創(chuàng)新實驗教學(xué)課程設(shè)置簡介

1、附件3創(chuàng)新實驗教學(xué)課程設(shè)置簡介根據(jù)創(chuàng)新人才培養(yǎng)的技術(shù)定位和本科生開展創(chuàng)新實驗的實際情況，現(xiàn)已開出以實驗儀器技術(shù)為基礎(chǔ)的13個系列創(chuàng)新實驗課程，涉及45個單項實驗，用于對進入基地學(xué)生進行集中培訓(xùn)。另外，對生物技術(shù)、臨床病理、醫(yī)學(xué)檢驗等專業(yè)本科生附加了細胞工程學(xué)、中藥生物技術(shù)學(xué)、醫(yī)學(xué)實驗器材相關(guān)的生物安全技術(shù)（GMT、SLT）等課程。這些課程實驗同時也作為學(xué)生立題、選擇技術(shù)時參考:實驗一、全血細胞DNA快速提取、擴增與檢測通過該實驗了解DNA提取、擴增的基本技術(shù)步驟，掌握紫外分光光度法測定核酸濃度、純度的原理、意義和操作方法?；蚪MDNA酶解及酶解片斷的瓊脂糖凝膠電泳。了解限制性內(nèi)切酶的特性，掌握

2、瓊脂糖凝膠電泳分離技術(shù)的實驗原理及應(yīng)用。聚合酶鏈式反應(yīng)。掌握聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）的原理及實驗設(shè)計，熟悉操作方法及主要影響因素的控制，掌握引物的設(shè)計原理及引物設(shè)計方法。實驗二、生物樣品的制備和分離如何選擇適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM行生物樣品的制備和分離是生物學(xué)實驗成敗的關(guān)鍵因素，本實驗?zāi)康氖鞘箤W(xué)生全面了解生物樣品制備和前處理等一系列生物技術(shù)，基本掌握重要儀器設(shè)備的正確使用和維修保養(yǎng)，重點掌握與基礎(chǔ)實驗相關(guān)的一些常用技術(shù)。使用電動組織勻漿器和超聲細胞粉碎儀處理樣品并檢測。不同過濾和超濾方法的使用，采用離心濃縮和冷凍干燥技術(shù)處理不同的樣品并比較。不同類型離心技術(shù)在生物實驗中的應(yīng)用（如細胞漿、細胞核、膜蛋白分離

3、的密度梯度超速離心）。實驗三、細胞培養(yǎng)技術(shù)細胞培養(yǎng)技術(shù)是現(xiàn)代生物學(xué)實驗的一項常規(guī)技術(shù)，目的是使學(xué)生能夠熟練進行有關(guān)細胞學(xué)實驗的一些操作技術(shù)，基本掌握CO2細胞培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡等器材的正確使用和常規(guī)維護保養(yǎng)，重點掌握無菌操作技術(shù)。結(jié)合不同類型培養(yǎng)箱和超凈工作臺的使用，強調(diào)無菌環(huán)境的質(zhì)量控制。培養(yǎng)基的選擇與制備。倒置顯微鏡的正確使用和保養(yǎng)，掌握相差環(huán)的調(diào)節(jié)，細胞形態(tài)觀察和照像。細胞的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的方法。細胞計數(shù)和細胞活力的檢測。細胞的凍存和復(fù)蘇技術(shù)。實驗室生物安全技術(shù)。實驗四、形態(tài)學(xué)系列實驗技術(shù)組織切片的制作、觀察通過對新鮮標本和石蠟標本的切片及H.E染色，使學(xué)生掌握冰凍切片機、石蠟切片機

