氣相色譜定量方法及加標(biāo)回收率的計(jì)算精

1、氣相包錯的文量方注物2標(biāo)收率的神客玄鉆；白明本節(jié)的主要內(nèi)容色譜的定量方法色譜的定量依據(jù) 幾種常見的定量方法 計(jì)算公式適用范圍和優(yōu)缺點(diǎn) 加標(biāo)回收的意義加標(biāo)回收率的計(jì)算1加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)過程計(jì)算公式色譜的定量依據(jù)峰高(Height)w = f - H適用條件：峰高定性要求色譜柱效較高的條件下, 半峰寬小于一定值或所有峰半峰寬均相等時。峰面積(Area)w = f - A適用條件：峰面積一般不會隨著外在條件的改變 而改變，所以用峰面積定量在任何條件下都適用。峰面積百分比法（PERCENT）峰面積百分比法，是指通過計(jì)算某一組分峰面積在所有 組分峰面積總和中所占的比重（比例），來計(jì)算這個組 分含量的方法。

2、計(jì)算公式如下：4以） = =- x（100-W） A組分峰面積： XA、卬水樣品中水的含量，%峰面積百分比法的適用范圍此定量方法在很多時候都較為粗略，若要獲得 較為準(zhǔn)確的分析數(shù)據(jù)，需滿足以下幾點(diǎn)要求：1.所有組分包括未知組分全部出峰，且全部分離;2.雜質(zhì)峰面積遠(yuǎn)小于測定組分峰面積，可以完全 忽略；3.雜質(zhì)組分物化性質(zhì)與測定組分物化性質(zhì)相似程 度接近，最好是同一類物質(zhì)。峰面積百分比法優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：對進(jìn)樣量無要求無需校準(zhǔn)，可根據(jù)峰面積直接定量缺點(diǎn)所有物質(zhì)都要流出且被檢測到定量結(jié)果較為粗略峰面積必須準(zhǔn)確本廠成品BDO純度達(dá)99.8%,其中中含有的 雜質(zhì)組分如下：1,4-戊二醇0.04%2-甲基-1,4

3、-丁二醇0.01%1,4-丁烯二醇0.05%3-甲基1,5 戊二醇0.02%1,6 己二醇未檢出四氫味喃未檢出Y-丁內(nèi)酯未檢出馬來酸二丁酯0.01%水分0.01%其他未知組分0.06%譜圖處理及結(jié)果計(jì)算14宦( sf4：OIbml二三 - w.ST =，冷 一Tm 笠1T*h.z，29r 實(shí)a工二，苫f;L 造/八x（ioo-卬水） 為組分峰面積；1W水 樣品中水的含量,化合物名稱相對校正因子外峰面積出歸一化結(jié)果實(shí)際結(jié)果ML0.529022.370.1410.141MF1.099229.750.3910.390甲醇0.5145721.404.4484.443DMC0.899896.601.04

4、11.039DMO1.00007840.6893.97593.879水 , 0.102夕卜標(biāo)法(ESTD)外標(biāo)法，是把己知濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知濃度的實(shí)際樣品在相同的 條件下單獨(dú)進(jìn)樣，把得到的峰面積進(jìn)行比較以求得待測組分含量的 定量方法。計(jì)算公式如下：力組分校正因子；上=% = / 即 w = fAa組分淵峰面積；A A ,標(biāo)111、A標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)樣品中組分i的含量,A.組分曲峰面積。外標(biāo)法適用范圍要用外標(biāo)法進(jìn)行定量分析，則需滿足以下條件:1 .要求色譜的穩(wěn)定性必須非常好才行，否則會對 測定直接產(chǎn)生影響；2 .由于外標(biāo)法的結(jié)果與進(jìn)樣量的大小是直接相關(guān) 的，所以只適用于測定較低含量的樣品；3.計(jì)算是按質(zhì)

5、量計(jì)算的，而進(jìn)樣是按體積進(jìn)樣的,所以有時得考慮密度的影響，尤其是溶劑與組分 密度的差異比較大的時候。外標(biāo)法的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：只對欲分析的組分峰做校正即可無需所有組分均流出缺點(diǎn)：口進(jìn)樣量必須準(zhǔn)確須定期對峰進(jìn)行重新校正內(nèi)標(biāo)法（ISTD）內(nèi)標(biāo)法是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加到一定量 的被分析樣品混合物中，然后對含有內(nèi)標(biāo)物的樣品進(jìn)行色 譜分析，分別測定內(nèi)標(biāo)物和待測組分的峰面積及相對校正 因子，按公式和方法即可求出被測組分在樣品中的百分含 量。計(jì)算公式如下：于I _（二,對照/ W內(nèi)標(biāo)）_ （，匕，樣品/w內(nèi)標(biāo)）（4,對照/由標(biāo)）（4,樣品/ 4為標(biāo)）國卬。樣品一二x，.,樣品3,對照一尸八桿島X u.T

