農(nóng)化分析土壤P分析

1、第五章第五章 土壤磷的測(cè)定土壤磷的測(cè)定一、概述磷的生理意義磷的生理意義 除C、H、O以外，作物體內(nèi)P含量?jī)H次于N、K，一般在種子中含量最高。許多重要的有機(jī)化合物都含有磷，有些化合物中雖然不含磷，但在其形成和轉(zhuǎn)化過程中，必須有磷參加，如糖和脂肪的代謝過程。土壤中的磷土壤中的磷 我國(guó)土壤全磷的含量(以P，gkg-1表示)大致在0.44 -0.85 gkg-1范圍內(nèi)，但最高可達(dá)1.8gkg-1，低的只有0.17gkg-1。南方酸性土壤全磷含量一般低于0.56gkg-1；北方石灰性土壤全磷含量則較高。 全磷含量受母質(zhì)、成土作用和耕作施肥的影響很大。土壤中磷的形態(tài)有機(jī)態(tài)（2050%，高分子形態(tài)存在，有效

2、性低）無機(jī)態(tài)鈣磷 Ca2-P（Ca（H2PO4）2、CaHPO4-Ca2-P） Ca8-P（Ca8(HPO4)2(PO4)4，牙齒、骨骼、結(jié)石的主要成分） Ca10-P（羥基磷灰石，Ca10(PO4)6(OH)2）鋁磷（Al-P，AlPO4,玻璃的助熔劑，陶瓷、牙齒的粘結(jié)劑,中和胃酸）鐵磷（Fe-P,FePO4，自然界存在的藍(lán)鐵礦）閉蓄磷（O-P,鐵鋁氧化物膠膜包裹的磷，磚紅壤可達(dá)80%）礦物態(tài)磷（M-P，磷灰石等）土壤中無機(jī)磷以吸附態(tài)和鈣鐵鋁的磷酸鹽為主，石灰性土壤以土壤中無機(jī)磷以吸附態(tài)和鈣鐵鋁的磷酸鹽為主，石灰性土壤以Ca-PCa-P為主，酸性土壤為主，酸性土壤Al-PAl-P和和Fe-P

3、Fe-P占優(yōu)勢(shì)，中性土壤大致占優(yōu)勢(shì)，中性土壤大致1 1：1 1：1 12013年西農(nóng)研究生復(fù)試題目1. 在樣品制備過程中，常用到方格法，這種方法是如何操作的？四分法取對(duì)角的一半 方格法每格取相同數(shù)量割圓環(huán)法，取1圈2013年西農(nóng)研究生復(fù)試題目1. 在樣品制備過程中，常用到方格法，這種方法是如何操作的？2. 測(cè)定堿解氮時(shí)如何檢驗(yàn)擴(kuò)散皿是否洗滌干凈?堿性阿拉伯膠比較難洗。定氮指示劑是酸堿指示劑。在擴(kuò)散皿內(nèi)室加入定氮混合指示劑，如果顏色不變，說明洗干凈，如果顏色變綠或者更深，說明沒有洗干凈。二、土壤全磷的測(cè)定（一）待測(cè)液的制備方法（一）待測(cè)液的制備方法如何使富含鋁硅酸鹽的土壤完全分解？分解礦物的方法

4、酸溶法：氫氟酸與鹽酸、硝酸、硫酸、高氯酸的組合。堿熔法： 碳酸鈉-鉑坩鍋熔融（標(biāo)準(zhǔn)方法）（標(biāo)準(zhǔn)方法） 氫氧化鈉-銀（鎳、鐵）坩鍋熔融（國(guó)標(biāo)（國(guó)標(biāo)） 偏硼酸鋰-石墨坩鍋熔融 根據(jù)分解試樣時(shí)所用的試劑不同，分解方法可分別為濕法和干法。 濕法：用酸、堿或鹽的溶液來分解試樣。 干法：用固體的鹽、堿來熔融或燒結(jié)分解試樣。 酸法分解酸法分解 由于酸較易提純，過量的酸，除磷酸外，也較易除去，分解時(shí)不引進(jìn)除氫離子以外的陽(yáng)離子不引進(jìn)除氫離子以外的陽(yáng)離子，操作簡(jiǎn)單，使用溫度操作簡(jiǎn)單，使用溫度低，對(duì)容器腐蝕性小等優(yōu)點(diǎn)低，對(duì)容器腐蝕性小等優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用較廣泛。 缺點(diǎn)：對(duì)某些礦物的分解能力較差，某些元素可能揮發(fā)損失。 多用