4、、干烤箱、孵箱、顯微鏡等常用形態(tài)學(xué)設(shè)備的操作方法及使用注意事項。組織切片的顯微鏡觀測、數(shù)字CCD成像和顯微圖像分析掌握顯微照像、數(shù)字CCD成像的基本操作步驟。了解顯微圖像分析中常用的處理和分析方法，常用參數(shù)的意義。實驗五、免疫熒光與組化學(xué)了解免疫熒光組織化學(xué)、熒光顯微鏡、細胞顯微光度分析、激光掃描共聚集顯微鏡的原理及應(yīng)用范圍。掌握免疫熒光和組化學(xué)標本制作過程，光學(xué)顯微鏡及熒光顯微鏡的使用組織、細胞免疫熒光切片的制備（直標法和間標法）熒光顯微鏡的使用和顯微熒光圖像的采集、分析（圖像質(zhì)量控制）。激光共聚焦顯微鏡的三維圖像重建。實驗六、實驗核醫(yī)學(xué)系列實驗技術(shù)以放射性核素1251、32p、3H標記為實

5、驗基礎(chǔ)的同位素檢測技術(shù)：放射性核素示蹤技術(shù)實驗；液閃技術(shù)測定實驗；體外翻譯實驗。放射性核素125I標記技術(shù)實驗。蛋白質(zhì)或酶純品的制備；Iodogen法標記125I;SephadexG25柱層析分離；測定各分離組分cpm數(shù)；繪制分離曲線。本實驗適用標記抗原，抗體和酶類，用于微量的放射免疫測定或放免測定試劑盒的研制。放射性核素32P標記技術(shù)實驗：酶純品的制備；酶催化法將32P標記到底物；電泳分離；放射性自顯影或cpm計數(shù)定量測定。本實驗適用于蛋白激酶（如蛋白激酶C，PKC）類測定，核酸標記的缺口平移，體外轉(zhuǎn)錄和Southernblot,Northernblot等。3H標記技術(shù)實驗：細胞培養(yǎng)；3H-

6、dTR摻入培養(yǎng)；沉淀和計數(shù)；液閃和測定。實驗七、生物大分子的分離、純化系列實驗綜合運用色譜、電泳及離心技術(shù),從生物材料提取純凈、完整而有活力的生物大分子，以供對其結(jié)構(gòu)與功能進行深入研究，從而揭示各種生命現(xiàn)象的本質(zhì)。學(xué)生要掌握各專項技術(shù)的原理、操作要點及技巧，為學(xué)生從事分子水平的生命科學(xué)研究奠定良好基礎(chǔ)。凝膠過濾層析分離純化蚓激酶SDS法測定蚓激酶分子量等電聚焦電泳法測定蚓激酶等電點實驗八、熒光差異顯示技術(shù)熒光差異顯示技術(shù)是分析基因表達水平差異的一項重要技術(shù)，本實驗的目的是使學(xué)生全面了解尋找差異基因的一些實驗方法，重點掌握實驗的原理及意義。RNA樣品的制備和純化及cDNA的合成。DD-PCR。D

7、D-PCR產(chǎn)物電泳和差異片段的分析。差異片段的回收和再擴增。差異片段的克隆篩選和測序。實驗九、重組DNA技術(shù)與基因工程重組DNA技術(shù)與基因工程是分子生物學(xué)研究的熱點和前沿，本實驗的目的是使學(xué)生基本掌握重組DNA技術(shù)原理及所需的工具酶、克隆載體和克隆宿主菌，熟練掌握基因工程的各項技術(shù)，了解基因工程中常用的儀器設(shè)備的正確使用和維修保養(yǎng)。目的基因的克隆與分離，質(zhì)粒的構(gòu)建。外源基因在大腸桿菌的表達。外源基因在哺乳動物細胞的表達轉(zhuǎn)染技術(shù)。外源基因表達產(chǎn)物的分離純化。實驗十、發(fā)酵工程與酶工程發(fā)酵工程與酶工程是生物工程的基本技術(shù)，本實驗的目的是使學(xué)生掌握發(fā)酵工程和酶工程的原理，了解發(fā)酵生理和發(fā)酵過程控制，熟