6、 x- xw內(nèi)標(biāo)仆標(biāo)內(nèi)標(biāo)法使用要求當(dāng)配制校正因子測定用的對照溶液和含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的待測 組分溶液使用同一份內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液時，則配制內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶 液不必精密稱（量）取。采用內(nèi)標(biāo)法定量時，內(nèi)標(biāo)物的選擇是一項(xiàng)十分重要的工作。理想地說，內(nèi)標(biāo)物應(yīng)當(dāng)是一個能得到純樣的已知化合物,這樣它能以準(zhǔn)確、已知的量加到樣品中去，它應(yīng)當(dāng)和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學(xué)性質(zhì) （如化學(xué)結(jié)構(gòu)、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等）、色 譜行為和響應(yīng)特征，最好是被分析物質(zhì)的一個同系物。當(dāng)然，在色譜分析條件下，內(nèi)標(biāo)物必須能與樣品中各組分充 分分離。內(nèi)標(biāo)物的選擇標(biāo)準(zhǔn)樣品中不存在該物質(zhì)物理化學(xué)性質(zhì)與待測組分相似，最好為同系物

7、與待測組分的相應(yīng)靈敏度接近不會與樣品發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，且與樣品能完全互溶在待測組分附近流出，不得干擾到測定峰的出峰, 且不能與測定峰的保留時間相差太遠(yuǎn)可得到良好的、干凈利落的色譜峰其色譜性質(zhì)穩(wěn)定內(nèi)標(biāo)法的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：進(jìn)樣量要求不嚴(yán)格只對欲分析的組分峰進(jìn)行校正即可因?yàn)閮?nèi)標(biāo)峰與樣品峰是同時流出的，所以比外 標(biāo)法更加準(zhǔn)確，且受儀器穩(wěn)定性影響小缺點(diǎn)：每次分析都必須加入內(nèi)標(biāo)物到樣品中口分析和計(jì)算過程比較復(fù)雜，不容易掌握外標(biāo)百分比法(ISTD%)和內(nèi)標(biāo)百分比法(ESTD%)外標(biāo)百分比法和內(nèi)標(biāo)白分比法是在外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法的基礎(chǔ) 上，由所得化合物的含量除以樣品的總含量，得到該化合 物的白分含量。計(jì)算公式如下：夕卜不示

8、百分比:內(nèi)標(biāo)百分比:vvi(%) = A_xlOO卬()=4,鵬 xiooZf A,樣品注意：由于外標(biāo)百分比法和內(nèi)標(biāo)百分比法沒有校正未知 組分峰，所以這兩種定量方法只適用于全部由已知化合物組成的樣品的定量，若樣品中存在未知物，則該定量方法是不可靠的。第二部令加標(biāo)收率的好兵加標(biāo)回收率簡介回收率(Recovery rate)是反映待測物在樣品分析過程中 損失程度的指標(biāo)，損失越少，回收率越高，它與真實(shí)成分 和分析的準(zhǔn)確度有密切的關(guān)系。加標(biāo)回收率的測定是實(shí)驗(yàn) 備收維常用以拴血工型質(zhì)位控制技術(shù)。它分為空白加標(biāo) 回收率和樣品加株回收率兩種空白加標(biāo)回收率。在沒有被測物質(zhì)的空白樣品基質(zhì)中加入定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按

9、樣品的處理步驟分析，得至U的 結(jié)果與理論值的比也即為空白加標(biāo)回收率。 (2)樣品加標(biāo)回收率。相同的樣品取兩份，即兩個子樣, 其中一個加入定量的待測成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；兩個孑樣同時按 相同的分析步驟分析，加標(biāo)的一個所得結(jié)果減去未加標(biāo)一 個所得結(jié)果，其差值同加入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的理論值之比即為樣 品加標(biāo)回收率。目前在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)經(jīng)常用樣品加標(biāo)回收來達(dá)到準(zhǔn)確度質(zhì); 控制的目的。加標(biāo)回收的意義反映一個方法定量關(guān)系的可靠程度從側(cè)面反映出分析過程的嚴(yán)密程度，即誤 差（或準(zhǔn)確度）的大小通過進(jìn)行多次加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，可以確定一 個分析方法的檢測范圍通過加標(biāo)收實(shí)驗(yàn)，可以發(fā)現(xiàn)外部條件的 變化對測定的影響加標(biāo)回收率的理論公式樣品加標(biāo)回I