5、混合酸體系 H2SO4-HClO4 王水-HClO4 HNO3-HClO4 H2SO4-H2O2植物樣品硫酸高氯酸和硫酸過氧化氫體系以其可以同時(shí)測(cè)定多種可以同時(shí)測(cè)定多種元素元素而廣受歡迎。 植物、土壤樣品消化分解多用H2SO4體系 土壤全氮?jiǎng)P氏法用硫酸-催化劑消化，可否用硫酸-高氯酸？為什么？熔融分解法 用酸或其他熔劑不能分解完全的分解完全的試樣，可用熔融的方法分解。此法就是將熔劑和試樣相混后，于高溫下，將試樣轉(zhuǎn)變?yōu)橐兹苡谒蛩岬幕衔铩?熔融方法需要高溫設(shè)備，且引進(jìn)大量溶劑的陽(yáng)離子和坩堝引進(jìn)大量溶劑的陽(yáng)離子和坩堝物質(zhì)物質(zhì)，這對(duì)有些測(cè)定是不利的。故其空白值較大空白值較大。 土壤硅酸鹽的溶解度決

6、定于硅和金屬元素的比例及金屬元土壤硅酸鹽的溶解度決定于硅和金屬元素的比例及金屬元素的堿度。素的堿度。磷測(cè)定的酸溶法硫酸-高氯酸消煮法方法原理強(qiáng)氧化劑高氯酸氧化有機(jī)質(zhì)，使膠狀硅脫水，螯合Fe3+，并抑制比色時(shí)的硅鐵干擾。硫酸提高消化液溫度，防止消化過程中溶液蒸干，高溫時(shí)是強(qiáng)氧化劑。使含磷礦物（氟磷磷石、羥基磷磷石等）分解。方法評(píng)述簡(jiǎn)便、快速。一般土壤分解率9798%，紅壤只有95%。為什么？能否用其它酸溶法制備待測(cè)液？Al-P磷測(cè)定的堿熔法（I）NaOH熔融法方法原理高溫（650750）下，土壤與610倍的氫氧化鈉于鎳坩堝中熔融，使土壤礦物的可溶性堿土金屬的成分增加。土壤與NaOH的熔融物可徹底

7、溶于稀酸溶液中，供分析測(cè)定用。方法評(píng)述為GB8937-88方法，土壤樣品分解徹底。待測(cè)液可供磷或其它元素的測(cè)定。磷測(cè)定的堿熔法（II）Na2CO3熔融法方法原理含石英、去母、長(zhǎng)石等難溶性硅酸鹽的土壤樣品，高溫（920）下，與610倍的Na2CO3于Pt坩堝中熔融，使土壤礦物的可溶性堿土金屬的成分增加。土壤中的硅、鐵、鋁、鉀、鈣鎂、磷以及各種微量元素可徹底溶于稀酸溶液中，供分析測(cè)定用。如鉀長(zhǎng)石熔融時(shí)的反應(yīng)：K2Al2Si6O10+ Na2CO3 2KAl2+CO2 +6NaSiO3方法評(píng)述土壤樣品分解徹底，待測(cè)液可供磷或其它元素的測(cè)定。 熔融完全的要求：內(nèi)容物成凹形，表面均勻一致，中間無氣泡或不

8、溶物（無粉粒狀顆粒），底部無黑色斑點(diǎn)。 含錳較多的樣品，熔融物為綠色（高錳酸鈉）。堿熔法（III）LiBO2熔融法方法原理 石英、去母、長(zhǎng)石等難溶性硅酸鹽的土壤樣品，高溫（920）下，與610倍的LiBO2于石墨坩堝中熔融，使土壤礦物的可溶性堿土金屬的成分增加。土壤中的硅、鐵、鋁、鉀、鈣鎂、磷以及各種微量元素可徹底溶于稀酸溶液中，供分析測(cè)定用。方法評(píng)述土壤樣品分解徹底，待測(cè)液可供磷或其它元素的測(cè)定。熔融塊易于取出。該法的待測(cè)液更適合于用AAS法和ICP法的測(cè)定偏硼酸鋰（ LiBO2 8H2O）使用前應(yīng)于高溫電爐中灼燒23h。 為什么？（二）溶液中磷的測(cè)定方法（二）溶液中磷的測(cè)定方法鉬藍(lán)比色法鉬

