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文檔簡介
1、課題專題三章節(jié)植物的組織培養(yǎng)技術課題1菊花的組織培養(yǎng)主備教師三維教學知識目標能力目標1、熟悉植物組織培養(yǎng)的基本過程2、理解細胞分化的概念及離體植物細胞的脫分化和再分化3、通過聯(lián)系農業(yè)生產(chǎn)實際,培養(yǎng)學生活學活用,理論聯(lián)系實際的能力歸納MS培養(yǎng)基的配制方法,并設計表格比較微生物培養(yǎng)基與MS培養(yǎng)基的配方的異同。目標情感態(tài)度教學價值觀目標通過閱讀植物組織培養(yǎng)技術的發(fā)展史,課下查閱植物組織培養(yǎng)技術在生產(chǎn)實踐中應用的資料,關注學生科學態(tài)度的教育,拓展學生視野,感受科學技術在生產(chǎn)實踐中的重要價值。植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術重點教學難點課時安排教學方法教學準備教學過程植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術1啟
2、發(fā)式教學多媒體課件(一)引入新課上節(jié)課我們探討學習了如何從土壤中分離出尿素分解菌和纖維素分解微生物及其計數(shù)方法。這節(jié)課我們來學習研究植物的組織培養(yǎng)技術。(二)進行新課1基礎知識知識回顧:聯(lián)系“植物細胞工程”,回答下列問題:11具有某種生物全套遺傳信息的任何一個活細胞,都具有發(fā)育成完整個體的能力,即每個生物細胞都具有全能性。但在生物體的生長發(fā)育過程中并不表現(xiàn)出來,這是因為在特定的時間和空間條件下,通過基因的選擇性表達,構成不同組織和器官。12植物組織培養(yǎng)技術的應用有:實現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖;培第1頁育脫毒作物;制作人工種子;培育作物新品種以及細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等。活動1:閱讀“植物組織培養(yǎng)的基
3、本過程”,討論并完成以下問題:13細胞分化:個體發(fā)育中細胞在形態(tài)、結構和生理功能上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過程。思考1細胞分化是一種持久性的變化,它有什么生理意義?使多細胞生物體中細胞結構和功能趨向專門化,有利于提高各種生理功能的效率。41愈傷組織是通過細胞分裂形成的,其細胞排列疏松而無規(guī)則,高度液泡化呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞。思考2填表比較根尖分生組織和愈傷組織的異同:組織類型細胞來源細胞形態(tài)細胞結構細胞排列細胞去向根尖分化成多種受精卵正方形無液泡緊密分生組織細胞組織愈傷組織高度分化細胞無定形高度液泡化疏松再分化成新個體相同點都通過有絲分裂進行細胞增殖15植物組織培養(yǎng)的過程可簡單表示為:離體細胞、組織
4、、器官(脫分化)(又叫外植體)(再分化)胚狀體(生長)愈傷新個叢芽等活動2:閱讀“影響植物組織培養(yǎng)的條件”,討論并完成以下問題:16材料:植物的種類、材料的年齡和保存時間的長短等都會影響實驗結果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇未開化植物的莖上部新萌生的側枝作材料。思考3一般來說,容易進行無性繁殖的植物容易進行組織培養(yǎng)。思考4選取生長旺盛嫩枝進行組培的原因是嫩枝生理狀態(tài)好,容易誘導脫分化和再分化。817營養(yǎng):常用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基,其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co,有機物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。1激素:在培養(yǎng)基
5、中需要添加生長素和細胞分裂素等植物激素,其濃度、使用的先后順序、用量的比例等都影響結果。思考5填表:激素使用的先后順序及其用量比例對細胞分裂和分化的影響。使用順序實驗結果生長素細胞分裂素比值與結果先生長素,促根分化,有利于分裂但不分化比值高時后細胞分裂素抑芽形成先細胞分裂素,促芽分化,細胞既分裂也分化比值低時后生長素抑根形成同時使用分化頻率提高比值適中促進愈傷組織生長1.9環(huán)境條件:PH、溫度、光等環(huán)境條件。菊花組培所需PH為5.8,溫度為18-22,光照條件為每日用日光燈照射12小時。2實驗設計第2頁活動3:閱讀“制備MS固體培養(yǎng)基”,回答下列問題:2121配制各種母液:將各種成分按配方比例
6、配制成的濃縮液。使用時根據(jù)母液的濃縮倍數(shù),計算用量,并加蒸餾水稀釋。22配制培養(yǎng)基:應加入的物質有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機物和植物激素的母液,并用蒸餾水定容到1000毫升。在菊花組織培養(yǎng)中,可以不添加植物激素,原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易。23滅菌:采取的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。思考6MS培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質的作用是什么?肉湯培養(yǎng)基相比,MS培養(yǎng)基有哪些特點?大量元素和微量元素提供植物細胞所必需的無機鹽;蔗糖提供碳源,維持細胞滲透壓;甘氨酸、維生素等物質主要是為了滿足離體植物細胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主,MS培養(yǎng)基則需提供大量無
7、機營養(yǎng)?;顒?:閱讀“外植體消毒”,填寫下列流程圖:旺盛(流水)刷洗,沖洗(無菌吸水紙)(70的酒精)嫩枝沖洗(無菌水)清洗20分鐘左右吸干表面水分(氯化汞)溶液(無菌吸水紙)浸泡12分鐘吸干表面水分搖動2-3次6-7秒(無菌水)清洗思考7在此消毒過程中,是不是強度越大越好,為什么?不是。對外植體進行表面消毒時,既要考慮到藥劑的消毒效果,又要考慮到植物的耐受力。3發(fā)酵操作活動5:閱讀“接種、培養(yǎng)、移栽和栽培”,填寫:31前期準備:用70的酒精消毒工作臺,點燃酒精燈。注意所有接種工作都必須在酒精燈旁進行,器械使用前后都要用火焰灼燒滅菌。32接種操作:接種過程中插入外植體時形態(tài)學上端朝上,每個錐形瓶接種78個外植體。思考8外植體接種與細菌接種相似之處是操作步驟相同,而且都要求無菌操作。33培養(yǎng)過程應該放在無菌箱中進行,并定期進行消毒,保持適宜的溫度和光照。34移栽前應先打開培養(yǎng)瓶的封口膜,讓其在培養(yǎng)間生長幾日,然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時間,進行壯苗。最后進行露天栽培。思考9外植體在培養(yǎng)過程中可能會被污染,你認為造成污染的原因有哪些?外植體消毒不徹底;培養(yǎng)基滅菌不徹底;接種中被雜
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