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1、“將知識裝進(jìn)大腦,將渣滓打包帶走組織學(xué)與胚胎學(xué)根底醫(yī)學(xué)院形狀學(xué)教研室 程艷華Histology and Embryology第1章 緒 論重點(diǎn):組織學(xué)的定義 人體的根本組織 石蠟切片術(shù) HE染色考試方式實(shí)驗(yàn)考試:20分 期中考試:20分 100分期末考試:60分第1章 緒 論一、組織學(xué)研討內(nèi)容組織學(xué)histology: -研討機(jī)體微細(xì)構(gòu)造及其相關(guān)功能的科學(xué)機(jī)體細(xì)胞、組織、器官、系統(tǒng)方法利用顯微鏡察看組織切片構(gòu)成人體的根本組織有四大類 上皮組織神經(jīng)組織肌組織結(jié)締組織器官是由不同的組織發(fā)育分化而成上皮組織肌組織結(jié)締組織神經(jīng)組織研討內(nèi)容 細(xì) 胞 cell細(xì)胞間質(zhì) 組 織(tissue)上皮組織 (e
2、pithelial tissue)結(jié)締組織 (connective tissue)肌肉組織 (muscle tissue)神經(jīng)組織 (nerve tissue)器官、系統(tǒng)有機(jī)體細(xì) 胞細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核線粒體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核糖體高爾基復(fù)合體溶酶體微體中心體細(xì)胞骨架糖元脂滴色素常染色質(zhì)異染色質(zhì)核膜-核孔核仁核基質(zhì)染色質(zhì)細(xì)胞器細(xì)胞基質(zhì)包涵物核被膜染色質(zhì)核 仁核基質(zhì)細(xì) 胞 核核外膜 核周隙核內(nèi)膜核孔核質(zhì)側(cè)核纖層支架核液核骨架細(xì)絲顆粒相隨染色質(zhì)常染色質(zhì)功能活潑異染色質(zhì)功能靜止遺傳物質(zhì)DNA和組蛋白在細(xì)胞間期的形狀胚胎學(xué) Embryology是研討生物個體發(fā)生、發(fā)育、開展及其機(jī)理的科學(xué)。二、組織學(xué)常用研討技術(shù)一普
3、通光學(xué)顯微鏡技術(shù)簡稱光鏡 light microscopy, LM 分辨率為0.2 m 可將組織放大1500倍左右。 顯微鏡的構(gòu)造目鏡物鏡載物臺粗細(xì)調(diào)理螺旋光源聚光器鏡臂鏡座 顯微鏡鏡下察看組織,必需制形成組織標(biāo)本載玻片組織標(biāo)本蓋玻片標(biāo)簽石蠟切片:取材固定脫水透明浸蠟包埋切片 染色 封片最常用的染色方法是:蘇木精-伊紅染色 HE染色 蘇木精hematoxylin): 堿性染料,能將細(xì)胞核染成藍(lán)紫色。 伊紅(eosin): 酸性染料,能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色。組織構(gòu)造的嗜色性嗜堿性:對于堿性染料親和力強(qiáng)的性質(zhì)。 可被蘇木精染成藍(lán)紫色。嗜酸性:對于酸性染料親和力強(qiáng)的性質(zhì)。 可被伊紅染成紅色。中 性:對于
4、兩種燃料親和力 都不強(qiáng)的性質(zhì)。 HE染色著色淡。HE染色其他染色: 硝酸銀染色:組織經(jīng)硝酸銀處置,呈棕黑色,主要用于神經(jīng)組織和內(nèi)分泌細(xì)胞研討重鉻酸鹽染色法異染性 : 肥大細(xì)胞中的顆粒經(jīng)甲苯胺藍(lán)等藍(lán)色染料染色 后,呈紫紅色,稱為異染性。其他常用的制片方法 冰凍切片涂片、鋪片 磨片其它光學(xué)顯微鏡技術(shù):熒光顯微鏡相差顯微鏡暗視野顯微鏡激光掃描共聚焦顯微鏡二電鏡技術(shù)electron microscope EM,簡稱電鏡 以電子束替代光源,以磁場替代透鏡,進(jìn)展聚集和放大,最后將物體的影象投射到熒光屏或照相底片上。 分辨率為0.2nm 可將物體放大幾千到幾十萬倍。 分辨率人眼0.2 mm普通光鏡0.2 m
5、透射電鏡0.10.2 nm掃描電鏡2.5 nm 透射電鏡術(shù) transmission electron microscopy, TEM 察看組織細(xì)胞的內(nèi)部構(gòu)造掃描電鏡術(shù) scanning electron microscopy, SEM 察看組織細(xì)胞外表的立體構(gòu)造冰凍蝕刻 freeze etching method 察看細(xì)胞斷裂外表的形狀構(gòu)造分析電鏡 X-射線顯微分析術(shù)analytical electron micro-scope 研討細(xì)胞、組織內(nèi)元素種類分布和含量TEM,漿細(xì)胞 SEM ,纖毛 SEM ,微絨毛1.電子密度高electron dense 電子束投射到密度大的樣品,電子散射多,
6、投射到熒光屏上的電子少而呈暗像,電鏡照片上那么呈黑色,稱電子密度高。2.電子密度低electron lucent 反之,稱電子密度低。透射電子顯微鏡三、組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)技術(shù) 糖類顯示法PAS反響:過碘酸Schiff反響,簡稱PAS反響periodic acid Schiff reaction 檢測組織活細(xì)胞中有無多糖存在。原理: 酶類顯示法 脂類顯示法 核酸顯示法多糖醛紫紅色沉淀氧化試劑PASchiffPAS反響,小腸上皮杯狀細(xì)胞的粘原顆粒四、免疫組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)技術(shù) 利用抗原antigen, Ag,抗體antibody特異 結(jié)合的原理,用知抗體檢測未知抗原的一種方法。辣根過氧化物酶標(biāo)志熒
7、光素標(biāo)志五、原位雜交技術(shù)in situ hybridization 特異性核酸組織化學(xué)術(shù)檢測基因DNA片段的有無、及在轉(zhuǎn)錄程度檢測基因的活性(mRNA)。原理:用帶標(biāo)志物的知堿基順序的核酸探針與細(xì)胞內(nèi)待測核酸按堿基配對原那么進(jìn)展特異性原位結(jié)合雜交,并經(jīng)過對標(biāo)志物的顯示而獲知待測核酸的有無及相對量常用標(biāo)志物有放射性核素和地高辛六、細(xì)胞培育實(shí)驗(yàn)中的組織工程耳七、共焦激光掃描顯微鏡八 、放射自顯影術(shù)autoradiography九 、圖像分析術(shù)image analysis: 又稱體視學(xué)十 、組織工程術(shù)tissue engineering三、組織胚胎學(xué)在根底醫(yī)學(xué)中的位置組織學(xué)=顯微解剖學(xué) 大體 to 微細(xì)不同組織的功能 生理學(xué)physiology正常與異常 病理學(xué)(pathology)臨床課的根底For a good doctor needed in future 四、組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法1.盡能夠多地察看切片、插圖、圖譜、網(wǎng)上圖庫等。留意察看角度、倍率、染色方法
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