9、黃比色法磷鉬奎啉重量法磷鉬奎啉容量法其它方法 離子色譜法 流動(dòng)注射分析 ICP法H3PO4、H3AsO4、H4SiO4鉬酸銨H3PO4+12H2MoO4H3PMo12O40+12H2ONH3PMo12O40黃色沉淀，少量P僅顯黃色不沉淀。NH4VO3NH3PVMo11O40吸光度更高，(釩釩)鉬鉬黃比色法黃比色法質(zhì)量法、容量法質(zhì)量法、容量法Vc或SnCl2Mo6+變?yōu)镸o5+生成鉬藍(lán)鉬藍(lán)比色法鉬藍(lán)比色法/鉬銻抗比色法鉬銻抗比色法與釩相似，銻也可以，而且磷銻鉬雜多酸可在室溫快速被Vc還原顯藍(lán)色，而且可以把鉬銻抗混合配制，便于自動(dòng)化 H3PO4、H3AsO4、H4SiO4都可以與鉬酸形成雜多酸，故

10、而相互干擾。 測(cè)定磷時(shí)，硅的干擾可以采用控制酸度的方法控制，磷鉬酸在較高酸度下（0.4-0.8 mol L-1 H+），硅鉬酸在較低酸度下形成（0.060.35 mol L-1 H+）。 As的干擾難于克服，但是土壤As含量低，且砷鉬酸還原速度慢，一般不影響磷的測(cè)定結(jié)果。需要克服As干擾時(shí)，在沒有加入鉬酸銨試劑前，將As還原為亞砷酸克服。鉬黃比色法1. 方法原理待測(cè)液中正磷酸能與偏釩磷酸鹽和鉬酸鹽在酸性條件下作用形成黃色的雜聚化合物釩鉬酸鹽，溶液的黃色很穩(wěn)定，其深淺與磷含量成正比，可用比色法測(cè)定磷的含量。 冷卻后的消煮液倒入100mL容量瓶中，用水沖洗開氏瓶(少量多次的原則)，待完全冷卻后，加

11、水定容。靜置過夜或用干的定量濾紙過濾，濾液待測(cè)。 吸取澄清液或?yàn)V液20mL以含磷(P)在0.25-1.0 mg為最好注入50mL容量瓶中，加二硝基酚指示劑二硝基酚指示劑2滴滴，滴加6molL-1NaOH溶液直至溶液變?yōu)辄S色，然后加釩鉬酸氨試劑10mL，再加水定容，搖勻。15min后，用450nm波長(zhǎng)進(jìn)行比色，。2.方法評(píng)述比色波長(zhǎng)寬（420490nm.）磷濃度（120 mgL-1）高選擇較長(zhǎng)波長(zhǎng)，否則用較短的波長(zhǎng)。酸體系要求不嚴(yán)；酸度：酸度：0.041.6molL0.041.6molL-1-1(H(H+ +) ) 。酸度太高顯色不完全或不顯色，太低時(shí)則可能生成沉淀或其它物質(zhì)的顏色 。顯色與穩(wěn)定

12、的時(shí)間：15min顯色完全，2h內(nèi)很穩(wěn)定，在24h無顯著變化 。靈敏度較鉬藍(lán)法低，適測(cè)范圍廣 ，常用于植株磷或磷礦粉有效磷的測(cè)定。干擾離子少，Si可通過控制酸度克服，As可通過顯色前將其還原克服，F(xiàn)e3+允許濃度較高。鉬藍(lán)比色法1. 方法原理磷酸+鉬酸銨磷鉬酸銨（濃度高時(shí)形成黃色沉淀）。加入銻（酒石酸銻鉀）磷鉬銻三元雜多酸。加入還原劑（Vc、SnCl2等) 形成鉬藍(lán)。 冷卻后的消煮液倒入100mL容量瓶中，用水沖洗開氏瓶(少量多次的原則)，待完全冷卻后，加水定容。靜置過夜或用干的定量濾紙過濾，濾液待測(cè)。 吸取澄清液或?yàn)V液5mL(對(duì)含P，0.56gkg-1以下的樣品可吸取10mL)，以含磷(P)