10、收率一般有濃度加標(biāo)計(jì)算、物質(zhì)的 量加標(biāo)計(jì)算、吸光度加標(biāo)計(jì)算等多種計(jì)算方法，對 于加標(biāo)濃度的計(jì)算方法給定了一個理論公式：p（%）= zixiooAc式中：P加標(biāo)回收率，%；C加標(biāo)后測定值，%;-原始測定值，;zlc加標(biāo)濃度，%O加標(biāo)HI收率的實(shí)驗(yàn)過程用選定分析方法對原始樣品的含量進(jìn)行測定，得 出其初始含量。0；量取一定體積（或稱取一定質(zhì)量）的原始樣品， 向其中加入一定量（一般為質(zhì)量）的待測組分純 物質(zhì)或含有該組分的物質(zhì)，計(jì)算出加標(biāo)濃度/C；對加標(biāo)后的樣品用同樣的分析方法進(jìn)行測定，得 出加標(biāo)后的含量C;用理論公式進(jìn)行計(jì)算，對一般加標(biāo)收實(shí)驗(yàn)而言, 如果方法和操作都沒有問題，加標(biāo)回收率應(yīng)在 98%10

11、2%之間。加標(biāo)濃度A的計(jì)算已知原始樣品中待測物質(zhì)的初始濃度為%,稱取子樣品 的質(zhì)量為”,加入樣品中待測純物質(zhì)的質(zhì)量為加，純物 質(zhì)的純度為則加標(biāo)濃度/C按下式計(jì)算：+ mw Ac = c0miy + m由于加標(biāo)質(zhì)量帆非常?。▋H為樣品1%）,所以可完全忽 略不計(jì)，所以上式化簡后近似寫成： mwAc =最終計(jì)算公式:rwic的計(jì)算公式代入理論公式中，得到加標(biāo)回收 率的計(jì)算公式為：尸（）=，叱（。一出）mw式中：P加標(biāo)回收率，%；C加標(biāo)后測定值，；Co原始測定值，%:m加標(biāo)質(zhì)量，g；小。稱取子樣品質(zhì)量，g ;卬加標(biāo)物質(zhì)的純度。計(jì)算公式使用的條件同一樣品的子樣取樣體積必須相等（若是稱取質(zhì) 量，則要保證多

12、次稱量盡可能接近）；各類子樣的測定過程必須按相同的操作步驟進(jìn)行;加標(biāo)量不可太大，一般為待測物含量的0.52倍, 且加標(biāo)后的總含量不得超出分析方法的測定上限;加標(biāo)物濃度宜較高（純物質(zhì)最好），子樣取樣體 積宜較大，加標(biāo)物的體積應(yīng)很小，一般以不超過 原始試樣體積的1 %為好。實(shí)例：甲醇樣品加標(biāo)HI收實(shí)驗(yàn)?zāi)骋灰后w樣品用氣相色譜法分析得出其中 甲醇含量為5.32% Qm/m）,現(xiàn)提供色譜純甲 醇（純度0.999）,要對甲醛進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí) 驗(yàn)，該如何進(jìn)行？甲醇加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)過程分別稱取加0值（約10g）樣品于5個20mL小玻璃瓶中,按下表的 量分別向5個小瓶中用微量進(jìn)樣微或移液器加入色譜純甲醉（純度 0.9

13、99） ?/g,混勻后用同樣的色譜方法進(jìn)樣，得出加標(biāo)后測定值 為c,代入計(jì)算公式中即可算出加標(biāo)回收率尸（%）。瓶號樣品量/g力口石；量nWg加標(biāo)測定值C/%加標(biāo)回收率 P/%1#10.00450.0248X0.9995.5704101.112#10.00320.0575X0.9995.883198.053#9.99780.0867X0.9996.182999.604#10.00020.1204X0.9996.519799.745#10.00930.1599X0.9996.914499.90加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)影響因素原始樣品和加標(biāo)樣品不在同一條件下進(jìn)行分析；加標(biāo)物質(zhì)中的雜質(zhì)干擾分析測定；待測物質(zhì)穩(wěn)定性差，如易揮發(fā)、吸附、水解、熱 解、光解等；人為操作問題，如稱量誤差、移液誤差等；在做吸光度加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)時，加標(biāo)量太大造成體 積誤差，此時應(yīng)該采用定容的方式