8、悉發(fā)酵反應(yīng)器和酶工程反應(yīng)器及相關(guān)工藝營養(yǎng)缺陷性菌株的誘變和分離。中藥特定成份的提純。實驗十一、熒光細胞激活分析檢測重點掌握樣品制備、分析方法和流式細胞儀的基本原理。淋巴細胞亞群、細胞周期DNA含量檢測細胞凋亡分析實驗十二、3H-TdR標記釋放測定NK活性實驗重點掌握NK細胞的制備；NK細胞活性測定基本原理。液閃測定酶活性體外翻譯實驗十三、藥物檢測技術(shù)系列實驗綜合運用高效液相色譜、紫外光譜、熒光光譜、薄層掃描等技術(shù)對有機化合物、生物大分子蛋白質(zhì)或生物肽等進行定性、定量分析。熒光光譜、薄層掃描還可對極微量的金屬離子、微量元素進行定量分析。重點掌握實驗的原理及意義。高效液相色譜測定血中藥物的含量（H

9、PLC）高效液相色譜測定腦組織中神經(jīng)遞質(zhì)的含量火焰原子吸收分光光度法測定生物樣品鈣、鎂、鈉、鉀、鋅、銅、鐵、鍶、鋰、錳石墨爐原子吸收分光光度法測定生物樣品中銅、錳、鍺、硒、鋁、鈷、鉻、鉛、鎘、鎳鉬、鉑3-22008.01.09理論課No日期內(nèi)容學(xué)時*地點擔(dān)當(dāng)者配合13.031章總論2.018教室崔澤實2章生物樣品制備技術(shù)及相關(guān)器材18教室崔澤實23.102章生物樣品制備技術(shù)及相關(guān)器材2.018教室崔澤實33.173章細胞培養(yǎng)技術(shù)相關(guān)器材1.018教室崔澤實細胞工程學(xué)技術(shù)1.018教室李春艷43.244章光學(xué)顯微鏡2.018教室崔澤實53.314章相差、熒光等特殊顯微鏡檢技術(shù)2.018教室崔澤實

10、64.074章CCD顯微鏡圖像采集技術(shù)原理1.018教室崔澤實醫(yī)學(xué)實驗室器材的生物安全問題1.018教室崔澤實74.144章顯微操作及轉(zhuǎn)基因、轉(zhuǎn)染技術(shù)1.018教室李春艷流式細胞檢測分析1.018教室張瑩李春艷84.215章分子生物學(xué)相關(guān)儀器技術(shù)2.018教室盧瑤94.286章生物實驗相關(guān)之化學(xué)檢測儀器2.016教室李春艷104.309章生理學(xué)信號測量儀器及技術(shù)2.018教室崔澤實115.057章電泳技術(shù)2.018教室梁再賦125.077章層析總論2.018教室孫晉民135.147章凝膠過濾層析2.018教室孫晉民145.217章離子交換層析2.018教室孫晉民155.287章親和層析、疏水層

11、析2.018教室傅煒昕166.047章高效液相色譜2.018教室孫林176.118章非放射性核素標記技術(shù)2.018教室于成國186.188章放射性核素標記技術(shù)2.018教室于成國196.258章液閃測定技術(shù)2.018教室刁堯207.028章放射免疫分析技術(shù)2.018教室刁堯40.0基本實驗課1實驗1電動組織勻漿、超聲細胞破碎1.0實驗室李春艷姚璐2實驗2真空冷凍干燥及離心濃縮0.5實驗室崔澤實高建、周末3實驗3差速離心技術(shù)及離心機維護0.5實驗室崔澤實高建、周末淋巴細胞亞群的密度梯度離心分離實驗室于淼張瑩、薛曉霞4實驗4CO2細胞培養(yǎng)箱的使用與維護1.0實驗室張瑩李春艷、汪薇5實驗5恒溫振蕩培養(yǎng)裝置、懸浮培養(yǎng)1.0實驗室李春艷周末6實驗6DIC相差、熒光顯微觀測技術(shù)1.0實驗室崔澤實高建、于淼7實驗7顯微操作及轉(zhuǎn)基因技術(shù)1.0實驗室王雁李春艷8實驗8流式細胞儀分析1.0實驗室薛曉霞李春艷9實驗9熒光Ca+濃度測定0.5實驗室薛曉霞張瑩10實驗10MTT細胞增殖檢測0.5實驗室李春艷姚璐綜合系列實驗課2008.01.No日期內(nèi)容學(xué)時地點擔(dān)當(dāng)者配合16.03實驗11光學(xué)顯微鏡及圖像采集記錄技術(shù)4.0實驗室崔澤