13、在2030g為最好注入50mL容量瓶中，用水沖稀至30mL，加二硝基酚指示劑二硝基酚指示劑2滴滴，滴加4molL-1NaOH溶液直至溶液變?yōu)辄S色，再加2molL-1(1/2 H2SO4) 1滴，使溶液的黃色剛剛褪去（調(diào)節(jié)pH，去除Si的干擾）。然后加鉬銻抗試劑5mL，再加水定容50mL，搖勻。30min后，用880nm或700nm波長(zhǎng)進(jìn)行比色，。土壤全磷(P)量 (gkg-1)V/mV2/V110-3顯色體積（V2，ml）吸取體積（V1，ml）加水定容消化液定容體積（V，ml）稱取稱取m g樣品樣品放入消化管消化后洗入容量瓶定容比色，得到吸光度比色，得到吸光度A比色測(cè)出吸光度A根據(jù)表現(xiàn)的CA關(guān)

14、系，可以計(jì)算出C，C顯色體積（V2）=顯色容量瓶中P的量顯色體積（V2）顯色體積（V2）吸取體積（V1）加水定容CV2/V1=吸取體積中P的濃度消化液定容體積（V）m g樣品放入消化管消化后洗入容量瓶定容CV2/V1V=消化液中P的量CV2/V1V/m=樣品中P的含量2.方法要點(diǎn)顯色劑：鉬銻抗溶液顯色劑：鉬銻抗溶液（5.5mol/L H2SO4，鉬酸銨10g/L，酒石酸氧銻鉀0.5 g/L，抗壞血酸15g/L（現(xiàn)用現(xiàn)配）。還原劑的種類還原劑的種類（SnCl2甘油溶液，抗壞血酸）酸度、溫度的要求酸度、溫度的要求0.4-0.8 mg/L H+，15-60顯色與穩(wěn)定的時(shí)間顯色與穩(wěn)定的時(shí)間（SnCl2

15、 靈敏度高、顯色快，穩(wěn)定時(shí)間短，5-15分鐘，抗壞血酸顯色慢，穩(wěn)定時(shí)間長(zhǎng)）干擾物：干擾物：砷（含量低，顯色慢，不至影響結(jié)果，含量高時(shí)可在加鉬試劑前將砷還原為亞砷酸克服）、硅（控制酸度，酸度較低）、鐵20mg/L(SnCl2),400mg/L(Vc)。磷鉬奎啉重量法1.方法原理溶液中的正磷酸根離子，在酸性介質(zhì)和丙酮存在下與喹鉬檸酮試劑生成黃色磷鉬酸喹淋沉淀，其反應(yīng)式如下：H3PO4 + 3C9H7N + 12 Na2MoO4 + 24HNO3 (C9H7N)3H3P(Mo3O10)4H2O + 11H2O + 24NaNO3沉淀經(jīng)過濾、洗滌、干燥后稱量。2.注意磷鉬奎啉沉淀如何洗滌？（傾瀉法,洗

16、滌至無酸）硅的干擾如何克服？控制酸度1:1硝酸或鹽酸酸化磷鉬奎啉容量法1.方法原理溶液中的正磷酸根離子，在酸性介質(zhì)和丙酮存在下與喹鉬檸酮試劑生成黃色磷鉬酸喹淋沉淀，其反應(yīng)式如下：H3PO4 + 3C9H7N + 12 Na2MoO4 + 24HNO3 (C9H7N)3H3P(Mo3O10)4H2O + 11H2O + 24NaNO3沉淀經(jīng)過濾、洗滌后溶于標(biāo)準(zhǔn)堿中，過量的標(biāo)準(zhǔn)堿用標(biāo)準(zhǔn)酸進(jìn)行回滴。2.方法評(píng)述肥料分析的標(biāo)準(zhǔn)方法。比重量法繁鎖。磷鉬奎啉重量法的儀器設(shè)備流動(dòng)注射分析法流動(dòng)注射分析法丹麥人丹麥人Ruzlcka和和Hahsen在在1974年提出。年提出。優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：使繁瑣的分光光度法分析過

