鹽的有機類似物，抑制多種皰疹病毒，包括CMV、HSV、VZV、EBV、HHV6，可能還對HBV和逆轉錄病毒有作用。選擇性抑制病毒DNA多聚酶和逆轉錄酶，而對宿主細胞無影響。四、其他抗病毒藥物（1）蛋白酶抑制劑 1賽科納瓦(saquinavir) 1995年批準的第1個蛋白酶抑制劑。 2英迪納瓦（indinavir）、瑞托納瓦（ritonavir）是1996年批準的新一代蛋 白酶抑制劑，用于HIV。 

13、（2）干擾素和干擾素誘生劑的應用 1. 干擾素(IFN) 具有廣譜抗病毒作用，毒性小，使用同種IFN無抗原性，主要用于甲、乙、丙型肝炎，HSV，乳頭瘤病毒和鼻病毒等感染的治療。反復應用也會引起耐藥性。 2. IFN誘生劑 如： poly IC、甘草甜素、蕓芝多糖 。（3）中草藥防治病毒感染 中草藥如黃芪、板藍根、大青葉、貫眾、螃 蜞 菊 以 及 甘 草 和 大 蒜 提 取 物 等 均 有 抑 制病 毒 的 作 用 ， 對 腸 道 病 毒 、 呼 吸 道 病 毒 、蟲 媒 病 毒 、 肝 炎 病 毒 感 染 有 一 定 防 治 作 用 ，其作用機理尚在研究中?；脽羝?7病毒性肝炎的診斷和抗抗毒治

14、療¨肝炎的類型¨肝炎的臨床表現(xiàn)¨病毒性肝炎的實驗室檢查¨肝炎的治療¨病毒性肝炎的預防肝炎的類型：病毒性肝炎酒精性肝炎藥物性肝炎自身免疫性肝炎化學性、中毒性肝炎其他原因所致肝損害 幻燈片28一、病毒性肝炎： 甲型病毒性肝炎 乙型病毒性肝炎 丙型病毒性肝炎 丁型病毒性肝炎 戊型病毒性肝炎幻燈片29甲型病毒性肝炎病原體：甲型肝炎病毒（HAV）結構特征：RNA病毒，微小RNA病毒屬穩(wěn)定性：對有機溶劑有抵抗力：耐酸、耐 堿，在外界的生存力很強：在塑料表面25 30天仍有0.4%存活。易感動物及培養(yǎng)：狨猴和黑猩猩；可在多種細胞中生長繁殖。形態(tài)與結

15、構球形顆粒，無包膜: 基因組:線狀+ssRNA，穩(wěn)定性高。衣殼:20面體立體對稱，由VP1VP4等4種多肽組成，其中VP1是主要的衣殼蛋白，其抗原決定簇的NT抗體，能中和所有的HAV株。至今，世界各地HAV只發(fā)現(xiàn)一個血清型。 傳染源：急性期患者和亞臨床感染者傳播途徑：糞-口人群易感性：未受染者均易感流行特征：發(fā)展中國家多發(fā)，春季高峰 潛伏期：15-45天癥狀：惡心、腹瀉、黃疸期幻燈片30 診 斷1.急性起病，早期可有“上感”或“胃腸炎”樣癥狀；2. 胃腸道癥狀等；3.肝功能異常4.抗HAV IgM 抗體和IgG抗體 甲型肝炎的預防1. 切斷傳播途徑：注意個人衛(wèi)生、不生食；糞

16、便、污水管理；食品管理；滅蠅；宣教。2. 特異性預防：疫苗：減毒活疫苗，滅活疫苗，蛋白疫苗；3. 被動免疫：丙種球蛋白  治療 甲型肝炎為自限性疾病，經(jīng)治療可痊愈，不轉慢性亦不留后遺癥。 用藥宜簡。 幻燈片31乙型病毒性肝炎歸屬：嗜肝DNA病毒科培養(yǎng)：未成功研究模型： 1. 基因轉染細胞：G2.2.15細胞； 2. 轉基因鼠； 3. 動物HBV： 土撥鼠肝炎病毒（WHBV）、鴨肝 炎病毒（DHBV）幻燈片32顆粒類型：Dane顆粒（42nm）、球狀顆粒 （20nm）、線狀顆粒（20nm）；基因結構：環(huán)狀、雙股DNA，部分單鏈；3.2 Kb；基因組有4個讀框，即4個基 因結構

17、區(qū)： S、C、P、X；基因產(chǎn)物：外膜蛋白：HBsAg、前S1、前S2； 核心抗原（HBcAg）； e抗原； DNA多聚酶； X蛋白?；脽羝?3球形顆粒，直徑20nm；線狀顆粒，直徑20nm，長度在50700nm之間；大球形顆粒，即Dane顆粒，直徑42nm?；脽羝?4亞型決定蔟位于S編碼區(qū)： 122位氨基酸：賴氨酸：d 精氨酸：y 160位氨基酸：賴氨酸：w 精氨酸：r中國流行的HBV 亞型：長江以北：adr 長江以南：adr和adw混存抵抗力 HBV 對理化因素的抵抗力相當強； 對低溫、干燥、紫外線、醚、氯仿、酚等均有抵抗性。 幻燈片35HBV的復制幻燈片361.傳染源：乙型肝炎患者、各類乙型肝炎 病毒攜帶者。2.傳播途徑： ¨血液：輸血、血制品，其他院內(nèi)感染， 嗜毒； ¨接觸傳播：乳汁、牙刷、餐具？ ¨母嬰傳播：產(chǎn)后； ¨遺傳？幻燈片37 發(fā)病機制不同臨床表現(xiàn)的發(fā)病機制： 1. 急性肝炎：免疫功能正常 2. 慢性肝炎：免疫耐受、免疫功能 低下、 病毒變異 3. 重型肝炎：超敏反應幻燈片38肝損傷機制 1. 細胞免疫介導的肝損傷； 2. 自身免疫引起的肝損傷； 3. 細胞因子引起的肝細胞損傷： TNF、IL-1； 4. 其它因素：微循環(huán)障礙幻燈片39 治 療 抗病毒治療 干擾素的應用 核苷類似物；拉米夫丁 中藥