17、程通過在管道中連使繁瑣的分光光度法分析過程通過在管道中連續(xù)流動(dòng)的過程自動(dòng)完成。續(xù)流動(dòng)的過程自動(dòng)完成。提高分析速度、分析精度及自動(dòng)化程度。提高分析速度、分析精度及自動(dòng)化程度。發(fā)展?jié)摿Φ暮艽蠓治龇椒?。發(fā)展?jié)摿Φ暮艽蠓治龇椒?。流?dòng)注射分析的原理流動(dòng)注射分析的原理使用一種泵輸入顯色試劑，使用一種泵輸入顯色試劑， 使之在一細(xì)長(zhǎng)管路中形成使之在一細(xì)長(zhǎng)管路中形成連續(xù)載流，然后把一定體積的各待測(cè)樣品溶液間歇地注入到載連續(xù)載流，然后把一定體積的各待測(cè)樣品溶液間歇地注入到載流中，樣品隨載流進(jìn)入一定長(zhǎng)度的反應(yīng)盤管。一邊流動(dòng)一邊發(fā)流中，樣品隨載流進(jìn)入一定長(zhǎng)度的反應(yīng)盤管。一邊流動(dòng)一邊發(fā)生顯色反應(yīng)，最后由載流帶入檢測(cè)器檢

18、測(cè)。連續(xù)地進(jìn)行一個(gè)個(gè)生顯色反應(yīng)，最后由載流帶入檢測(cè)器檢測(cè)。連續(xù)地進(jìn)行一個(gè)個(gè)樣品的分析測(cè)定。樣品的分析測(cè)定。 流動(dòng)注射分析將一般分流動(dòng)注射分析將一般分光光度法中顯色、比色的一系光光度法中顯色、比色的一系列操作均在管道體系中自動(dòng)進(jìn)列操作均在管道體系中自動(dòng)進(jìn)行，操作簡(jiǎn)單、自動(dòng)化。并且行，操作簡(jiǎn)單、自動(dòng)化。并且諸反應(yīng)條件也可通過輸液速度諸反應(yīng)條件也可通過輸液速度、反應(yīng)盤管長(zhǎng)度等嚴(yán)格控制，、反應(yīng)盤管長(zhǎng)度等嚴(yán)格控制，各待測(cè)樣品均在同一管道體系各待測(cè)樣品均在同一管道體系中分析測(cè)定，因此具有很高精中分析測(cè)定，因此具有很高精度的重復(fù)性。度的重復(fù)性。在流動(dòng)注射分析中，顯色反應(yīng)不必一定要達(dá)到終點(diǎn)，只在流動(dòng)注射分析中

19、，顯色反應(yīng)不必一定要達(dá)到終點(diǎn)，只要有一定程度的顯色，即可進(jìn)入檢測(cè)器檢測(cè)，因此大大提高了要有一定程度的顯色，即可進(jìn)入檢測(cè)器檢測(cè)，因此大大提高了分析速度。分析速度。凡是用分光光度計(jì)進(jìn)行的比色分析，一般均可改造成流凡是用分光光度計(jì)進(jìn)行的比色分析，一般均可改造成流動(dòng)注射分析動(dòng)注射分析，用流動(dòng)注射分析法取代一些長(zhǎng)期以來雖行之有效，用流動(dòng)注射分析法取代一些長(zhǎng)期以來雖行之有效，但效率不高的經(jīng)典方法有非常大的潛力。，但效率不高的經(jīng)典方法有非常大的潛力。三、土壤有效磷的測(cè)定有效磷的含量（為當(dāng)季作物吸收的磷量為當(dāng)季作物吸收的磷量）磷的有效性（土壤中存在的磷能為植物吸收利用的程度）強(qiáng)度因素(溶液中磷的濃度)容量因素

20、(作物吸收，溶液磷濃度降低，維持溶液中磷的濃度不降低得固相中磷的含量)磷位：1/2pCa+ pH2PO4（固相磷進(jìn)入溶液的難易，或土壤吸持磷的能力）有效養(yǎng)分浸提劑選擇的原則是什么？ 成比例浸提原則 分析操作簡(jiǎn)單原則 與作物有相關(guān)性原則土壤有效磷的測(cè)定，生物的方法被認(rèn)為是最可靠生物的方法被認(rèn)為是最可靠的。同位素32P稀釋法測(cè)得的“A”值被認(rèn)為是標(biāo)準(zhǔn)方法。陰離子樹脂方法有類似植物吸收磷的作用陰離子樹脂方法有類似植物吸收磷的作用，即樹脂不斷從溶液中吸附磷，是單方向的，有助于固相磷進(jìn)入溶液，測(cè)出的結(jié)果也接近“A”值。但是用得最普遍的是化學(xué)速測(cè)方法用得最普遍的是化學(xué)速測(cè)方法?；瘜W(xué)速測(cè)方法即用提取劑提取土

21、壤中的有效磷。有效養(yǎng)分浸提劑有哪些種類？有效養(yǎng)分浸提劑有哪些種類？水 （H2PO4-，水提取的是有效P，但不是全部，適用于砂壤,難得到清澈溶液）飽和二氧化碳水（模擬根系分泌CO2，根際pH約為5）有機(jī)/無機(jī)酸（有機(jī)酸的理論依據(jù)與CO2水一樣，無機(jī)酸的選用主要是從分析方法的方便來考慮的）堿（pH8.5的NaHCO3溶液中Ca2+、Al3+、Fe3+等離子的活度很低，有利于磷的提取，而溶液中OH-、HCO3-、CO32-等陰離子均能置換H2PO4-。主要用于石灰性土壤，但也可用于中性和酸性土壤。）鹽（CaSO4，CaCl2,KCl等，氮等）螯合劑（DTPA，EDTA，微量元素）以上各種試劑的組合O

22、lsen法，1954，0.5 M NaHCO3 Bray-Kurtzl法，1945, 0.03M NH4F+0.025M HClMehlich3法，1984,(0.2M CH3COOH+0.25M NH4NO3+ 0.015M NH4F+0.013M HNO3+ 0.001M EDTA)Morgan法, 1941，(0.72M NaOAc+0.52M CH3COOH, pH 4.8)Vermont 1法，1969，（1.25M NH4OAc，pH4.8）Vermont 2法，1969，（1.25M NH4OAc+0.03M NH4F pH 4.8）Sharpley法，1991，0.1M NaO

23、H影響有效養(yǎng)分提取量的因素有哪些影響有效養(yǎng)分提取量的因素有哪些? ?浸提劑的種類液/土比例震蕩時(shí)間震蕩溫度振蕩強(qiáng)度土壤（中性和石灰性土）有效磷的測(cè)定方法（I）0.5mol/L NaHCO3浸提，鉬藍(lán)比色法olsen-P，1954方法原理利用提取劑中CO3-的同離子效應(yīng)，降低碳酸鹽的溶解，抑制鋁鐵離子的活性；提取劑中的、HCO3-、OH-也利于吸附態(tài)、交換態(tài)磷的提取。提取出的磷用鉬藍(lán)法測(cè)定。稱取過20目土樣2.5g于150mL三角瓶(或大試管)中，加入0.5molL-1NaHCO3溶液50mL，再加一勺無磷活性炭，塞緊瓶塞，在振蕩機(jī)上振蕩30min，立即用無磷濾紙過濾，濾液承接于100mL三角瓶

24、中。吸取濾液10mL(含磷量高時(shí)吸取2.55.0mL，同時(shí)應(yīng)補(bǔ)加0.5molL-1NaHCO3溶液至10mL)于150mL三角瓶中，再用滴定管準(zhǔn)確加入蒸餾水三角瓶中，再用滴定管準(zhǔn)確加入蒸餾水35mL35mL，然后移液管加入鉬銻抗試劑5mL，搖勻，放置30分鐘后，用700nm波長(zhǎng)進(jìn)行比色。以空白液的吸收值為0，讀出待測(cè)液的吸收值(A)。注注1活性炭對(duì)PO43-有明顯的吸附作用，當(dāng)溶液中同時(shí)存在大量的HCO3-離子飽和了活性炭顆粒表面，抑制了活性炭對(duì)PO43-的吸附作用。注注2本法浸提溫度對(duì)測(cè)定結(jié)果影響很大，一般要在室溫(2025)下進(jìn)行，最好在恒溫振蕩機(jī)上進(jìn)行提取。顯色溫度(20左右)較易控制。

25、注注3由于取0.5molL-1 NaHCO3浸提濾液10mL于50mL容量瓶中，加水和鉬銻抗試劑后，即產(chǎn)生大量的產(chǎn)生大量的COCO2 2氣體氣體，由于容量瓶口子小，CO2氣體不易逸出，在搖勻過程中，常常造成試液外溢，造成測(cè)定誤差。為了克服這個(gè)缺點(diǎn)，可以準(zhǔn)確加入提取液、水和鉬銻抗試劑(共計(jì)50mL)于三角瓶中，混勻、顯色。土壤中有效磷(P)含量 (mgkg-1)Vts/m103k1000方法的要點(diǎn)1.有機(jī)質(zhì)是干擾。2.活性碳的洗滌。無磷3.加入試劑后應(yīng)立即混勻。4.趕盡二氧化碳。5.顯色穩(wěn)定的時(shí)間與溫度。6.液/土=20：1；振蕩時(shí)間：30min.缺素臨界指標(biāo)：10ppm.酸性土壤速效磷的測(cè)定方

26、法（I） 0.03mol/LNH4F-0.025mol/L HCl法 Bray-Kurtzl，1945方法原理方法原理NH4FHCl法主要提取酸溶性磷和吸附磷包括大部分磷酸鈣和一部分磷酸鋁和磷酸鐵，因?yàn)樵谒嵝匀芤褐蟹x子能與三價(jià)鋁離子和鐵離子形成絡(luò)合物，促使磷酸鋁和磷酸鐵的溶解，鉬藍(lán)法測(cè)定。3NH4F+3HF+AlPO4H3PO4+(NH4)3AlF63NH4F+3HF+FePO4H3PO4+(NH4)3FeF6 稱1.000g土樣，放入20mL試管中，從滴定管中加入浸提液7mL，試管加塞后，搖動(dòng)1min，用無磷干濾紙過濾。如果濾液不清，可將濾液倒回濾紙上再過濾，吸取濾液2mL，加蒸餾水6mL

27、和鉬酸銨試劑2mL，混勻后，加氯化亞錫甘油溶液1滴，再混勻。在515分鐘內(nèi)，在分光光度計(jì)上用700nm波長(zhǎng)進(jìn)行比色。注注1. 1. 氯化亞錫甘油溶液遠(yuǎn)比水溶液穩(wěn)定，可貯存半年以上。注注2.2.加入鉬酸銨試劑量要準(zhǔn)確，因?yàn)檫@里顯色溶液的體積較小(10mL)，鉬酸銨試劑量的多少，容易改變?nèi)芤旱乃岫?，影響顯色。注注3. 3. 用SnCl2還原劑的鉬藍(lán)法，顏色不夠穩(wěn)定，515min內(nèi)顏色最為穩(wěn)定。注注4. 4. 在顯色過程中氟化物可能產(chǎn)生干擾影響，可以加硼酸克服之，但在大多數(shù)情況下(除非少數(shù)酸性砂土)并無此必要。土壤速效磷(P)含量 (mgkg-1)107/(m2103)100035式中：從標(biāo)準(zhǔn)曲線上

28、查得的磷的質(zhì)量濃度，gmL-1P； 10顯色時(shí)定容體積，mL； 7浸提劑的體積，mL； 2吸取濾液的體積，mL； m風(fēng)干土質(zhì)量，g； 103將g換算成mg； 1000換算成每kg含P質(zhì)量。酸性土壤有效磷的測(cè)定方法（II）0.05mol/L HCl -0.025mol/L H2SO4浸提，鉬藍(lán)比色法方法原理本法特別適用于固定磷較強(qiáng)的酸性土壤。如土壤有機(jī)質(zhì)含量較低pH小于6.5，陽(yáng)離子交換量小于100 cmolkg-1的土壤。本法不僅適用于酸性土壤速效磷的測(cè)定，也能用以測(cè)定其他有效養(yǎng)分。利用酸對(duì)Ca-P和Al-P的溶解，而將有效磷浸提出來，用鉬藍(lán)法測(cè)定。方法的要點(diǎn)1.有機(jī)質(zhì)是否是干擾？2.可用氯化

29、亞錫作還原劑。3.氟化物是干擾，可加硼酸克服。4. 液/土=5：1；振蕩時(shí)間：30min.缺素臨界指標(biāo)：20ppm.其它土壤有效養(yǎng)分測(cè)定的方法同位素稀釋法A值法。同位素E值法。陰離子樹脂法氧化鐵膠膜濾紙法。同位素稀釋法A值法 施用一定量用32P標(biāo)記的過磷酸鈣于土壤，進(jìn)行盆缽試驗(yàn)盆缽試驗(yàn)，分析植物樣品中的全磷含量植物樣品中的全磷含量(a+b(a+b)和放射性強(qiáng)度(植物從放射性肥料中吸收的P，b)，可求得植物從肥料吸收的磷占植物體中總磷量的百分?jǐn)?shù)(y)。isotope labeling如果土壤中有效磷含量為A，由肥料施入土中的有效磷量為B，那么，AB（100-y）/y （1）y=b/（a+b） （

30、2）由式1和2可計(jì)算出土壤有效磷含量。ABABy100-yy100-yBAyba + b本法的特點(diǎn)：1. 分析準(zhǔn)確，可以從1015個(gè)原子中檢出一個(gè)放射性原子。2. 利用盆缽培養(yǎng)試驗(yàn)測(cè)出的有效磷含量與作物生長(zhǎng)相關(guān)性好。3. 測(cè)定時(shí)間較長(zhǎng)，需要大麥長(zhǎng)至齊穗。4. 需要空白試驗(yàn)來測(cè)定放射性與含量的關(guān)系。5. 需要控制試驗(yàn)來矯正放射性衰變引起的誤差。同位素E值法“E”值（有效磷含量）=Pe（固相表面31P）+Ps（溶液中31P） Ps為可溶性P，可直接測(cè)定，Pe采用同位素方法測(cè)定。加入的32P與土壤表面磷進(jìn)行交換，同時(shí)被土壤有效磷所稀釋，因此溶液中放射性比強(qiáng)降低。當(dāng)溶液中的32P與土壤表面P達(dá)成平衡時(shí)

31、，則：固相表面31P/固相表面32P=溶液31P /溶液32P固相表面31P =溶液31P固相表面32P/溶液32P 用公式來表示，即： Pe=Ps固相表面32P/溶液32PE=Ps+Ps固相表面32P/溶液32P=Ps（1+固相表面32P/溶液32P）=Ps/(溶液32P/固相32P+溶液32P)溶液32P可通過測(cè)定交換平衡后溶液的放射性獲得。溶液32P +固相表面32P為加入的放射性P的總量，可通過原始溶液的放射性獲得。Ps為溶液中31P，即可溶性磷，可用比色測(cè)定；令ft為殘留在溶液中32P百分?jǐn)?shù)（根據(jù)原始溶液和平衡溶液放射性強(qiáng)度的測(cè)定而求得），則，E=Ps/ftM-31P31PM-31P

32、3232P PM-M-3232P P31PM-31P31P3232P P3232P P24 h過濾31P31P3232P P3232P P溶液32P溶液32P+固相32P本法的特點(diǎn)：1. 分析準(zhǔn)確，可以從1015個(gè)原子中檢出一個(gè)放射性原子。2. 與作物生長(zhǎng)相關(guān)性一般。3. 測(cè)定迅速。4. 不需要空白試驗(yàn)來測(cè)定放射性與含量的關(guān)系。5. 不需要控制試驗(yàn)來矯正放射性衰變引起的誤差。6. 需要用比色方法測(cè)定溶液中的P。陰離子交換樹脂法M-PPM-PR-PR-PM-31P16 h過濾過濾anion exchange resinR RR RR-PR-P如果樣品用100目，樹脂用30-50目，過濾時(shí)用80目布氏漏斗R-PR-PR-PR-PR-ClR-ClR-ClR-ClNaClNaClPP過濾過濾鉬藍(lán)法或者鉬黃法測(cè)鉬藍(lán)法或者鉬黃法測(cè)P P45 min，水浴四、酸性、中性土壤無機(jī)磷的分級(jí)水溶磷、斷鍵和松結(jié)合磷。1 mol/L NH4Cl浸提。陰離子交換，極少量，可以不測(cè)。Al-P，AlPO4nH2O0.5mol/L